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CONTROL DEL CRECIMIENTO

MICROBIANO. ESTERILIZACIÓN Y

DESINFECCIÓN. MODOS DE ACCIÓN.

Dr. Carlos A.Azañero Díaz

Biólogo - Microbiólogo Departamento de Biología, Microbiología y Biotecnología

Facultad de Ciencias

Universidad Nacional del Santa

DEFINICIÓN DE TÉRMINOS

ESTERILIZACIÓN

DESINFECCIÓN

AG. FÍSICOS

AG. QUÍMICOS

CALOR:

Seco

Húmedo

RADIACIONES:

Luz Ultravioleta

Radiaciones Ionizantes

AGENTES MECÁNICOS:

Filtración

Ultrasonidos

AGENTES FÍSICOS

LÍQUIDOS (Desinfectantes)

GASEOSOS:

Óxido de Etileno

Peróxido de Hidrógeno (Plasma Gas)

Formaldehido

Glutaraldehido

AGENTES QUÍMICOS

LA ACCIÓN LETAL DEL CALOR ES UNA RELACIÓN DE TIEMPO Y TEMPERATURA

La mayoría de bacterias, levaduras y hongos

80oC , 5-10 min

Mycobacterium tuberculosis

58oC , 30 min

Mycobacterium tuberculosis

59oC , 20 min

Mycobacterium tuberculosis 65oC , 2 min

Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis

60oC , 60 min

La mayoría de esporas patógenas

100oC , pocos min

H.E.P.A / U.L.P.A.:

Los filtros H.E.P.A (High efficiency Particulate Air) son filtros descartables de medio

filtrante seco y extendido.

Eficiencia mínima de 99,97 %: (penetración máxima del 0,03 %) en aerosoles de

0,3 micrones generados térmicamente (Norma MILSTD-282).

Los filtros U.L.P.A. (Ultra Low Penetration Air) son filtros con características

similares a los filtros H.E.P.A.

Eficiencia mínima de 99,999 % (penetración máxima inferior al 0,001 %) para

partículas de un tamaño entre 0,1 y 0,2 micrones.

Se utilizan en sectores hospitalario, industria farmacéutica, industria alimenticia,

industria química, industria veterinaria, cabinas de pintura, etc.

AGENTE ANTIMICROBIANO Sustancia química que mata o inhibe el desarrollo de los

microorganismos.

Un agente es cida cuando esta a altas concentraciones. Según los organismos que matan.

Bactericidas Fungicidas Algicida.

Un agente es estático cuando esta a

bajas concentraciones.

Bacteriostáticos

Fungistáticos

Algistaticos

Características generales de los agentes antimicrobianos

Varían en su toxicidad selectiva. 1. Algunos actúan de modo

selectivo y tienen efectos similares sobre células de todos los tipos.

2. Otros son mucho mas selectivos, son especialmente utilizados como agentes quimioterapicos.

EFECTOS DE LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO

Efecto Bacteriostático:

Se observa cuando el crecimiento se inhibe,

pero las células no mueren.

Efecto Bactericidas:

Estos evitan la proliferación e inducen la muerte pero no tiene lugar la lisis o ruptura celular.

Efecto Bacteriolítico.:

Provocan la muerte celular por lisis.

Susceptibilidad relativa de los microorganismos

a los agentes antimicrobianos

3 grupos:

1º Formas vegetativas de bacterias y hongos, virus con envolturas.

2º Micobacterias, virus desnudos sin envoltura.

3º Formas de resistencia de bacterias y hongos (esporas).

PRIONES (EJC)

ESPORAS BACTERIANAS (Bacillus spp., Clostridium spp.)

MICOBACTERIAS (Mycobacterium tuberculosis)

VIRUS PEQUEÑOS SIN ENVOLTURA (Poliovirus)

BACTERIAS GRAMNEGATIVAS (Pseudomonas spp.)

HONGOS (Aspergillus spp., Candida spp.)

VIRUS MEDIANOS SIN ENVOLTURA (Adenovirus)

BACTERIAS GRAMPOSITIVAS (Staphylococcus spp.)

VIRUS CON ENVOLTURA (HIV, VHB)

Rela

ció

n d

ecre

cie

nte

de r

esis

tencia

NIVEL ALTO:

Glutaraldehido y formol.

NIVEL INTERMEDIO:

Alcoholes, halógenos, fenoles y yodóforos.

NIVEL BAJO:

Mercuriales, detergentes, clorhexidina y hexaclorofenol.

Según el nivel de actividad de los compuestos químicos.

Agentes desinfectantes

Efecto de la concentración del agente de

control

Tiempo (minutos)

Efecto de diferentes concentraciones de fenol sobre una población

de E.coli.

La temperatura

Tiempo

Efecto de la temperatura en el control de E.coli

con fenol a una concentración de 4,62 g/l

DESINFECCION ANTISEPSIA

Tiene por objeto destruir los microorganismos patógenos PRESENTES EN OBJETOS.

Tiene por objeto destruir los microorganismos patógenos PRESENTES EN TEJIDOS VIVOS.

Permite eliminar, matar, inactivar o inhibir a un microorganismo patógeno.

