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5/11/2018 practica - slidepdf.com

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¿QUÉ ES?Material a estudiar: observación de la piel luego de la colocación de un lazo interrumpiendo la circulaciónvenosa.Descripción de la prueba: se mantiene elevada la presión en un miembro por un perído de 5 minutos, con unlazo o un manguito inflable. Luego se realiza el recuento de las petequias (pequeñas manchas hemorrágicas enun círculo de 5 cm de diámetro).

Tiempo insumido al paciente: 5 a 10 minutos.

Finalidad: determinar la fragilidad de las paredes capilares, estimar la tendencia a la hemorragia. Ayuda areconocer la trombocitopenia.

Preparación previa: no es necesaria. No repetir en el mismo miembro antes de los 7 días.

Resultados:

Valores normales: ninguna petequia o hasta diez petequias en un área de 5 cm. Escala para informar elnúmero de petequias:

0 a 10 = 1+10 a 20 = 2+20 a 50 = 3+50 o más petequias = 4+

Valores aumentados: pueden indicar coagulación intravascular difusa, disminución del fibrinógeno,disminución de la protrombina, deficiencia de factor VII, trombocitopenia, tromboastenia, enfermedad deVon Willebrand, deficiencia de vitamina K. Y puede estar asociado a afecciones no relacionadas con lostrastornos de la coagulación como: escarlatina, hipertensión, diabetes, gripe, sarampión, escorbuto.

Confiabilidad de los resultados: buena.

Medicamentos que pueden alterar los resultados: Corticoesteroides.



LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS.

Nombre: Tiempo de coagulación y tiempo de sangrado

Objetivo: El alumno determinará el tiempo de sangrado y coagulación para verificar los valores normales y laimportancia de su determinación en la eficiencia global del mecanismo de coagulación.

MATERIAL SUSTANCIAS:Lancetas estériles EtanolPapel filtro u otro papel absorbenteTubos de ensayeCronómetroJeringaTorundas de algodónBaño maría a 37° C

Introducción:

TIEMPO DE COAGULACIÓN DE LA SANGRE COMPLETA.

Esta prueba suministra un indicio aproximado de la eficacia global del mecanismo intrínseco de lacoagulación. Se encuentran tiempos prolongados en la hemofilia clásica y en la deficiencia del factor IXdurante la hemorragia. La prueba carece de valor para las insuficiencias ligeras de distintos factores, por que

basta una cantidad pequeña de trombina para producir un coágulo de fibrina. Es menos útil para las anomalíasde las ultimas etapas de la coagulación (factores V, X o II), pues dichas etapas son rápidas en comparacióncon las primeras.

La coagulación requiere solamente un pequeño número de plaquetas normales, por lo tanto, el tiempo decoagulación es normal en la púrpura trombocitopénica.

METODO DE LEE Y WHITE.

1.-Se extrae sangre venosa con una jeringa de vidrio limpia y seca, utilizando una aguja gruesa (núm. 18 ó19). La punción debe ser perfecta, pues la contaminación con linfa modifica los resultados. Se pone enmarcha un cronógrafo en cuanto la sangre penetra en la jeringa, pues en este momento inicia la coagulaciónsanguínea.

2.-Se retira la aguja y se pone 1ml de sangre en cuatro tubos de ensayo secos, químicamente limpios de10X1cm, colocados en una gradilla en baño María a 37oC.

3.-3minutos después, y reduciendo al mínimo el tiempo que los tubos se encuentren fuera del agua, se lesinclina uno por uno cada 30 segundos (en el laboratorio utilizamos un aplicador de madera que introducimosen el tubo para evitar sacarlos, envés de estarlos inclinando). Se evita la agitación, que podría prolongar eltiempo de coagulación. Este corresponde al momento en que resulta posible invertir los tubos sin que sederrame su contenido (en nuestra practica es el momento en el que al sacar el aplicador aparece un hilillo de

fibrina).Se anota separadamente el tiempo de coagulación de cada tubo, y la cifra definitiva es el promedio delos cuatro resultadosCifras normales de este método de 4 a 10 minutos. Con las modificaciones de clase es de 3 a 6 minutos.

TIEMPO DE SANGRADO.

