anexo enzimas
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PARTE F. INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
Introducción:
Los vegetales contienen compuestos fenólicos tales como el aminoácido tirosina. Estos fenoles
pueden transformarse en catecoles por acción de la enzima fenol hidroxilasa, en presencia de O2.
A su vez, los catecoles pueden oxidarse por acción de otra enzima, la polifenol oxidasa, a orto
quinonas. Por su parte, estas últimas polimerizan y dan lugar a compuestos de color oscuro
llamados melaninas. Ambas enzimas utilizan al Cu2+ como cofactor.
FENOL CATECOL ORTO QUINONA MELANINAS
L-Tyr L-Dopa Dopaquinona
1) Manzana – Técnica:
- Pelar una manzana y cortar 7 fetas.
- Tomar 2 fetas y colocarlas: una en estufa a 37°C y la otra en heladera a 4°C.
- Tomar 2 fetas y rociarlas con jugo de limón. Colocar una muestra en estufa a 37°C
y la otra en heladera a 4°C.
- Tomar 2 fetas y rociarlas con ácido acético al 5% (vinagre). Colocar una muestra
en estufa a 37°C y la otra en heladera a 4°C.
- Tomar una feta y calentarla a 100°C durante 5 minutos. Luego colocar en estufa a
37°C.
2) Banana – Técnica:
- Pelar una banana y cortar 7 fetas.
- Tomar 2 fetas y colocarlas: una en estufa a 37°C y la otra en heladera a 4°C.
- Tomar 2 fetas y rociarlas con jugo de limón. Colocar una muestra en estufa a 37°C
y la otra en heladera a 4°C.
- Tomar 2 fetas y rociarlas con ácido acético al 5% (vinagre). Colocar una muestra
en estufa a 37°C y la otra en heladera a 4°C.
- Tomar una feta y calentarla a 100°C durante 5 minutos. Luego colocar en estufa a
37°C.
Fruta4°C 37°C Limón
4°C
Limón
37°C
Vinagre
4°C
Vinagre
37°C
Hervida
37ºC
Manzana
Banana
PARTE G. ENZIMAS PRESENTES EN MICROORGANISMOS
1) Catalasa – Técnica:
- Tomar con un palillo una colonia de Staphylococcus aureus y depositarla en un
portaobjetos.
- Realizar lo mismo con una colonia de Escherichia coli, depositándola en el mismo
portaobjetos.
- Agregar a cada una de las colonias una gota de H2O2. Observar.
2) Oxidasa: prueba utilizada para la detección de la enzima citocromo-c-oxidasa, presente en
los géneros Pseudomonas, Neisseria, Moraxella, Vibrio, Aeromonas, entre otros.
Técnica:
- Sobre un portaobjetos colocar un disco de oxidasa y humedecer con una gota de
agua. Observar el color inicial.
- Luego colocar una colonia de Pseudomonas aeruginosa tomada de una placa de
petri con un palillo. Observar el color.
IMPORTANTE: LOS PALILLOS Y PORTAOBJETOS DEBERÁN
DESCARTARSE EN UN FRASCO CONTENIENDO SOLUCIÓN DE
HIPOCLORITO DE SODIO.