tema 7 aeromonas vibrio campylobacter y helicobacter

TEMA 7:

Aeromonas, Vibrio,

Campylobacter y Helicobacter

Lic. Liliana Gómez Gamboa (M.Sc.)

REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA

FACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA DE MEDICINA

UNIDAD CURRICULAR: BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA

MARACAIBO, JUNIO 2012.

Describir la taxonomía, mecanismos de

patogenicidad,, hallazgos clínicos, diagnóstico de

laboratorio y epidemiología, de

Aeromonas, Vibrio, Campylobacter y

Helicobacter

OBJETIVO ESPECÍFICO

Aeromonas, Vibrio,

Campylobacter y Helicobacter

* Complejo A. hydrophila A. hydrophila (3 subespecies) A. bestiarum A. salmonicida (5 subespecies)

• Aeromonas

• Oceanimonas

• Oceanisphaera

• Tolumonas

• Zobellella

Familia Aeromonadaceae

• Complejo A. hydrophila

• Complejo A. caviae

• Complejo A. veronii

Género Aeromonas (30, 12)

Complejo A. caviae • A. caviae • A. media • A. eucrenophila

A. veronii bv. sobria A. veronii bv. veronii A. jandei A. trota A. schubertii A. encheleia

A.allosaccharophila A. sobria A. popoffii A. culicicola A. simiae A. molluscorum

• Complejo A. veronii

CARACTERÍSTICAS

GENERALES

• Bacilos Gram negativo, anaerobios facultativos, rectos o células cocoides de 1.0 a 3.5 um de largo y 0.3 a 1.0 um de diametro.

• Poseen flagelos polares monotricos. Cultivos jóvenes de medios en agar pueden ser peritricos. A. salmonicida es no mótil.

• Son oxidasa y catalasa positiva.

• Reducen los nitratos a nitritos.

• Fermentan la glucosa y una variedad de otros carbohidratos y alcoholes con producción de ácido ó ácido y gas.

• Crecen entre 10 y 42ºC, ocasionalmente son más activos entre 22 y 25ºC.

• Crecen en pH 4.5 y 9.0 y en concentraciones de sales de 0 a 4%

• Son habitantes de los ambientes acuáticos de todo el

mundo, incluso agua dulce, agua contaminada o clorada,

agua salobre (↓ sal) y agua de mar.

• Se encuentran en una gran variedad de productos

frescos, carnes (vacuno, porcino, aves de corral) y

productos lácteos (leche, helados).

• Infectan diversas especies de animales de sangre fría y

caliente .

HÁBITAT NATURAL

VERTEBRADOS

INVERTEBRADOS AGUA

Primates

Otros

Moluscos

Artrópodos

Otros

Dulce

Salada

Salobre

Alimentos

FUENTES AMBIENTALES DE ESPECIES DE AEROMONAS POTENCIALMENTE

PATÓGENAS PARA HUMANOS. RUTAS DE COLONIZACIÓN/INFECCIÓN

• Poseen un gen alt que codifica una enterotoxina-

citotóxica termolábil y en los cuadros más severos se ha

descrito también la presencia de un segundo gen ast, el

cual codifica una enterotoxina-citotóxica termoestable.

• Producen exoenzimas: proteasas, lipasas, DNasas,

amilasas, y hemolisinas, así como también adhesinas.

FACTORES DE

VIRULENCIA

MODELO HIPOTÉTICO DE INFECCIÓN DE

HERIDAS POR AEROMONAS:

(1) Adherencia y colonización inicial de

la herida.

(2) Elaboración de proteasas y

degradación de material proteíco

como fuente de energía liderizando la

multiplicación bacteriana.

(3) Migración hacia los tejidos más

profundos debido al efecto gradiente

(↑ concentración de proteínas) vía

movilidad quimiotáctica.

PATOGENICIDAD

• Cuadros de gastroenteritis desde una diarrea aguda líquida a una

enfermedad crónica disentérica. A. veronii bv. sobria se asocia a

una enfermedad similar al cólera.

• Los síntomas incluyen dolor abdominal (60 a 70%), fiebre, vómito

(20 a 40%) y náuseas (40%).

• A. caviae es la especie más común en este tipo de cuadros. Los

cuadros diarreicos ocasionados por A. hydrophila y A. veronii bv

sobria son más severos.

• Las complicaciones de una enfermedad diarreica incluye

Síndrome urémico hemolítico o enfermedades del riñón que

requieren transplantes.

SIGNIFICADO CLÍNICO

• Ha sido aislada de una gran variedad de infecciones extra-intestinales, siendo los sitios más frecuentes sangre y heridas.

• La mayoría de los casos de septicemia están asociados con pacientes con enfermedad en el hígado y problemas hematológicos.

