toma de muestras (bacteriolÓgicas

OBTENCIÓN DE MUESTRASBACTERIOLÓGICAS

CICLO DIAGNÓSTICO

• Paciente consulta.• Médico examina y formula diagnóstico tentativo.• Muestras son tomadas para cultivo (rotuladas).• Las órdenes son transcritas a formularios de

laboratorio.• Al ser recibidas por el laboratorio los datos son

ingresados a libro y sistema.

CICLO DIAGNÓSTICO

• La muestra es examinada directamente, puede elaborarse informe presuntivo.

• Las muestras son procesadas: los medios de cultivo son seleccionados.

• Después de incubación, los cultivos son examinados a través de sistemas de identificación.

• Se examinan los subcultivos y los resultados. • Informe final y se envía.• El médico interpreta el informe e instala terapia

adecuada.

GENERALIDADES SOBRE OBTENCIÓN DE MUESTRAS

La utilidad de los procedimientos analíticos realizados en muestras clínicas está en relación directa con la calidad de la muestra misma.

GENERALIDADES SOBRE OBTENCIÓN DE MUESTRAS

1. La muestra debe obtenerse antes de la administración de agentes antimicrobianos.

2. Debe ser recolectada adecuadamente por una persona idónea, utilizando equipo estéril y asepsia.

3. Debe ser REPRESENTATIVA del proceso infeccioso y obtenerse de sitios donde sea más probable encontrar al m.o. con la menos contaminación externa posible.

4. Considerar la etapa de la enfermedad, durante la cual, se recoge la muestra.

GENERALIDADES SOBRE OBTENCIÓN DE MUESTRAS

5. En caso que el propio paciente se tome la muestra debe dársele instrucciones completas, claras y precisas, ojalá escritas.

6. La cantidad de muestra debe ser suficiente como para permitir su análisis completo.

7. Debe colocarse en envases adecuados y estériles para evitar el riesgo de contaminación.

8. El TRANSPORTE al laboratorio debe ser lo más rápido posible para que no se dificulte el crecimiento del patógeno.

GENERALIDADES SOBRE OBTENCIÓN DE MUESTRAS

9. La muestra debe ir acompañada de la INFORMACIÓN CLÍNICA Y EPIDEMIOLÓGICA correspondiente.

10.Optimizar la toma de muestra, mediante la comprensión y la estrecha colaboración del grupo de profesionales de la salud.

11.Educar al personal responsable del Servicio, para que comprenda la importancia de la pronta entrega de toda muestra destinada al estudio microbiológico.

GENERALIDADES SOBRE OBTENCIÓN DE MUESTRAS

EL LABORATORIO ESTÁ EN LA OBLIGACIÓN DE RECHAZAR LA MUESTRA QUE SE HA OBTENIDO O TRANSPORTADO INADECUADAMENTE.

RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA

• Preparación del sitio• Volumen• Envases y recolectores• Numero de muestras• Técnica de recolección• Medio de transporte

REGLAS BÁSICAS EN TOMA DE MUESTRAS

• La muestra debe ser tomada con asepsia.• Representativa del proceso.• Cantidad suficiente.• Envío rápido y temperatura y medio de

transporte adecuados.• Tomar antes de la administración de

antibióticos.

CRITERIO DE RECHAZO DE MUESTRAS

• Discrepancia en nombre de frasco y orden.• Falta de identificación en envase que contiene la

muestra.• No se indica en la solicitud el tipo de muestra.• Muestra enviada en medio de transporte

inadecuado.• Muestra en envase inadecuado.

CRITERIO DE RECHAZO DE MUESTRAS

• Muestra en tubo derramado.• Muestra inadecuada.• Muestra en cantidad insuficiente.• Muestra repetida por más de una vez en el mismo día,

excepto: Baciloscopía, Hemocultivo.• Orina en frasco no estéril.• Orina mantenida más de 2 horas a t° ambiente.

MUESTRAS QUE DEBEN SER TOMADAS POR MÈDICOS

• LÍQUIDO AMNIÓTICO

• LÍQUIDO CEFALORAQUÍDEO

• LÍQUIDO PLEURAL

• LÍQUIDO PERICÁRDICO

• LÍQUIDO PERITONEAL

• CONTENIDO GÁSTRICO

MUESTRAS QUE DEBEN SER TOMADAS POR MÈDICOS

• PUNCIÓN SUPRAPÚBICA

• S.BRONQUIAL POR BRONCOSCOPÍA

• LAVADO BRONCOALVEOLAR

• LÍQUIDO PLEURAL

• LÍQUIDO ARTICULAR

PROCEDIMIENTOS GENERALES: TOMA DE MUESTRA Y LABORATORIO

UROCULTIVO:CONSIDERACIONES GENERALES

• BACTERIURIA.• ITU pueden involucrar riñón, uréteres, vejiga

y uretra; > frecuencia uretra y vejiga.• Producidas generalmente vía uretra por la

ruta ascendente.• Es necesario que la orina permanezca, a lo

menos, 3 horas en la vejiga.

