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PROTOCOLO NACIONAL PARA TOMA DE MUESTRAS, LEVANTAMIENTO DE INDICIOS, EMBALAJE Y ENVIO AL LABORATORIO DE GENTICA FORENSE SUBDIRECCIN TCNICA CIENTFICA DE LA POLICA JUDICIAL

CRIMINALISTICA

SUBDIRECCION TCNICO CIENTFICA CODIGO: SDTC-04

PROTOCOLO NACIONAL

TOMA DE MUESTRAS, LEVANTAMIENTO DE INDICIOS, EMBALAJE Y ENVIO PARA LA BASE NACIONAL DE DATOS GENTICOS Pg. 2 de 55

Edicin No. 01

NDICE: 1. INTRODUCCIN 2. ANTECEDENTES 3. OBJETIVO 4. ALCANCE 5. MATERIAL Y REACTIVOS 6. INDICACIONES GENERALES 6.1 Recomendaciones importantes para el levantamiento de muestras e indicios biolgicos 6.2 Embalaje 6.2.1 Etiquetado 6.3 Envo de muestras e indicios al laboratorio 7. INDICIOS DE ORIGEN BIOLGICO 7.1 SANGRE: 7.1.1 Manchas de sangre 7.1.2 Lago hemtico 7.1.3 Manchas de sangre sobre objetos transportables 7.1.4 Cogulos de sangre 7.1.5 Sangre de cadver 7.2 TEJIDOS 7.2.1 Tejidos 7.2.2 Tejido en cadveres parcialmente quemados 7.2.3 Raspado de uas 7.3 SALIVA 7.3.1 Clulas epiteliales bucales 7.3.2 Manchas de saliva en soportes no transportables 7.3.3 Objetos transportables con saliva (colillas de Cigarro, Prendas, Vasos, Envases)


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7.3.4 Saliva sobre cadver 7.4 SEMEN 7.4.1 Semen lquido 7.4.2 Exudado anal 7.4.3 Exudado vaginal 7.4.4 Exudado de la regin del glande 7.4.5 Exudado oral 7.4.6 Lavado anal 7.4.7 Lavado vaginal 7.4.8 Lavado de la regin prepucial 7.4.9 Semen sobre piel 7.4.10 Manchas de semen 7.5 ELEMENTOS PILOSOS 7.5.1 Elementos pilosos en el lugar de los hechos 7.5.2 Elementos pilosos de cadveres 7.5.2.1 Cabello 7.5.2.2 Vello pbico 7.5.3 Peinado pbico 7.6 RESTOS OSEOS 8. MUESTRAS BIOLGICAS DE REFERENCIA 8.1 Autorizacin 8.2 Toma de muestra 8.3 Sangre 8.4 Saliva 8.4.1 Saliva recolectada con aplicador 8.5 Cabello (elementos pilosos) 8.6 Semen 8.7 Toma de muestra a menores de edad 9.- CADENA DE CUSTODIA


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1. INTRODUCCINLas pruebas para identificacin humana han evolucionado rpidamente, ajustndose cada vez a los requerimientos de las muestras biolgicas encontradas frecuentemente en los lugares de la investigacin. Es as que cantidades de muestra biolgica tan pequeas, como la contenida en un cabello en fase de crecimiento activo, puede ser suficiente para realizar la tipificacin gentica, describiendo a un individuo como nico, al caracterizar de manera simultnea varias regiones de su ADN. Actualmente se han desarrollado mtodos sensibles que utilizan secuencias de ADN altamente variables entre individuos marcadas con sustancias fluorescentes, y son genotipificados de manera automatizada en equipos altamente sofisticados y de tecnologa de vanguardia. As mismo se han implementado mtodos para la extraccin de ADN de alta pureza que hacen posible realizar el anlisis de una muestra con ADN degradado y conteniendo inhibidores potenciales para la reaccin de amplificacin. Lo anterior parece resultar intil de no existir un esfuerzo conjunto, es decir, un trabajo en equipo, que contribuya a preservar la integridad de la muestra biolgica que se encuentra en un lugar de investigacin y que posiblemente proporcione informacin que permita llegar a conocer la verdad histrica de los hechos. Es importante sealar que la muestra biolgica pudo haber estado expuesta a factores que degraden la integridad del ADN, por lo que evitar un deterioro adicional parece una tarea difcil y ardua, que requiere de la participacin de todo un equipo de trabajo. En caso de tener alguna duda sobre el tipo de muestra a elegir, se debe contactar al equipo tcnico de laboratorio de ADN para valorar, en funcin de las muestras disponibles y de su estado, cuales son las ms adecuadas para su anlisis.

