post analítica virus
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Etapa Post Analítica
Equipo 5
Gómez Córdova Jessica AnahíGonzález Luna Cecilia
González Saavedra IsraelTéllez Hernández Ana PatriciaZamudio Quiterio Samantha
ELISA
O Puede ser empleada para identificar los Ag como para Ac.
O Basada en la propiedad que tienen las proteínas al unirse al plástico.
La reacción se realiza dejando absorber el Ac
conjugado con la enzima a la
superficie plástica
Posteriormente se le agrega el Ag-Ac, agregándole el sustrato a la
enzima
Si existe reconocimiento entre ambos, la
enzima transforma la
reacción en una señal
colorimétrica, indicando que la
reacción es positiva.
INMUNOFLUORES-CENCIA
Ya que las infecciones por virus libera Ag que son puestos en contacto con un anticuerpo monoclonal dirigido contra dicho virus conjugado con
fluoresceína.
Sí el Ag esta presente se formara un complejo antígeno-
anticuerpo.
La reacción positiva se da en
forma de fluorescencia
verde manzana que puede verse con la ayuda de un microscopio.
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
A diferencia de otras formas de microscopía,
en los microscopios electrónicos se utilizan espirales magnéticos
para dirigir un haz de electrones desde un
filamentode tungsteno a través
de una muestra y hacia una pantalla.
La amplificación y la resolución mejoran de forma notable como consecuencia de la
aplicación de luz de una longitud de onda mucho
más corta.
Esta técnica permite observar partículas víricas individuales
(en lugar de cuerpos de inclusión víricos).
Normalmente, las muestras están
teñidas o recubiertas de iones metálicos con el fin de crear
contraste.
Se distinguen dos tipos de microscopio
electrónico: el microscopio de
transmisión de electrones, y el
microscopio electrónico de
barrido.
• en el cual los electrones, como la luz, atraviesan directamente la muestra.
Microscopía de
transmisión de
electrones
• en el cual los electrones rebotan en la superficie de la muestra con un cierto ángulo para generar una figura tridimensional.
Microscopio electrónico de barrido
O Estudio ultraestructural de células y tejidos normales y patológicos.
O Morfología y ultraestructura de microorganismos.
O Localización y diagnóstico de virus.O Caracterización inmunocitoquímica e
histoquímica de distintos tipos celulares.O Comprobación morfológica de tratamientos
terapéuticos experimentales.O Estudio ultraestructural de suspensiones
celulares y orgánulos aislados.
Aplicaciones MTE
O Estudios ultraestructurales en diferentes tejidos y células de los efectos que producen los tratamientos con diferentes fármacos en una experimentación concreta.
O Estudios de ultraestructurales de de marcaje con técnicas de hibridación in situ.
O Estudios a nivel ultraestructural de los efectos producidos en una célula o un tejido determinado después de realizar una experimentación de tipo fisiológico.
O Tipificación de distintos tipos celulares en sus distintos estadios de desarrollo, en estado normal y patológico.
O Estudios sobre ocupación de los distintos orgánulos celulares en relación al estado celular.
O Estudios de morfología y topografía en general, hasta resoluciones de 4 nm, tanto en el campo biomédico como en el de los materiales.
O Microanálisis elemental: permite conocer los elementos químicos presentes en las diferentes partes de una muestra, en un volumen tan pequeño como un micrómetro cúbico.
O También permite realizar un maping para ver la distribución de los elementos químicos que tiene la muestra y, en muchos casos, cuantificarlos.
Aplicaciones M de Barrido
O Análisis de partículas. Estructura de alimentos. Contaminantes. Procesos de corrosión. Caracterización de recubrimientos y de estructuras metalúrgicas y cerámicas. Capas pictóricas. Microelectrónica. Aplicaciones forenses. Controles de calidad. Aplicaciones biomédicas: estudio de cultivos celulares, tejidos y órganos etc.
O Valoración del deterioro de materiales ,estudios y análisis de pinturas.
O Observación de materiales aislantes que necesitan recubrimiento con oro o carbón
O Estudios de Parasitología y enfermedades parasitarias.
O En ciertas enfermedades respiratorias se ha detectado un trastorno importante del transporte mucociliar.
O Ultraestructuralmente, se observan cilios con alteraciones en número y disposición del esqueleto ciliar microtubular y ausencia de los brazos internos de dineína y de las espículas radiales del esqueleto microtubular constituyendo el llamado síndrome de cilios inmóviles o disquinesia ciliar.
O Estas anomalías representan un trastorno de carácter congénito y la microscopía electrónica es el único método que permite hacer un diagnóstico preciso en estos pacientes.
EJEMPLO
ROTAVIRUSO Los rotavirus pertenecen a la familia
Reoviridae. O Son virus sin envoltura, icosaédricos, de 70 nm
de diámetro y presentan una cápside proteica de tres capas que rodea a un genoma de 11 fragmentos de RNA de doble cadena. Su forma semeja a la de una rueda de carreta.
ROTAVIRUS
Son virus sin envoltura,
icosaédricos, de 70 nm de
diámetro y presentan una
cápside proteica de tres capas que
rodea a un genoma de 11 fragmentos de RNA de doble
cadena. Su forma semeja a la de una rueda de
carreta.
Los rotavirus
pertenecen a la familia
Reoviridae.
OSon muy sensibles debido al tamaño de las partículas que son capaces de detectar.
OCuando el antígeno libre o unido a un soporte se enfrenta al anticuerpo, el complejo antígeno-anticuerpo resultante se observa como una aglutinación.
OSe expresan como aumento de título.
OSe emplean tanto para la detección de antígenos como de anticuerpos.
OSe pueden hacer de dos maneras: directas o indirectas.
ODIRECTA: detección de antígenos
OSi el suero del paciente posee anticuerpos, se forman agregados visibles en el fondo del tubo o en el porta o en fondo de la microplaca.
OINDIRECTA: detección de anticuerpos.
OSe observa la presencia de agregados visibles en el fondo del tubo, porta o pocillo de microplaca.
OEste sistema se usa para descubrir anticuerpos contra el virus de fiebre amarilla, VZV, influenza, parainfluenza y dengue
Aglutinación de látexO Estos ensayos generalmente son
pruebas de filtro (tamizaje) pues sólo determinan la presencia o no de anticuerpos.
O Los resultados se pueden interpretar como «inmune » (positivo) o «susceptible» (negativo), como en el caso de determinar el estado inmune para el virus de la rubéola.
O En virología se utiliza con más frecuencia la técnica de aglutinación de látex directa.
Resultados O Generalmente se expresan como títulos O Ejemplo:Un resultado negativo de una prueba frente a virus de la rubeola en una mujer que quiere quedar embarazada, indica que es susceptible a la infección por el virus y por lo tanto debería vacunarse. Sin embargo, si la prueba da un título de anticuerpos determinado, el virus no puede re infectarla y no será, por tanto, peligroso para el feto.
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