INMUNIDAD CELULAR

Materia: InmunologíaCarrera: FarmaciaFlavia SacerdotiAño:2015

Objetivo de este seminario

• Repasar las generalidades del sistema inmune

• Conocer las formas de evaluar la respuesta celular in vivo e in vitro.

¿CUALES SON LAS CELULAS DEL SISTEMA INMUNE?

¿CUALES SON LAS FUNCIONES DE LAS CELULAS DEL SISTEMA INMUNE?

¿Qué vamos a ver hoy?

In vivo: • Pruebas funcionales

Pruebas para evaluar

la inmunidad celular:

In vitro: • Pruebas funcionales• Pruebas no funcionales

Pruebas in vitro

No Funcionales

Funcionales

Proliferación celular

-por mitógenos

-por antígenos

Citotoxicidad

-ADCC

-CDC

Detección de sustancias liberadas

-Bioensayos

Citometría de Flujo

Inmunofluorescencia

Pruebas in vitro

No Funcionales

Citometría de Flujo

Inmunofluorescencia

UTILIDADES: Caracterizar poblaciones celulares

* Detección de tipos celulares Diagnóstico y clasificación de leucemias y linfomas

* Caracterización fenotípicaEvaluación del pronóstico en cáncer

* Evaluación número total de linfocitos Pronóstico de pacientes con HIV

* Relaciones LT/LB, LT CD4+/ CD8+ Estado inmunitario en pacientes transplantados

Citometría de flujo

Debe encontrarse en forma de suspensión monodipersa

MUESTRAS

Imunofluorescencia

Pruebas in vitro

Funcionales

No Funcionales

Citometría de Flujo

Inmunofluorescencia

Funcionalidad de LT: Bioensayos,ELISA,ELISPOT

Detección de sustancias liberadas (Respuesta efectora)

-ADCC (Citotoxicidad mediada por Ac)

Citotoxicidad (Respuesta efectora)

-por antígenosProliferación celular (linfocitaria) (Activación)

¿Cómo se cultiva una célula?

Condiciones esterilidad para evitar contaminaciones con bacterias y hongos fundamentalmente

Proliferación por antígenos

Co-cultivo de Células presentadoras de antígenos (CPA) con LT

Evalúa: Funcionalidad de LT específicos de memoria

contra una antígeno determinado

LINFOCITO T o B

CPA

ANTIGENO

5-7 días

Proliferación de Linfocitos

ADCC (Citotoxicidad mediada por anticuerpos)

BIOENSAYO

Evalúa la funcionalidad biológica de una molécula determinadaEjemplos:

• Proliferación inducida por citoquinas (proliferación de LT por IL-2)

• Citotoxicidad de una molécula (TNF-α produce citotoxicidad de células fibroblasticas, L929)

• Funcionalidad de anticuerpos (anti TNF-α inhibe la funcionalidad del TNF- α)

Pruebas para evaluar la inmunidad celular

Pruebas in vivo

Funcionales Intradermo-reacción

Hipersensibilidad Retardada

Intradermo-reacción

Prueba de Mantoux, tuberculina o PPD

Inoculación del Ag

Intradérmico

LT reconoce el Ag y libera

citoquinas que actúan sobre el endotelio

Reclutamiento de macrófagos y

leucocitos INFLAMACION

Evalúa la respuesta celular (activacion de CPS y linfocitos de memoria)

ante el Mycobacterium tuberculosis

MUCHAS GRACIAS!