I.E.S. Rayuela - Departamento de Biología y Geología.Práctica nº 3 de Biología de 4º de ESOIdentificación del grupo sanguíneo y reconocimiento de células de la sangre.

Objetivos ❍ Conocimiento de técnicas de análisis de grupos sanguíneos ❍ Reconocimiento de los diferentes tipos de células sanguineas.

Material - Microscopio - Portaobjetos - Cubreobjetos - Alfiler - Etanol

- Cuentagotas - Colorante Wright - Agua destilada

- Reactivos de determinación de grupo sanguíneo

Desarrollo

Extracción de sangre

En esta práctica se realizará por una parte un análisis de grupos sanguíneos y por otra se observarán las células de la sangre. Para ello hay que extraer sangre con ayuda de una lanceta diseñada para ello. La herida no es dolorosa. Es muy importante no intercambiar la lanceta ni utilizarala para varios individuos. Hay enfermedades graves que se contagian por la sangre.

● Limpiar la yema de un dedo y frotarla con algodón empapado en alcohol● Con la lanceta bien desinfectada hacer una punción● Apretar el dedo y depositar cuatro gotas de sangre en cuatro portaobjetos bien limpios, (tres gotas

en tres portaobjetos para el análisis del grupo sanguíneo y una para la observación de las células)Realizar rápidamente las dos prácticas sin dejar coagular la sangre.

Identificación del grupo sanguíneo

En la especie humana existen varios genes diferentes implicados en la compatibilidad o incompatibilidad de las transfusiones de sangre. Los dos grupos principales se conocen como ABO y Rh. El sistema ABO es consecuencia de la presencia de una proteína en la cubierta de los glóbulos rojos. Para esta proteína se conocen dos formas inmunológicamente diferentes la forma A y la forma B. Las dos formas tienen igual importancia inmunológica. Los grupos sanguíneos A, B y AB se refieren al tipo de proteínas que presenten los glóbulos rojos; en el caso de que no se presente esta proteína se incluye a estos individuos en el grupo sanguíneo 0.

El factor Rh corresponde a una proteína del plasma. La presencia de esta proteína es Rh+ y la ausencia Rh-

La determinación del grupo sanguíneo se efectua enfrentando los hematíes problema con reactivos de especificidad conocirda anti-A, anti-B y anti-D. La aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos es indicativa de la presencia o ausencia de los correspondientes antígenos.

Procedimiento● Extraer sangre como se apunta en el apartado anterior● Poner 3 gotas en tres portaobjetos. Una en cada uno de ellos● Verter uno de los reactivos sobre cada gota de sangre● Mezclar bien la sangre con el reactivo formando un círculo de unos 2 cm de diámetro● Mover el portaobjetos lentamente con movimientos basculantes durante 2 minutos● Observar la aparición o no de aglutinación

La reacción es positiva si se produce aglutinación. Suele tardar pocos segundosLa reacción es negativa si no se observa aglutinación al cabo de dos minutos en reposo.

Grupo ABO Aglutinación Factor Rh Aglutinación

Grupo A reactivo anti-A Rh + Reactivo anti-D

Grupo B reactivo anti-B Rh - No aglutina anti-D

Grupo AB reactivos anti-A y anti-B

Grupo 0 Ni anti-A ni anti-B

Por ejemplo Aglutina anti-A . No aglutina anti-B . Si aglutina anti-D : Grupo Sanguíneo A+

Observación de células sanguíneas

En la sangre se pueden observar varios tipos celulares. Su cantidad y proporción pueden ser indicativos de diversas enfermedades o alteraciones.

● Hacer un frotis de la gota de sangre con otro porta. El frotis se hace extiendiendo la sangre de forma rápida y contínua arrastrando un porta sobre el que contiene la sangre con un ángulo de inclinación de unos 45º . Esta operació se realiza para extender la sangre que, de otro modo coagularía en grandes masas inpidiendo la observación.

● Dejar secar al aire● Teñir la preparación cubriéndola con varias gotas de colorante Wright. Mantenerla con el tinte

durante 2 minutos● Añadir a continuación tantas gotas de agua destilada como las que se pusieron de colorante.

Mantener la preparación con esta mezcla durante 3 minutos● Lavar con agua destilada vertiéndola gota a gota durante medio minuto● Dejar secar al aire● Poner un cubreobjetos y observar al microscopio.

Las células sanguíneas aparecer teñidas del siguiente modo: – Núcleos celulares en azul – Eritrocitos en rojo claro.– Citoplasmas de los granulocitos granulados (rojo en eosinófilos, azul intenso en basófilos y violáceo en

neutrófilos). – Citoplasma de los linfocitos y monocitos en azul claro – Plaquetas en azul claro

Hoja de prácticas ● Hacer un esquema del protocolo seguido para la determinación del grupo sanguíneo● Anotar los resultados delos reactivos e indicar el grupo sanguíneo

● Hacer un esquema de los pasos seguidos para la observación de células sanguíneas● Hacer un dibujo del aspecto general de la preparacióm indicando el aumneto● Hacer dibujos detallados de los diferentes tipos de células sanguíneas observados● Responder a las preguntas de la hoja de prácticas.

Notas– Los esquemas a los que se refieren los puntos anteriores son una serie de dibujos esquemáticos

muy claros de la secuencia de acciones seguida en cada caso, acompañados de un texto explicativo resumido.

– Los dibujos de las preparaciones y las células deben ser claros y de tamaño grande para que se aprecien todas las estructuras observadas. Hay que intentar que sean lo más fieles posibles al original sin inventarse nada.

– Se colorearán como aparecen en la preparación– Se anotará el número de aumentos con los que se ha observado la preparación

Departamento de Biología y Geología – Hoja de PrácticasPráctica nº 3 de 4º de ESO: Identificación del grupo sanguíneo Nombre y apellidos Curso Fecha

Esquma del protocolo seguido para el análisis del grupo sanguíneo

Resultado

Anti -A: Anti -B: Anti- D:

Grupo Sanguíneo

Reconocimiento de células de la sangre. Esquema preparación sangre Aspecto general de la preparación de sangre

Aumento

Tipos celulares

Tipo celularAumento

Tipo celularAumento

Tipo celularAumento

Tipo celularAumento

¿Qué características distinguen a los eritrocitos de las otras células sanguíneas?

¿Por qué tiene estas características?

¿Que tipos de leucocitos has observado?

¿Cuales son más abundantes?