2. ANTECEDENTESLa identificacin positiva de restos humanos ha sido siempre una de las mayores preocupaciones de las Ciencias Forenses. La huella dactilar, los registros dentales y los


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estudios antropolgicos han sido hasta hace poco buenas herramientas para este propsito. Sin embargo, la aplicacin de la Biologa Molecular en los laboratorios forenses abri nuevas perspectivas para la identificacin directa. Esta se ha convertido en un mtodo indispensable en los laboratorios forenses, ya que gracias al conjunto de tcnicas moleculares es posible el estudio de muestras que contienen mnimas cantidades de ADN o que lo presentan parcialmente degradado. De esta manera se pueden analizar muestras en las que antes era imposible pensar que se obtuviera un resultado positivo. El presente manual tiene como propsito servir y orientar al perito durante el levantamiento, embalaje y traslado de indicios; y muestras de referencia de origen biolgico. FLUJO DE PROCESOS DEL LEVANTAMIENTO DE MUESTRAS E INDICIOS BIOLGICOS

INICIO

OBSERVACION, anlisis y valoracin del lugar de los hechos

PROTECCION del Lugar de los hechos

FIJACION (fotografa o video, planimetra, narrativa escrita)

RECOLECCION (Levantamiento, Embalaje, Rotulacin)

ENVIO al Centro de Acopio, Bodega de Evidencias

ENVIO al Laboratorio de ADN

FIN


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3. OBJETIVOEstablecer un procedimiento nacional documentado normado y sistematizado para el levantamiento, embalaje y traslado de los indicios y muestras biolgicas, asegurando su naturaleza, conservacin, preservacin e integridad, que garantice la autenticidad y legalidad de las mismas mediante un manejo adecuado de la Cadena de Custodia; y que nos permita generar una base nacional de datos genticos e identificacin humana.

4. ALCANCEEl presente Manual aplica a todos los servidores pblicos y privados relacionados con la Administracin de Justicia y Organismos de salud (Casas de Salud, Hospitales, Cruz Roja, Defensa Civil, Secretara Nacional de Gestin de Riesgos, Bomberos, 911, Paramdicos), involucrados en el levantamiento, embalaje y traslado de indicios; y muestras de referencia de origen biolgico. La recogida de muestras, en casos de sucesos con vctimas, se realizar normalmente en tres escenarios distintos: En algunos casos, cuando hay indicios de que el suceso puede ser provocado, algunas muestras y vestigios biolgicos pueden ser recogidos directamente en el lugar de los hechos. En las salas de autopsia y morgues, donde se recogen las muestras procedentes de los cadveres y de los restos humanos, aparecidos en el escenario del suceso. En los laboratorios de Gentica Forense, donde se recogen las muestras de referencia (de familiares, sospechosos, y vctimas) necesarias para la identificacin de los restos humanos.

5. MATERIAL Y REACTIVOSA continuacin se menciona los materiales bsicos idneos para el levantamiento de los indicios y muestras biolgicas de referencia de origen biolgico, algunos son equivalentes y


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su utilizacin depender del tipo de muestra biolgica o de los suministros con que se cuente. 5.1 LISTA DE MATERIALES BSICOS PARA EL LEVANTAMIENTO DE LOS INDICIOS Y MUESTRAS DE REFERENCIA DE ORIGEN BIOLGICO. Material para levantamiento o colecta de muestras: Sierra manual o stryker (sierra elctrica con discos circulares) Aplicadores con punta de algodn, papel o esponja estriles, hisopos o citocepillos en su respectivo estuche Papel filtro para muestras biolgicas forenses: sangre, saliva y semen Hojas de bistur (22 o 23) Frceps para exodoncia peditrico (universal, superior, inferior y pico de loro) Estuche de diseccin (mangos de bistur n3 y n4, tijeras curva y recta, pinzas anatmica y quirrgica) Cpsula, tubos y agujas para toma de muestras de sangre Torniquete Lancetas Pipetas pasteur de plstico (goteros) de 1 a 3 ml Jeringas estriles de 5 a 10 ml Esptulas Torundas de algodn Curitas Materiales de embalaje: Pliegos de papel empaque o peridico no impreso Sobres de papel grueso de diferente tamao Bolsas de plstico de diferentes tamaos Bolsas con cierre hermtico de diferentes tamaos Cinta adhesiva Marcador de tinta indeleble Etiquetas adhesivas o con hilo para colgar Papel encerado adhesivo Frascos de plstico estriles recolectores de orina


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Tubos de plstico estriles cnicos , con tapa de rosca, de 15 ml de capacidad Tubos de plstico estriles cnicos, con tapa de rosca, de 50 ml de capacidad Tubos plstico de tapa lila con EDTA (5 ml) Tubos de vidrio de tapa roja sin ningn preservante (10 ml) Tubos para microcentrfuga, estriles, de 1.5 ml Gasa estril

Soluciones: Etanol al 70 % Solucin salina estril Agua desionizada estril Fenoftalena Blue star o luminol Material de proteccin: Guantes de vinilo (libres de talco) Gorra desechable Mascarillas Overoles desechables Gafas de proteccin Campos estriles Materiales varios: Recipientes de refrigeracin transportables Geles refrigerantes para conservar los indicios a temperatura de refrigeracin Lmpara de luz blanca Luces forenses Encendedor Formularios: Formulario de cadena de custodia Formulario de recopilacin de datos Consentimiento informado para toma de muestras de referencias


