MANEJO INTEGRADO DE Armillaria sp. y Armillaria gallica EN AGUACATE 1

(Persea americana Mill) EN MICHOACÁN 2

3 Jeny Michua-Cedillo1, Daniel Téliz-Ortíz1, Salvador Ochoa-Ascencio2, María del Pilar Rodríguez-Guzman1, Alejandro Alarcón3, Carlos 4 de León1. 5 1Posgrado en Fitosanidad-Fitopatología, Colegio de Postgraduados, 56230 Texcoco, México. 2Facultad de 6

Agrobiología “Presidente Juárez” UMSNH, 60170 Uruapan, Michoacán. 3Posgrado en Edafología, Colegio de 7

Postgraduados, 56230 Texcoco, México. 8

Autor de correspondencia: michua0206@gmail.com 9

10

Armillaria sp y A. gallica están causando mortandad en árboles de aguacate en 11

Michoacán, principalmente en huertos establecidos en áreas de vocación forestal. El manejo 12

de Armillaria spp. se ha reducido a estrategias culturales y biológicas que incluyen la 13

eliminación de raíces y tocones infectados y aplicación de microorganismos antagonistas. La 14

aplicación de fumigantes químicos no ha dado resultados debido a la complejidad del 15

patógeno. En el presente estudio se realizó el manejo de dos especies de Armillaria en 16

temporada de lluvias. El manejo integrado de la enfermedad se estableció en cinco huertos 17

comerciales e incluyó el uso de inductores de resistencia (acibenzolar-S-methyl), el fungicida 18

sistémico propiconazole y la aplicación de Trichoderma koningiopsis, además se realizaron 19

podas, manejo de nutrición y exposición al sol del cuello de la raíz. La evaluación in vitro de 20

T. koningiopsis sobre las dos especies de Armillaria en diferentes estados de crecimiento dio 21

como resultado la reducción en el número, longitud y pigmentación de los rizomorfos y 22

diámetro de la colonia de las dos especies. El manejo integrado de la enfermedad disminuyo 23

más del 50% la severidad y el 30% de la incidencia en tres de los cinco huertos. Este es el 24

primer registro de Armillaria como patógeno emergente del aguacate y el primer estudio 25

prometedor del manejo integrado como estrategia de control. 26

27

Palabras clave: control biológico, Manejo integrado del aguacate, Armillaria spp., 28

Trichoderma koningiopsis 29

INTRODUCCIÓN 30

31

Armillaria causa daños en bosques, viñedos y plantas hortícolas de todo el mundo 32

(Baumgartner, 2004; Keča, 2009). En México, se ha encontrado en Oaxaca, Morelos, Estado 33

de México y Michoacán en Quercus sp., Pinus hartwegii, Prunus pérsica, Alnus sp., 34

Carpinus caroliniana, Miconia mexicana, Q. xalapensis y Liquidambar styraciflua y Persea 35

americana (Klopfenstein et al. 2014; Michua, 2014). Sin embargo, en Michoacán Armillaria 36

se ha encontrado asociada a árboles forestales sin presencia de síntomas y con presencia de 37

basidiocarpos en la base de árboles derribados o talados. Actualmente las plantaciones de 38

aguacate están desplazando bosques de coníferas en Michoacán (Téliz, 2000; INIFAP, 2012; 39

GIIIA, 2013), lo que favorece la presencia de Armillaria como patógeno, que a diferencia de 40

especies forestales, todos los árboles atacados presentan síntomas característicos de la 41

enfermedad. En Michoacán, se han detectado huertas de aguacate con incidencias del 10 al 42

60% de Armillaria spp en siete municipios (Michua, 2015; en proceso de publicación) y a la 43

fecha se desconocen las especies que causan la enfermedad en este hospedante. La condición 44

como patógeno en aguacate se fundamenta en que Armillaria ha coexistido con especies 45

forestales sin dañarlos, pero al cambiar de hospedante, se manifiestan sobre el aguacate, 46

como un cultivo exótico y manifiesta su patogenicidad. El manejo de Armillaria con métodos 47

culturales tradicionales no resulta eficaz y el control químico sólo disminuye la incidencia; 48

pero no erradica al patógeno (Keča, 2009; Schnabel et al. 2011). Otra estrategia que se ha 49

empleado en países como Alemania es la esterilización del suelo a presión de 120°C durante 50

