titulo de la presentacion - interreg sudoe4.interreg-sudoe.eu/contenido-dinamico/libreria... ·...

21/09/20100

titulo de la presentacion

21/09/2010

JORNADA DE PORTES OBERTES

SANT CARLES DE LA RÀPITA

16 de Setembre de 2010

EL PROJECTE ALARMTOXHelena Eixarch Puigcerver

IRTA

3

ÍNDEX

-Introducció: - Objectius del projecte

- Definició de conceptes

- Altres mètodes de detecció de toxines

-Desenvolupament del projecte i resultats:- Producció d’enzims PP per enginyeria genètica

- Desenvolupament d’assajos bioquímics i biosensors

- Anàlisi de mostres de camp i comparació amb mètodes de

referència

-Propers passos a realitzar

-Conclusions

21/09/2010

SEGURETAT

ALIMENTÀRIA I SALUT

RECOLZAMENT AL

SECTOR

4

Objectius del projecte

Desenvolupar

assajos bioquímics i

biosensors per a la detecció

de toxines aquàtiques

Medi maríAigües

continentals

- Introducció:

- Objectius del projecte


- Altres mètodes

- Desenvolupament del

projecte i resultats:

- Producció d’enzims

- Assajos i biosensors

- Anàlisi de mostres

- Propers passos

- Conclusions

21/09/20105

Objectius del projecte

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Rapidesa

Sensibilitat

Rendibilitat

Rapidesa i

fiabilitat en

la detecció

Velocitat de

resposta front a

contaminacions

Qualitat dels

productes

d’aqüicultura

i pesca

Funcionament

del sector

turístic

Garantir

l’aigua

potable

Preservar

el medi

ambient

21/09/20106

Definició de conceptes: ASSAIG

Reacció bioquímica que permet detectar

substàncies d’interès

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

COMPOST A DETECTAR

Compost químic

Compost biològic

MATERIAL BIOLÒGIC

Enzim

Anticòs

Microorganisme

Altres

Reacció química

Reconeixement estructural

SENYAL MESURABLE

Color

Turbidesa

Fluorescència

21/09/20107




- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

TOXINA

AQUÀTICA:

Àcid okadaic (OA)

Microcistina (MC)

COMPOST A DETECTAR

Compost químic

Compost biològic

MATERIAL BIOLÒGIC

Enzim

Anticòs

Microorganisme

Altres

Reacció química


SENYAL MESURABLE

Color

Turbidesa

Fluorescència

21/09/20108




- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

ENZIM:

PROTEïNA

FOSFATASA

(PP)

COMPOST A DETECTAR

Compost químic

Compost biològic

Reacció química


SENYAL MESURABLE

Color

Turbidesa

Fluorescència

MATERIAL BIOLÒGIC

Enzim

Anticòs

Microorganisme

Altres

TOXINA

AQUÀTICA:

Àcid okadaic (OA)

Microcistina (MC)

21/09/20109




- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

DETECCIÓ DE

TOXINES EN MARISC

I AIGUA

COMPOST A DETECTAR

Compost químic

Compost biològic

ENZIM:

PROTEïNA

FOSFATASA

(PP)

MATERIAL BIOLÒGIC

Enzim

Anticòs

Microorganisme

Altres

TOXINA

AQUÀTICA:

Àcid okadaic (OA)

Microcistina (MC)

Reacció química


SENYAL MESURABLE

Color

Turbidesa

Fluorescència

21/09/2010

10

Definició de conceptes: BIOSENSOR

Instrument que utilitza material biològic per a

detectar substàncies d’interès

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

SENYAL ELÈCTRIC

DETECCIÓ DE

TOXINES EN MARISC

I AIGUA

COMPOST A DETECTAR

Compost químic

Compost biològic

ENZIM:

PROTEïNA

FOSFATASA

(PP)

MATERIAL BIOLÒGIC

Enzim

Anticòs

Microorganisme

Altres

TOXINA

AQUÀTICA:

Àcid okadaic (OA)

Microcistina (MC)

Reacció química


21/09/2010

11

Definició de conceptes: BIOSENSOR

Instrument que utilitza material biològic per a

detectar substàncies d’interès

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions Exemple:

BIOSENSOR DE GLUCOSA

PER A DIABÈTICS

SENYAL ELÈCTRICCOMPOST A DETECTAR

Compost químic

Compost biològic

MATERIAL BIOLÒGIC

Enzim

Anticòs

Microorganisme

Altres

Reacció química


21/09/201012

Definició de conceptes:

REACCIÓ ENZIMÀTICA

Enzim

PP

Enzim

PP

Enzim

PP

Enzim

PP

Entrada del

substrat al

centre actiu

Transformació

del substrat

Obtenció

del

producte

BIOSENSOR

ASSAIG

BIOQUÍMIC

Enzim

PP

Enzim

PP

OA/MC

Enzim

PP

Presència

de toxines

Bloqueig

del centre

actiu

Absència

de producte

LA DISMINUCIÓ DEL

SENYAL ENS DÓNA

UNA MESURA DE LA

QUANTITAT DE

TOXINA PRESENT

EN UNA MOSTRA

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

21/09/201013

Definició de conceptes:

REACCIÓ ENZIMÀTICA

LA DISMINUCIÓ DEL

SENYAL ENS DÓNA

UNA MESURA DE LA

QUANTITAT DE

TOXINA PRESENT

EN UNA MOSTRA

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

-20

0

20

40

60

80

100

120

0,0 0,1 1,0 10,0 100,0

% A

cti

vit

at

PP

2A

OA (µg/L)

-20

0

20

40

60

80

100

120

0,0 0,1 1,0 10,0 100,0

% I

nh

ibic

ió P

P2

A

OA (µg/L)

21/09/201014

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Altres mètodes de detecció de toxines

Mètodes de referència de detecció de toxines

Ens permeten comprovar que els resultats que

obtenim amb els assajos i biosensors són

correctes

MÈTODES BIOLÒGICS

BIOASSAIG RATOLÍ

MÈTODES QUÍMICS

CROMATOGRAFIA

21/09/201015

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Desenvolupament del projecte i resultats

Bloc 1: Producció d’enzims PP per enginyeria genètica

Bloc 2: Disseny i desenvolupament d’assajos i biosensors

Bloc 3: Anàlisi d’aigües, microalgues i bivalves per OA i MC

21/09/201016

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Bloc 1: Producció d’enzims PP per enginyeria genètica

Objectius:

- Producció i purificació

d’enzims fosfatasa (PP)

- Enzims més sensibles a OA

i MC que els disponibles

comercialment

- Enzims més estables que

els comercials


Resultats:

- Enzims PP produïts i

purificats

- Sensibilitat igual als enzims

comercials

- Enzims més estables que

els comercials

- Modificats per a poder-los

immobilitzar

21/09/201017

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Bloc 2: Disseny i desenvolupament d’assajos i biosensors

Objectius:

- Establiment de les

condicions òptimes de

reacció:

- Quantitats d’enzim, mostra

i altres reactius

- Temps d’assaig

- Temperatura d’assaig

- Optimització biosensors:

- Immobilització

- Funcionament


Resultats:

- Reacció enzimàtica posada

a punt

- Permet detectar OA i MC

- Immobilització biosensors en

desenvolupamet

21/09/201018

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions



Objectius:

- Obtenció de mostres de

camp per part dels socis del

projecte i socis associats

- Anàlisi de les mostres amb

assajos i biosensors

- Anàlisi de les mostres per

mètodes químics: validació

Resultats:

- Mostres de camp:

- Aigües: Embassaments de

Catalunya, Extremadura,

Castilla y León, Castilla la

Mancha

21/09/201019

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions



Objectius:








- Mostres de camp:

- Microalgues: Cultius en

laboratori, per absència de

creixements naturals

Resultats:

21/09/201020

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions



Objectius:








- Mostres de camp:

- Marisc: Delta de l’Ebre,

Alacant, Galícia

Ostres de la Badia

Resultats:

21/09/201021

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions



Objectius:








- Mostres analitzades amb

assajos bioquímics i

validades per mètodes

químics:

- OA: Musclo, Ostra plana,

Tellerina, Ostró

- MC: Aigües, cultius de

microalgues

Resultats:

21/09/201022

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions



Objectius:








- Validació:

- OA: Sobreestimació amb

els assajos bioquímics

sobre marisc; factor de

correcció

- MC: Estimació correcta

sobre aigües i microalgues;

s’ha d’optimitzar

Resultats:

21/09/201023

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Propers passos a realitzar

1. Anàlisi de la resta de mostres de marisc

amb assajos bioquímics i validació amb

mètodes químics

2. Desenvolupament final dels biosensors:

immobilització

3. Anàlisi de mostres amb biosensors i

validació amb mètodes químics

21/09/201024

- Introducció:



- Altres mètodes






- Propers passos

- Conclusions

Conclusions

El projecte es desenvolupa segons

planificació

Som capaços de detectar OA i MC amb la

tecnologia desenvolupada

Encara estem lluny de l’aplicació pràctica als

programes de vigilància

Importància de la col·laboració externa per a

l’obtenció de mostres de camp: validació del

mètode

GRÀCIES PER LA VOSTRA

ATENCIÓ[email protected]

titulo de la presentacion - interreg sudoe4.interreg-sudoe.eu/contenido-dinamico/libreria... ·...

Documents