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6. INDICACIONES GENERALES6.1 RECOMENDACIONES IMPORTANTES PARA EL LEVANTAMIENTO DE LAS MUESTRAS E INDICIOS BIOLGICOS Con el fin de optimizar el tiempo y agilitar el trabajo es muy importante que al laboratorio slo se enven las muestras o indicios asociativos al delito. Algunos ejemplos nos pueden ilustrar: Cuando no ha existido lucha en un delito no es necesario enviar toda la ropa del cadver, basta con enviar una muestra indubitada del mismo para compararla con el resto de muestras aparecidas en el lugar de los hechos o intervenidas a un sospechoso. Si el hecho delictivo ocurre en un sitio pblico (bar, discoteca, etc.) no es necesario enviar todos los restos biolgicos presentes en el lugar (colillas, pelos) pues muy probablemente no tengan nada que ver con el delito en s. Para la realizacin del levantamiento de una muestra e indicio, el Perito deber evaluar las condiciones de las mismas para establecer el procedimiento adecuado y llevarlo a cabo tomando en cuenta las siguientes precauciones: Si es necesario utilizar pinzas para una segunda evidencia, estas debern esterilizarse a la flama impregnndolas con alcohol al 70 % y encendindolo hasta que se extinga, dejndolas enfriar antes de usarlas o en su caso limpiarlas cuidadosamente nicamente con alcohol al 70%. Realizar una limpieza adecuada de las superficies de trabajo (solucin de leja comercial al 10%). Usar ropa protectora (guantes, mascarilla, batas u overoles, etc.) durante todo el proceso de levantamiento de las muestras, debiendo cambiarse de guantes cada vez que se tome una evidencia para evitar o minimizar el riesgo de contaminacin, tanto exgena como cruzada.


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El uso de guantes es imprescindible por dos motivos: a) Para no contaminar la muestra biolgica con nuestro ADN. b) Para no contaminarnos nosotros con la muestra. Hay que tener en cuenta que una muestra biolgica puede ser peligrosa por contener bacterias y virus muy contagiosos (hepatitis B, VIH). El Perito debe usar recipientes diferentes para guardar cada muestra, a pesar de encontrase muy prximos o juntas. Puede ocurrir que desconozcamos cmo se desarrollaron los hechos en algunos delitos y por ello no sabremos si las muestras pueden pertenecer a una o ms personas. Se ha de tener especial cuidado cuando en un mismo envo se remiten muestras dubitadas e indubitadas. Ambos tipos de muestras se procesarn por separado en el laboratorio para evitar contaminaciones cruzadas y de nada servira este especial cuidado si las muestras se han empaquetado en un mismo sobre. No se deben exponer las muestras biolgicas a luz UV por tiempos prolongados, (ms de dos minutos), ya que la exposicin a este tipo de radiaciones puede provocar la degradacin del material gentico. No se debe comer o fumar mientras se realiza la recogida de muestras ni hablar o toser encima de una muestra o indicio biolgico. Se fotografiarn o documentarn grficamente las muestras, se detallar el tipo de muestra, su ubicacin en la escena, etc. Si fuese necesario recoger ms de una muestra, es conveniente sealarlas todas en el mismo formulario; complementado con la cadena de custodia; y mencionando el orden en el que fueron tomadas. La toma de muestra, en la morgue deber llevarse a cabo antes del lavado previo a la necropsia y/o cualquier tipo de intervencin criminalstica. Todos los recipientes utilizados para el envasado de muestras, deben estar correctamente etiquetados, precintados y con la cadena de custodia complementada.


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6.2 EMBALAJE DE MUESTRAS E INDICIOS BIOLGICOS La tcnica del embalaje esta sujeta a la naturaleza de la evidencia. Segn el material de la muestra o indicio, el embalaje se realiza de la siguiente manera: Embalajes interiores, formados por: a) embalaje primario (recipientes primarios). b) embalaje secundario (bolsa de plstico, bolsa de papel, cartn, etc.). Si se coloca varios recipientes primarios en un mismo embalaje secundario, los primeros debern envolverse individualmente para evitar que haya contacto entre ellos. Embalaje exterior, donde se debe incluir una relacin detallada de su contenido. El embalaje est constituido por el empaque, el sellado y el etiquetado, y por lo tanto estos tres elementos forman parte de un buen embalaje, y cualquiera de ellos que falle constituye alteracin del mismo. De acuerdo al tipo de muestra biolgica, ser requerido un embalaje adecuado como los siguientes: Las muestras deben ser embaladas en sobres de papel individualmente para ser transportadas al laboratorio cuando estas se encuentren secas. En caso de prendas hacer un doblez de la prenda de tal manera que la mancha queda protegida en su interior. Las muestras hmedas o mojadas podrn ser embaladas en bolsas de plstico, solamente si se procede a un secado de las mismas en la bodega de evidencias o centro de acopio, antes de ser enviadas al laboratorio. Estas muestras e indicios debern tener un rtulo adicional que diga: INDICIO MOJADO, FAVOR PONER A SECAR INMEDIATAMENTE. Si las muestras son lquidas deben embalarse en recipientes estriles con sello hermtico tales como frascos o tubos de plstico o de vidrio con tapa rosca; y conservados bajo condiciones de refrigeracin (4 a 8 C).


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Si los objetos son de tipo cortopunzante, con filo o frgiles, embalar e inmovilizarlos sobre una caja de cartn, para evitar que la mancha se desprenda por el roce con la superficie de la caja. Se debe embalar el extremo punzante protegido con una gasa estril. Las impregnaciones en papel filtro para muestras biolgicas forenses una vez secas, deben ser individualmente envueltas en papel aluminio, etiquetadas, y selladas para su envo. En el caso de tejidos deben ser recolectados en frascos de tapa rosca estriles (frascos para muestra de orina), hermticamente cerrados, refrigerados para su preservacin y posterior envo al laboratorio. Si la refrigeracin de las muestras de tejido es imposible, se recomienda depositar el tejido en un frasco estril y cubrirlo con sal de mesa, sellar, y conservar a temperatura ambiente hasta su envo al laboratorio. NO utilizar formol o formaldehido para la preservacin de tejidos y otros indicios, porque degrada el ADN. Si se utiliza ms de un hisopo sobre el mismo indicio indicar el orden en el que fueron tomados.


