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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE

BAJA CALIFORNIA SUR

AREA DE CONOCIMIENTO AGROPECUARIO DEPARTAMENTO ACADEMICO DE ZOOTECNIA

TESIS

“PREVALENCIA DE CASOS SOSPECHOSOS DE RICKETTSIA

ENFOCADO EN LA FIEBRES MACULOSA DE LAS MONTAÑAS ROCALLOSAS Y EHRLICHIOSIS EN PERROS CON

PROCEDENCIA CALLEJERA EN EL MUNICIPIO DE TIJUANA”

PATA OBTENER EL TITULO DE:

MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

PRESENTA:

JOSE MANUEL GOMEZ GOMEZ

DIRECTOR:

Dr. MVZ RAFAEL RAMIREZ ORDUÑA

La Paz B.C.S 2 DE OCTUBRE DEL 2015

iii

Dedicatoria

A mi padre: Carlos Agustín Gómez Rodríguez.

Gracias a tu ejemplo de rectitud y honradez, marcaste mi conducta ante la vida y

mi formación profesional.

A mi madre: María de los Ángeles Gómez Ramos.

A quien con esfuerzo y dedicación debo mi formación humana y profesional.

A mis hermanos: Karla Gómez Gómez, Juan Pablo Marín Gómez y Luis Ángel

Marín Gómez.

Por su cariño y ejemplo.

A mi abuela: Maria Emilia Rodríguez Jaime

Por su apoyo y ser una excelente persona y ejemplo de la vida.

A mis tíos: Jesús Jorge Gómez Rodríguez y Ana Josefina Gómez Ochoa

Por su apoyo y cariño.

Al profesor: Juan Alejandro Casillas Montes.

Por su valiosa intervención en la valoración de este presente trabajo.

A mi novia: Liliana Ocaña Benítez e hijos.

Gracias a su apoyo, cariño e inteligencia.

Te amo.

A mis familiares y amigos.

iv

Agradecimientos

A las 2 asociaciones:

Sociedad Humanitaria

Por amor a Toby.

Por haber permitido la realización de los estudios en los perros que han rescatado

de la calle y puestos en hogares temporales.

A las 3 veterinarias:

Veterinaria Sociedad Humanitaria.

Veterinaria EMEVET.

Veterinaria Dog.

Por haberme permitido utilizar sus instalaciones para la toma de las muestras de

los perros a muestrear.

A mi asesor:

Dr. MVZ Rafael Ramírez Orduña.

Por ser un excelente maestro, pero mejor amigo.

Mi más sincero agradecimiento.

Al maestro:

Dr. MVZ José Ángel Armenta Quintana.

Por ser un excelente maestro y colaborador directo en la revisión de la tesis.

A mis sinodales:

Dr. MVZ Rafael Ramírez Orduña.

Dr. MVZ José Ángel Armenta Quintana.

Dr. MVZ Juan Manuel Ramírez Orduña.

Por su valiosa sugerencias en la revisión del presente trabajo.

v

Al MVZ Sergio Jaime Valdez Manrique

Por haberme presentado con las autoridades sanitarias de nuestra entidad.

Al MVZ Luis Tinoco García

Por haber colaborado proporcionándome los estudios recientes sobre Rickettsiosis

de la UABC Campus Mexicali Baja California.

A la Universidad Autónoma de Baja California Sur, por brindarme la oportunidad

de estudiar la carrera de Médico Veterinario Zootecnista.

vi

CUADRO DE CONTENIDO

Dedicatoria ............................................................................................................. vii

Agadesimientos ..................................................................................................... ivii

Contenido de gráficas ............................................................................................ vi

Cuadro de contenido ............................................................................................. vii

Resumen………………………………………………………………………………….viii

Introducción ............................................................................................................. 1

Hipótesis.................................................................................................................. 2

Objetivo ................................................................................................................... 2

Antecedentes ....................................................................................................... 3-9

Marco teórico……………………………………………………………………..…..10-20

Rickettsia…………………………………………………………………………….……10

Fiebre de las Montañas Rocosas…………...…………………………...……………..15

Ehrlichiosis………………………………………………………...……………………...17

Ciclo de las garrapatas…………………………………………………………………..19

Diseño de la investigacion ................................................………………………….22

Resultados .......................................................................................................... 244

Análisis y discusión de los resultados .................................................................. 25

Conclusión........................................................................................................... 266

Problemas pendientes…………………………………………………………………..26

Literatura citada ................................................................................................... 277

Anexo .................................................................................................................. 299

Gráficas………………………...................................................................................29

Tablas de datos……...…………………………………………………………………...31

vii

Contenido de gráficas

Gráfica 1.- Casos confirmados de la enfermedad ((Field-Cortazares & Moreno,

2011)………………………………………………………………………………….........5

Figura 1.- Casos sospechosos en Baja California (Field-Cortazares & Moreno,

2011)…..……………………………………………………………………………………7

Figura 2.- Rickettsiales (Mutz, 2009 ……………………………………………………12

Figura 3.- Ciclo de vida de la garrapata (Mountain & Fever, 2010)………………… 21

Grafica 2.- Perros muestreados con trombocitopenia por delegación……………. 29

Grafica 3.- Porcentaje de perros muestreados en azul con trombocitopenia y en

naranja positivos a E. canis…………………………….………………...……………..29

Grafica 4.- Perros positivos a E. canis por delegación………………………………. 30

Grafica 5.- Porcentaje de perros con trombocitopenia en azul y positivos a R.

rickettsia en naranja…………………………………………………………….………..30

viii

RESUMEN

“PREVALENCIA DE CASOS SOSPECHOSOS DE RICKETTSIA

ENFOCADO EN LA FIEBRES MACULOSA DE LAS MONTAÑAS

ROCALLOSAS Y EHRLICHIOSIS EN PERROS CON

PROCEDENCIA CALLEJERA EN EL MUNICIPIO DE TIJUANA”

Por: JOSE MANUEL GÓMEZ GÓMEZ

Desde 1930 se tienen registros de la presencia clínica de la enfermedad en

humanos en México. Pero en los últimos años se ha observado el aumento

progresivo de la población de garrapatas en los estados del norte del país,

principalmente en el estado de Baja California, especialmente en el municipio de

Mexicali, ya que cuenta con la mayor cantidad de casos sospechosos.

