3ºCongreso Bioquímico de Córdoba 2015

Dra. Graciela Lucero.

Unidad de Investigaciones Oncohematológicas - Oncolab.

Buenos Aires.

Dra. Graciela Lucero.

Unidad de Investigaciones Oncohematológicas - Oncolab.

Buenos Aires.

CAUSAS INFECCIONES BACTERIANAS

ALERGIA

ENFERMEDADES INFLAMATORIAS

NECROSIS HISTICA POR ALGUNOS FARMACOS O TOXICOS

( CORTICOIDES, HISTAMINA, MERCURIO, etc )

PROCESOS MALIGNOS

PROCESOS AGUDOS ANEMIA HEMOLITICA AGUDA

HEMORRAGIAS

QUEMADURAS

HALLAZGOS MORFOLOGICOS

DESVIACION A LA IZQUIERDA

GRANULACIONES GRUESAS

MICROPOLIVACUOLIZACION

CUERPOS DE DÖHLE

NEUTROFILOS HIPOSEGMENTADOS

CUERPOS DE DÖHLE

CUERPOS DE DÖHLE

REACCION LEUCEMOIDE MIELOIDE

Leucemia mieloide Crónica (BCRLeucemia mieloide Crónica (BCR--ABL+)ABL+) Leucemia neutrofílica crónicaLeucemia neutrofílica crónica Policitemia VeraPolicitemia Vera Mielofibrosis PrimariaMielofibrosis Primaria Trombocitemia EsencialTrombocitemia Esencial Leucemia eosinofílica crónica (NOS)Leucemia eosinofílica crónica (NOS) MastocitosisMastocitosis Neoplasias Mieloproliferativas No Neoplasias Mieloproliferativas No

ClasificablesClasificables Neoplasias Mieloides Asociadas con Neoplasias Mieloides Asociadas con

Eosinofilia Eosinofilia y anormalidades de PDGFRA, PDFRB o y anormalidades de PDGFRA, PDFRB o FGFR1FGFR1

Neoplasias Mieloproliferativas

Crónicas ( WHO 2008)

Expansión de un clon neoplásicoExpansión de un clon neoplásico

Activación de vías antiapoptóticas o Activación de vías antiapoptóticas o

hipersensibilidad a factores de hipersensibilidad a factores de

crecimiento.crecimiento.

Activación de vías de tradución de Activación de vías de tradución de

señales de tirosinquinasas (TKs) por señales de tirosinquinasas (TKs) por

mutaciones puntuales o translocaciones mutaciones puntuales o translocaciones

en genes que codifican para TKs.en genes que codifican para TKs.

Neoplasias Mieloproliferativas

Crónicas

Enfermedades causadas por la aparición de Enfermedades causadas por la aparición de

clones anormales de stem cell con ventajas clones anormales de stem cell con ventajas

proliferativas sobre los clones normales con proliferativas sobre los clones normales con

los cuales coexisten y además ejercerían los cuales coexisten y además ejercerían

cierta acción inhibitoria de su crecimiento.cierta acción inhibitoria de su crecimiento.

La proliferación aumentada es predominantemente La proliferación aumentada es predominantemente

de un linaje celular si bien pueden estar de un linaje celular si bien pueden estar

aumentados los otros. aumentados los otros.

Conservan capacidad de diferenciación hasta Conservan capacidad de diferenciación hasta

célula madura.célula madura.

Neoplasias Mieloproliferativas

Crónicas

Leucemia Mieloide Leucemia Mieloide CrónicaCrónica

Hipercelularidad de la Médula Osea

Aumento del número de megacariocitos

Presencia de basófilos y eosinófilos

en SP y MO

Hiperplasia mieloide ó descenso del número de

células nucleadas eritroides ( M:E 10:1 )

Score de Fosfatasa Alcalina Leucocitaria

disminuído

Presencia de Cromosoma Filadelfia (Ph)

Criterios para el Criterios para el diagnóstico de LMCdiagnóstico de LMC

Traslocación recíproca entre los Cr. 9 y 22 (95% de los casos). Involucra 2 oncogenes, el ABL (9) y el BCR(22). El Cr 22 pierde el brazo largo (22q-) , el 22 q- es el Cr. Ph.

El gen de fusión BCR/ABL transcribe y este RNAm produce una proteína p210 con actividad TK que promueve sobrevida celular y proliferación, además de inhibir la apoptosis.

La proteína TK controla la activación de la señal de transducción que regula procesos críticos celulares: crecimiento, diferenciación y apoptosis.

Cromosoma PhCromosoma Ph

Cromosoma Philadelphia

Sangre

periférica

LMC

LMC-SP

LMC

LMC

LMC

LMC

LMC-MO

LMC-MO

RLM LMC

MORFOLOGIA

DESVIACION A LA

IZQUIERDA

DESVIACION A LA

IZQUIERDA HASTA EL

BLASTO

↑BASOFILOS NO SI

FOSFATASA

ALCALINA

LEUCOCITARIA

N o↑ ↓↓

CROMOSOMA Phi NO SI

BCR-ABL NO SI

Policitemia Vera

Criterios para Policitemia Vera

Criterios mayoresCriterios mayores

Hemoglobina > 18.5g/dl en hombre, Hemoglobina > 18.5g/dl en hombre,

16,5g/dl en mujeres u otra evidencia de 16,5g/dl en mujeres u otra evidencia de

aumento de volumen celular de aumento de volumen celular de

globulos.globulos.