• La infección de herida usualmente precede a un daño que ocurre en contacto con agua. La especie predominante es A. hydrophila.

• Otras infecciones extraintestinales: oculares, repiratorias y urinarias, meningitis, osteomielitis,colicistitis, endocarditis y peritonitis.


INFECCIONES CLÍNICAS Y SÍNDROMES ASOCIADOS CON ENFERMEDAD

Gastroenteritis

Infecciones transmitidas a

través de la sangre

Infecciones de piel y tejidos blandos

Infecciones intra-

abdominales

Infecciones de tracto

respiratorio

Infecciones de tracto

urogenital

Infecciones oculares

• Sobreviven bien en cualquier medio de transporte.

• Las heces frescas son siempre preferibles que el hisopado rectal.

• Crecen bien en la mayoría de los medios de cultivo diferenciales y

selectivos utilizados para enterobacterias.

Agar sangre con ampicilina (20 ug)

Cefsulodin-irgasan-novobiocina (CIN)

Medio de xilosa-galactosidasa (XGM) + novobiocina

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

CULTIVO

SIEMBRA DE MUESTRAS CLÍNICAS

EN MEDIOS DE CULTIVO SELECTIVOS

INCUBACIÓN EN AEROBIOSIS A 35-37°C durante 24-48horas

• Sensibles: ciprofloxacina, gentamicina, amikacina,

tobramicina (A. veronii bv veronii 42% de R), Imipenem (A.

jandai 65% de R y A. veronii bv veronii 67% de R) y

trimethoprim-sulfametoxazole.

• Se les ha descrito ß-lactamasas inducida, que incluye un

grupo 1 de cefalosporinasa clase C, un grupo 2d

penicilinasa clase D y un grupo 3 metalo-ß-lactamasa

(carbapenemasa).


• Pruebas bioquímicas.

• Susceptibilidad a los antimicrobianos

Realizar ensayos de susceptibilidad y detección de ß-

lactamasas según especificaciones del CLSI 2012.

Género Vibrio

V. cholerae

V. mimicus

V. metschnikovii

V. cincinnatiensis

Grimontia hollisae

Photobacterium damsela

• 11 géneros

Familia Vibrionaceae

• 101 especies

• 12 de importancia clínica

Género Vibrio

V. fluvialis

V. furnissii

V. alginolyticus

V. parahaemolyticus

V. vulnificus biogrupo 1

V. harveyi

• Bacilos Gram negativo, pequeños, rectos, curvos, ligeramente curvos ó en forma de coma de 0.5 a 0.8 um de diámetro y 1.4 a 2.6 um de largo.

• Mótiles con flagelo polar ( 1 ó penacho).

• No requieren vitaminas ni aminoácidos.

• La mayoría de las especies requieren Na+.

• Anaerobios facultativos y oxidasa positiva.

• Fermentan la glucosa con producción de ácido, sin gas.

• Reducen los nitratos a nitritos y crecen en TCBS.

CARACTERÍSTICAS

GENERALES

• Primariamente el agua, dependiendo de la temperatura,

concentración de Na+, contenido nutritivo del agua, plantas y

animales.

• Son más frecuentes en medios marinos o estuarios y en la

superficie y tracto intestinal de animales marinos.

• En los medios marinos o estuarios, los vibrios son aislados del

sedimento, columnas de agua, tablones, ó en el caparazón de

los peces.

• También han sido recuperados de lagos salobres y especies de

vibrios no halofílicas se han encontrado en aguas dulces.

HÁBITAT NATURAL

• A excepción de V. furnissii las demás especies son consideradas patógenas para el humano, causando diarrea ó infecciones extraintestinales.

• V. cholerae y V. parahaemolyticus son bien reconocidos como causantes de diarrea. Más recientemente V. fluvialis, Grimontia hollisae y V. mimicus como productores de cuadros diarreicos en el humano.

• V. furnissii, V. metschnikovii y V. vulnificus han sido aislados de las heces de pacientes con diarrea, sin embargo su papel patógeno es incierto y requiere mayor investigación.

• Los vibrios han sido aislados de sangre, heridas de brazos y piernas, oídos y ojos infectados y vejiga irritada.


• Posee un flagelo polar único.

• La estructura antigénica es similar a la de Enterobacterias, con un antígeno flagelar H y un antígeno somático O, este último permite la diferenciación entre los tres grupos.

• V. cholerae O1 se clasifica en tres serotipos: Inaba (A y C) , Ogawa (A y B) y Hikojima (A, B y C) y dos biotipos Clásico y El Tor.

• Sólo V. cholerae O1 y O139 se asocian con cólera.

SUBGRUPOS: hay al menos

139 grupos de antígeno O.

