MICROBIOLOGÍA EXPERIMENTAL 1515GRUPO 07

CUESTIONARIO PREVIO

P9. Técnicas de Aislamiento de Microorganismos

1.- Describe las diferentes técnicas que te permiten obtener colonias aisladas.

2.- Investiga la composición y uso de los siguientes medios de cultivo:a. Agar Nutritivob. Agar Sal y Manitolc. Agar EMB

este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.

Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas

Fórmula (en gramos por litro)

  Peptona  10.0

  Lactosa 5.0

  Sacarosa 5.0

  Fosfato dipotásico 2.0

  Agar 13.5

  Eosina 0.4

  Azul de metileno 0.065

Si las bacterias fermentan lactosa o sacarosa, acidifican el medio y la eosina vira dando lugar a la aparición de colonias oscuras, de color rosado a verde brillante (Ej: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter). Las bacterias que no fermentan ni lactosa ni sacarosa originan colonias claras o transparentes (Ej: Salmonella, Proteus, Pseudomonas).

d. Agar Sabouraud Rosa de Bengalae. Agar para anaerobios según Brewerf. Medio de tioglicolato con rezarsurina

3.- ¿Qué método se emplea para poder separar esporas de células vegetativas?4.- Menciona métodos que empleados para obtener condiciones de incubación en anaerobiosis.5.- Investiga el funcionamiento de la Jarra de Gas Pack. Explica detalladamente el fundamento, incluyendo reacciones involucradas en el mismo.6.- ¿Cuáles son las principales características de los microorganismos anaerobios? ¿Qué medios se emplean para cultivarlos?7.- ¿Qué métodos se emplean para conservar cepas?8.- ¿Qué es la estreptomicina?

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