30 min, sin embargo presenta la desventaja de que esta práctica debe ser anual y esto conlleva 51

a la pérdida de microorganismos benéficos del suelo (Raziq, 1998; Raziq, 2000; West, 1994). 52

La aplicación de fumigantes al suelo difícilmente eliminan las estructuras infecciosas de 53

Armillaria, muchos de estos productos y de fungicidas sistémicos han demostrado baja 54

efectividad en el manejo del hongo. Sin embargo, Adaskaveg et al. (1999) encontraron que 55

el propiconazole es tóxico para el crecimiento micelial in vitro de A. mellea y que cuando se 56

inyecta en los árboles de portainjertos de almendra infectados a una dosis de 440mg de IA/L-57

1 durante de dos estaciones del año se observa reducción en la mortalidad del hospedante. Por 58

otra parte, el uso de inductores de resistencia sistémica adquirida como el Acibenzolar-S-59

Metil tienen la función de activar los genes de defensa de las plantas, esto combinado con 60

otras prácticas agronómicas pueden prolongar la vida productiva del hospedante (Resende et 61

al. 2006). La eliminación permanente del suelo que está en la base del tronco a una 62

profundidad donde se originan las raíces del árbol es una estrategia potencial empleada en 63

viñedos denominada excavación cuello de la raíz (Day y Harris, 2008; Day et. al. 2009; 64

Baumgartner, 2004). Con esta práctica se impide la formación del micelio debajo de la 65

corteza en el cuello de la raíz, la descomposición del tejido subyacente y decadencia del 66

xilema secundario (Baumgartner y Rizzo, 2002). Hongos antagonistas como Trichoderma 67

spp., tienen efectos de parasitismo y lisis celular sobre patógenos del suelo (Elad, 1996; 68

Harman et al. 2004; Cox y Sherm, 2006). Bliss (1951) mencionó que Trichoderma viridae 69

muestra antibiosis sobre Armillaria mellea en suelos previamente fumigados como método 70

de control en cítricos. En condiciones in vitro, existen aislamientos de Trichoderma spp. que 71

tienen efectos sobre cepas de Armillaria como reducción del desarrollo de la colonia, 72

efectúan penetración directa e invasión de las hifas de Trichoderma sobre el patógeno, 73

inhiben la formación de rizomorfos o bien se observa desintegración del contenido de los 74

rizomorfos (Dumas y Boyonoski, 1992; Reaves et al. 1990). Actualmente no existen 75

antecedentes de T. koningiopsis como antagonista potencial sobre Armillaria. Con estos 76

antecedentes, los objetivos de este estudio fueron evaluar el potencial in vitro de Trichoderma 77

koningiopsis sobre A. gallica y Armillaria sp. aisladas de raíces de árboles de aguacate de 78

huertos establecidos en suelos forestales en Michoacán y el manejo integrado de la 79

enfermedad en cinco huertos comerciales de la meseta purépecha de Michoacán. 80

81

MATERIALES Y METODOS 82

83

Aislamientos de Armillaria y Trichoderma 84

85

Las cepas de Armillaria gallica y Armillaria sp. provinieron de dos huertas 86

comerciales de aguacate Hass, La Tepoja (19°38’ 53.72’’ N, 102° 17’11.73’’W, 2324 msnm) 87

y Xhanamba (19º 37’ 92.4’’ N y 102º 18’ 01.7´’W, 2352 msnm) de 30 y 12 has con un 88

porcentaje de 2.4% y 3.6% de incidencia del patógeno respectivamente. El hongo se cultivó 89

en extracto de malta al 2% y se mantuvo en la oscuridad a temperatura ambiente para 90

favorecer el crecimiento de los rizomorfos. El aislado de Trichoderma se obtuvo de raíces de 91

café provenientes de Hueitamalco, Puebla, y se seleccionó debido al que las condiciones de 92

este cultivo son similares a las de bosque y se facilita la adaptación en suelos aguacateros. 93