• V. cholerae O1

• V. cholerae 0139

• V. cholerae no O1

Se divide en SUBGRUPOS, de acuerdo al antígeno somático O en O1, O139 y no O1.

Vibrio cholerae O1 se divide adicionalmente en:

SEROTIPOS: Inaba, Ogawa y Hikojima.

BIOTIPOS: Clásico y El Tor.

• Vive en los medios acuáticos, que son sus reservorios naturales.

• Tanto las cepas O1 como las no O1 coexisten en estos medios y las cepas no O1 y las no toxigénicas O1 predominan con respecto a las cepas toxigénicas O1.

• Vive unido a una clase particular de algas (fitoplancton) ó a los caparazones de los crustáceos y los copépodos (zooplancton).

• Cuando las condiciones en el medio, como la temperatura, la salinidad y la disponibilidad de nutrientes son adecuadas, V. cholerae se multiplica y puede sobrevivir durante años en un ciclo de vida libre.

• Pueden existir en el medio ambiente en un estado latente (viable no cultivable) pero sobreviven bajo condiciones difíciles.

HÁBITAT NATURAL

Los V. cholerae planktónicos que fueron liberados en las heces humanas “agua de

arroz” son el centro del ciclo de vida. Estas bacterias mótiles pueden ser ingeridas

por un nuevo hospedador humano o pueden asociarse con superficies abióticas

(posiblemente formando biofilms), copépodos, algas y masas de huevos

quironómidos (dípteros nematóceros) en el ambiente. Estos V. cholerae ambientales

pueden disasociarse de estos hospedadores para formar asociaciones con un nuevo

hospedador ambiental o pueden ser ingeridos por humanos, ocasionando infección.

Las cepas toxigénicas de V. cholerae persisten en ambientes acuáticos al lado de las

cepas no toxigénicas, ayudadas por la formación de biofilm sobre superficies biológicas y

utilizando quitina como fuente de carbono y nitrógeno.Tras la ingestión de estas bacterias

adaptadas a los ambientes acuáticos en aguas o alimentos contaminados, las cepas

toxigénicas colonizan el intestino delgado, se multiplican, secretan la toxina colérica y

son liberadas de nuevo al ambiente por el hospedador en la diarrea secretoria. El

patógeno liberado en heces comparte un estado hiperinfeccioso transitorio que sirve para

amplificar el brote a través de transmisión subsecuente a hospedadores.

•V. cholerae O1 y O139 secretan una “enterotoxina” o toxina del

cólera (CT) que promueve la secreción de líquido y electrólitos en

el intestino delgado.

• La dosis infectante varía con el vehículo de transmisión: agua

(103-106), alimentos (102-104). El período de incubación varía

con la dosis infectante y la acidez gástrica y dura 12 a 72 horas.

• No invade la pared intestinal y se detectan pocos neutrófilos en

el material fecal.

MECANISMO DE

PATOGENICIDAD

Toxina del Cólera (CT)

Pilis correguladores

de la toxina (TCP)

Regulador ToxR

•La toxina del cólera (CT) es una exotoxina proteica compuesta de una subunidad activa A y cinco subunidades de enlace B, lo cual se asemeja a la enterotoxina termolábil de ECET.

•Los genes para esta toxina son parte de un paquete de genes enlazados (cadenas) que codifican para las subunidades A y B de la toxina del cólera como parte de un “cassette de virulencia”.

•Un segundo factor de virulencia es un factor de adherencia conocido como pilis coreguladores de la toxina (TCP). Estos pilis median la colonización en el intestino, quizas por la adherencia a las células intestinales.

TOXINA DEL

CÓLERA

• La expresión de CT y TCP está controlada por el regulador ToxR, el cual se apaga y se enciende en respuesta al estímulo del medio ambiente. Este regulador es considerado otro factor de virulencia.

• Todos estos tres elementos (CT, TCP y ToxR) constituyen el “cassette de virulencia”, el cual ha sido descrito recientemente que puede ser transferido por un fago filamentoso que puede transferir toxigenicidad a otras cepas que posean TCP.

• Todo esto sugiere que la toxina del cólera fue adquirida a través de una transferencia horizontal de genes de una fuente microbiana desconocida.

TOXINA DEL

CÓLERA

El bacteriófago CTX codifica los genes para las dos

subunidades de la toxina del cólera (ctxA y ctxB).

Este bacteriófago se une al pilis corregulado por la toxina

(tcp) y pasa al interior de la célula bacteriana, donde se

integra en el genoma de V.cholerae.

El locus cromosómico de este bacteriófago lisogénico

contiene, igualmente, otros factores de virulencia:

el gen ace para la enterotoxina accesoria del cólera.

el gen zot para la toxina de la zónula occludens y

el gen cep para un factor de colonización.