En la actualidad los pacientes humanos con síntomas relacionados a una Rickettsii

son asociados a perros que padecen la enfermedad clínica o subclínica; que al ser

picados por garrapatas (vectores) son la fuente de infección.

Y la respuesta por parte de las unidades de salud tanto humanas como veterinarias

ha sido compleja, dado que se ha tenido que ir descartando diversas patologías

asociadas con cuadros exantemáticos y febriles, lo cual en algunos casos ha

retrasado el diagnostico e inicio del tratamiento específico.

En este trabajo se presentará un estudio recopilativo de los libros y artículos que se

han publicado en los últimos años. Sobre el problema que se ha manifestado en los

estados fronterizos del norte del país, sobre las enfermedades rickettsiales y se llevó

a cabo un estudio para determinar la prevalencia existente de las bacterias del

ix

genero Rickettsii de las especies R. rickettsii y E. canis en pruebas de campo

realizadas a 36 perros de la calle en las 9 delegaciones del municipio de Tijuana.

Mediante los estudios de laboratorio (biometría hemática, Cox-19 y ELISA) para la

detección de R. rickettsii y E. canis. Obteniendo como resultado 20/36 (55.5%)

perros callejeros muestreados con trombocitopenia. Lo cual nos lleva a sospechar

que el 55.5% de los perros son sospechosos de padecer Rickettsiosis. En base al

55.5% de casos sospechosos, se decidió a comprobar los casos mediante la prueba

específica para E. canis (ELISA) obteniendo como resultado 6/20 (30%) perros que

padecen la enfermedad.

El último estudio se realizó para la detección del agente R. rickettsii a la totalidad de

los perros muestreados, obteniendo como resultado 0/36 (0%) perros.

1

INTRODUCCIÓN

En los últimos años se ha observado el aumento progresivo de la población de

garrapatas en los estado del norte del país, principalmente en el estado de Baja

California, en los municipios de Mexicali, Tijuana, Ensenada, Rosarito y Tecate

(Field-cortazares & Moreno, 2011). Representan una gran amenaza, ya que estos

ectoparásitos son vectores de bacterias del genero Rickettsii, algunas de estas

bacterias son zoonóticas por lo cual utilizan a la población canina y humana como

huéspedes, provocando cuadros patológicos severos que pueden llevar hasta la

muerte del huésped.

La distribución de las enfermedades rickettsiales es mundial, con cierta delimitación

geográfica por el tipo de reservorios y vectores involucrados. En algunas regiones

surgen como enfermedades proliferantes estrechamente relacionadas con

alteraciones del medio ambiente.

Actualmente los pacientes humanos con síntomas relacionados a una Rickettsii son

asociados a perros que padecen la enfermedad clínica que al ser picados por el

parasito (vectores), que son la fuente de infección hacía la población humana

mediante las garrapatas que los ectoparásitan.

Y la respuesta por parte de las unidades de salud tanto humanas como veterinarias

que atendieron a estos enfermos ha sido compleja, dado que se ha tenido que ir

descartando diversas patologías asociadas con cuadros exantemáticos y febriles,

lo cual en algunos casos ha retrasado el diagnostico confirmativo e inicio del

tratamiento específico.

Los antecedentes literarios mencionan que en el municipio de Mexicali B.C, el

Laboratorio de Salud Pública del Instituto de Investigaciones en Ciencias

Veterinarias de la Universidad Autónoma de Baja California. Han realizado

investigaciones para la detección de perros enfermos con Rickettsia sp, utilizando

2

la técnica de laboratorio PCR y ELISA en los años 2005 al 20014.(ELISA).(Gracia,

2015).

En este trabajo se presentará un estudio recopilativo de los libros y artículos que se

han publicado en los últimos años. Sobre el problema que se ha manifestado en los

estados fronterizos del norte del país, sobre las enfermedades rickettsiales y se llevó

a cabo un estudio para determinar la prevalencia existente de las bacterias del

genero Rickettsii de las especies R. rickettsii y E. canis en pruebas de campo

realizadas a 36 perros de la calle en las 9 delegaciones del municipio de Tijuana

Baja California.

Al dar resultados positivos, de las 2 enfermedades Rickettsiales a estudiar. Permitirá

alertar a los médicos veterinarios y a profesionales del sector de salud, a tomar las

medidas pertinentes. Tales como llevar a cabo actividades preventivas mediante el

control químico en hogares y la ectodesparasitación de los animales de compañía.

HIPÓTESIS

La relación entre ciudades tan cercanas como lo que es Mexicali con Tijuana a una

distancia de 148 km. Los resultados que se han presentado en Mexicali no deben

de ser tan lejanos a lo que probablemente se está presentando en la ciudad de

Tijuana B. C. por el movimiento de ganado, mascotas y personas. Por lo que se

comprobará que R. rickettsii y E. canis se encuentran con una prevalencia muy

semejante, como en la ciudad de Mexicali B. C.

OBJETIVO

Se realizarán muestreos sanguíneos para la detección de 2 enfermedades

causadas por el orden Rickettsia: R. rickettsi ¨zoonotica¨ y E. canis. En 36 perros

del municipio de Tijuana los cuales se tomarán 4 perros por delegaciones que

comprende: Centro, Otay Centenario, Playas de Tijuana, La Mesa, San Antonio de

los Buenos, Sánchez Taboada, Cerro Colorado, La Presa y La Presa Rural.

