Gen Gen RHDRHD

Proteina RhDProteina RhD

Gen Gen RHCERHCE

Proteina RhCcEeProteina RhCcEe

RHCEDRHCED (RH30) y (RH30) y RHAGRHAG (RH50)(RH50)

•• RH30RH30 y y RH50RH50 son proteínas integrales de son proteínas integrales de

membrana que muestran una topología similar membrana que muestran una topología similar

al atravesar 12 veces la membrana.al atravesar 12 veces la membrana.

•• RH30RH30 contiene ácidos grasos acetilados contiene ácidos grasos acetilados •• RH30RH30 contiene ácidos grasos acetilados contiene ácidos grasos acetilados

(palmitatos) y es una proteína no glicosilada (palmitatos) y es una proteína no glicosilada

(sin carbohidratos), en tanto que (sin carbohidratos), en tanto que RH50RH50 resulta resulta

glicosilada.glicosilada.

•• La interacción entre ambas proteínas resulta La interacción entre ambas proteínas resulta

esencialesencial para la expresión de los antígenos Rh.para la expresión de los antígenos Rh.

complejo polisacárido

membrana plasmática

palmitato

Varias proteínas adicionales, tales como CD47CD47 y LWLW, están asociadas con el complejo de Rh. No son necesarias para la expresión Rh.

Rol BiológicoRol BiológicoLos hematíes de los rarosLos hematíes de los raros

sujetos que carecen de sujetos que carecen de polipéptidospolipéptidos RH (RH (Rh Rh NullNull) ) tienen varios defectos tienen varios defectos morfológicos morfológicos ((EstomatocitosisEstomatocitosis) y ) y morfológicos morfológicos ((EstomatocitosisEstomatocitosis) y ) y funcionales que sugieren funcionales que sugieren que las proteínas Rh son que las proteínas Rh son esenciales para la esenciales para la EstructuraEstructura (Integridad) y (Integridad) y FFunciónunción del glóbulo rojo. del glóbulo rojo.

Rol BiológicoRol Biológico

Recientes estudios le otorgan a Recientes estudios le otorgan a RHAGRHAGfunciones como funciones como canal de Amoniocanal de Amonio, , responsable de la captación de iones responsable de la captación de iones amonio desde el espacio amonio desde el espacio periplásmicoperiplásmico al al citoplasma citoplasma intraeritrocitariointraeritrocitario..

Las funciones de las proteínas Las funciones de las proteínas RHCERHCE y y

RHDRHD aparentemente aparentemente serían diferentes serían diferentes

pero relacionadas, dado que pero relacionadas, dado que

intervendrían como intervendrían como canal canal para el gas COpara el gas CO22..

Alelos Alelos RHDRHD

Los alelos RHD han sido clasificados Los alelos RHD han sido clasificados

sobre la base de su relación sobre la base de su relación

fenotípica con la variación molecular fenotípica con la variación molecular

como: como: como: como:

•• Tipos de Tipos de D DébilD Débil (107 fenotipos)(107 fenotipos)

•• D ParcialD Parcial (150 fenotipos)(150 fenotipos)

•• DELDEL (32 fenotipos)(32 fenotipos)

•• Alelos no funcionales.Alelos no funcionales.

D DébilD Débil

�Es una variante de la proteína RhD que comprende una sustitución de aminoácido situado en los segmentos transmembrana o intracelular y expresa una cantidad reducida de antígeno D (generalmente menos de 5.000 antígenos (generalmente menos de 5.000 antígenos D por glóbulo rojo).

�Las sustituciones se cree que causan problemas de plegado durante la integración de la proteína en la membranade los glóbulos rojos, afectando la palmitilación o el anclaje del polipéptido al citoesqueleto de los glóbulos rojos.

D DébilD Débil

�Por lo tanto, la cantidad de antígeno D expresado en la superficie de los hematíes resulta cuantitativamente reducida, pero el propio antígeno D, al no modificar sus segmentos exofaciales, modificar sus segmentos exofaciales, sigue cualitativamente sin cambios.

�Por consiguiente, el antígeno D normal no resulta ser, para estos individuos, inmunogénico.

Próxima a 149

2 a 13

179 a 225 267 a 397

D DébilD Débil

•• Los cambios en los segmentos de la Los cambios en los segmentos de la proteína No exofacial puede conducir, proteína No exofacial puede conducir, aunque aunque raramenteraramente, a una inmunización , a una inmunización con alo Anticon alo Anti--D.D.