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6.2.1 Etiquetado Todas las muestras deben ser rotuladas con bolgrafo de tinta indeleble, letra imprenta clara y legible. Las muestras no rotuladas como se indica, no se las receptar. Cada una de las muestras e indicios deben identificarse con los datos de la siguiente etiqueta adhesiva: Anverso de la EtiquetaTipo de muestra o indicio: Contenido:

Fecha de recoleccin:(da/mes/ao)

Hora que se toma la muestra:(00h hasta 24h)

Lugar donde se recolect el indicio o la muestra: Noticia Tcnica N: Informe N: Apellidos y nombres de la persona que levanta el indicio o toma la muestra:

Firma y N de CC:

Apellidos y nombres de la persona que efecta el control de calidad de la recoleccin del indicio o la toma de la muestra:

N de celular: Firma y N de CC:

N de celular Observaciones: (condiciones especiales de manejo, transporte o almacenamiento para evitar sudeterioro o alteracin)

Reverso de la EtiquetaInstrucciones de Uso Tipo de muestra o indicio: Debe indicarse si el indicio es biolgico, si se trata de un bala, arma, vaina o cualquier elemento relacionado, huella dactilar, algn escrito, video, grabacin etc. Contenido: Debe describirse brevemente el indicio Fecha de recoleccin: Segn el formato da/mes/ao Hora que se toma la muestra: Segn el formato 00h hasta 24h N de Noticia Tcnica e Informe : Segn el SIIPNE Observaciones: Especificar las condiciones especiales de manejo, transporte o almacenamiento


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del indicio para evitar su deterioro o alteracin, en especial si el indicio fue tomado bajo condiciones no favorables.

6.3 ENVIO DE MUESTRAS O INDICIOS BIOLGICOS AL LABORATORIO Las evidencias sern enviadas al laboratorio de ADN lo ms antes posible, con la orden de la autoridad competente para su estudio (providencia, posesin de perito); y se debe mantener la cadena de custodia a lo largo del proceso. Las muestras lquidas y tejidos deben transportarse en contenedores con geles refrigerantes o hielo seco, para asegurar que la muestra fue transportada a temperatura adecuada de 4 a 8C para su conservacin. Las impregnaciones en papel filtro para muestras biolgicas forenses deben ser transportadas a temperatura ambiente hasta su envo al laboratorio.

De manera general, toda muestra o indicio biolgico que se encuentre seco puede mantenerse a temperatura ambiente hasta ser enviado al laboratorio. FLUJO DE PROCESOS: EMBALAJE, ENVO DE MUESTRAS BIOLGICAS


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Muestras Hmedas: Bolsa de Plstico hasta su llegada al Centro de Acopio o Bodega de Evidencias con rtulo :INDICIO

MOJADO, SECAR INMEDIATAMENTE.

LIQUIDA

Tubos striles Sangre: Tapa lila Otros: Falcon,o Tapa roja Refrigeracin: muetras lquidas y tejidos T ambiente: bolsas de papel, FTA

SI

SECA

Bolsa de papel

INICIO

Objeto transportable? EMBALAJE INDIVIDUAL

HUESOS

Cartn sobre lecho de papel picado o bolsa de papel SELLAR hermticamente con parafilm, cinta adhesiva, Sello de seguridad

DIENTES y UNAS NO 1ml Recoger con jeringuilla y colocar en tubo ELEMENTO PILOSO

Bolsa de papel, o tubos eppendorf

ETIQUETAR

ENVIO

FIN

Bolsa de papel

Tipo de muestra SECA

LIQUIDA

TEJIDOS BLANDOS

Frascos estriles de boca ancha

Recuperar la mancha con aplicadores humedecidos con solucin salina y dejar secar

NO utilizar formol

Fecha Y Hora Direccin del Lugar Nmero de Indicio Ubicacin exacta dentro del lugar Clase de Indicio Descripcin del Indicio Observaciones Nombre, firma del Perito que recolect el indicio

7. INDICIOS DE ORIGEN BIOLGICOEl tipo de muestra ms adecuado para el anlisis de ADN viene determinado por las caractersticas del suceso y el estado de los restos humanos. (Se enviarn los que mejores condiciones presten). En caso de tener alguna duda sobre el tipo de muestra a elegir, se debe contactar al equipo tcnico del laboratorio de ADN para valorar en funcin de las muestras disponibles y de su estado cuales son las ms adecuadas para el anlisis. 7.1 SANGRE 7.1.1 Manchas de sangre Considerar si el soporte donde se encuentra la mancha es transportable (ver seccin 6.3 y 6.2). Si no es as, proceder al levantamiento de la mancha. Material y reactivos: Guantes, cofias, mascarillas Gafas de seguridad, bota quirrgica y overol


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Hisopos estriles Pinzas estriles Encendedor Hojas de bistur tijeras Solucin salina estril o agua inyectable Sobres de papel, bolsas de plstico microtubos Marcador de tinta indeleble Contenedores y geles congelados para mantener temperatura de refrigeracin Fenoftalena

