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MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO EN FRUTAS Y HORTALIZAS FRESCAS
UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA.
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.
Dr. Iván Salmerón.Nolbertha Corral Soriano
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Erwinia carotovora.
Pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae. Siendo estas del grupo de los coliformes. NOM-112-SSA1-1994 Bienes y Servicios. Determinación de
bacterias coliformes. Técnica del numero mas probable (NMP)
Proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana presente en los tubos con crecimiento
positivo
Densidad esperada es 1 bacteria X 10ml de
liquido o X g de alimento solido
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FUNDAMENTO.
Bacterias coliformes Fermentan la lactosa
Incubadas a 35 ± 1°C durante 24 a 48 horas.
Resultando una producción de ácidos y gas el cual es manifestado en forma de turbidez.
Bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos.
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REACTIVOS.
Solución reguladora de fosfatos.
Caldo lactosado
Caldo lauril sulfato triptosa
Caldo lactosa bilis verde brillante
Medio selectivo de mayor concentración.
Medio selectivo de enriquecimiento.
Medio confirmativo.
Preparación de muestra
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PROCEDIMIENTO.
10 ml de Caldo lactosado.
1ml de la dilución primaria inicial NOM -110
10 ml de Caldo lauril sulfato triptosa.
Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas
PRUEBA PRESUNTIVA.
10 ml de la dilución primaria inicial (NOM- 110)
Realizar diluciones según se necesite.
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PROCEDIMIENTO.
Tubos con presencia de gas
10 ml de caldo lactosa bilis verde brillante.
PRUEBA CONFIRMATIVA.
Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas
Después del tiempo de incubación de la prueba presuntiva
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Dilución 10-1
Dilución 10-2
Dilución 10-3
Índice del
NMP/100ml
0 0 1 3
0 1 0 3
1 0 0 4
1 0 1 7
1 1 0 7
1 1 1 11
1 2 0 11
2 0 0 9
2 0 1 14
2 1 0 15
Los resultados se expresan como numero de bacterias /g o ml
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De los tubos positivos, se puede sembrar en el agar selectivo MacConkey e incubar a 37 ºC por 24 h.
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios facultativos.
Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae en este agar.
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FUNDAMENTO DEL AGAR.
Peptona
Lactosa
Sales biliares y cristal violeta
Desarrollo de los microorganismos.
Hidrato fermentable
Inhibidores de Gram positivos
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Agar MacConkey
Agar MacConkey con Erwinia carotovora
Pequeñas colonias de color rojo o rosa
profundo