Presencia de la mutación JAKPresencia de la mutación JAK--2 V617F 2 V617F

u otra mutación funcionalmente similar u otra mutación funcionalmente similar

como la mutación JAKcomo la mutación JAK--2 en el exon 12.2 en el exon 12.

Criterios para Policitemia Vera (Who 2008)

Criterios menoresCriterios menores

Biopsia de M.O. mostrando hipercelularidad para la edad con aumento de las tres series (panmielosis) con proliferación prominente eritroide, granulocítica y megacariocítica.

Eritropoyetina baja para el valor de referencia normal.

Formación de colonias eritroides in vitro endógenas.

Hematocrito aumentadoHematocrito aumentado

Volemia aumentadaVolemia aumentada

Leucocitosis (neutrofiliaLeucocitosis (neutrofilia--ocasional ocasional

aumento de mielocitos y aumento de mielocitos y

metamielocitos)metamielocitos)

BasófilosBasófilos

Policitemia Vera

Diagnóstico diferencial

Exclusión de causas secundarias de Exclusión de causas secundarias de

eritropoyesis y esplenomegaliaeritropoyesis y esplenomegalia

Sin esplenomegalia, ver anormalidades Sin esplenomegalia, ver anormalidades

cromosómicas clonales, formación in vitro cromosómicas clonales, formación in vitro

de colonias eritroides endógena y niveles de colonias eritroides endógena y niveles

séricos de Eposéricos de Epo

La celularidad de MO es variable,generalmente La celularidad de MO es variable,generalmente

Megacariocitos de pequeños a gigantes,Megacariocitos de pequeños a gigantes,

lobulados, pueden ser displásicos, bizarroslobulados, pueden ser displásicos, bizarros

Descartaría eritropoyesis secundariaDescartaría eritropoyesis secundaria

Policitemia Vera

P V

P V

P V

Mielofibrosis Primaria

Criterios mayores Presencia de proliferación megacariocítica y atípica

usualmente acompañada de fibrosis reticulínica o colágena, o en ausencia de fibrosis reticulínica, los cambios megacariocíticos deben estar acompañados de la celularidad de la M.O., caracterizada por roliferación granulocítica y a menudo disminución de la eritropoyesis (fase prefibrótica).

Ausencia de criterios de la WHO para PV, LMC (BCR-ABL+), SMD u otras neoplasias mieloides.

Demostración de JAK-2 V617F u otros marcadores de clonalidad (EJ: MPLW515 K/L), o en ausencia de los marcadores mencionados, ausencia de evidencia de que la fibrosis es secundaria a infección, enfermedad autoinmune, u otra condición inflamatorio, tricoleucemia u otra neoplasia linfoide, malignidad metastásica u mielopatías tóxicas.

Criterios para MF Primaria (Who 2008)

Criterios menores

Leucoeritroblastosis

Aumento de LDH sérica

Anemia

Esplenomegalia palpable

Criterios para MF Primaria (Who 2008)

Anemia (marcada anisopoiquilocitosis) con

presencia de dacriocitos, eritroblastos

Policromatofilia

Reticulocitos aumentados (frecuente)

Leucocitosis (moderada), con desviación

izquierda hasta el Blasto

Hipo e hipersegmentación en neutrófilos

Trombocitosis (frecuente)

Trombocitopenia (30% de los casos)

Mielofibrosis Primaria

Punción aspiración de MO es dificultosa, DRY TAP por fibrosis

Hiperplasia granulocítica y megacariocítica, las células eritroides están normales o aumentadas

Aumento de fibras reticulínicas y colágeno

Mielofibrosis Primaria

MP

MP

MP

MP

MP

MP

Tinción argéntica

Fibras reticulínicas

y colágeno

Trombocitemia esencial

Criterios para trombocitemia esencial

(WHO 2008)

El diagnóstico requiere los 4 criterios

Recuento de plaquetas sostenido ≥ 450 x 109 /L Biopsia de M.O. mostrando proliferación predominante

de línea megacariocítica con aumento del número de megacariocitos maduros de mayor tamaño, sin aumento significativo o desviación izquierda de la granulopoyesis neutrofílica o de la eritropoyesis.

Ausencia de criterio de la WHO para P.V., mielofibrosis primaria o LMC (BCR-ABL+) o SMD u otra neoplasia mieloide.

Demostración de mutación JAK-2 V617F, ausencia de evidencia de trombocitosis reactiva.

Trombocitosis marcada

Plaquetas dismórficas y fragmentos megacariocíticos

Leucocitosis discreta

Anemia moderada

Trombocitemia esencial

T E

T E

T E

T E

Gen: CALR

Ubicación: 19p13.3-p13.2. Formado por

12891 pb y 9 exones

Proteína: Calreticulina

Mutaciones: indels en exón 9

Presentes en TE y MP

Mutaciones en CALR

JAK2 V617F (Exón 14)

95% PV

55% TE

65% MP

JAK2 Exón 12 <5% PV

MPL W515L/K (JAK2V617F Negativos)

0% PV

2-5% TE

5-10% MP

CALR

0% PV

70-84% TE y MP

Muchas gracias!