La porción activa de la subunidad A se internaliza, interacciona

con proteínas G que controlan la adenilciclasa y provoca la

conversión catabólica del trifosfato de adenosina (ATP) en

monofosfato de adenosina cíclico (AMPc), lo que origina la

hipersecreción de agua y electrólitos

Esta acusada pérdida de líquidos provocaría normalmente la

eliminación de los microorganismos del aparato digestivo; no

obstante, las células de V. cholerae son capaces de adherirse a la

capa de células mucosas a través de:

1) los pili correguladores de la toxina que están codificadas por el

complejo génico tcp, y

2) las proteínas quimiotácticas codificadas por los genes cep. En

consecuencia, el pilis corregulador de la toxina es un elemento

destacado tanto como receptor del fago portador del gen de la

toxina del cólera como de la adhesión a la mucosa que tapiza el

aparato digestivo.

Las cepas no adherentes son incapaces de establecer una

infección.

En ausencia de la toxina del cólera, V. cholerae 01 aún

provoca una diarrea significativa por medio de la

acción de la toxina de la zónula occludens y la

enterotoxina accesoria del cólera.

Toxina de la zónula occludens relaja las uniones

estrechas (zónula occludens) de la mucosa del

intestino delgado, lo que incrementa la permeabilidad

intestinal.

Enterotoxina produce aumento de la secreción de

líquido.

• Las cepas de V. cholerae O139 se asemejan fenotípicamente al Biotipo El Tor de V. cholerae O1 y produce la toxina colérica, siendo la principal diferencia el antígeno de superficie.

• El antígeno dominante de superficie de O139 es un polisacárido capsular, mas que un antígeno O típico, los genes que codifican para la síntesis de la cápsula han reemplazado los genes que codifican las enzimas que sintetizan el antígeno O.

• Este mecanismo de delección/reemplazo no ha sido bien definido, sin embargo se piensa que la modificación por fagos es una posibilidad.

“Vibrios no aglutinantes”, “vibrios nag”, “vibrios no cólera”,

“V. cholerae no O1, no O139”, “V. cholerae no O1, O139”

• No aglutinan con los antisueros O1 y O139.

• No producen la toxina del cólera.

• Pueden causar una enfermedad parecida al cólera, pero son mas frecuentes en pacientes con diarrea moderada, infecciones extraintestinales, alimentos marinos y el medio ambiente. Han sido descritos en cuadros de septicemia en pacientes con cirrosis u otra enfermedad de base. También han sido aisladas de oídos, heridas, tracto respiratorio y orina.

• Los antígenos somáticos O1 y O139 asociados con la pared celular son marcadores positivos de las cepas capaces de producir epidemias y diseminación pandémica.

• V. cholerae O1 es responsable de las 7 pandemias de cólera. Las primeras 6 se produjeron entre 1817 y 1923, causadas por V. cholerae O1 biotipo clásico y originadas principalmente en Asia (India) con extensión a Europa y las Américas.

• La 7ª pandemia causada por V. cholerae O1 biotipo El Tor se originó en Indonesia en 1961, ha sido la mas larga y ha afectado varios países y continentes. La última extensión fue en América Latina en 1991 (Perú), causando tasas mayores de ataque que las que se habían visto anteriormente, pero menor número de casos fatales

ASPECTOS

EPIDEMIOLÓGICOS

• La 7ª pandemia todavía continúa en muchos países. Para 1997 la OMS recibió reportes de brotes de cólera en 8 países , el 89% de ellos se informaron en África.

• En octubre de 1992 se reportó una epidemia de una enfermedad similar al cólera en Madrás, India, con casos subsiguientes en la bahía de Bengal, ocasionada por V. cholerae serogrupo O139. La epidemia se diseminó por el continente asiático y se reportaron algunos casos importados en países desarrollados.

• A finales de 1992 ocurre una epidemia de V. cholerae O1 en las mismas regiones donde se produjo la epidemia por V. cholerae O139.

ASPECTOS

EPIDEMIOLÓGICOS

• Las personas infectadas pueden eliminar la bacteria por meses o años, pero su importancia como reservorio es mínima al lado del medio acuático.

• V. cholerae se introduce en el humano a través de la contaminación de las fuentes de agua y de los alimentos. Una vez infectados, en los humanos pueden producirse tasas de ataque elevadas, en especial en las zonas no expuestas con anterioridad, como lo ocurrido en la epidemia en América Latina.

• Durante varias epidemias se ha documentado muy bien que la enfermedad se presenta al beber agua contaminada de ríos, lagunas, lagos e inclusive fuentes de agua entubadas.

• La contaminación del agua municipal sin hervir fue la vía principal de transmisión del cólera en Perú en 1991.