Los ejemplos incluyen:Los ejemplos incluyen:

��D débil tipo D débil tipo 1515,,

��D débil tipo D débil tipo 4.24.2 (también conocido como (también conocido como DARDAR))

��D débil tipo D débil tipo 77. .

D DébilD Débil

• Las tipos de D Débil 1, 2, 3, y 4.0 / 4.1, que son los más frecuentes en cualquier población europea y de raza caucásica, representan más del 95% de todos los tipos D débiles.D débiles.

• Hasta la fecha, más de 15 años después de su descripción molecular, en la literatura no se ha documentado ningún portador de D Débil de los tipos 1 al 4.1 que hubiera sido alo-inmunizado produciendo alo-anti-D. Los anticuerpos que han sido observados fueron de naturaleza Auto-inmune y de bajo títulos.

D DébilD DébilAlgunos Fenotipos Moleculares y su relación con Algunos Fenotipos Moleculares y su relación con

AloAlo--antianti--D D

AntiAnti--D Nunca observadoD Nunca observado AntiAnti--D DocumentadoD DocumentadoAntiAnti--D potencialmente D potencialmente

No excluidoNo excluido

TipoDensidad

Ag D/GRTipo

Densidad

Ag D/GRTipo

Densidad

Ag D/GR

D débil tipo 1D débil tipo 1 908 D débil tipo 4.2D débil tipo 4.2 1037 D débil tipo 5D débil tipo 5 302

D débil tipo 1.1D débil tipo 1.1 598 D débil tipo 11D débil tipo 11 102 D débil tipo 9D débil tipo 9 248D débil tipo 1.1D débil tipo 1.1 598 D débil tipo 11D débil tipo 11 102 D débil tipo 9D débil tipo 9 248

D débil tipo 2D débil tipo 2 632 D débil tipo 15D débil tipo 15 215 D débil tipo 12D débil tipo 12 96

D débil tipo 2.1D débil tipo 2.1 163 D débil tipo 16D débil tipo 16 235

D débil tipo 3D débil tipo 3 1991 D débil tipo 17D débil tipo 17 66

D débil tipo 4.1D débil tipo 4.1 1037 D débil tipo 26D débil tipo 26 49

D débil tipo 31D débil tipo 31 134

D débil tipo 32D débil tipo 32 49

DELDEL

•• Es un antígeno D expresado muy Es un antígeno D expresado muy débilmente.débilmente.

•• Se lo detecta sólo si un antiSe lo detecta sólo si un anti--D es D es adsorbido y posteriormente eluido de los adsorbido y posteriormente eluido de los adsorbido y posteriormente eluido de los adsorbido y posteriormente eluido de los glóbulos rojos.glóbulos rojos.

•• Normalmente, los glóbulos rojos DEL Normalmente, los glóbulos rojos DEL expresan 200 copias o menos de antígeno expresan 200 copias o menos de antígeno D por glóbulo rojo.D por glóbulo rojo.

DELDEL

•• Los fenotipos Los fenotipos DELDEL también poseen también poseen problemas característicos con su problemas característicos con su integración en la membrana del glóbulo del glóbulo rojo. En todos los casos, esto puede ser rojo. En todos los casos, esto puede ser rojo. En todos los casos, esto puede ser rojo. En todos los casos, esto puede ser responsabilidad de los cambios plegables responsabilidad de los cambios plegables o conformacionales que deriva en el o conformacionales que deriva en el patrón de expresión de estas formas patrón de expresión de estas formas variantes.variantes.

D ParcialD Parcial

La clasificación de las variantes La clasificación de las variantes D ParcialD Parcial se se basa en la premisa de que basa en la premisa de que

ciertas sustituciones de aminoácidos ciertas sustituciones de aminoácidos ciertas sustituciones de aminoácidos ciertas sustituciones de aminoácidos en un bucle extracelularen un bucle extracelular

afectan a epítopes lineales afectan a epítopes lineales DD o, o, más a menudo, más a menudo,

la conformación tridimensional de ese bucle.la conformación tridimensional de ese bucle.