La identificación de Trichoderma se realizó por amplificación de la región ITS de ADNr con 94

los oligos ITS4 e ITS5 (Hernández, 2014). Las condiciones de amplificación fueron las 95

descritas por Crous et al. (2009). Los productos de PCR fueron secuenciados para 96

comparación con secuencias del GENBANK. 97

98

Confrontación de Armillaria vs Trichoderma 99

100

Las pruebas de antagonismo se realizaron en extracto de malta (EMA Difco®) con 101

colonias de 0, 5, 10 y 15 días de crecimiento de Armillaria sp. y A. gallica. Se colocaron dos 102

discos de Trichoderma de 2 mm con un disco del aislado de Armillaria en medio del 103

antagonista, la separación entre aislados fue de 1 cm y por cada fase de crecimiento se 104

realizaron cinco repeticiones, teniendo un total de 20 cajas Petri de cada especie. Se 105

incluyeron cinco testigos sin Trichoderma para cada especie. Las cajas sembradas se 106

incubaron a temperatura ambiente y en oscuridad. 107

108

Evaluación de la capacidad antagónica 109

110

La capacidad antagónica de las cepas se evaluó midiendo el diámetro de las colonias 111

y numero de rizomorfos en las cinco cajas de cada tiempo de crecimiento por cepa del 112

patógeno. El desarrollo de rizomorfos de Armillaria en extracto de malta en ausencia de 113

Trichoderma en 20 de cajas se observó como testigos. Se utilizó un diseño completamente al 114

azar y una prueba de medias de Tukey con un alfa de 0.05. El análisis estadístico se realizó 115

con el programa SAS versión 9.0. 116

117

Aplicación de Manejo Integrado sobre Armillaria sp. y A. gallica en aguacate. 118

Sitios de estudio 119

Se seleccionaron cinco huertos ubicados en la meseta purépecha del estado de 120

Michoacán pertenecientes a los municipios de Charapan, Los Reyes y Nuevo Parangaricutiro 121

con alta incidencia y severidad de la enfermedad. El tratamiento de manejo integrado se 122

aplicó a 10 unidades experimentales de nivel de severidad 2 y 3, como testigos se evaluaron 123

10 árboles sanos, 10 testigos absolutos de severidad 2 y 10 de severidad 3. 124

El diseño experimental fue en bloques al azar y los resultados se analizaron con el 125

paquete estadístico SAS V.9.0, la comparación de medias se realizó con la prueba de Tukey 126

(α=0.05). Debido a que la variable severidad es cualitativa se realizó el rankeo de los datos 127

de severidad inicial y final. 128

129

Tratamiento de Manejo Integrado 130

La estrategia de manejo integrado incluye manejo químico, los productos aplicados se 131

indican en el Cuadro 1: 132

Cuadro 1. Productos y dosis aplicadas a unidades experimentales (árboles) para el 133

manejo integrado de Armillaria spp. en aguacate 134

Producto Ingrediente activo Dosis Frecuencia de

aplicación

Vía de Aplicación Referencia

Actigard® Acibenzolar-S-Methyl 2gr/50 lt Mensual Foliar Beltrán

(2013)

Star Fluid® Ácido fosfórico 15ml/ lt Bimestral Foliar y al drench

Aliette® Fosetyl-Al 1gr/lt Bimestral Foliar

Prosimicros

484®

Zn, Mg, Mn, B 500gr/árbol Semestral Al suelo

Basfoliar

Kelp ®

Citocininas y auxinas 2ml/lt Bimestral Foliar

Tilt® Propiconazole 1ml/lt Mensual Inyección al tronco Amiri et al. 2008.

135

Además de los productos aplicados, se realizaron prácticas como excavación del 136

cuello de la raíz y limpieza de los troncos y podas sanitarias consideradas como manejo 137

cultural. El control biológico incluyó cinco aplicaciones mensuales de Trichoderma 138

koningiopsis en dosis de 10gr/lt agua. 139

140

RESULTADOS Y DISCUSIÓN 141

142

Evaluación de la capacidad antagónica 143

144

La colonización de Trichoderma koningiopsis sobre las colonias de Armillaria sp y 145