ASPECTOS

EPIDEMIOLÓGICOS

Situación de Epidemia de Cólera en Haití

Información hasta el 11/01/2011 (MINSAL Haiti)

V. cholerae O1 serotipo Ogawa.

Total casos notificados:

188.967

Total fallecidos:

3.838

Letalidad Global:

2.0%

Letalidad Hospitalaria:

2.4%

Resistencia a SXT, F/N, NA y

streptomicina. Sensibles a: Te,

Doxiciclina y Ciprofloxacina.

PAÍSES AFECTADOS: República

Dominicana, México, Bolivia,

Brasil.

• Las epidemias de cólera tienden a presentarse durante las estaciones calurosas.

• Algunos factores del huésped son importantes en la transmisión del cólera: la infección por H. pylori y el efecto del grupo sanguíneo O.

• H pylori provoca una gastritis crónica que induce hipocloridia, lo que a su vez reduce la capacidad del estómago para contener la invasión del Vibrio. El riesgo es más elevado tanto para adquirir cólera como para presentarse la forma severa.

ASPECTOS

EPIDEMIOLÓGICOS

• Una predisposición no explicada hacia una forma severa de enfermedad en las personas con el grupo sanguíneo O ha sido observada tanto en Asia como en América Latina

• El cólera se presenta principalmente en regiones con condiciones escasas de sanidad y sobretodo en países con poco desarrollo.

• En países desarrollados como Estados Unidos, Canadá y Australia también se han descrito casos nativos, esporádicos que difieren de las cepas encontradas en las pandemias anteriores.

ASPECTOS

EPIDEMIOLÓGICOS

• V. cholerae es la especie más importante del género y causante de muchas epidemias de cólera y millones de muertes.

• El aspecto sobresaliente del cólera es la producción de una diarrea acuosa (agua de arroz) con grados variables de deshidratación, oscilando desde su ausencia hasta una diarrea severa que amenaza la vida.

• Diarrea leve a moderada es difícil de diferenciar a la ocasionada por otros microorganismos entéricos como ECE ó rotavirus.

• Cuadros con deshidratación severa por cólera son fáciles de identificar, ningún otro microorganismo lo ocasiona. La cantidad de líquido que se pierde es más de 1 litro por hora.

ASPECTOS CLÍNICOS

• La enfermedad comienza abruptamente y se caracteriza por la producción de una diarrea acuosa sin esfuerzo, tenesmo o dolor abdominal prominente, seguida con rapidez, o en ocasiones precedidas por vómitos.

• Se produce una deshidratación severa, con calambres generalizados y anuria.

• El examen físico muestra un paciente en alerta, pese a que el pulso no es palpable y no se logra registrar la tensión arterial.

• Los pacientes se muestran ansiosos y con desasosiego ó en ocasiones obnubilados, los ojos muy hundidos, las membranas mucosas secas, la piel sin elasticidad y retraída en forma lenta al pellizco, la voz inaudible y ruidos intestinales prominentes.

ASPECTOS CLÍNICOS

Eurosurveillance, Volume 16, Issue 20, 19 May 2011

Rapid communications

Toxin producing Vibrio cholerae O75 outbreak, United States, March to

April 2011 TJ M Onifade1,2, R Hutchinson1,2, K Van Zile1,2, D Bodager1,2, R Baker3, C Blackmore

Toxin producing Vibrio cholerae O75 outbreak,

United States, March to April 2011

• Es un vibrio halofílico que representa una causa importante de enfermedad diarreica aguda en el Japón (50 a 70% de los casos).

• Causa gastroenteritis con nausea, vómitos, dolores abdominales, fiebre moderada y escalofríos leves.

• La diarrea es por lo general acuosa aunque algunas veces presenta sangre.

• La enfermedad por lo general es autolimitada, sin embargo en ocasiones es fatal.

• Las epidemias por lo general están asociadas con la ingestión de alimentos de mar crudos o contaminados.

• La mayoría de las cepas productoras de gastroenteritis producen una toxina conocida como hemolisina directa termoestable (TDH), también conocida como toxina Kanagawa

• Es codificada por los genes tdh1 y tdh2x, que también se ha detectado en otras especies de vibrios.

• Se demuestra por la hemólisis de las células rojas en el medio de Wagatsuma agar ó por kit comerciales de técnicas de aglutinación pasiva de latex

• Una segunda toxina relacionada al TDH conocida como TRH también ha sido detectada en las cepas aisladas de pacientes con gastroenteritis y está codificada por los genes tdh y trh.