3

ANTECEDENTES

Fiebre de las Montañas Rocosas

En abril de 1906 Howard Taylor Ricketts (1871-1910) viajó a Biterroot Valley para

estudiar una enfermedad que se manifestaba con cierta frecuencia en la zona

noroeste de los Estados Unidos, la fiebre maculosa o manchada de las Montañas

Rocosas, por iniciativa del McCormick Memorial Institute, en el estado de Montana,

la Universidad y la American Medical Association. Howard Taylor Ricketts pasó

cuatro años alternando entre laboratorios y el trabajo de campo. Con su ayudante

J. Moore logró reproducir experimentalmente la enfermedad en monos y cobayos.

Demostrando su transmisión por la picadura de garrapata del Pacífico o

Dermancentor occidentalis. También probó la inmunidad que adquiere el animal

después de un ataque y que la infección en artrópodos se transmitía trans-ovárica

a su progenie. (Microbiol & Uribe, 2010).

En 1909 anunció el descubrimiento de dos diminutos cuerpos de aspecto lanceolado

como causante de la enfermedad. (Microbiol & Uribe, 2010).

Ehrlichiosis

Se descubrió por primera vez en Argelia en 1935 por Donatein y Lestoquard, pero

fue a partir de la década de 1960 debido a la epizootia que afectó a los perros

procedentes de U.S.A. y utilizados con fines militares en la guerra de Vietnam. Por

lo cual se retomó su estudio. Debido a la alta morbilidad y mortalidad hizo que se

llamara durante algún tiempo Pancitopenia Tropical Canina, pero se comprobó que

era el mismo agente que el descrito por Donatein en 1935, solo que en presencia

de una cepa más virulenta.

En 1945 fue renombrada como Ehrlichia canis, en honor al bacteriólogo alemán

Paul Ehrlich. (Callés, n.d.)

4

Antecedentes en humanos en México

Desde 1930 se tienen registros de la presencia clínica de la enfermedad en

humanos en México y actualmente la enfermedad se distribuye, con mayor

prevalencia, en los estados del norte del país con climas cálidos y áridos. En los

pacientes no tratados el desenlace puede ser fatal, la tasa de mortalidad puede ser

hasta del 35%. Los datos más recientes 2007-2009 muestran que solo 11 estados

de la República Mexicana se han reportado casos confirmados de la enfermedad

(Cuadro 1), resaltando el brote en Mexicali, Baja California (2009; 278 casos) (Field-

Cortazares & Moreno, 2011).

5

Cuadro 1.- Casos confirmados de la enfermedad (Field-Cortazares & Moreno,

2011).

6

Estudios previos en humanos en Baja California (2008-2010)

A partir del mes de septiembre del 2008, se han podido cuantificar un total de 1453

pacientes que cubrían los requisitos para considerarlos como sospechosos (Figura

1). (Field-Cortazares & Moreno, 2011).

A partir del 24 de marzo del 2009 a febrero del 2010 se han detectado un total de

278 pacientes donde se confirmó el diagnóstico de rickettsiosis, todos estos

confirmados practicando el método de Weil Felix como tamizaje y Eliza como

confirmatorio (Field-Cortazares & Moreno, 2011).

En 275 casos el agente causal fue por Rickettsia rickettsii y en 3 casos por Rickettsia

prowazekii presentando un total de 264 casos positivos en la ciudad de Mexicali y

11 casos positivos entre las ciudades de Tijuana, Rosarito y Ensenada (Field-

Cortazares & Moreno, 2011).

Las defunciones en una zona marginada de la ciudad de Mexicali conocida como

Los Santorales fueron un total de 132 y el resto en distintos puntos de la misma

ciudad. (Field-Cortazares & Moreno, 2011).

7

Figura 1.- Casos sospechosos en Baja California (Field-cortazares & Moreno,

2011).

8

Detección de Rickettsia sp por PCR en humanos atendidos por el sector salud de

Mexicali, Baja California, México.

El estudio se llevó a cabo en el Laboratorio de Salud Pública del Instituto de

Investigaciones en Ciencias Veterinarias de la Universidad Autónoma de Baja

California. Se analizaron 120 muestras de sangre de pacientes colectadas por el

sector salud, que comprende el Hospital General de Mexicali y del IMSS delegación

Baja California. Los criterios para la selección de muestras se basaron en personas

con signos compatibles a la enfermedad, edad y sexo indistintos.(Gracia, 2015).

El análisis molecular se realiza con la técnica de PCR para la detección de Rickettsia

rickettsii. Obteniendo de los 120 pacientes muestreados mediante la técnica de

laboratorio PCR, se obtuvo un total de 30 (25%) casos positivos. (Gracia, 2015).

Estudios previos de Rickettsia rickettsii en perros en la zona urbana de Mexicali

B.C. 2005 al 2009.

El presente trabajo se llevó a cabo en la ciudad de Mexicali B. C. realizando

muestreos sanguíneos de 384 perros atendidos en 39 clínicas veterinarias,

realizados desde febrero de 2005 a diciembre de 2006. Y otro estudio incluyó el

análisis serológico de muestras sanguíneas de 384 perros distribuidos en grados de

marginada, alta, mediana y baja de la cuidad, colectadas en el mes de junio del

2009. Utilizando como método de diagnóstico (ELISA).(Gracia, 2015).

Obteniendo como resultado (284/384) 64.4% en los perros que fueron atendidos en

clínicas veterinarias. Los resultados obtenidos en perros capturados por el personal

del Centro Municipal de Control Animal fue de (218/384) 59.54%. Todas las

garrapatas colectadas de perros fueron R. sanguineus (Gracia, 2015).

9

Presencia de Rickettsia sp. en garrapatas Rhipicephalus sanguineus de perros en

Mexicali, B. C, México 2009 al 2013.

Este proyecto consta del diagnóstico molecular de Rickettsia sp. por PCR en

garrapatas Rhipicephalus sanguineus analizadas en el Laboratorio de Salud Pública

Veterinaria del Instituto de Investigaciones en Ciencias Veterinarias de la

Universidad Autónoma de Baja California desde febrero de 2009 a diciembre de

2013. El proyecto fue realizado mediante el análisis de muestras de ADN de 188

garrapatas colectadas de perros de la zona urbana de Mexicali.(Gracia, 2015).

Obteniendo el resultado de las 188 muestras de ADN de garrapatas colectadas de

perros de la zona urbana de Mexicali BC, 58 (30.8%) resultaron positivas a R.

rickettsii (Gracia, 2015).

