primulina. detección de quitina

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Primulina. Deteccin de quitina en paredes fngicasAplicaciones: Aplicable a muestras vivas o secciones obtenidas por congelacin, muestras incluidas en parafina o en resina. Microscopa de epifluorescencia (U-MWB2, B) o Confocal (Blue Diode).

Mtodo:1. 2. 3. 4. Preparar las muestras: secciones obtenidas por congelacin, parafina o semifinos. Aplicar la solucin de primulina al 0.02 % durante 1 h. Lavar y montar con una solucin antifade. Observar en epifluorescencia (cubo U-MWB2, azul) o con Confocal (Blue Diode) si son muestras vivas o seccionadas por congelacin. La primulina fluoresce en verde.

Soluciones: Solucin de primulina al 0,02% (p/v): Disolver 20 mg de primulina en 100 mL de agua. Solucin antifade de 0.1% (p/v) de p-fenilendiamina.

Reactivos: Primulina (Primuline; SIGMA 206865). p-fenilendiamina (p-Phenylenediamine; MERCK: 807246).

Referencias: Yamaguchi, M., Itakura, S., Imai, I. & Ishida, Y. (1995). A rapid and precise technique form enumeration of resting cysts of Alexandrium spp. (Dinophyceae) in natural sediments. Phycologia, 34: 207-214

Laboratorio de Anatoma e Histologa Vegetal Julio Iranzo. Jardn Botnico de Valencia

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