Un tiempo de sangrado normal indica una retracción normal de los capilares, y la existencia de un númerosuficiente de plaquetas, con actividad normal. El tiempo de sangrado se prolonga en la insuficiencia del factor VII; aumenta en la púrpura trombocitopénica y suele ser un poco mayor en la púrpura no trombocitopénica yla trombastemnia de Glanzmann.



Puede presentarse un ligera prolongación del tiempo de sangrado cuando existen insuficiencias pronunciadasde otros factores.

METODO DE IVY PARA EL TIEMPO DE SANGRADO.

1.-Se pone alrededor del brazo un manguito de esfigmomanómetro, con la que se ejerce una presión 40mm deHg, que debe permanecer igual durante toda la prueba.2.-Utilizando una lanceta se hacen a intervalos cortos tres punciones (entre 2.5 y 3mm de profundidad) a lolargo de la cara flexora del antebrazo, evitando las venas visibles o las lesiones cutáneas. Se echa a andar elcronómetro.3.-A intervalos de medio minuto, utilizando papeles filtro distintos, se seca cuidadosamente cada gota desangre con el papel evitando tocar la piel; el punto final es cuando el disco de papel ya no absorbe sangre. Setoma la media de los tres tiempos.

El tiempo normal es entre 2 y 6 minutos máxima 7. En clase es de 3 minutos.

CONCLUSIONES.---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

NOMBRE DEL ALUMNO:__________________________SEM. Y GPO.____________

FECHA DE REALIZACIÓN:_________________________

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firma del maestro



LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS.

Nombre de la práctica: Determinación de TP y TPT.

Objetivo: El alumno realizará la determinación de TP y TPT como un medio para evaluar el sistema decoagulación de un paciente.

Material: Sustancias:Pipeta Pasteur Reactivo para TP.Tubo con citrato de sodio al 3.8% Reactivo para TPT.Tubos de ensayo de 12X75 . Plasma citratadoPipeta automática de 0.1 ml. CaCl2 al 0.025MPipeta automática de 0.2 ml.Baño María a 37° C .

Introducción:TIEMPO DE PROTROMBINA

Es la mejor prueba de sondeo para anormalidades de la vía extrínseca. Mide la activación del factor X por elfactor tisular y el complejo del factor VIIa, también las reacciones restantes de la vía común. Mide losfactores I, II, V, VII y X. El TP es una determinación analítica que se efectúa antes de una intervenciónquirúrgica para determinar problemas hemorrágicos potenciales; un TP prolongado es indicativo de un niveldisminuido de uno o más factores del sistema extrínseco cuya causa puede deberse a trastornos hereditarios dela coagulación, deficiencia de vitamina K, enfermedad hepática o a la administración de medicamentos.

SIMPLASTIN EXCEL. Es un reactivo de tromboplastina tisular (cerebro de conejo) que contiene iones decalcio y estabilizantes en un tampón adecuado, se utiliza en la prueba monofásica modificada del tiempo de

protombina.

El principio de esta prueba es que esta sustancia es sensible a las deficiencias del sistema extrínseco de lacoagulación. No es sensible a las deficiencias del sistema intrínseco ni a las disfunciones de las plaquetas. No

se puede utilizar para controlar la terapia con heparina.

Para reconstruir el contenido del reactivo debe de coincidir la s etiquetas del vial y el diluyente, agitar enérgicamente para asegurar su rehidratación completa, antes de utilizarlo se debe de volver a mezclar. Sedebe conservar (cerrado herméticamente) a 2-8oC durante máximo 4 días. El diluyente contiene estabilizantesy preservativos para garantizar la sensibilidad y estabilidad del producto, contiene azida sódica (NaN3) comoconservante.

Nota: Cuando se vierta por el desagüe hay que hacer fluir gran cantidad de agua ya que forman azidasmetálicas que cuando están altamente concentradas en las tuberías metálicas pueden resultar explosivas.

Preparación de la muestra: se añaden nueve partes de sangre a una de anticoagulante (citrato de sodio), semezclan, se centrifugan y se separa el plasma de las células y se realiza la prueba antes de 4 horas desde la

extracción. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO.

