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Diagnóstico microbiológico de las hepatitis virales
Juan Carlos RodríguezS. Microbiología
Hospital General Universitario de Alicante
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Hepatitis A. Características generales� Provoca enfermedad aguda en mayor frecuencia al aumentar la edad: en niños es frecuente la infección y generalmente es asintomática
� No cronifica nunca� En el 1% de los casos se produce hepatitis fulminante
� Transmisión fecal-oral� Existe vacuna eficaz
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Hepatitis A
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Hepatitis A
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Hepatitis A
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Hepatitis A
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Hepatitis B. Características generales� En la mayoría de los casos provoca una infección asintomática, pero en otros se presenta como una enfermedad aguda
� En algunos casos puede cronificar (5-10%) y llegar a cirrosis y a carcinoma hepático. Si hay transmisión materno-fetal, el porcentaje de persistencia es del 80%.
� Transmisión a través de sangre, fluidos biológicos, vía sexual y materno-fetal
� Existe vacuna eficaz
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Hepatitis B
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Hepatitis B
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Hepatitis B
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Hepatitis B
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Hepatitis D. Características generales� Es un virus defectuoso� Necesita la presencia de HBsAg en el suero para poder replicarse
� Puede provocar coinfección (se asocia a un elevado porcentaje de hepatitis fulminante) o sobreinfección (suele cronificarse y evolucionar a formas graves)
� Se transmite igual que la hepatitis B, pero en nuestro medio se da casi exclusivamente en ADVP
� No hay vacuna
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Hepatitis D
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Hepatitis D
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Hepatitis C. Características generales� Infección aguda, generalmente asintomática.� Cronifica el 85% de los casos, con evolución a cirrosis y a carcinoma
� Se transmite igual que la hepatitis B, pero la transmisión sexual es poco eficiente (< 5% de los casos)
� Afecta al 2-4% de la población adulta� No hay vacuna� Principal causa del transplante hepático
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Hepatitis C
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Hepatitis E. Características generales� Infección generalmente importada (India, Méjico y Centroamérica)
� Puede aparecer en trabajadores que trabajan con animales, principalmente cerdos
� Transmisión fecal-oral� No cronifica� No hay vacuna
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Hepatitis E
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Otros virus Características generales� El virus de la hepatitis G (GBV-C) no se demostrado que cause enfermedad en humanos y por tanto no se debe investigar en los pacientes
� Tampoco tiene significado clínico el virus TT
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Hepatitis AMarcadores serológicos� Ig M: Aparece en la infección aguda y se mantiene 3-6 meses, por lo que es el que se emplea en el diagnóstico. Se detecta mediante ELISA
� Ig G: Indica contacto previo con el virus. Sólo útil en estudios de prevacunación y seroprevalencia. Se detecta mediante ELISA
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Marcadores serológicos. Hepatitis A
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Hepatitis B. Marcadores serológicosActividad viral Infección Buen
pronóstico
HBsAg AntiHBc AntiHBs
HBeAg AntiHBe
AntiHBc (IgM)
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Hepatitis B. Marcadores serológicos� Hepatitis aguda
� Hepatitis curada. Desaparición de HBsAg a los 6 meses.
� Hepatitis crónica: Puede pasar a portador � Portador inactivo. Puede negativizarse el HBsAg o reactivarse la enfermedad.