V. mimicus Diarrea similar en la mayoría de los aspectos clínicos,

epidemiológicos y ecológicos a V. cholerae no O1

V. vulnificus Septicemia primaria e infecciones de herida

V. fluvialis Casos esporádicos de diarrea

V. furnissii Infrecuente en el humano. ¿Casos de diarrea?

V. hollisae Casos esporádicos de diarrea

V. damsela Infecciones de heridas en manipuladores de frutos del mar

V. alginolyticus Infecciones de tejidos blandos, heridas, oídos y ojos

V. metschnikovii Casos de bacteriemia, peritonitis, orina, úlceras y diarrea

V. cincinnatiensis Bacteriemia y meningitis

V. harvei (V. carchariae) Infecciones de heridas de manipuladores de frutos de mar

RECOLECCIÓN, TRANSPORTE Y ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS:

• Muestras extraintestinales: ningún procedimiento especial

Muestras intestinales:

* Muestras de heces frescas preferiblemente durante las

primeras 24 h. y antes de recibir terapia antimicrobiana.

* Hisopados rectales pueden ser utilizados

• Transporte: lo más pronto posible, heces líquidas deben colocarse en pH alcalino para mantener viabilidad. Heces formadas o hisopados rectales deben colocarse en medios de transporte como Cary & Blair. Los vibrios son muy susceptibles a la desecación.


Aislamiento:

Muestras extraintestinales MC AS GC

Muestras intestinales TCBS, Agua peptonada alcalina

Incubación:

35ºC durante 24 horas

Identificación: Pruebas fenotípicas que incluyen los requerimientos de Na+

Pruebas serológicas: O1, O139 y otros antisueros

Detección de CT Y TDH. Métodos comerciales


Susceptibilidad a los agentes antimicrobianos

(CLSI 2012) • Crecen bien en MHA y MHB, para los vibrios halofílicos hay que

tomar en consideración los requerimientos de Na+

• En la mayoría de los casos no existen patrones estándar

• Patrones de resistencia pueden ser utilizados para diferenciar

especies fenotípicamente similares

V. hollisae desarrolla grandes halos de inhibición

V. cholerae biotipo El Tor y V. vulnificus son por lo general

resistente al grupo de las PB


VIBRIO CHOLERAE O1 Y O139

TRATAMIENTO

• REHIDRATACIÓN

Fase de rehidratación.- 2 a 4 horas

Fase de mantenimiento.- hasta que cese la diarrea (SRO)

• TRATAMIENTO ANTIMICROBIANO

Disminuyen la enfermedad y acortan la excreción del microorganismo

Tetraciclinas o doxiciclina, cloranfenicol, eritromicina, trimethoprim sulfametoxazole, quinolonas

VIBRIO

INTERPRETACIÓN Y REPORTE

• Todo aislamiento de V. cholerae O1 y O139 debe ser reportado a las autoridades competentes.

• A todos los aislamientos se les debe determinar la producción de toxina colérica.

• Muchos de los aislamientos obtenidos de material de mar pueden no poseer los genes que determinan la patogenicidad de los microorganismos .

• Arcobacter

• Campylobacter

• Dehalospirillum

• Sulfurospirillum

Familia Campylobacteraceae

• 32 Especies

• 13 subespecies

Género

Campylobacter

C. jejuni

C. coli

Campylobacter. Bacilos curvos, coma, o forma de S, de 0.2

a 0.9 µm de diametro y 0.5 a 5 µm de largo. Gram -, no

esporulados, que pueden dar formas cocoides ó

esféricas en cultivos viejos. Mótiles por la presencia de

un flagelo en uno o dos extremos. Son microaerofílicas.

• C. jejuni y C. coli producen cuadros de gastroenteritis, siendo en algunos países la principal causa de este tipo de infección

• Ocurren principalmente en meses calurosos y se presentan principalmente en infantes y niños jóvenes

• Los síntomas y signos incluyen fiebre, dolor abdominal, calambres y diarrea, con o sin sangre o polimorfonucleares. La infección se asemeja a un cuadro de apendicitis aguda.

• Infecciones extraintestinales incluyen bacteriemia, hepatitis, colicistitis, pancreatitis, aborto y sepsis neonatal, síndrome urémico hemolítico, nefritis, prostatitis, infección del tracto urinario, peritonitis, miocarditis y abscesos

• C. jejuni se multiplica en bilis humana, característica que ayuda a la colonización del intestino delgado superior rico en bilis. Los sitios de daño tisular son yeyuno, íleo y colón.

• Poco es conocido sobre la patogénesis de la infección entérica por Campylobacter. Los signos y síntomas sugieren un mecanismo de invasividad.

• C. jejuni se adhiere (EPB1) y expresa una proteína citoletal que distiende las células epiteliales.