Detección de Ehrlichia por PCR en perros en Mexicali, Baja California, México.

El trabajo fue realizado en la ciudad de Mexicali, el 18 de febrero del 2013 al 26 de

mayo del 2014, en 184 perros colectadas en 2005-2009, buscando las bacterias E.

canis. Estas fueron analizadas en el Laboratorio de Salud Publica Veterinaria

(Gracia, 2015).

Los resultaron obtenidos fueron 99/184 (53.8%) muestras resultaron positivos

(Gracia, 2015).

10

MARCO TEÓRICO

Rickettsia

Generalidades

Las rickettsias son un género de bacterias intracelulares obligadas transmitidas por

artrópodos hematófagos como las garrapatas, piojos y ácaros. (Venzal & Nava,

2011).

Dentro de la clase alfa-proteo bacterias, se encuentra el orden Rickettsiales, en el

cual se incluyen a su vez la familia Rickettsiaceae y Anaplasmataceae (Figura 2).

La familia Rickettsiaceae incluye dos géneros. El ya mencionado Rickettsia y el

género Orientia. El género Rickettsia está compuesto por los grupos Tifus (TG), el

grupo de las Fiebres Manchadas (SFG), el grupo Transicional (TRG) y el grupo

Ancestral (AG). TG solo tiene 2 miembros, R. prowazekii y R. typhi, ambos

patógenos para los seres humanos. En el SFG existen 20 especies: R. rickettsii

(Rocky Mountain spotted fever), R. conorri subsp. conorii (Mediterranean spotted

fever), R. conorii subsp. israelensis (Israeli spotted fever) R. conorii subsp. caspia

(Astrakhan fever), R. conorii subsp. indica (Indian Tick Typhus), R. sibirica subsp.

sibirica (Siberian tick typhus or North Asian tick typhus), R. sibirica subsp.

mongolitimonae, R. australis (Queensland tick typhus), R. japonica (Japanese or

Oriental spotted fever), R. africae (African tick bite fever), R. honei (Flinders Island

spotted fever), R. slovaca, R. heilongjiangensis, R. aeschlimannii, R. parkeri, R.

massiliae, R. marmionii, R. amblyommii, R. texiana y R. helvética. Todas las

rickettsias de éste grupo son potencialmente patógenas para el hombre, siendo R.

rickettsii la más patógena. (Mutz, 2009).

En el grupo ancestral se encuentran R. belli y R. canadensis. Por último en el grupo

transicional están R. akari y R. felis. Y por último, en la familia Anaplasmatacea

11

encontramos en la actualidad los géneros Ehrlichia spp y Anaplasma spp. (Mutz,

2009).

12

Figura 2.- Rickettsiales (Mutz, 2009)

13

Patogenia

Las rickettsias patógenas sobreviven en una relación comensal con un insecto

vector, los cuales sirven como un reservorio primario. Los humanos son

hospedadores accidentales. Los reservorios de esta zoonosis, de los cuales los

humanos típicamente adquieren la infección por los perros y ratones salvajes. Por

lo general, la picadura es indolora y pasa inadvertida. La enfermedad se transmite

durante la alimentación hemática, cuando las secreciones provienen de las

glándulas salivales de la garrapata y se ponen en contacto en el interior de los vasos

sanguíneos dérmicos. Después de la introducción a través de la piel, los

microorganismos alcanzan el torrente sanguíneo a través de los vasos de pequeño

calibre y linfáticos. (“Boletín epidemiológico periódico,” 2006).

Se ha demostrado que pocos microorganismos vivos son necesarios para ocasionar

infección clínica aparente. La diseminación a través del torrente circulatorio se

continúa con el ataque al endotelio vascular. Las rickettsias utilizan a las células

endoteliales de vasos de pequeño calibre como el blanco primario en las infecciones

in vivo, causando incremento en la permeabilidad capilar, así como lesiones febriles

en hospederos mamíferos. La patogenia es muy similar en todas ellas y consiste en

una vasculitis de pequeños vasos por infección directa de las células endoteliales.

(“Boletín epidemiológico periódico,” 2006).

Cuando las rickettsias se ponen en contacto con las células endoteliales, inducen

su propia fagocitosis, y una vez dentro del citosol, escapan del fagosoma y proliferan

por fisión binaria simple, siendo finalmente expulsadas por exocitosis para seguir

infectando células contiguas. (“Boletín epidemiológico periódico,” 2006).

Manifestaciones clínicas

La sintomatología clínica, comienza 6–10 días después de producirse la picadura

de la garrapata, e incluye fiebre, mialgia, linfadenopatía local y la característica

14

pústula en el lugar de la picadura de la garrapata. (“Dermacentor occidentalis.,”

1995).

Estos signos clínicos principales varían dependiendo de la especie de rickettsia

implicada. Entre los hallazgos hematológicos y bioquímicos no específicos se

incluyen trombocitopenia, recuentos leucocitarios anormales. La enfermedad puede

ser aguda o crónica. (“Dermacentor occidentalis.,” 1995).

Diagnóstico

El diagnóstico de la infección se basa empíricamente en el examen físico del

paciente y datos epidemiológicos. Sin embargo, el diagnóstico clínico es difícil,

debido a que los signos y síntomas iniciales generalmente son inespecíficos.

(“Boletín epidemiológico periódico,” 2006)

Las pruebas serológicas como Weil-Felix el ensayo serológico más antiguo, tienen

un valor limitado ya que los anticuerpos contra el patógeno no son detectables hasta

los 7 a 10 días después de la lesión inicial y da una sensibilidad global tan bajo

como 33% y una especificidad de 46%. (Febriles, n.d.)

Otras pruebas serológicas es la de ELISA indirecta IgM que presenta una

sensibilidad de 78% y una especificidad de 80% y la prueba de anticuerpos

fluorescentes indirecto (IFI) es considerada como el estándar de oro para este

patógeno, ya que presenta una sensibilidad de 82% y una especificidad de

90.9%pero no permite distinguir entre infección con R. rickettsii de otras rickettsias.

