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Genómica y Proteómica
Evolución del diseño de vacunas
Noemí Párraga Niño
Instituto de Biotecnología y Biomedicina
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Desarrollo de vacunas
• Estudio proteínas extracelulares: - Adhesión celular
- Invasión células huésped- Detección condiciones físicas y químicas- Generación señales apropiadas
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Estrategias de búsqueda
• Genómica: técnica clásica
– Clonación genes– Sobreexpresión– Purificación– Modelos animales
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Estrategias de búsqueda
• Proteómica:1.- Bioinformática: predicción de proteínas
de superficie
Ej. Programa PSORT
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Estrategias de búsqueda
• Proteómica:2.- Subproteoma de membrana:
- Fracción membrana plasmática- Extracción proteínas- 2D Electroforesis- Espectrometría de masas
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ESTRATEGIA GENERAL PARA EL ANÁLISIS DEL PROTEOMA
1ª Dimensión:
Isoelectroenfoque2ª Dimensión,
geles prehechos
Tinción con nitrato de plata
Análisis por MS, MALDI-TOF
Análisis de imagen
Digestión tríptica
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High Mr
Low Mr
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Estrategias de búsqueda
• Proteómica:3.- Surfoma: identificación proteínas
expuestas en la superficie bacteriana
Importancia surfoma: tan solo el 6,5% proteínas de membrana están expuestas
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Surfoma
• Pionero: Manuel Rodríguez-Ortega
Estudio Streptococcus grupo AImportancia en humanosModelo animal conocido
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Surfoma
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Surfoma
• Identificación 72 proteinas:- Proteinas ancladas a membrana con motivos LPXTG-like- Lipoproteinas- Proteinas transmembrana- Proteinas secretadas
Identificación 4 proteinas citoplaasmáticas
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Surfoma
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Surfoma
Proteína M: tasa de supervivencia 90%
Buena diana como posible vacuna