• Síndrome de Guillain Barré (Polineuropatía inflamatoria desmielinizante; polineuritis aguda postinfecciosa; Parálisis ascendente de Landry). Enfermedad paralítica aguda del sistema nervioso periférico. Un clon particular de C. jejuni, presente en LPS de ciertos serotipos (19 y 41), expresa unas estructuras similares a los gangliosidos mediando en el huésped susceptible daño en el nervio periférico

• Artritis reactiva. Dolor e inflamación de las articulaciones que pueden permanecer por varios meses. La patogénesis es desconocida, sin embargo se presenta en personas con antígenos de histocompatibilidad HLA-B27

• Recolección y transporte de las muestras

Heces: Stuart, Cary & Blair, agua peptonada alcalina con

tioglicolato y cistina

Sangre: Sistema BACTEC, Septi-Check ó caldo anaeróbico

• Aislamiento

Medios de cultivo: CCDA, CSM, Camp-BAP, Campy-CVA, Skirow

Incubación: 42°C 5-10% CO2

• Morfología colonial

• Morfología celular y prueba de la oxidasa

• Características fenotípicas

Hidrólisis del hipurato

Susceptibilidad al ac. nalidíxico ( 30 ug) y cefalotina (30 ug)

Hidrólisis del indocil acetato

Crecimiento a diferentes temperaturas

Crecimiento en ClNa (3.5%), Glicina (1%), MacConkey

Producción de H2S

Reducción de nitratos

• C. jejuni y C. coli son susceptibles a macrólidos, quinolonas, aminoglicósidos, cloranfenicol, nitrofurantoína, y tetraciclinas.

• Azitromicina y eritromicina continúan siendo las drogas de elección para C. jejuni. C. coli ha alcanzado porcentajes de resistencia importantes (hasta del 80%)

• Pueden también producir ß-lactamasas activas contra amoxacilina, ampicilina y ticarcilina, las cuales pueden ser inhibidas por ácido calvulanico pero no por sulbactam ó taxobactam.

• Las pruebas de susceptibilidad no están estandarizadas por el CLSI, por lo tanto existen variabilidad en los datos reportados. Se recomienda usar MH suplementado con sangre de carnero al 5%.

• Helicobacter

• Sulfuricurvum

• Sulfurimonas

• Sulfurovum

• Thiovulum

• Wolinella

Familia Helicobacteraceae

• 32 especies

• H. pylori

Género Helicobacter

CARACTERÍSTICAS GENERALES • Son Bacilos Gram negativo, curvos o espirales, de 0,3 a 1,0

µm de ancho y 1,5 a 10,0 µm de largo.

• No formadores de esporas.

• Pueden formar cuerpos cocoides o esféricos si se cultivan en

períodos de tiempo prolongados o si las condiciones de

crecimiento son óptimas.

• Son mótiles. Usualmente poseen ocho flagelos únicos o

múltiples flagelos bipolares. H. pylori múltiples flagelos

monopolares.

CARACTERÍSTICAS

GENERALES

• Son microaerofílicos. Requieren atmósfera húmeda mantenida a 37°C.

• Son oxidasa positiva.

• Son relativamente inertes con respecto a los CHO.

• Tracto gastrointestinal y hepatobiliar de

mamíferos y aves.

• NICHOS Gástrico (estómago) y Enterohepático

(intestino, hígado o bilis).

HÁBITAT

NATURAL

HÁBITAT NATURAL

Habitan el estómago, bien sea dentro o debajo de la

capa de moco adyacente al epitelio.

Raramente invaden la circulación sanguínea, a

diferencia de los helicobacter enterohepáticos.

H. pylori puede en ocasiones estar intracelularmente.

H. pylori coloniza el cardias, cuerpo y antro (porción

distal) del estómago humano.

Los helicobacter gástricos pueden encontrarse

transitoriamente en áreas de metaplasia gástrica del

duodeno, jugo gástrico (vómito), saliva y heces.

HÁBITAT NATURAL

Intestino y tracto hepatobiliar

de mamíferos y aves.

Han sido aislados de: hisopados rectales, heces,

sangre y otros sitios extraintestinales.

PATOGENICIDAD

El estómago es intrínsecamente resistente a la colonización

bacteriana, debido a la acidez gástrica, lactoferrina y péptidos

antibacterianos (LL-37, ß-defensin 1, and ß-defensin 2). La capa

epitelial gástrica constituye un barrera física que previene la

entrada de las bacterias a la mucosa gástrica.

PATOGENICIDAD

Ureasa contribuye a la resistencia al ácido.

Flagelo movilidad que permite la penetración de la capa

de moco.

Proteínas de la membrana externa BabA, SabA, AlpA,

AlpB, y HopZ median la adherencia a las CE gástricas (CEG)

La actividad de la ureasa bacteriana se incrementa por una proteína de

shock térmico (HspB) que se coexpresa con la ureasa en la superficie de la

bacteria.