(Roberto & Evia, 2009)(“Serodiagnóstico de rickettsiosis por prueba elisa e

inmunofluorescencia ifi igm,” 2007).

El uso de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), está limitado debido a su

baja sensibilidad para detectar ADN en especímenes sanguíneos. Ya que el número

de este patógeno circulante en sangre es bajo, particularmente en ausencia de

enfermedad avanzada o infección fulminante. (Roberto & Evia, 2009).

15

Tratamiento

El tratamiento debe administrarse sobre la base de la sospecha clínica, sin esperar

los resultados de las pruebas serológicas, porque el retraso en la administración de

antibióticos puede dar lugar a tasas más altas de desenlace grave o mortalidad. Se

debe administrar doxiciclina a una dosis de 5 a 10 mg/kg, VO o IV, 1v/d durante 10

a 21 días. También es eficaz administrar 22 mg/kg de tetraciclina VO 3 v/d durante

28 días y dipropionato de imidocarb a una dosis de 5 mg/kg 1 vez cada 2 a 3

semanas. Puede ser necesario introducir una terapia de apoyo. Debe instaurarse

ciertas precauciones para la eliminación y el control seguro de garrapatas. (“Boletín

epidemiológico periódico,” 2006) (Mutz, 2009).

Fiebre Maculosa de las Montañas Rocosas

Clasificación taxonómica

Reino: Bacteria

Filo: Proteobacteria

Clase Alpha Proteobacteria

Orden: Rickettsiales

Familia: Rickettsiaceae

Género: Rickettsia

Especie: R. rickettsii

(Roberto & Evia, 2009)

16

Etiología

Es una enfermedad de seres humanos y perros que son causada por Rickettsia

rickettsii y miembros relacionados estrechamente del grupo de las rickettsias de la

fiebre maculosa, son consideradas endémicos en la mayor parte de América del

Norte, del Sur y Centro. Estos patógenos se transmiten principalmente por la

picadura de garrapatas infectadas. (Roberto & Evia, 2009).

Cuadro clínico

Los pacientes que presentan la infección desarrollan diversos rangos de

manifestaciones sistémicas, cutánea, cardiacas, pulmonares, gastrointestinales,

renales, neurológicas y musculo esqueléticas. (Mountain & Fever, 2010).

Manifestaciones sistémicas: Las manifestación inicial usualmente consisten en

fiebre. Se observa en 100% de los casos y es mayor a 40 °C. (Roberto & Evia,

2009).

Manifestación cutánea: Edema e hiperemia de las mucosas, prepucio peniano.

(Roberto & Evia, 2009).

Manifestaciones cardiacas y circulatorias: una minoría de los casos presenta

miocarditis Típicamente, la forma inicial de la lesión comienza con pequeñas

petequias en membranas mucosas oculares, orales y genitales, también ‘presentan

anorexia . (Roberto & Evia, 2009).

Manifestación pulmonar: Se debe a la permeabilidad vascular de la microcirculación

pulmonar. Se presenta tos en una tercera parte de los pacientes. (Roberto & Evia,

2009) (Mountain & Fever, 2010).

Manifestaciones gastrointestinales: durante los primeros días de infección, los

pacientes generalmente desarrollan náuseas y melena. (Roberto & Evia, 2009).

17

Manifestaciones renales: en los casos severos pueden desarrollarse insuficiencia

renal aguda y hematuria. (Roberto & Evia, 2009) (Mountain & Fever, 2010).

Manifestaciones neurológicas: Los pacientes pueden desarrollar letargo, cefalea y

meningitis. Pueden progresar las manifestaciones neurológicas hasta ataxia.

(Roberto & Evia, 2009) (Rocosas & Basica, 2011).

Manifestaciones musculo esqueléticas: Se presentan con frecuencia las mialgias.

(Roberto & Evia, 2009).

Ehrlichiosis

Clasificación taxonómica

Dominio: Bacteria

Filo: Proteobacteria

Clase: Alpha Proteobacteria

Orden: Rickettsiales

Familia: Anaplasmataceae

Género: Ehrlichia

Especie: Ehrlichia canis

(Veterinaria, 2006)

Etiología

La ehrlichiosis monocítica clásica canina está causada por Ehrlichia canis, que

infecta las células sanguíneas (monocitos, plaquetas y granulocitos) de los perros.

(Veterinaria, 2006)

18

Epidemiologia

Estos agentes se transmiten mediante la garrapata del perro, Rhipicephalus

sanguineus. La garrapata Rhipicephalus se infecta con E.canis al alimentarse en

perros infectados y transmiten la infección a otros perros durante las tomas de

sangre en las fases vitales sucesivas. También pueden transmitir el patógeno las

transfusiones de sangre. (Veterinaria, 2006) (Silva-molano, Sánchez-ucrós, &

Loaiza-echeverri, 2008).

Cuadro clínicos

Los signos normalmente progresan desde agudo a crónico, según la cepa del

microorganismo y del estado inmune del hospedador. (Silva-molano et al., 2008).

Los signos de la fase aguda de la enfermedad generalmente se desarrollan de 1 –

3 semanas posteriores a la mordida de la garrapata infectada, y generalmente dura

de 2 – 4 semanas. En esta fase el hemograma puede mostrar una trombocitopenia

(Veterinaria, 2006) (Silva-molano et al., 2008).

Seguida de la fase aguda los animales pueden entrar en estado subclínico, durante

la cual la persistencia del antígeno en las células infectadas obra como estímulos

para el sistema inmune. Esta fase aparece de 6 – 9 semanas después de la

infección inicial y su duración suele ser de 1 a 4 meses. Hay ausencia de signos

clínicos pero persisten los cambios hematológicos consisten con trombocitopenia,

anemia arregenerativa y respuestas celulares variables leucopenia a linfocitosis y

monocitosis. Los perros que no eliminan la infección progresan a la fase crónica.

(López, Abarca, Mundaca, & Caballero, n.d.).

Esta fase generalmente se desarrolla de 1 a 4 meses luego de la mordida de la

garrapata y puede ser, ya sea leve o severa. (López et al., n.d.).