Procedimiento para prueba de orientacin: Fenoftalena Esta tcnica es orientativa, permite diferenciar si la mancha corresponde a sangre o no. La identificacin de la mancha se la debe realizar de la siguiente manera. 1. Levantar la mancha con un hisopo estril. Si la mancha est seca humedecer con solucin salina o agua estril. 2. Aadir dos gotas de fenoftalena a dicho hisopo. 3. Adicionar una gota de agua oxigenada. 4. Si la mancha corresponde a sangre se observa el cambio de color a rosa oscuro (oxidacin) en forma inmediata; pasado los 30 segundos esta prueba pierde validez ya que el fenmeno de oxidacin puede generar falsos positivos. NOTA: La fenoftalena debe ser mantenida en frascos mbar, y antes de utilizar este reactivo debe verificarse que no presente ninguna coloracin. Procedimiento para levantamiento de manchas: 1. Humedecer el hisopo con solucin salina o agua inyectable y colocarlo sobre la mancha hemtica hasta que se impregne el hisopo. 2. Una vez impregnado el soporte, dejar secar en un sitio limpio y aislado para evitar su contaminacin. 3. Ya seco el hisopo, guardar en su respectivo estuche, con los datos de embalaje (ver seccin 6.2) y sellarlo. 4. Conservarlo a temperatura ambiente hasta su envo al laboratorio de ADN. NOTA: Dependiendo del tamao de la mancha se recoger de 1 a 2 hisopos por mancha.


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Procedimiento para levantamiento de manchas no transportables sobre superficies lisas: Pisos, paredes, muebles y otros. 1. Si la mancha est seca y puede rasparse debe utilizarse una hoja de bistur estril; si son varias manchas emplear una hoja para cada mancha. Si se dispone nicamente de una hoja de bistur, desinfectarla con alcohol al 70% antes de raspar cada mancha. 2. Recibir el raspado de cada mancha en su respectivo sobre de papel y cerrarlo para su embalaje con los respectivos sellos de seguridad. NOTA: Tener cuidado al raspar de no arrastrar material inerte (pintura, tierra, etc.) 7.1.2 Charco de sangre En casos donde haya presencia de sangre lquida: Si se dispone de ms de 1ml, recoger la muestra con una jeringuilla y colocarla en un tubo de tapa lila. Si se dispone de menos de 0,5ml, se debe impregnar directamente sobre papel FILTRO PARA MUESTRAS BIOLGICAS FORENSES, dejar secar en un sitio limpio y aislado para evitar su contaminacin. Embalar (seccin 6.2), y conservar hasta su envo al laboratorio (seccin 6.3.) 7.1.3 Manchas de sangre sobre objetos transportables Se considera a aquellos objetos impregnados o manchados con sangre que puedan ser transportados como: prendas, zapatos, armas, piedras, envases de bebidas, artculos personales, etc. 1. Si las manchas se encuentran hmedas, dejar secar sin exponer directamente al sol, sobre una superficie limpia y aislada. 2. Cuando se trate de ropa, se hace un doblez de preferencia donde se encuentre la mancha con el propsito de protegerla. Embalar cada muestra por separado en bolsas de papel, etiquetadas con los datos ya indicados (ver seccin 6.2 y 6.3). 3. Cuando se trate de manchas, sobre soportes que se puedan recortar como son cortinas, alfombras, etc. Recortar la mancha, embalarla en bolsas de papel hasta su envo al laboratorio (ver seccin 6.2 y 6.3).


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NOTA: Si se trata de prendas hmedas o fragmentos de tela que contengan manchas hmedas, y no se dispone de tiempo para el secado; introducir en bolsa plstica con un rtulo que diga INDICIO MOJADO, FAVOR PONER A SECAR INMEDIATAMENTE. En este caso la etiqueta del indicio debe llenarse en el Centro de Acopio o Bodega de Indicios 7.1.4 Cogulos de Sangre. 1. Levantar con una esptula estril utilizando una para cada cogulo. Si se dispone nicamente de una esptula, desinfectarla con alcohol al 70% antes de recoger cada cogulo. 2. Colocarlo(s) en tubo(s) de tapa roja, microtubo(s) o recipiente(s) estril(es) que contengan suficiente solucin salina estril para cubrir el cogulo. 3. Etiquetar y preservar a temperatura de refrigeracin (4 a 8C) sobre geles refrigerantes o hielo secos (ver seccin 6.2 y 6.3). 7.1.5 Sangre de cadver. Realizar una puncin intracavitaria del corazn y tomar 4 a 5 ml de sangre en un tubo de tapa lila. A la par, impregnar aproximadamente 0,5ml de la misma sangre sobre papel FILTRO PARA MUESTRAS BIOLGICAS FORENSES. Permitir secar, etiquetar y embalar (seccin 6.2 y 6.3). NOTA: Cuando la puncin intracavitaria del corazn es tomada en los Consultorios Provinciales, y el envo no puede ser inmediato, almacenar la muestra en refrigeracin (4 a 8C) y enviar en una heladera con bloques de geles de hielo en su interior. Hay ocasiones en las que el cadver es encontrado varios das despus de su muerte y ya no disponemos de sangre lquida de la cavidad cardaca en perfecto estado, en ese caso es recomendable tomar muestras de tejidos blandos. FLUJO DE PROCESOS: MUESTRAS HEMATICAS


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Recortar la mancha

Muestras Hmedas: Dejar secar, si no se dispone de tiempo poner en Bolsa de Plstico hasta su llegada al Centro de Acopio o Bodega de Evidencias con rtulo :INDICIO

MOJADO, SECAR INMEDIATAMENTE.