PROCEDIMIENTO MANUAL PARA DETERMINACIÓN DE TP1.-Preincubar a 37oC un volumen suficiente de Simplastin Excel (0.2ml/prueba). Evitar evaporación y nomantenerlo a 37oC destapado por más de 60’.2.-Rotular el tubo de ensayo con todos los datos.3.-Pipetear 0.1ml de muestra al tubo apropiado.4.-Incubar cada muestra a 37oC durante 2-3’.



5.-Pipetear 0.2ml de reactivo para TP y simultáneamente poner el cronómetro en marcha hasta la deteccióndel coágulo.6.- Anotar el tiempo transcurrido en segundos.

Se debe emplear material exclusivo de vidrio o plástico limpio ya que se requiere la máxima garantía deejecución y se debe hacer por duplicado. El intervalo normal es de 10-14 segundos. Pero cada laboratoriodebe establecer sus propios valores de control y precisión en base al método empleado y a las propiascondiciones operarias.

TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL

Esta es la prueba de elección para descubrir anormalidades en la vía intrínseca. La prueba mide todos losfactores excepto VII y XIII.

AUTOMATED APTT. Es un reactivo de factor plaquetario 3 (fosfolípidos de cerebro de conejo),conteniendo un activador particulado (sílice micronizada) y un tampón (ácidoN-2 hidroxietilpipeazida-N-2estanolsulfónico) apropiado. Se utiliza en determinación de tiempo de tromboplastina parcial activada, se usa

para la valoración de los factores del sistema intrínseco, tiene especial sensibilidad para la presencia deheparina lo que la hace muy útil para le control de la terapéutica anticoagulante por heparina.

Para su reconstrucción se utiliza el volumen indicado de agua destilada en el vial, se agita vigorosamentehasta que se completa la hidratación y suspención de las partículas de sílice; antes de usarlo se debe agitar denuevo y una vez reconstituido anotar su fecha de caducidad de una semana a la fecha realizada.

Preparación de la muestra: en un tubo limpio poner una parte de citrato de sodio al 3.8% , añadir nueve partesde muestra, centrifugar y separar el plasma, las pruebas deben completarse dentro de las 4 horas siguientes ala obtención de la muestra.

TÉCNICA MANUAL PARA LA DETERMINACIÓN DE TTP

1.-Calentar a 37oC un volumen suficiente de CaCl2 0.025M.2.-Rotular un tubo de ensayo con todos los datos y realizar la prueba por duplicado.3.-Dispersar 0.1ml de plasma a su tubo correspondiente y añadir 0.1ml de automated APTT.4.-Incubar a 37oC durante 5’.5.-Inmediatemente después añadir 0.1ml de solución de CaCl 2, simultaneamente poner el cronómetro en

marcha y determinar la formación del coagulo.6.-Anotar el tiempo en segundos.Cada laboratorio debe establecer sus normales para está prueba.

NORMALES:TP=10-14 SEG.

.TPT=25-43 SEG.

CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________ __________________________________

NOMBRE DEL ALUMNO:__________________________SEM. Y GPO.____________ FECHA DE REALIZACIÓN:_________________________



___________________________ VoBo del maestro

LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS I

Nombre: determinación de fibrinógeno.

Objetivo: El alumno realizará la determinación del fibrinógeno como una técnica más que valora el sistema decoagulación de un individuo.

Material: Sustancias:Capilares azules. plasma citratadoMechero de Bunsen.Baño María.Pipeta Pasteur.Perilla de seguridadTubos de ensayo.Tubo con citrato de sodio 3.8%.

Introducción:

El fibrinógeno es una globulina grande, pertenece a l grupo de proteínas fibrilares. Las cifras normales de esteen plasma oscilan entre 200 y 500 mg por 100ml (en promedio 300 mg). Por exposición a la trombina elfibrinógeno pierde dos péptidos, quedando un monómero de fibrina que se polimerizan a base de puentes dehidrógeno, el reforsamineto final de la fibrina polimerizada se debe al factor XIII (factor estabilizador de lafibrina), que crea enlaces covalentes dentro del polímero de fibrina.

El fibrinógeno aumenta en sangre en varios estados como: inflamación mieloma múltiple, nefrosis, embarazo.

