enzimas vo iii

D R A . V A L E S K A O R M A Z A B A L V . D E P T O . C I E N C I A S B Á S I C A S

F A C U L T A D D E M E D I C I N A C R U S O M E D I C I N A M E D . 2 0 7

2 0 1 2

Cinética Enzimática

Energía de fijación

Significancia de la km.

1.  Km: concentración de sustrato necesaria para alcanzar la mitad de la velocidad máxima (Vmáx).

1.  Si una enzima tiene una Km pequeña, alcanza su máxima eficiencia catalítica a bajas concentraciones de sustrato.

2.  Si una enzima tiene una Km alta alcanza su máxima eficiencia catalítica a altas concentraciones de sustrato.

2.  Sólo si k2 es pequeño con respecto a k1/k-1. Km es una medida de afinidad del complejo enzima sustrato.

Significado de los parámetros cinéticos

Función de los aa. en la Célula

Síntesis de proteínas Degradación Energía

Función de los aa. en la Célula

Síntesis de proteínas Degradación Energía

¿ Cómo la célula se asegura que los aa van a ser utilizados primordialmente en la síntesis de proteínas y no van principalente a

degradación? R: La respuesta se encuentra al contemplar las propiedades cinéticas

de las enzimas que participan en cada evento.

Km de las aminoacil-tRNA 2,2

µM

Km de las Transaminasas

30mM

1. Constante catalítica: kcat( S-1) o Núnero de recambio

kcat= Vmáx

[Et]

k cat: Es el número de procesos de reacción que cada sitio activo realiza por unidad de tiempo

Significado de los parámetros cinéticos

Acetilcolinesterasa kcat: 14000 (sec-1)

Lisozima kcat: 0,5 (sec-1)

Función lítica sobre las bacterias

2. Constante de especificidad: kcat/Km. Es una medida de eficiencia catalítica de una enzima . Evalúa la velocidad en que una enzima se encuentra con un sustrato en solución.

Significado de los parámetros cinéticos

Para comparar actividades enzimáticas se utilizan parámetros cinéticos

Corte transversal del sitio activo de la enzima superoxido dismutasa. kcat/Km 2,8x109

Factores que afectan la Actividad Enzimática

• Inhibidores • pH • Temperatura

Inhibidor Competitivo (reversible)

Km Aumenta

Un inhibidor competitivo produce cambios en la Km, sin afectar la Vmáx

Ki[ESI]

PURO

Ki=Ki[ES]

Ki[ESI]

Mixta (KI> K[ESI]) Mixta (KI< K[ESI])

Km diminuye Vmax diminuye

Km aumenta Vmax diminuye

Km diminuye Vmax diminuye