D ParcialD Parcial

•• Sin embargo, para muchos D Parcial, los Sin embargo, para muchos D Parcial, los eventos de inmunización antieventos de inmunización anti--D D

aparentemente son raros, y para varios D aparentemente son raros, y para varios D Parcial no ha habido hasta ahora ninguna Parcial no ha habido hasta ahora ninguna

observación de pacientes con antiobservación de pacientes con anti--D. D. observación de pacientes con antiobservación de pacientes con anti--D. D. Estos datos son compatibles con la Estos datos son compatibles con la conclusión de que los portadores de conclusión de que los portadores de

varios D Parcial distintos pueden ser de varios D Parcial distintos pueden ser de muy bajo o ningún riesgo de inmunización muy bajo o ningún riesgo de inmunización

antianti--D.D.

D ParcialD Parcial•• Muchos D Parcial se identifican utilizando Muchos D Parcial se identifican utilizando

anticuerpos monoclonales dirigidos contra dominios anticuerpos monoclonales dirigidos contra dominios o bucles específicos en la superficie de los o bucles específicos en la superficie de los eritrocitos.eritrocitos.

•• Las Las Categorías DCategorías D (D(DIIII a Da DVIIVII) representan un ) representan un subconjunto de todos los subconjunto de todos los D ParcialesD Parciales. D. DIIII y Dy DVIIVII son son causadas por causadas por sustituciones de aminoácidossustituciones de aminoácidos

subconjunto de todos los subconjunto de todos los D ParcialesD Parciales. D. D y Dy D son son causadas por causadas por sustituciones de aminoácidossustituciones de aminoácidosextracelulares individuales, mientras que Dextracelulares individuales, mientras que DIIIIII, D, DIVIV, , DDVV, y D, y DVIVI son causados son causados por por alelos híbridos alelos híbridos RHDRHD--RHCERHCE--RHDRHD y comprenden varios subtipos de y comprenden varios subtipos de cada uno.cada uno.

•• Las calificación de D Parcial es de relevancia Las calificación de D Parcial es de relevancia clínica porque los portadores a menudo producen clínica porque los portadores a menudo producen antianti--D cuando se exponen al antígeno D normal.D cuando se exponen al antígeno D normal.

Reactivos AntiReactivos Anti--D MonoclonalD Monoclonal

La mayoría están dirigidos contra el La mayoría están dirigidos contra el epitopeepitopeepD6/7epD6/7, ausente en los G.R. , ausente en los G.R. DDVIVI, y en , y en consecuencia éstos consecuencia éstos no reaccionanno reaccionan con la con la mayoría de los antimayoría de los anti--D Monoclonales.D Monoclonales.

La categoría de hematíes La categoría de hematíes DDVIVI

es uno de los D Parcial es uno de los D Parcial más más comúnescomúnes(7% de todos los que inicialmente impresionan (7% de todos los que inicialmente impresionan como D Débiles)como D Débiles), , y los y los epitopesepitopes ausentes son considerados ausentes son considerados los los más más inmunogénicosinmunogénicos..

DDVIVI

tipo 1tipo 1

DDVIVI

tipo 2tipo 2

DDVIVI

tipo 3tipo 3

DDVIVI

tipo 4tipo 4

DDVIVI

tipo 1tipo 1

DDVIVI

tipo 2tipo 2

DDVIVI

tipo 3tipo 3

DDVIVI

tipo 4tipo 4

DDVIVI

tipo 1tipo 1

DDVIVI

tipo 2tipo 2

DVIcE ccDVI.Ee Raro

600 Ag/GR Caucásicos

DVICe BARC CcDVI.ee

Más frecuente 2.400 Ag/GR

Caucásicos y Japoneses

DVICe BARC CcDVI.ee DDVIVI

tipo 3tipo 3

DDVIVI

tipo 4tipo 4

DVICe BARC CcDVI.ee

Muy raro 12.000 Ag/GR

Caucásicos

DVICe CcDVI.ee

Alelo de DVI más prevalente

en España

Es importante tener en cuenta que los Es importante tener en cuenta que los reactivos monoclonales antireactivos monoclonales anti--D tienen una D tienen una reactividad variable tanto con los reactividad variable tanto con los D ParcialD Parcialcomo con los tipos de como con los tipos de D DébilD Débil, por lo que , por lo que no no

Reactivos AntiReactivos Anti--D MonoclonalD Monoclonal

pueden diferenciarse entre ellospueden diferenciarse entre ellos de de manera confiable.manera confiable.Generalmente, los reactivos detectan la Generalmente, los reactivos detectan la mayor parte de los hematíes de las mayor parte de los hematíes de las Categorías DCategorías D y y D Parcial D Parcial en una fase de en una fase de prueba de Aglutinación Directa. prueba de Aglutinación Directa.