UROCULTIVO:CONSIDERACIONES GENERALES

• Fundamental el aseo genital.• Llevar la muestra lo antes posible al

laboratorio.• Urocultivo acompañado de recuento

bacteriano.• PIURIA sin bacteriuria indica posible TBC

renal.

UROCULTIVO:CONSIDERACIONES GENERALES

• Mujeres: en caso de leucorrea o menstruación, usar tampón vaginal, mantener labios mayores separados desde el inicio de aseo hasta final.

• Hombres: retraer el prepucio, descubrir el glande y realizar aseo con tórulas en dirección desde uretra al pene.

UROCULTIVO:TÉCNICA DE TOMA DE MUESTRA

• ORINA DE 2º CHORRO.

• ORINA ASÉPTICA POR TÉCNICA DE RECOLECTOR.

• PUNCIÓN SUPRAPÚBICA.

• CATETERISMO VESICAL.

UROCULTIVO:ASPECTOS A CONSIDERAR

• ITU NEONATAL:

– Generalmente vía descendente. Acompañar de hemocultivo.

– ETIOLOGÍA: E. coli, Klebsiella sp, P. aeruginosa, Enterococcus sp, Streptococcus agalactiae.

UROCULTIVO:ASPECTOS A CONSIDERAR

• ITU EN LACTANTES Y 1ª INFANCIA:

– Acompañar por estudios radiológicos.

– ETIOLOGÍA: • Niñas: E. coli (90%), enterobacterias, Enterococcus sp

(rara vez).• Niños: E. coli (50 – 60%), enterobacterias (> frecuencia

que en niñas).

UROCULTIVO:ASPECTOS A CONSIDERAR

• ITU EN MUJERES SEXUALMENTE ACTIVAS:– Vía ascendente.– Frecuentemente relacionadas con la actividad

sexual.– ETIOLOGÍA: E. coli (80%), Klebsiella sp,

Enterobacter sp, P. aeruginosa, Proteus sp, Streptococcus sp, Staphylococcus sp, Alcaligenes sp, Enterococcus sp.

UROCULTIVO:PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO

• SEDIMENTO URINARIO– Buen método para evaluar la adecuada recolección

de la muestra.

– Presencia de numerosas células epiteliales indica contaminación (repetir muestra).

– Valorar el sedimento a través de la presencia de leucocitos, G.R., cilindros, cristales y bacterias.

UROCULTIVO:PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO

• UROCULTIVO DE RUTINA– Sembrar en Placa de Agar Sangre y McConkey.

– Incubar 18 – 24 hrs. a 35 – 37 ºC.

UROCULTIVO:PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO

• RECUENTO BACTERIANO EN ORINA

– TÉCNICA DEL ASA CALIBRADA.– Aislamiento de una sola especie bacteriana >

100.000 UFC/ml indica INFECCIÓN.– Recuento < 104 UFC/ml indica contaminación.– Entre 104 – 105 UFC/ml evaluar con antecedentes

clínicos.– Aspirado suprapúbico: cualquier recuento se

considera significativo.

SIEMBRA: TÉCNICA DEL ASA CALIBRADA

UROCULTIVO:PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO

• ANTIBIOGRAMA

COPROCULTIVO:CONSIDERACIONES GENERALES

• Este examen se realiza para estudiar casos de diarrea, fiebres entéricas y portadores entre los manipuladores de alimentos.

• Indicar edad del paciente para buscar gérmenes específicos.

COPROCULTIVO:TÉCNICA DE TOMA DE MUESTRA

• DEPOSICIÓN FRESCA

– Frasco pequeño de boca ancha y estéril (sólida o líquida).

– Elegir porciones de la muestra que tienen mayor probabilidad de revelar m.o: mucus, sangre, pus, etc.

COPROCULTIVO:TÉCNICA DE TOMA DE MUESTRA

• TÓRULA RECTAL– Tórula contenida en un tubo con un medio

semisólido de Cary – Blair estéril.– Asear región perianal con solución jabonosa y

enjuagar con agua destilada estéril.– Introducir tórula 1 cm en lactantes o 3 cm en

adultos, retirar rotando.– El m.o. permanece viable por varios días a tº

ambiente.

SIEMBRA COPROCULTIVO

COPROCULTIVO:MICROORGANISMOS PATÓGENOS

• Salmonella sp.• Shigella sp.• Escherichia coli (ECEP, ECEI, ECEA, ECEH,

ECET).• Campylobacter sp.• Aeromonas sp.• Yersinia sp.• Vibrio sp.

COPROCULTIVO:PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO

• DETERMINACIÓN DE LEUCOCITOS FECALES

– Útiles en la evaluación de DIARREAS CAUSADAS POR BACTERIAS INVASIVAS.

COPROCULTIVO:PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO

• CULTIVO E IDENTIFICACIÓN– Cultivo: A.McConkey y A. SS.

• IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA– Baterías bioquímicas.

• ANTIBIOGRAMA

HERIDA SUPERFICIAL

• Limpiar superficie de piel con alcohol 70°

• Elegir zonas profundas, sin tocar zonas adyacentes a la piel, entre herida y piel.

• Utilizar transporte Stuart (Azul).

• Introducir muestra hasta el fondo del tubo.