NO

TRANSPORTABLE

Objeto Transportable?

SI

La muestra est Hmeda? NO Hacer un doblez, de tal modo que la mancha quede protegida

SI

Dejar secar, no rayos UV, lugar limpio

INICIO

Tipo Muestra hemtica Humedecer hisopo con solucin salina NO Aplicar el hisopo sin presionar y de forma circular sobre la mancha, dejar secar y regresar a su respectivo estuche EMBALAR ENVIAR FIN

SECAS Superficie lisa?

SI Raspar con hoja de bistur en una bolsa de papel

COAGULOS

Levantar con esptula estril

Colocar en tubo tapa roja, Falcon etc.

LIQUIDAS

NO Es de Cadver

1ml Recoger con jeringuilla y colocar en tubo Tapa lila

SI Puncin intracavitaria del corazn, tubo tapa lila, e impregnacin FTA

7.2 TEJIDOS PARA ESTUDIOS DE ADN NUNCA SE DEBE FIJAR LOS TEJIDOS CON FORMOL Como norma general, cualquier tejido que contenga clulas nucleadas es una fuente adecuada para estudio de ADN. Sin embargo s conviene tener en cuenta que existen unos tejidos mejores que otros. En los casos de que se encuentre fetos o recin nacidos, cortar 2 muestras entre 0.5 y 1cm de tamao del extremo proximal del cordn umbilical. Colocarlos por separado en frascos estriles tapa rosca (recipiente para orina). Preservar a temperatura de refrigeracin 4 a 8C (sobre geles refrigerantes o hielo seco, seccin 6.2 y 6.3). En el caso de que el bazo y el hgado se encuentran en buen estado, se debe dar prioridad a este tipo de tejidos.


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En el caso de Consultorios Provinciales, si el envo tarda ms de 48h, mantener en congelacin (-18C) hasta su envo en heladera con geles refrigerantes. Si la refrigeracin de las muestras de tejido es imposible, se recomienda depositar el tejido en un frasco estril y cubrirlo con sal de mesa, sellar, y conservar a temperatura ambiente hasta su envo al laboratorio. Si dichos rganos se encuentran deteriorados es preferible tomar muestras de dos regiones internas de msculo esqueltico mejor conservadas. 7.2.1 Tejidos en cadver Material y reactivos: Frascos de plstico estriles con tapa de rosca Frascos recolectores de orina Bolsas de plstico Pinzas estriles Suero fisiolgico estril. Hojas de bistur

Procedimiento: 1. Tomar con pinzas estriles una porcin de aproximadamente 5g de las vsceras mejor conservadas dependiendo del estado de putrefaccin, eligiendo en este orden de prioridad: bazo, hgado, msculo, rin, corazn, pulmn o estmago. Tomar en cuenta que el mdico al realizar la necropsia, no cambia de guantes y a l se le pedir las muestras. 2. Colocar cada porcin de manera individual en un frasco tapa rosca estril. 3. Etiquetar (seccin 6.2). 4. Enviar al Laboratorio (seccin 6.3). 7.2.2 Tejido en cadveres parcialmente quemados La muestra idnea en estos casos es el musculo interno. Es necesario tomar dos muestras de este tejido a lo largo del hueso. Material y reactivos:


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Frascos recolectores de orina. Tubos de plstico estriles con tapa de rosca de 15 o 50 ml Bolsas de plstico Pinzas estriles Suero fisiolgico estril. Hojas de bistur

Procedimiento: 1. Tomar con pinzas estriles una porcin de aproximadamente 5g del tejido lo ms cercano al hueso. 2. Colocar cada porcin de manera individual en un frasco tapa rosca estril (recipiente para orina). 3. Etiquetar como se indica en la seccin 6.2. 4. Enviar al Laboratorio atendiendo a las recomendaciones de la seccin 6.3. 7.2.3 Raspado de uas Es importante mencionar que adherido a las uas del individuo, puede encontrarse tejido ajeno a la vctima involucrada en un hecho presuntamente delictuoso. Material y reactivos: Pinzas estriles Bolsas de papel o tubos para microcentrfuga de 1.5 ml Hoja de bistur estril Alcohol al 70% Etiquetas Procedimiento: 1. Se debe examinar las manos y uas de la vctima, recogiendo con pinzas estriles los pelos o fibras que pueden existir (los mismos que debern ser levantados de acuerdo al protocolo para elementos pilosos). 2. Posteriormente cortar el borde superior de las uas e introducirlas en tubos de 1.5 ml. o bolsas de papel pequeas. Utilizar una hoja de bistur estril por cada ua. Si se dispone nicamente de una hoja de bistur, desinfectar con alcohol al 70% antes de cortar cada ua.


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3. Embalar en una bolsa de papel de manera individual cada una de las muestras y etiquetar como se indica en la seccin 6.2. 4. Enviar al laboratorio atendiendo a las recomendaciones de la seccin 6.3. NOTA: En caso de cadver la toma de muestra deber llevarse a cabo antes del lavado previo a la necropsia y/o cualquier tipo de intervencin criminalstica.