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Hepatitis B. Marcadores serológicos
HBsAg HBeAg AntiHBc (IgM)
AntiHBc AntiHBs AntiHBe
H. Aguda
+/(-) + + + - -
H. Curada
- - - + + +
H. Crónica
+ + -/+ + - -
Portador + - - + - +
Pre-core + - - + - +
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Hepatitis B. Marcadores serológicos
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Hepatitis B. Marcadores serológicos
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Hepatitis BMarcadores serológicos� HBsAg (Antígeno de superficie):
� Llamado antígeno Australia� Aparece en la fase aguda y si la evolución es favorable, desaparece en 6-8 semanas
� Si se mantiene a los 6 meses indica infección persistente que puede derivar en hepatitis crónica o en un estado de portador sano (sin replicación vírica ni lesión hepática)
� Se detecta en suero mediante ELISA y existe una técnica confirmatoria de neutralización
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Hepatitis BMarcadores serológicos� Anti HBs (Anticuerpo frente al antígeno de superficie): � Indica recuperación de la enfermedad� Aparece a los 3 meses de la infección aguda si el paciente se cura
� Confiere protección contra la reinfección� Es el único presente en vacunados� Se detecta mediante ELISA
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Hepatitis BMarcadores serológicos� Anti HBc (Anticuerpo frente al antígeno del core): � Se realizan dos determinaciones por ELISA: Anticuerpos totales y IgM
� Los anticuerpos totales están en todas las fases de la enfermedad pero no protegen de la reinfección
� La Ig M-AntiHBc es el primer anticuerpo que aparece en la fase aguda y puede mantenerse 12-18 meses. También puede encontrarse en algunos pacientes con hepatitis crónica
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Hepatitis BMarcadores serológicos� Ag HBe-AntiHBe:
� El Ag Hbe se detecta en suero en fase aguda y en fase crónica activa. Se correlaciona con la replicación viral y la viremia
� Su presencia es signo de elevada contagiosidad y su desaparición es signo de buen pronóstico
� Los pacientes con variantes pre-core defectuosas no tienen este antígeno, pero tienen replicación viral persistente y mal pronóstico
� La aparición de AntiHBe en una infección aguda indica buen pronóstico
� La presencia en hepatitis persistentes con HBsAg indica buen pronostico excepto en la pre-core
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Hepatitis BMarcadores serológicos� Detección de DNA:
� Se detecta de forma cuantitativa por PCR a tiempo real
� Sirve para detectar la viremia y su cuantificación refleja la situación de los hepatocitos. Por tanto sirve para:
� Confirmar resultados serológicos dudosos� Control de los tratamientos� Diferenciar portador de hepatitis crónica
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Hepatitis BMarcadores serológicos� Genotipado y detección de mutantes
� Mediante PCR e hibridación con sondas fijadas en tiras de celulosa (LIPA)
� También por secuenciación.� Es útil para:
� Permite dividir los virus en varios genotipos A-G� Permite detectar las variantes pre-core� Permite detectar cepas resistentes a lamivudina, adefovir y entecavir
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Hepatitis C. Diagnóstico� Técnica de cribado: Detección de anticuerpos totales mediante ELISA
� Los anticuerpos aparecen 4-6 semanas postinfección, pero en algunos casos pueden retrasarse meses.
� Todos los resultados positivos deben ser confirmados
� Pruebas confirmatorias: Inmunoblot o PCR
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Hepatitis C. Diagnóstico
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Hepatitis C. Diagnóstico� La PCR positiva indica la presencia del virus en sangre.
� Útil para:� Diagnóstico de las primoinfecciones (periodo ventana)
� Confirmación de los resultados del ELISA� Seguimiento del tratamiento
� La detección del Ag de core mediante ELISA es una técnica con las mismas utilidades que la PCR
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Hepatitis C. Genotipado� El genotipo del virus influye en la respuesta al tratamiento (1b es el que peor responde)
� Se realiza mediante una amplificación por PCR del fragmento variable y por hibridación posterior con sondas fijadas en un papel de celulosa (LIPA)
� Si no se puede hacer el genotipado por ausencia de virus, puede hacerse serotipado (buscando anticuerpos específicos de cada genotipo)
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Hepatitis C. Genotipado
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Hepatitis C. Genotipado
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Hepatitis C. GenotipadoGenotipo General HIV No HIV
1b 38.4 27.3 41.5
3a 23.1 25.4 22.5
1a 13.5 16.4 12.8
1a/1b 8.5 9.1 8.4
4 9.2 10.9 8.8
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Hepatitis D. Marcadores serológicos� Solo se debe buscar este agente si existe presencia de HBsAg en suero del paciente (hepatitis B aguda, portador o hepatitis crónica)
� Se detecta mediante la busqueda de anticuerpos totales mediante ELISA
� Mediante PCR se detecta la presencia de virus en suero