19

Manifestaciones sistémicas: Los signos más comunes en la enfermedad son

debilidad, anemia, depresión, anorexia, pérdida de peso, letargia, palidez de

mucosas, petequias, tos, disnea, fiebre y edema periférico, especialmente en

miembros posteriores. De todos los signos hemorrágicos observados en la fase

crónica: petequias, hematuria, melena, hemorragias oculares y epistaxis es más

frecuente. (Silva-Molano et al., 2008), (Craing E. Greene. 2008).

Los signos oculares: Los hallazgos e incluyen uveítis anterior, opacidad corneal,

hifema, tortuosidad de vasos retínales. Puede haber desprendimiento de retina y

ceguera debido a hemorragias. (Silva-molano et al., 2008), (Craing E. Greene.

2008).

Manifestaciones neuromusculares: Son el resultado de meningitis por inflamación o

hemorragia, o ambas. Se han observado convulsiones, estupor y ataxia.

Ocasionalmente aparecen signos locomotores como marcha envarada (Craing E.

Greene. 2008).

CICLO NATURAL DE LAS GARRAPATAS

Dependiendo del área geográfica se conocen varias especies de garrapatas que

sirven como vectores del microorganismo. Las garrapatas Dermancentor andersoni

(garrapata de la madera de las Montañas Rocosas) y Dermancentor variabilis

(garrapata estadounidense del perro), son los principales vectores de la infección

en los Estados Unidos y Amblyomma cajennense (garrapata Cayena) es el vector

más importante en Centro América y Sudamérica. Amblyomma aureolatum

(garrapata dorada del perro) y Rhipicephalus sanguineus (garrapata café del perro)

también son vectores reconocidos en Sudamérica. (Mountain & Fever, 2010).

El ciclo de vida de estas garrapatas consiste en tres etapas: las larvas que salen de

los huevos, las ninfas que se desarrollan a partir de las larvas y los adultos (Figura

3). Cada una de estas formas permanece unida al huésped, alimentándose de su

20

sangre por unos pocos días. R. rickettsii puede estar en cualquiera de las tres

etapas del ciclo de vida de las garrapatas, incluso en los huevos. (Microbiol & Uribe,

2010).

21

Figura 3.- Ciclo de vida de la garrapata. (Mountain & Fever, 2010)

22

DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN

36 perros

36 jeringas de 10 ml

36 tubos con EDTA

36 tubos con SST

Rasuradora con navaja del número 10

Isipós

1 pinza hemostática

1 Liga

Snap para E. canis con su respectivo diluyente

Jeringas de 1 ml

Tubos con EDTA

Tubos capilares desechable

En el presente trabajo se realizó a partir del mes de agosto del 2014 - agosto del

2015 mediante estudios epidemiológicos para la valoración de dos enfermedades

de transcendencia sanitaria a nivel mundial. La cual comprende la Fiebre de las

Montañas Rocallosas y Ehrlichiosis en 36 perros de procedencia callejera, edad,

sexo y raza indistinto, pero que haya o estén ectoparásitos con garrapatas. Los

cuales se localizan en el municipio de Tijuana Baja California, que comprende 9

23

delegaciones: Centro, Otay Centenario, Playas de Tijuana, La Mesa, San Antonio

de los Buenos, Sánchez Taboada, Cerro Colorado, La Presa, La Presa Rural.

Se seleccionaron 4 perros al azar de cada una de las 9 delegaciones, prosiguiendo

a citarlos en las veterinarias más cercanas a su localidad o en su mismo domicilio

para la realización del llenado del formato epidemiológico y la extracción de las

muestras sanguíneas que consiste en extraer 9 ml de sangre, de la yugular

(previamente rasurada la piel y desinfectada) y colocar 3 ml de la sangre en un tubo

de EDTA (tapón morado) para la Biometría Hemática, para valorar la serie

plaquetaria y 5 ml en el tubo con SST para el estudio COX-19, para valorar los casos

positivos a R. rickettsia. El ml sobrante se colocó en otro tubo con EDTA y se

almacenó en refrigeración 4-8 °C.

Con los tubos previamente identificados de la Biometría Hemática y COX-19 se

prosiguió a mandarlos al laboratorio Klein para la realización de los análisis, los

cuales reportaron sus resultados a las 8 horas a partir de la recepción de las

muestras.

En los resultados obtenidos de la biometría hemática fueron considerados los

pacientes que presentaran trombocitopenia como sospechosos a Ehrlichiosis, los

cuales fueron candidatos para la realización del 3 estudio ELISA, el cual es

específico para E. canis.

El estudio consiste en recolectar 10 ul de sangre del tuvo con EDTA (previamente

almacenada) y depositarlo en la ventana del dispositivo y posteriormente, agregué

2 gotas de diluyente en la ventana del dispositivo y para finalizar esperar 20 min

para valorar la interpretación. El análisis estadístico de la información se realizó de

manera descriptiva por delegación.

24

RESULTADOS

Los resultados obtenidos de las muestras sanguíneas de perros 36 callejeros que

fueron realizadas mediante los estudios de laboratorio (biometría hemática, Cox-19

y ELISA) para la detección de R. rickettsii y E. canis. En el municipio de Tijuana B.

C. México, en sus respectivas delegaciones: Centro, Otay Centenario, Playas de

Tijuana, La Mesa, San Antonio de los Buenos, Sánchez Taboada, Cerro Colorado,

La Presa y La Presa Rural. Mostrados en la (Tabla de datos).

Se obtuvo como resultado 20/36 (55.5%) (Grafica 3) perros callejeros muestreados

con trombocitopenia, localizados en las delegaciones: 4 Centro, 4 Otay Centenario,

4 Playas de Tijuana, 4 La Mesa, 3 San Antonio de los Buenos y 1 en La Presa Rural

(Grafica 2).

Lo cual nos lleva a sospechar que el 55.5% de los perros son sospechosos de

padecer Rickettsiosis. En base al 55.5% de casos sospechosos se decidió a

comprobar los casos mediante la prueba específica para E. canis (ELISA)

obteniendo como resultado 6/20 (30%) (Grafica 3) perros que padecen la

enfermedad. Los cuales se encuentran distribuidos en las delegaciones: Centro 4,

Otay Centenario 1 y en La Presa Rural se confirmó 1 caso (Grafica 4).

