tec
DESCRIPTION
TecTRANSCRIPT
-
1PREPARACIN DE LOS TEJIDOS PARA EXAMEN MICROSCPICO.
El examen de la estructura de la clula, tejidos y rganos puede hacerse de 2 formas:
EXAMEN AL ESTADO FRESCO, INMEDIATO O IN VIVO: Se realiza sobre el organismo vivo o sobre partes aisladas que sobreviven cierto tiempo.sobreviven cierto tiempo. Pueden ser teidas con un colorante vital o no.
EXAMEN MEDIATO O POST-MORTEM: Se realiza sobre elementos que han sido muertos por la fijacin y luego teidos.
MICROSCOPA OPTICA
FIJACIONParaformaldehdos/Alcohol
LAVADO
CORTEMicrtomo
5-10 um
MONTAJEBao termorregulado/Adhesivo/Portaobjetos
COLORACION
DESPARAFINAJEXilol/OH descentes/Agua destilada
TAMAO1 a 3 cm3
Agua corriente
DESHIDRATACIONOH ascendentes/Xilol
INCLUSIONParaplast (60)
COLORACIONHematoxilina-Eosina
(H-E)
DESHIDRATACIONOH ascendentes/Xilol
PROTECCION (montaje final)/ cubreobjetos/pegamento
COLORANTES M.O.
HEMATOXILINA EOSINA
Esta tcnica utiliza dos colorantes: en primer lugar los cortes se someten ala accin de la hematoxilina, colorante bsico, que se une a cualquiersustancia que tenga grupos cidos, tales como los grupos fosfato del ADN y alas protenas nucleares que poseen carga negativa. A continuacin, los cortesse someten a la accin de la eosina, colorante dbilmente cido, que coloreaa las estructuras bsicas.
AZUL DE TOLUIDINA
Colorante que tie estructura basfilas, tales como la cromatina. Se puedecomportar como colorante ortocromtico (tie de color azul) ometacromtico (tie de color violeta-rojo), dependiendo del pH y de lanaturaleza qumica de la sustancia teida.
-
2MICROSCOPA ELECTRONICA
FIJACIONGlutaraldehdo/OsO4
LAVADO
CORTEUltramicrotomo
50-60 nm
MONTAJERejilla de cobre
( ll )
TAMAO1 a 5 mm3
LAVADOSolucin Lavadora
DESHIDRATACIONAlcoholes
ascendentes/Acetona
INCLUSIONEPON (T Amb.)
(grilla)
CONTRASTEMetales pesados
Acetato de uranilo/citrato de plomo
EL MICROSCOPIO ELECTRNICO DE BARRIDO (MEB)
-
3