FLUJO DE PROCESOS: TEJIDOS


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FETOS O RECIEN NACIDOS

Cortar 2 muestras entre 0.5 y 2cm del extremo proximal del cordn umbilical

En orden de prioridad: Bazo, hgado, msculo, rin corazn o pulmn

Colocar en un frasco estril tapa rosca de boca ancha

CADAVER

Tomar con pinza estril una porcin de aprox. 5g de las vsceras mejor conservadas

EMBALAR CADAVER PARCIALMENTE QUEMADO Tomar con pinzas estriles una porcin de aproximadamente 5g del tejido mejor conservado y lo ms cercano al hueso. Si la refrigeracin es imposible, depositar el tejido en un frasco estril y cubrirlo con sal de mesa, y conservar a T ambiente. RASPADO DE UAS DE CADAVER ELEMENTO PILOSO

ENVIAR

FIN

INICIO

Tipo de muestras

Examinar las manos y uas de la vctima.

Tipo de muestra en la ua

Recoger con pinzas estriles los pelos.

TEJIDOS HUMANOS

Frotar con un aplicador estril la comisura entre la ua y el dedos

Recoger dentro de bolsas de papel por indidivual.

SANGRE Cortar las uas una por una

Si se dispone nicamente de un cortaas, desinfectarlo con alcohol al 70% antes de cortar cada ua.

7.3 SALIVA 7.3.1 Clulas Epiteliales de Raspado bucal. Material y reactivos: Hisopos estriles o citocepillos. Papel filtro para muestras biolgicas forenses para saliva Etiquetas. Bolsas de plstico. Guantes Overol Cofia Mascarilla Sobres de papel Procedimiento:


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1. Raspar el carrillo derecho de la boca con el hisopo estril o citocepillo, realizando seis movimientos ascendentes y descendentes rotando el hisopo. Repetir este paso con un segundo hisopo o citocepillo. 2. Dejar secar a temperatura ambiente y embalarlo en su contenedor respectivo o en bolsa de papel. 3. Hacer lo mismo con el carrillo izquierdo y colocar los hisopos en sus contenedores. 4. Etiquetar y enviar de acuerdo a la seccin 6.2 y 6.3. Consideraciones: Si el hisopo utilizado viene acompaado de su contenedor especial (empaque), embalarlo en ste. 7.3.2 Manchas de saliva en soportes no transportables: Material y reactivos: Etiquetas Guantes Cofia y mascarillas Hisopos estriles Tijeras estriles Pinzas estriles Bolsas de plstico y papel Sobres de papel Agua desionizada estril Solucin salina Pipetas Pasteur plsticas para hacer la transferencia al papel Tarjetas de papel filtro para muestras biolgicas forenses para saliva Overol Procedimiento: 1. Si en el lugar de los hechos se tienen objetos no transportables como; muebles, vehculos, etc., donde el soporte es tela o superficie susceptible de corte, se recomienda recortar la mancha. 2. Dejar secar a temperatura ambiente, doblarla de manera que la mancha quede protegida.


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3. Etiquetar y embalar (ver seccin 6.2, 6.3). En caso de manchas de saliva sobre soportes no transportables y no recortables como por ejemplo; vidrio, madera, plstico, suelo, etc. Se recomienda lo siguiente: 1. Frotar la mancha con un hisopo humedecido con solucin salina, o agua inyectable. 2. Dejar secar el hisopo a temperatura ambiente. 2. Colocar el hisopo en su propio contenedor. 3. Etiquetar (ver seccin 6.2) y enviar al laboratorio (seccin 6.3). Si se cuenta con tarjetas de papel filtro para muestras biolgicas forenses de saliva y se localiza una muestra lquida se recomienda lo siguiente: 1. Levantar la muestra con una pipeta Pasteur desechable e impregnarla sobre una tarjeta de papel filtro para muestras biolgicas forenses. 2. Dejar secar a temperatura ambiente, envolverla en papel aluminio y colocar dentro de un sobre de papel. Embalar individualmente cada una de las muestras. 3. Etiquetar y enviar de acuerdo a la seccin 6.2 y 6.3. 7.3.3. Objetos transportables con saliva: colillas de cigarro, prendas, vasos, envases, cucharas, etc. Material y reactivos: Guantes Cofia Mascarilla Bolsas de plstico Aplicadores estriles Tubos de 15 ml estriles Etiquetas Sobres manila Pinzas estriles Cartoncillos Solucin salina estril Overol y botas quirrgicas Procedimiento:


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1. Colocar el objeto transportable seco dentro de un sobre de papel. 2. Embalar individualmente cada objeto. 3. Etiquetar (ver seccin 6.2). Cuando se trate de objetos como envases, vasos, botellas, latas, etc., donde adems se vaya a realizar estudio dactiloscpico, debe realizarse primero el levantamiento de la muestra biolgica como se indica, protegiendo ante todo los elementos dactilares que pudieran estar presentes: 1. Tomar un aplicador estril y humedecerlo con agua estril, agua inyectable o solucin salina. 2. Frotar la regin en donde se sospecha que est la mancha de saliva. 3. Esperar unos minutos para permitir la hidratacin de la mancha. 4. Frotar nuevamente la regin para recuperar el material biolgico. 5. Dejar secar los hisopos, embalar de manera individual en su respectivo contenedor. 6. Etiquetar como se indica en la seccin 6.2. 7. Enviar al laboratorio atendiendo a las recomendaciones de la seccin 6.3. Consideraciones: Si se trata de prendas hmedas o fragmentos de tela que contengan manchas hmedas, y no se dispone de tiempo para el secado; introducir en bolsa plstica con un rtulo que diga INDICIO MOJADO, FAVOR PONER A SECAR INMEDIATAMENTE. Para el caso de vasos con presencia de muestras biolgicas se debe tomar el hisopado en tres zonas diferentes, sin pasar por todo el borde; si se observa residuos de lpiz labial evitar hacer el frotis sobre este. En el caso de botellas tomar dos hisopados, uno del borde de la boca de la botella y otro de la tapa, dejar secar; etiquetar, embalar por separado. 7.3.4 Saliva sobre el cuerpo Material y reactivos: Etiquetas Guantes


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Cofia y mascarillas Hisopos Bolsas de plstico o papel Agua inyectable o solucin salina Overol Guantes Gafas de seguridad

Procedimiento: Hacer una exploracin exhaustiva por zonas del cadver para la bsqueda de saliva sobre la superficie corporal (por ejemplo mordeduras), la muestra se debe levantar de la siguiente manera: 1. Humedecer un hisopo estril con agua inyectable o solucin salina. 2. Aplicar el hisopo sin presionar sobre la mancha en la superficie corporal y deslizar de manera circular rotando el hisopo. Dejar secar y colocar el hisopo en su contenedor. Repetir estos pasos con un segundo hisopo. 3. Embalar y enviar (ver seccin 6.2, 6.3) FLUJO DE PROCESOS: SALIVARASPADO BUCAL Raspar el carrillo derecho con el hisopo estril o citocepillo, con movimientos ascendentes y descendentes rotando el hisopo. Repetir lo mismo con el carrillo izquierdo Secar a T ambiente, sin luz directa

MANCHA EN PRENDAS

Recortar la mancha

Hacer un doblez, de tal modo que la mancha quede protegida

TRANSPORTABLE

Dejar secar, no luz UV, lugar limpio Botellas: tomar dos hisopados, uno del borde de la boca de la botella y otro de la tapa, dejar secar. Colillas, vasos, cubiertos: colocarlas en bolsa de papel o cartn

Muestras Hmedas: Dejar secar, si no se dispone de tiempo poner en Bolsa de Plstico hasta su llegada al Centro de Acopio o Bodega de Evidencias con rtulo :INDICIO

OTROS

MOJADO, SECAR INMEDIATAME NTE.

INICIO

Tipo Muestra de saliva SECAS O CADAVER Humedecer hisopo con solucin salina Aplicar el hisopo sin presionar y de forma circular sobre el rea sospechosa, dejar secar y regresar a su respectivo estuche EMBALAR ENVIAR FIN

1ml Recoger con jeringuilla y colocar en tubo Tapa lila


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7.4 SEMEN En casos en los que se presume un delito sexual, el semen puede buscarse en la ropa de la presunta vctima y/o cadver; en las diferentes zonas anatmicas (vagina, ano, boca, glande, extremidades, etc.):Cuadro 1: Presencia de espermatozoides en las diferentes cavidades anatmicas en vctimas de agresin sexual.CAVIDAD Vagina Ano/Recto Boca ESPERMATOZOIDES INTACTOS 24h 5h (rara vez) CABEZAS DE ESPERMATOZOIDES Hasta 7das 2 a 3 das Hasta 24h

El cuadro 1 detalla el tiempo mximo que se puede encontrar espermatozoides intactos o nicamente las cabezas en las diferentes cavidades anatmicas en vctimas de agresin sexual. Cabe mencionar que la literatura cientfica muestra una gran variabilidad de datos sobre el tiempo de supervivencia de los espermatozoides y otros componentes seminales en cavidades naturales, a menudo debido a que estn basados en declaraciones de las vctimas, que por sus niveles de trauma o por alegaciones falsas no se ajustan a la realidad. En caso de delitos sexuales es importante preguntar a la vctima si tuvo relaciones sexuales con anterioridad a la agresin (hasta 72 horas). 7.4.1 Semen lquido. Material y reactivos: Hisopos estriles Tijeras estriles Tubos de tapa roja Tubos cnicos Etiquetas Bolsas de plstico Pipeta de plstico Papel filtro para muestras biolgicas forenses


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Guantes Mascarillas Gafas de seguridad Overol

Procedimiento: 1. Si disponemos de un volumen de ms de 0.5 ml. Aspirarlo con una pipeta de plstico estril y depositarlo en un tubo cnico o un tubo de tapa roja. Etiquetar y embalar el tubo en bolsa de papel (ver seccin 6.2 y 6.3). Mantener en condiciones de refrigeracin hasta su llegada al laboratorio. 2.- Si disponemos de un volumen menor a 0.5ml, fijar el semen en papel filtro para muestras biolgicas forenses (embalar y enviar de acuerdo a la seccin 6.2 y 6.3). NOTA: En caso de no disponer de papel filtro para muestras biolgicas forenses, sumergir un hisopo estril, en el semen lquido (

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