tesis antioxidantes

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UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA INSTITUTO DE QUÍMICA APLICADA 1 UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA “DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE COMPUESTOS FENÓLICOS TOTALES Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE LOS EXTRACTOS TOTALES DE DOCE ESPECIES VEGETALES NATIVAS DEL SUR DEL ECUADOR: Adiantum poiretti (Culantrillo), Neonelsonia acuminata (Zanahoria blanca), Siparuna eggersii (Monte de oso), Ilex guayusa (Guayusa), Verbena litoralis (Verbena), Justicia colorata (Insulina), Oreocalix grandiflora (Cucharillo), Baccharis genistelloides (Tres filos), Artocarpus altilis (Fruto del pan), Costus comosus (Caña agria), Piper crassinervium (Guabiduca) y Croton wagneri (Mosquera). Tesis previa a la obtención del Título de Ingeniera Química AUTORA: Zayda Lorena Burneo Palacios DIRECTORA: Ing. Ximena Verónica Jaramillo Fierro Loja – Ecuador 2009

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UNIVERSIDADTCNICAPARTICULARDELOJAESCUELADEINGENIERAQUMICA DETERMINACINDELCONTENIDODECOMPUESTOSFENLICOSTOTALESYACTIVIDAD ANTIOXIDANTEDELOSEXTRACTOSTOTALESDEDOCEESPECIESVEGETALESNATIVASDELSUR DELECUADOR:Adiantumpoiretti(Culantrillo),Neonelsoniaacuminata(Zanahoriablanca), Siparunaeggersii(Montedeoso),Ilexguayusa(Guayusa),Verbenalitoralis(Verbena),Justicia colorata(Insulina),Oreocalixgrandiflora(Cucharillo),Baccharisgenistelloides(Tresfilos), Artocarpusaltilis(Frutodelpan),Costuscomosus(Caaagria),Pipercrassinervium(Guabiduca)y Crotonwagneri(Mosquera).

Tesispreviaalaobtencindel TtulodeIngenieraQumica AUTORA: ZaydaLorenaBurneoPalacios DIRECTORA: Ing.XimenaVernicaJaramilloFierro LojaEcuador 2009

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CERTIFICACINDEAPROBACIN Ing. XimenaJaramillo. DIRECTORADETESIS CERTIFICA: Que el presente Trabajo de Investigacin: Determinacin del contenido de compuestos fenlicos totales y actividad antioxidante de los extractos totales de doce especies vegetales nativas del Sur delEcuador:Adiantumpoiretti(Culantrillo),Neonelsoniaacuminata (Zanahoria blanca), Siparuna eggersii (Monte de oso), Ilex guayusa (Guayusa), Verbena litoralis (Verbena), Justicia colorata (Insulina), Oreocallis grandiflora (Cucharillo), Baccharis genistelloides (Tres filos),Artocarpusaltilis(Frutodelpan),Costuscomosus(Caaagria), Piper crassinervium (Guabiduca) y Croton wagneri realizado por la egresadaZaydaLorenaBurneoPalacios,hasidorevisadoyseajustaa losrequisitoslegalesexigidosporlaEscueladeIngenieraQumica,por loqueautorizosupresentacin. Loja,Octubrede2009 __________________________ Ing.XimenaJaramilloFierro DIRECTORADETESIS

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AUTORIA Las ideas, conceptos y contenidos vertidos en la presente investigacin sonderesponsabilidadexclusivadelaautora. _____________________________ ZaydaLorenaBurneoPalacios

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DEDICATORIA Dedicoelpresentetrabajoalamemoriademipadrequienconinmensa sabidurasiempresupodarmeejemplodeperseveranciaydedicacin. Amimadreporsuapoyo,carioybondadincondicional; Amitiernoyamadohijito,porllenardealegrayternuramivida; Amiesposoporbrindarmesuapoyoeincentivoincondicional; Amishermanosysobrinos. Lorena

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AGRADECIMIENTO LedoygraciasinfinitasaDiosporguiarmispasosencadamomentodemi vida. MisinceroagradecimientoalaUniversidadTcnicaParticulardeLoja,que atravsdelaPlantadeProductosNaturales,facilitlosmediosnecesarios pararealizarmiproyectodeTesis. Atodosycadaunodelosdocentesinvestigadoresybecariosqueforman parte del Instituto de Qumica Aplicada, quienes me brindaron su apoyo incondicionalparalaculminacindeestetrabajo. MigratitudamidirectoradetesisIng.XimenaJaramilloFierro,quiensupo brindarmesuorientacin,apoyoyamistaddurantetodoesteproceso. Al Laboratorio de Qumica Instrumental, de manera especial al Ing. Geovanny Figueroa y al Centro de Biologa Celular y Molecular en la personadelIng.FranciscoGordilloporfacilitarmeelusodeequipospara eldesarrollodelpresentetrabajo. A la Escuela de Ingeniera Qumica, as como a todo el personal docente que a lo largo de mi formacin profesional supieron brindarme sus enseanzas,consejos,ascomounconstanteestmulodesuperacin. A todos mis compaeros con los que compart mi vida estudiantil, especialmenteaCisne,porhabermebrindadosiempresuapoyo. 5

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CESINDEDERECHOS Yo,ZaydaLorenaBurneoPalacios,declaroconoceryaceptarladisposicin del Art. 67 del Estatuto Orgnico de la Universidad Tcnica Particular de Loja que en su parte pertinente textualmente dice: Forman parte del patrimonio de la Universidad la propiedad intelectual de investigaciones, trabajoscientficosotcnicosytesisdegradoqueserealicenatravs,o con el apoyo financiero, acadmico o institucional (operativo) de la Universidad Loja,Octubrede2009 _____________________ ZaydaLorenaBurneoPalacios C.I.11036492896