El fibrinógeno de la sangre puede disminuir en los trastornos que se acompañan del paso a la circulación degrandes cantidades de tromboplastina tisular, que produce la transformación generalizada del fibrinógeno en

fibrina sin trombosis local. El tejido placentario, la decidua y el tejido pulmonar son muy ricos entromboplastina tisular; los cuadros clínicos de disminución de fibrinógeno (fibrinogenopenia) son:a) obstétricos: aborto incompleto, retención de restos placentario etc.b) consecutivos a intervención sobre el pulmón: decorticación por engrosamiento de la pelura, extirpación de

un tumor, etc.c) transfusión de sangre incompatible.d) quemaduras extensas.e) cáncer de próstata.f) síndromes trombohemoliticos microangiopáticos

Estos casos pueden producirse hemorragias mortales si la cifra sanguínea de fibrinógeno no se restablecemediante transfusión de concentrados de fibrinógeno. En el síndrome de fibrinogenopenia adquiridadisminuyen al mismo tiempo las plaquetas y los factores V y VIII.

Fibrinogenopenia congénita: Esta enfermedad se hereda como un rasgo recesivo no ligado al sexo. No es raroque los padres sean consanguíneos, en esta la insuficiencia no es absoluta.

Es probable que la enfermedad se traduzca por sangrado anormal de las heridas que tocan a los grandesvasos: al nacimiento, por el cordón umbilical; más tarde, después de traumatismos u operaciones.Habitualmente el sangrado de los vasos pequeños es normal en estos casos, es combatido por lavasoconstricción y trombos de plaquetas.



Sin embargo en algunos casos de fibrinogenopenia congénitas los cortes y traumatismos ligeros pueden producir pueden producir hemorragias rebeldes. El fibrinógeno en suero fisiológico por vía intravenosa, esmás eficaz que la sangre fresca completa para combatir el sangrado en los fibrinogenopénicos.

El tiempo de coagulación de la sangre completa y el tiempo de protombina resulta prolongados; pero eltiempo de sangrado, la prueba del torniquete y las pruebas de producción de tromboplastina resultannormales. El tiempo de trombina se prolonga y la retracción del coágulo es inadecuada. En una hemorragia

por fibrinogenopenia se encuentran cifras plasmáticas inferiores a 100 mg por 100ml (habitualmente menosde 80mg por 100ml). Todos estos resultados son correspondientes al la fibrinogenopenia.

El fibrinógeno es producido por el hígado y en las enfermedades hepáticas graves puede disminuir ligeramente su concentración en plasma, aunque este descenso raras veces basta para producir hemorragia.De hecho las enfermedades hepáticas menores pueden aumentar el fibrinógeno en plasma.

Puede presentarse un descenso rapidísimo del fibrinógeno plasmático hasta cifras de hemorragia, en la atrofiaamarilla aguda, bien sea por toxemia gravídica o por intoxicación con tetracloruro de carbono, cloroformo ofósforo. Cerca del 75 por 100 del fibrinógeno inyectado abandona la circulación al cabo de seis días.

Desarrollo:1.-Tomar la muestra de sangre venosa y colocarla en un tubo con citrato de sodio al 3.8% (tubos vacutainer azules).2.- Centrifugarla durante 5’ y separar el plasma en un tubo seco y limpio3.-Llenar las ¾ un capilar seco (azul) y sellar por un lado, evitando que la muestra se queme.4. Centrifugar como si se tratara de un hematocrito5.-sellar el otro extremo del capilar y llevarlo a incubar a 58° C durante 15 minutosProcura que el agua del baño maría cubra la muestra.6.- Transcurrido el tiempo de incubación, poner en la microcentrifuga durante 5’ .7.-Con una regla medir el total de la muestra y lo que corresponde al fibrinógeno (precipitado blanco) enmm, con éstos datos realizar el siguiente cálculo:.

Altura del fibrinógeno en mm_______________________________X 100 ( 48.3) = mg/ dl

Altura total del plasma en mm

Conclusiones:

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NOMBRE DEL ALUMNO:__________________________SEM. Y GPO.____________

FECHA DE REALIZACIÓN:________________________

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VoBo del maestro

practica

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