Intenta evitar la transmisión de microorganismos patógenos.

Capaces de matar los microorganismos patógenos. Se oponen a la sepsis o putrefacción de

materiales vivos.

Presentar efectos tóxicos sobre tejidos vivos, por lo

que se suelen emplear sólo sobre materiales inertes.

Baja actividad tóxica hacia los tejidos vivos

donde se aplican.

Bacteriostático:

impide la multiplicación bacteriana (reversible).

Bactericida:

efecto mortal(irreversible).

Agentes que actúan sobre la membrana citoplasmática y pared celular:

- ácidos y álcalis.

- detergentes.

- hexaclorofeno

Agentes que actúan sobre proteínas y enzimas:

- Las sales de metales pesados, el calor, el fenol y el alcohol.

- Sustancias oxidantes.

- Cl y Hg

- Formol, glutaraldehido y oxido de etileno.

- Alcohol, acido fenico y fenoles sintéticos.

Agentes que actúan por alteración de los ácidos nucléicos:

- Formol, agentes alquilantes

- Radicales ionizantes

- Radiación UV

DESINFECTANTES MÁS USADOS:

1. Alcoholes

2. Agentes oxidantes (Cloro, Yodo, Ac. Paracético, H2O2)

3. Agentes surfactantes

4. Derivados fenólicos

5. Aldehídos

6. Oxido de etileno

Alcoholes: Etanol e isopropanol

• Mecanismo de acción: desnaturalización de proteínas y

alteraciones en la membrana

• Nivel intermedio

• Escasa toxicidad

• Usos:

– antisépticos cutáneos en forma de sol. acuosa al

70-90 %

– Desinfectantes de objetos semicríticos y no críticos

Inactivación por la materia orgánica

Derivados del Cloro: Hipoclorito sódico en sol. acuosa

• Mecanismo de acción: Oxidación

• Alto o bajo nivel (en función de la concentración)

• Muy tóxico y corrosivo

• Usos:

– Tratamiento de aguas

– Desinfección de superficies ambientales en general

Inactivación por la materia orgánica e inestabilidad

Yodo y Yodóforos (Povidona yodada)

• Mecanismo de acción: Oxidación (< Cl) y halogenación

• Nivel intermedio

• Poco tóxicos

• Usos: Antisépticos de mayor uso (piel intacta, heridas,

colutorios, lavado quirúrgico de manos,...)

Inactivación por la materia orgánica. Proteger de la luz

Acido paracético

• Mecanismo de acción: Oxidación y alteración de la

permeabilidad de la membrana

• Alto nivel y esterilizante

• Tóxico y corrosivo de metales

• Usos:

– Esterilización de endoscopios

– Desinfección de instrumental

Se mantiene activo en presencia de materia orgánica

Peróxido de hidrógeno

• Mecanismo de acción: Oxidación

• Potencia variable (en función de la concentración y Tª)

• Soluciones concentradas son tóxicas y corrosivas

• Usos:

– Desinfección de lentes de contacto (3%)

– Desinfección de equipos médicos limpios (6%)

– Esterilización con PLASMAGAS

PLASMAGAS

Agente esterilizante. H2O2 vaporizado, sometido a radiaciones de

alta energía Mecanismo acción: formación de radicales libres

(oxígeno atómico) de alto poder microbicida. Ventajas frente al óxido de etileno:

- No productos secundarios tóxicos.

- Alta eficiencia.

Agentes surfactantes (Tensoactivos)

• Mecanismo de acción: Alteración de la membrana

• Bajo nivel

• Poco tóxicos

• Uso: Antisépticos

Cloruro de benzalconio (Dvdo. Amonio cuaternario)

Paraclorometaxilenol

Jabones y Detergentes

Derivados fenólicos

• Mecanismo de acción: Alteración de la membrana y

coagulación de proteínas

• Nivel intermedio

• Usos:

– Descontaminación ambiental

– Antisépticos:

– Hexaclorofeno

– Triclosan

Aldehídos (Glutaraldehído y formaldehído)

• Mecanismo de acción: Agentes alquilantes

• Alto nivel y esterilizantes

• Muy tóxicos y potencialmente carcinogénicos

• Usos:

– Esterilización de materiales no resistentes al calor

(glutaraldehído)

– Desinfección de cabinas de seguridad biológica

(formaldehído)

Oxido de etileno

• Mecanismo de acción: Oxidación y alquilación

• Alto nivel y esterilizante con rapidez de efecto

• Muy tóxico (cámara hermética y posterior aireación)

• Usos: Esterilización de materiales no resistentes al calor ni

a la humedad

CLASIFICACIÓN DE LOS OBJETOS SEGÚN EL RIESGO

Críticos: Contacto con sistema vascular o tejidos estériles. (instrumentos quirúrgicos, agujas, catéteres) ESTERILIZACION Semicríticos: Contacto con mucosas o piel no intacta. (sondas urinarias, endoscopios, …) DESINFECCIÓN DE ALTO NIVEL O ESTERILIZACIÓN No críticos: Contacto con piel intacta (termómetros, silla odontológica) LIMPIEZA O DESINFECCIÓN DE NIVEL INTERMEDIO O BAJO.