• Transporte a t° ambiente de inmediato al laboratorio.

MEDIO DE TRANSPORTE STUART

HERIDA PROFUNDA

• Se utiliza cloricsidina si esta muy contaminada.

• Aspirar con jeringa.

• T° ambiente de inmediato al laboratorio

• Mínimo 1 - 2 ml.

SECRECIÓN NASAL

PLACA DE AGAR SANGRE CON CRECIMIENTO BACTERIANO

SECRECIÓN CAVIDADES PERINASALES

SECRECIÓN FARÍNGEA

HEMÓLISIS EN PLACA DE AGAR SANGRE

SECRECIÓN OCULAR, HUMOR VÍTREO Y ACUOSO

EXPECTORACIÓN

SECRECIÓN URETRAL

SECRECIÓN ENDOCÉRVIX

SECRECIÓN VAGINAL

LÍQUIDOS CORPORALES

LÍQUIDO ARTICULARLÍQUIDO PLEURAL

PLACAS CON CRECIMIENTO BACTERIANO

HEMOCULTIVO

• Herramienta diagnóstica de las bacteriemias.

• CALIDAD DE LA TOMA DE MUESTRA:– Preparación de la piel es clave.– Se recomienda tomar 2 – 3 hemocultivos.– Asepsia en toma de muestra para evitar

contaminación con flora habitual de la piel.

HEMOCULTIVO

M U E S T R A - H E M O C U L T IV O .

E X A M E N P E D ID O - G R A M .- C U L T I V O C O R R I E N T E .- C U L T I V O A N A E R O B I O- C U L T I V O H O N G O S .

P R E P A R A C IO N D E LP A C IE N T E

- E N L O P O S I C I B L E T O M A R M U E S T R A S A N T E S D EA D M I N I S T R A C I Ó N D E A N T I B I O T I C O S .

- D E B E E V I T A R S E L A O B T E N C I O N D E M U E S T R A S D E S P U E S D EI N T E R V E N C I O N E S Q U I R U R G I C A S E I N G E S T I O N D EA L I M E N T O S .

- T O M A R M U E S T R A S S O L O C O N D I F E R E N C I A E N T R EM U E S T R A S Y M U E S T R A S D E 6 0 M I N U T O S Y E N D I F E R E N T E SS I T I O S .

- O B T E N E R L A M U E S T R A E N T R E D O S H O R A S Y T R E I N T AM I N U T O S A N T E S D E P E A C K F E B R I L .

HEMOCULTIVOT E C N IC A S D ER E C O L E C C IO N

- D E S P U E S D E L A P A L P I T A C I O N D E L A V E N A , L A P I E L D E B ES E R L A V A D A C O N P O V I D O N A Y O D A D A , L A V A D O RQ U I R U R G I C O O C O N G L U C O N A T O D E C L O R H E X I D I N A A L 2 – 4% . L A A N T I S E P S I A D E L A P I E L S E R E A L I Z A C O N P O V I D O N AY O D A D A O C O N A L C O H O L Y O D A D O 7 0 % , A P L I C A D A E NF O R M A E X C E N T R I C A . D E B E E S P E R A R S E Q U E E LA N T I S E P T I C O S E S E Q U E P A R A Q U E E J E R Z A S U A C C I O NR E S I D U A L . S I E M P R E L A P U N C I O N D E B E S E R E F E C T U A D AC O N G U A N T E S , Q U E D E B E N E S T A R E S T E R I L E S C U A N D O S ER E Q U I E R E N U E V A M E N T E D E L A V E N A .

M A T E R IA L A U S A R - M A T R A C E S D E H E M O C U L T I V O S D E 5 0 M L . P A R A A D U L T O S YD E 2 0 M L P A R A N I Ñ O S .

- A N A E R O B I O : M A T R A C E S C O M E C I A L E S .- D I L U C I O N 1 : 1 0- D E S C O N T A M I N A R E L T A P O N D E G O M A A N T E S D E

P U N S I O N A R L A B O T E L L A C O N P O V I D O N A Y O D A D A UE S P E R A R Q U E S E S E Q U E .

- I N O C U L A R A L A M U E S T R A E N L A B O T E L L A O M A T R A Z P R E V I OC A M B I O D E A G U J A .

-

T R A N S P O R T E - T R A N S P O R T A R E N L O S M A T R A C E S A L L A B O R A T O R I O A T ºA M B I E N T E .

C A N T ID A D M IN IM A - 5 – 1 0 C C D E S A N G R E P A R A A D U L T O S Y 1 - 2 C C D E S A N G R EP A R A N I Ñ O S .

HEMOCULTIVOS

MUESTRAS DE HEMOCULTIVO ANAEROBIOS

• Recolectadas del sitio activo de la lesión.• Excluir contaminantes (sin O2).

• Muestras líquidas y/o tejidos abscesados tomarlas por aspiración.

• Envío en jeringa ¡¡URGENTE!!• Evitar refrigeración

MUESTRAS DE HEMOCULTIVO ANAEROBIOS

• TRANSPORTE:

– Rápido envío de la muestra al laboratorio.– Mantención de humedad en la muestra.– Atmósfera anaerobia.