Se realizaron dos estudios de ELISA a dos perros que manifestaron antecedentes

sistémicos no específicos de haber presentado Rickettsiosis. Uno de ellos en

estudios fuera de este proyecto, mostró trombocitopenia, signos gastrointestinales

y respiratorios y como tratamiento se manejó doxiciclina por 20 días y el paciente

se dió de alta al finalizar el tratamiento. Por ese motivo se integró al proyecto

realizándole una biometría la cual no presentó trombocitopenia y ELISA, la cual fue

negativa. El segundo caso fue de un perro que presentaba convulsiones por motivo

inespecífico, se le realizó una biometría hemática y salió negativo a trombocitopenia,

se prosiguió a realizar ELISA y el resultado fue positivo, los paciente provenían de

la delegación La Presa Rural.

25

El tercer y último estudio se realizó para la detección del agente R. rickettsii a la

totalidad de los perros muestreados por el motivo de confirmar el agente ya que es

una enfermedad zoonótica y con alta incidencia en nuestra vecina ciudad de

Mexicali. Obteniendo como resultado 0/36 (0%) perros muestreados (Grafica 5).

ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS

Tinoco - García et al., (2015) realizaron estudios serológico (ELISA) (sensibilidad de

78% y una especificidad de 80%) en perros para la detección del agente etiológico

Rickettsia rickettsii en la zona urbana de la ciudad de Mexicali B.C. (Clima desértico

3°C a 45 °C y 28% de humedad) realizaron muestreos sanguíneos para la detección

de 768 perros (384 veterinarias y 384 en la perrera municipal) en los cuales se

obtuvo como resultado 284 (64.4%) veterinarias y 218(59.54%) perrera; El presente

trabajo se realizó en la ciudad de Tijuana B.C. (mediterráneo seco 7°C a 33°C y

80%) mediante otro tipo de estudio de laboratorio por ser inaccesible la prueba

serológico (ELISA) para este tipo agente etiológico en nuestro país. Por lo cual se

elaboró el proceso de diagnóstico mediante el estudio Weil-Felix con una

sensibilidad 33% y una especificidad de 46%. Por lo cual nos basamos en los títulos

de Proteus OX-19, para detectar casos positivos. Obteniendo como resultados, que

en los 36 perros muestreados en la ciudad de Tijuana no se encontró ningún perro

infectado con este agente etiológico.

Tinoco - García et al., (2015) realizaron estudios para la detección de E. canis

utilizando como método de diagnóstico molecular (PCR). En 184 perros de la

perrera municipal en la ciudad de Mexicali, en la cual se dió como resultado que 99

(53.8%) perros estaban infectados con este agente etiológico. En contraparte en

este estudio mediante la técnica de laboratorio (ELISA) Obteniendo como

resultados, que en los 20 perros muestreados en la ciudad de Tijuana se encontró

6 (30%) perros infectado con este agente etiológico.

26

Las causas de que en el estudio para Rickettsia rickettsii hayan salido los resultados

negativos. Se debió al proceso de diagnóstico elaborado en este estudio ya que es

de baja sensibilidad y especificidad o por la cantidad de muestras analizas

comparados con los elaborados en la ciudad de Mexicali por la Universidad

Autónoma de Baja California.

CONCLUSIÓN

Los resultados obtenidos en este estudio a partir del mes de agosto del 2014 a

agosto del 2015. Se demostraron casos positivos en 6/20 (30%) perros por E. canis

comparado con 99/184 (53.8%) obtenidos en la ciudad de Mexicali y en el estudio

para R. rickettsii se demostró 0 casos positivos en perros, comparados con 502/768

(65.3%) casos positivos en perros de la ciudad de Mexicali en el presente año. Por

lo que mi hipótesis no se cumplió.

PROBLEMAS PENDIENTES

Considerando el alto riesgo zoonótica de R. rickettsii y la rápida diseminación de las

2 enfermedades abarcadas en este trabajo y teniendo pruebas moleculares de que

estas pueden alojarse en la garrapata café del perro, se hace de suma importancia

implementar estudios epidemiológicos para la detección de estos patógenos en los

artrópodos y sumar pruebas moleculares en perros en la ciudad de Tijuana.

27

LITERATURA CITADA

Callés, A. (n.d.). EhrlicWosis canina. Dermacentor occidentalis. (1995). Febriles, R.

(n.d.). Reacciones febriles, 1–6.

Field-cortazares, J., & Moreno, J. L. S. (2011). Rickettsiosis en Baja California,

28(2), 44–50.

Gracia, L. T. (2015). ESTUDIOS EPIDEMIOLÓGICOS DE RIQUETSIOSIS EN

BAJA CALIFORNIA Y PROGRAMAS EDUCATIVOS DE PREVENCIÓN, 1–23.

Ickettsiosis, R., Enfermedad, U. N. A., & Pero, P. (2010). Rickettsiosis es un término

que agrupa a las enfermedades infecciosas causadas por al menos ocho

especies de las bacterias del género.

López, J., Abarca, K., Mundaca, M. I., & Caballero, C. (n.d.). Identificación molecular

de, 527–530.

Microbiol, E. N. F. I. N. F., & Uribe, C. M. (2010). Historia y actualidades Resumen

Introducción Fisiopatogenia Desarrollo y multiplicación del agente Factores de

riesgo, 30(1), 25–31.

Mountain, R., & Fever, S. (2010). Fiebre manchada de las montañas rocosas : ni tan

manchada ni tan montañosa como pensábamos as thought, 264–276.

Mutz, I. (2009). Las infecciones emergentes transmitidas por garrapatas. Annales

Nestlé (Ed. Española), 67(3), 123–134. http://doi.org/10.1159/000287275

Boletín epidemiológico periódico. (2006).

Roberto, J., & Evia, B. (2009). Fiebre manchada de las Montañas Rocosas, 56, 193–

208.

