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Universidad Nacional del Nordeste FACULTAD DE AGROINDUSTRIAS Trabajo Práctico Nº 4 Medios de Microb i ología Gene r a l- Ca r rera F a r m ac i a A ñ o 2006 López Tévez, Leonor; Torres, Carola Trabajo Práctico Nº 4 Medios de Cultivo MEDIOS DE CULTIVO Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias. Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte extra de factores de crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de levadura entre otros. Clasificación de los medios de cultivo Según su origen: a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce exactamente. b) SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida cuali y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles. c) SEMISINTÉTICOS son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura. Según su consistencia a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa. b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de 15g/litro. El agar es una sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran posibles en medio líquido". c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la motilidad de las especies en estudio.

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Universidad Nacional del NordesteFACULTAD DE AGROINDUSTRIASTrabajo Prctico N 4Medios de cultivo Microb iologa Gee r al!Ca r rera F ar " ac iaA # o$%%& Lpez Tvez, Leonor; Torres, CarolaTraba'o (r)cticoN* + Medios de CultivoMEDIOS DE CULTI,OUn medio de cultivo es un sustrato o una solucin de nutrientes que permite el desarrollo demicroorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivose debe sembrar sobre el mediodecultivoelegidolasmuestrasenlasquelosmicroorganismosvanacrecer!multiplicarseparadarcolonias."os microorganismos son los seres ms abundantes de la tierra pueden vivir en condiciones e#tremas de p$temperatura!tensindeo#%genocolonizandounaampliadiversidaddenic&osecolgicos.Entrelosrequerimientosmsimportantesparasudesarrolloestnelcarbonoelo#%genonitrgenodi#idodecarbonoe&idrgeno. 'uc&asbacteriassinembargonecesitandelaportee#trade(actoresdecrecimientoespec%(icos en (orma de suero sangre ! e#tracto de levadura entre otros.Clasi-icaci.delos"ediosdecultivo Seg/ su orige)a*NATURALES) sonlospreparados apartir desustancias naturales deorigen animal ovegetal como sere#tractos de tejidos o in(usiones ! cu!a composicin qu%mica no se conoce e#actamente.b* SINT0TICOS) sonlosmediosquecontienen unacomposicin qu%micade(inida cuali!cuantitativamente. +e utilizan para obtener resultados reproducibles.c*SEMISINT0TICOS son lossint,ticos alosquese lesa-aden (actores decrecimiento bajo una(ormade un e#tracto orgnico complejo como por ejemplo e#tracto de levadura.Seg/ su cosisteciaa*L12UIDOS) se denominan caldos ! contienen los nutrientes en solucin acuosa.b* S3LIDOS)sepreparana-adiendounagaraunmediol%quido.caldo*araznde/0g1litro.Elagaresuna sustancia inerte polisacrida .&idrato de carbono* que se e#trae de las algas. 2omo esta sustancia noesdigeridaporlasbacteriasnoconstitu!e ning3nelementonutritivo.Esteconjuntoconvenientementeesterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de ensa!o ! presentan la posibilidad de aislar! di(erenciar bacterias 4procesos que antes no eran posibles en medio l%quido4.c*SEMIS3LIDOS) contienen 50 g de agar 1litro de caldo. +e utilizan para determinar la motilidad de lasespecies en estudio.6ctualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.Seg/ su co"4osici.5 6 causa de los requerimientos qu%micos del mundo microbiano a veces es necesario agregar o eliminar componentes qu%micos del medio.a*COMUNES O UNI,ERSALES) su (inalidad es el crecimiento de la ma!or parte de losmicroorganismospocoe#istentes.Eselmedioms(recuentementeutilizadoparamantenercoloniasmicrobianas. Por ejemlo) agar com3n o caldo com3n.b* ENRI2UECIDOS) estn compuestos de un medio base como apo!o del crecimiento al cual se le puedeagregarungrane#cesodenutrientescomosuplementos nutritivosporejemplo)sangresuerol%quidoasc%tico etc. +e utiliza para microorganismos que tienen grandes e#igencias nutricionales.c*SELECTI,OS) sonslidosenlosquelaselectividad seconsigue alterando lascondiciones (%sicasdelmedio o a-adiendo o suprimiendo componentes qu%micos espec%(icos con el (in de in&ibir el crecimientode especies qu%micas cu!o crecimiento no interesa. Este tipo de medio slo permite el crecimiento de ungrupo de microorganismos e in&ibiendo el de otros. +e utiliza paraseleccionar ! aislar microorganismosa partir de poblaciones mi#tas. Por ejemplo 6gar salado7manitol o 2&apman .permite el crecimiento deciertos esta(ilococos*.Entre los (actores selectivos que alteran las condiciones del medio tenemos)X Ca"bio de 46) por ejemplo agregando cido ac,tico para (avorecer el crecimiento de Lactobacillus .p$(inal) 04 que es &ostil par la ma!or%a de las especies que crecen entre 80 ! 59*. "os &ongos crecen entrep$ 4 ! 8 ! S. faecalis a p$ :8.X Ca"biodete"4eratura)lama!or%adelasbacteriascreceptimamenteentre9;2!4;2."oscultivost%picosdeS.Faecalisrequieren8;2detemperatura !losdeListeriasoncapacesdedesarrollarse ! crecer a 4 2.X Alteracioes os".ticas) se acrecientan las propiedades osmticas un medio con el agregado de clorurode sodio. Estos medios intensi(ican la seleccin de bacterias &al(ilas como Staphylococcus spp. .50