8/16/2019 Tecnica Inmunohistoquímica

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Inmunohistoquímica

Día 1

1. Desparafinar (60-70°C)/ 2 horas

2. i!o! (2 cam"ios)/20 min c/u

#. $!coho! $%& ('os cam"ios)/ min c/u. *%& 1/2- min

. +ecuperaci,n 'e antíeno en "uffer 'e citratos/12 min para tei'o cerica! (pue'e

ariar 'epen'ien'o 'e! tei'o)6. *%& 1/2- min

7. *%& 1-trit,n 100 (0.01)/10 min

. *%& 1/2- min. %!oqueo 'e pero3i'asas en',enas (quenchin)/ # min

10. *%& 1/2- min

11. %!oqueo con 10 'e suero 'e ca"ra con 1 'e %&$ por una hora

12. *%& 1/2 min1#. Incu"aci,n 'e $" primario/to'a !a noche a °C o 1 a 2 hrs a #7°C

Día 2

+ee!ar con e! sistema 'e ree!a'o que !o prefiera

&istema %io&%4

 

1. *%& 1/2- min2. $nticuerpo secun'ario /1hr 

#. *%& 1/2- min

. *reparar e! crom,eno( 5! 'e 'iamino"eni'ina en 00 5! 'e D$% %uffer)

. $'icionar e! crom,eno (Diamino"eni'ina)/ iempo 'e ree!a'o8 hasta #0 min.6. *%& 1

7. 9emato3i!ina (:it 'e ;ime')/ 1 se

. $ua 'e !a !!ae hasta irar e! co!or . *%& 1/#0 se

10. $ua 'esti!a'a/ 'os cam"ios

11. $'icionar me'io 'e montae permanente12.