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NDICEDECONTENIDOS CERTIFICACIN........................................................................ AUTORA.................................................................... DEDICATORIA........................................................................ AGRADECIMIENTO..................................................................... CESINDEDERECHOS... NDICEDECONTENIDOS.. NDICEDETABLAS. NDICEDEFIGURAS.. RESUMEN... CAPITULOI.DESCRIPCINGENERALDELPROYECTO Introduccin Justificacin. ObjetivosdelaInvestigacin.. Findelproyecto Hiptesisdetrabajo. Diseoexperimental. CAPITULOII.DESCRIPCINBIBLIOGRAFICA 7 2 4 5 5 6 6 1 I II III IV V VI IX X XII

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2.1 2.2 HistoriadelosAntioxidantes... LosAntioxidantesylasReaccionesdeOxidacin.. 2.2.1Antioxidantesprimarios. 2.2.2Antioxidantessecundarios 2.2.3Antioxidantesterciarios. 2.3 2.4 2.5 Especiesreactivasdeloxgeno(ROS)yRadicaleslibres. Antioxidantesvegetales EspeciesvegetalesenEstudio.... 2.5.1 2.5.2 2.5.3 2.5.4 2.5.5 2.5.6 2.5.7 2.5.8 2.5.9 Neonelsoniaacuminata(Zanahoriablanca). Siparunaeggersii(Montedeoso) Ilexguayusa(Guayusa) Pipercrassinervium(Guabiduca).. Crotonwagneri(Mosquera). Baccharisgenistelloides(Tresfilos). Costuscomosus(Caaagria) Verbenalitoralis(Verbena) Oreocallisgrandiflora(Cucharillo) 8 8 9 9 9 9 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

2.5.10 Artocarpusaltilis(FrutodelPan).. 2.5.11 Adiantumpoiretti(Culantrillo) 2.5.12 Justiciacolorata(insulina).

CAPITULOIII.PARTEEXPERIMENTAL 8

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3.1 3.2 3.3 readeRecoleccin................................................................................ ObtencindelosExtractos..................................................................... DeterminacindeActividadAntioxidante.............................................. 3.3.1MtodoDPPH................................................................................ 3.3.2MtodoTEAC................................................................................ 3.4 Determinacindelcontenidodecompuestosfenlicos totales........... CAPITULOIV.RESULTADOSYDISCUSIN 4.1 AnlisisEstadstico... 4.2 DiscusinGeneral.. 4.2.1EvaluacindelaActividadAntioxidanteporlosmtodosDPPH YTEAC 4.2.1.2ComparacindeResultadosdeIC50 delosextractos Metanlicos 4.2.2ContenidosdeCompuestosFenlicostotales(CFT)delos Extractosmetanlicos 31 32 33 33 34 35 26 26 28 28 29 30

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CAPITULOV.CONCLUSIONESYRECOMENDACIONES 5.1 5.2 BIBLIOGRAFIA..................................................................................................... ANEXOS.............................................................................................................. 41 45 Conclusiones............................................................................................ Recomendaciones.................................................................................... 38 39 40

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INDICEDEFIGURAS

Figura.1

FotografadeNeonelsoniaacuminata, tomadadelHerbariodelaPlantade ProductosNaturales.UTPL.... Fotografa de Siparuna eggersii, tomada del Herbario de la Planta de ProductosNaturales.UTPL

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Figura.2

14 15 16

Figura.3

Fotografa de Ilex guayusa, tomada en la zona de recoleccin...........................................................................Fotografa de Piper crassinervium, tomada en la zona recoleccin. Fotografa de Croton wagneri, tomada en la zona recoleccin.. de

Figura.4

Figura.5 Figura.6

de

17 18 19

Fotografa de Baccharis genistelloides, tomada en la zona de recoleccin...................................................................................recoleccin.

Figura.7 Fotografa de Costus comosus, tomada en la zona de Figura.8 Fotografade Verbena litoralis, tomada en la zona recoleccin. de

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Figura.9 Fotografa de Oreocallis grandiflora, tomada en la zona de recoleccin..................................................................................

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Figura.10 Fotografa de Artocarpus Altillis, tomada en la zona derecoleccin.

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Figura.11 Fotografa de Adiantum poiretti, tomada en la zona derecoleccin.

23 24 27

Figura.12 Fotografa de Justicia Colorata, tomada en la zona de recoleccin..................................................................................

Figura.13 Diagrama de flujo del proceso de obtencin de extractos

totales

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Figura.14 Comparacin de los valores IC50 (ug/ml) obtenidos

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mediante los mtodos DPPH y TEAC Figura.15 Contenido de Compuestos Fenlicos Totales (CFT)..

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INDICEDETABLAS

Tabla1. Nomenclatura de las principales especies reactivas del oxgeno(ROS)....

10 26 34

Tabla 2.

Lugares de recoleccin de las especies vegetales en estudio . Valores IC50 (ug/ml) de la actividad antioxidante mediante el mtodo DPPH .... Valores IC50 (ug/ml) de la actividad antioxidante mediante el mtodo TEAC

Tabla 3.

Tabla 4.

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Tabla5. ValoresGAEs/gEapartirdelensayoCFT....

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RESUMENEnelpresentetrabajoseevaluelcontenidodefenolestotalesylaactividadantioxidantede los extractos metanlicos de 12 plantas usadas en la medicina tradicional, a travs de los ensayos de decoloramiento del radical DPPH (2,2difenil1picrihidracilo) y ABTS.* (2,2 azinobis(3etilbenzotiazolin6sulfonico); y el contenido de fenoles totales mediante el mtodo de Folin Ciocalteu