28

Rocosas, M., & Basica, I. (2011). Fiebre maculosa de las montañas rocosas, 2011.

Serodiagnóstico de rickettsiosis por prueba elisa e inmunofluorescencia ifi igm.

(2007).

Silva-Molano, R. F., Sánchez-Ucrós, N., & Loaiza-Echeverri, A. M. (2008).

sanguíneas de caninos en la ciudad de Cali , Colombia Recurrence report of

Ehrlichia canis in dog blood samples in Cali , Colombia, 2(1), 27–31.

Venzal, D. J. M., & Nava, S. (2011). El género Rickettsia como agente de zoonosis

en el Cono Sur de Sudamérica, 98–106.

Veterinaria, E. A. P. D. E. M. (2006). Estudio retrospectivo de caso control de

ehrlichiosis canina en la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad

Mayor de San Marcos : periodo 2002-2005.

Serodiagnóstico de rickettsiosis por prueba elisa e inmunofluorescencia ifi igm.

(2007).

29

ANEXO

Graficas

Grafica 2., Perros muestreados con trombocitopenia por delegación.

Grafica 3., Porcentaje de perros muestreados en azul con trombocitopenia y en naranja positivos a E. canis

4 4 4 4 3 10369

121518212427303336

Delegaciones con Trombocitopenia

Delegaciones

20

6

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

Mu

esre

ado

s

TROMBOCITOPENIA Y E. CANIS

trombocitopenia E. canis

55.5%

30%

30

Grafica 4., Perros positivos a E. canis por delegación.

Grafica 5., Porcentaje de perros con trombocitopenia en azul y positivos con R. rickettsii en naranja

4 1 0 0 0 0 0 0 10369

121518212427303336

Delegaciones con E. canis

Delegaciones

20

00

3

6

9

12

15

18

21

24

27

30

33

36

Per

ros

mu

estr

ead

os

R. rickettsii

Sospechosos R. rickettsia

55.5%

31

Tabla de datos

Número de folio: 1

Fecha: 10 marzo del 2015

Delegación: Centro

Nombre: Vieja.

Raza: Pastor Alemán.

Sexo: Hembra.

Organización: Sociedad Humanitaria.

Resultados de los estudios: Trombocitopenia. Ox – 19: negativo. E. canis: positivo.

Fotografía del perro valorado

Número de folio: 2

Fecha: 14 de enero del 2015

Delegación: Centro

Nombre: Bob.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.

Organización: Por amor a Toby.



32

Número de folio 3

Fecha: 20 de febrero del 2015

Delegación: Centro

Nombre Chiquito.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




Número de folio 4


Delegación: Centro

Nombre: Keto.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.

Organización: Por amor a Toby

Resultados de los estudios:

Trombocitopenia. Ox – 19: negativo. E. canis: positivo.


33

Número de folio 5

Fecha: 23 de diciembre del 2014

Delegación: Otay centenario

Nombre: Flaquito.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.

Organización: Sociedad humanitaria.



Número de folio 6



Nombre Camila.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.


Resultados de los estudios: Trombocitopenia. Ox – 19: negativo. E. canis: negativo.


34

Número de folio 7

Fecha: 17 de marzo del 2015


Nombre: Chispita.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




Número de folio 8



Nombre Manchas.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




35

Número de folio 9


Delegación: Playas de Tijuana

Nombre Clos.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




Número de folio 10

Fecha: 30 de diciembre 2014


Nombre Beto

Raza: Mixto

Sexo: Macho

Organización: Sociedad Humanitaria



36

Número de folio 11

Fecha: 18 febrero del 2015


Nombre Maya.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




Número de folio 12

Fecha: 21 marzo 2015


Nombre X.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




37

Número de folio 13


Delegación: La Mesa

Nombre Negra.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.

Organización: Sociedad humanitaria:

Resultados de los estudios: Trombocitopenia. Ox – 19: negativo E. canis: negativo


Número de folio 14



Nombre: Elioth.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




38

Número de folio 15



Nombre Yeni.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.

Organización. Por amor a Toby.



Número de folio 16



Nombre Sensor.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




39

Número de folio 17


Delegación: San Antonio de los Buenos

Nombre Teleke.

Raza: Schnauzer.

Sexo: Macho.




Número de folio 18



Nombre Tomasa.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




40

Número de folio 19



Nombre: Ades.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




Número de folio 20

Fecha: 21 marzo del 2015


Nombre: Molly.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.


Resultados de los estudios: Ox – 19: negativo.


41

Número de folio 21


Delegación: Sánchez Taboada

Nombre Chio.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




Número de folio 22



Nombre Colitas.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.


Resultados de los estudios: Ox- 19: negativo.


42

Número de folio 23



Nombre Puca.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




Número de folio 24



Nombre Celia.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




43

Número de folio 25


Delegación: Cerro Colorado

Nombre: Loba.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




Número de folio 26


Delegación: Cerro Colorado.

Nombre: Peque.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




44

Número de folio 27



Nombre Sofía.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




Número de folio 28



Nombre: Chocolata.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




45

Número de folio 29


Delegación: La Presa

Nombre Angelito.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




Número de folio 30



Nombre Toreta.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




46

Número de folio 31



Nombre: Julia.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.




Número de folio 32



Nombre: Blanquita.

Raza: Mixto.

Sexo: Hembra.


Resultados de los estudios: Ox- 19: negativo.


47

Número de folio 33


Delegación: La Presa Rural

Nombre Capulín.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.


Resultados de los estudios: Ox – 19: negativo. E. canis: negativo.


Número de folio 34


Delegación: La Presa Rural

Nombre: Negro.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.




48

Número de folio 35


Delegación: La Presa Rural.

Nombre: Tigrito.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.


Resultados de los estudios: Trombocitopenia. Ox – 19: negativo. E. cania: negativo.


Número de folio 36

Fecha: 2 de mayo del 2015

Delegación: La Presa Rural.

Nombre Peluche.

Raza: Mixto.

Sexo: Macho.


Resultados de los estudios: Ox – 19: negativo. E. cania: positivo.


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