Las células de Helicobacter dotadas de gran movilidad pueden atravesar la

mucosidad gástrica y adherirse a las células epiteliales.

El daño tisular localizado está mediado por los residuos de ureasa,

mucinasa, fosfolipasas y la actividad de citotoxina formadora de vacuolas, la

cual lesiona a las células epiteliales y, junto con la ureasa y el lipopolisacárido

bacteriano, estimula la respuesta inflamatoria.

H. pylori se protege de la fagocitosis y de la muerte intracelular a través de la

producción de superóxido dismutasa y de catalasa.

H. pylori produce también factores que estimulan: 1) la secreción de

interleucina 8 (IL-8); 2) la síntesis del factor activador de plaquetas que

conduce a hipersecreción de ácido gástrico, y 3) la muerte programada de las

células epiteliales gástricas.

El reconocimiento inmunitario

innato de H. pylori dirige la

producción de citokinas

proinflamatorias por los

macrófagos, mastocitos y células

epiteliales gástricas (CEG). El

peptidoglucano de H. pylori puede

ser reconocido por receptores

intracelulares y la interacción entre

H. pylori y las CEG dirige la

activación del FNT y alteración de la

transcripción genética en las CEG.

La producción de IL-8 por CE dirige

el reclutamiento de neutrófilos los

cuales fagocitan la bacteria y

producen moléculas tóxicas de

oxígeno y nitrógeno. La activación

de mastocitos resulta en

degranulación y producción de

citokinas proinflamatorias y

quimiocinas.

ENFERMEDAD ULCEROSA PÉPTICA

FACTOR DE RIESGO PRINCIPAL DE CÁNCER

GÁSTRICO

1994 US National Institutes of Health Consensus Development

Conference:

Infección por H. pylori es la principal causa de enf. ulcerosa

peptica.

Todos los pacientes con enf. ulcerosa péptica asociada con

inf. por H. pylori deben recibir tto antimicrobiano.

1994 International Agency for Research on

cancer working group of the WHO:

H. pylori GRUPO I CARCINÓGENO HUMANO

50% de la población mundial está infectada con H. pylori.

La mayoría de las personas adquieren la infección en la niñez

y la infección persiste durante toda la vida.

•Mayoría de niños ≈10 años.

•80-90% de adultos

Países en vías de desarrollo

•↓ prevalencia en niños

•40-50 % adultos

Países desarrollados


GASTRITIS AGUDA: dolor abdominal,

naúseas y vómitos 2 semanas

siguientes a la infección.

GASTRITIS CRÓNICA

Prominente inflamación de la mucosa

en gastritis crónica activa (antro) +

hiperacidez y enf. ulcerativa duodenal.

Síndromes abdominales recurrentes

(dispepsia no ulcerativa).

Duodenitis úlceras duodenales 16%.

Pangastritis atrófica multifocal.

Gastritis atrófica

Enfermedad ulcerativa gástrica

Adenocarcinoma gástrico

Linfomas de tejido linfoide asociado a mucosa gástrica

(MALT) único cáncer que puede ser curado por

antibióticos.

GASTROENTERITIS HUMANA

BACTERIEMIA

Muestras

SANGRE

HECES

BIOPSIAS GÁSTRICAS

JUGOS GÁSTRICOS

H. pylori raramente

aislado en sangre.

H. pylori raramente aislado

de heces humanas a ≠ de

Campylobacter.

“MUESTRA IDEAL”

Ensayo rápido de ureasa

Coloraciones

Histopatología

PCR

N° de muestras: dos por cada sitio (antro + cuerpo), 1 ó 2 de

cada sitio para cultivo y 1 del antro para prueba de la

ureasa.

H. pylori sensible a desecación, temperatura y atmósfera

ambiental.

MEDIOS DE TRANSPORTE SSF (hasta 4 h), Stuart medium,

Brucella broth + 20% glicerol, Portagerm pylori 4°C o <

10°C 16h.

> 24h almacenar la muestra de biopsia a -70°C hasta su

procesamiento.

BIOPSIAS GÁSTRICAS

EXAMEN DIRECTO Y DETECCIÓN DE ANTÍGENOS:

Detección de antígenos de H. pylori en heces

(ELISA).

BIOPSIAS GÁSTRICAS coloración, prueba de

la ureasa, histología y amplificación de ADN.

CULTIVO HELICOBACTER

GÁSTRICO

SEROLOGÍA

PRUEBA DE LA UREASA

HISTOLOGÍA

↑ resistencia antimicrobiana.

BHIA, Brucella Agar, Collumbia

Agar, Wilkins Chalgren agar y

TSA +10% sangre o suero.

37°C, 5-10% CO2 y 85% N2).

tema 7 aeromonas vibrio campylobacter y helicobacter

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