A. gallica fue total, la esporulación fue abundante cubriendo la colonia del patógeno. Las 146

colonias de A. gallica inoculadas con Trichoderma detuvieron su crecimiento en las cinco 147

fechas de la inoculación con Trichoderma y no hubo desarrollo de rizomorfos. En los aislados 148

de Armillaria sp de 15 días de edad hubo presencia de rizomorfos, sin embargo posterior a 149

la inoculación no se observó mayor número de estas estructuras (Figura 1). Las colonias sin 150

inocular de ambas cepas desarrollaron rizomorfos durante las cinco fechas de evaluación, T. 151

koningiopsis inhibió completamente el desarrollo de los rizomorfos de A. gallica, confirmado 152

por la prueba de medias que mostró que existen diferencias estadísticas significativas entre 153

los la inoculación de Armillaria sp y A. gallica con Trichoderma en las cinco fechas de 154

inoculación siendo el tratamiento testigo de Armillaria sp el que produjo mayor número de 155

rizomorfos a los 25 días y que está estrechamente relacionado con la longitud de estas 156

estructuras. 157

158 Figura 1. Media del número de rizomorfos cepas de Armillaria sp y A. gallica en cinco fechas diferentes de 159

desarrollo solas o en presencia de Trichoderma koningiopsis en extracto de malta. 160

161

In the present work T. koningiopsis invaded the whole plate 72 hs after being inoculated with 162

a total growth of 38-40 mm in comparison with Armillaria spp., coinciding with Keča (2009) 163

but contrasting with 12-24 hs required by Trichoderma koningiopsis to cover colonies of S. 164

rolfsii y R. solani, who grew faster than Armillaria spp (Hoyos et al., 2008). Trichoderma 165

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

5

0 ddi 5 ddi 10 ddi 15 ddi 25 ddiArmillaria sp A. gallicaArmillaria sp + T. koningiopsis A. gallica + T. koningiopsis

A B

virens and T. harzianum invaded colonies of Armillaria mellea 5 to 7 days after being 166

inoculated (Mohammad et al., 2008). 167

En las confrontaciones de Armillaria spp y Trichoderma, el antagonista disminuyó 168

ligeramente su crecimiento (35-38 mm) al encontrarse con Armillaria, (Figura 2), este 169

periodo coincidió con el observado en Trichoderma virens y T. harzianum que colonizaron 170

aislados de Armillaria mellea a los 5 y 7 días Mohammad et al. (2008). 171

172 Figura 2. Diametro (mm) de Armillaria sp, A. gallica y Trichoderma koningiopsis cuando crecen solos o 173

confrrontados a los 5 ddi. 174

175

176

A los 15 días de crecimiento, las hifas que emergen de los rizomorfos de las dos 177

especies de Armillaria se degradaron y fueron reemplazadas por el micelio de T. koningiopsis 178

(Figura 3). Resultado similar se registró con Ganoderma. lucidum, Schizophyllum commune y 179

Xylaria hypoxylon como antagonistas de A. mellea y A. tabescens en durazno, induciendo 180

más del 58% de pérdida de viabilidad de las hifas. T. viridae inhibió del 63 al 81% de las 181

colonias de Armillaria ostoyae, A. mellea y A. cepistipes (Keča, 2009). 182

183

184

185

186

187

188

189

190

191

192

193

194

Figura 3. Invasión de Trichoderma koningiopsis sobre colonias de Armillaria sp. a los 15 días de la inoculación 195

(ddi). A. Rizomorfos de la colonia de Armillaria sp no inoculada con T. koningiopsis (testigo); B. Rizomorfos 196

de Armillaria sp. invadidos con micelio de Trichoderma koningiopsis a los 15 ddi (Arm: Armillaria; Trk: 197

Trichoderma koningiopsis) 198

199

T. koningiopsis, colonizó totalmente las colonias de ambas especies de Armillaria, 200

detuvo su crecimiento e inhibió el desarrollo de rizomorfos. De acuerdo a Mohammad et al. 201

(2008) y a los resultados en este trabajo, el crecimiento de Trichoderma fué más rápido que 202

el de Armillaria, esta característica le ayuda a competir eficientemente por espacio y 203

0

10

20

30

40

0 ddi 5 ddi 10 ddi 15 ddi 25 ddiArmillaria sp A. gallica T. koningiopsisArmillaria sp + T. koningiopsis A. gallica + T. koningiopsis

Trk

Arm

nutrientes, también puede romper por lisis las hifas de otros hongos, o bien producir 204

compuestos antagonistas como glucanasas, quitinasas y endonucleasas (Howell, 2003), para 205

colonizar y esporular sobre el patógeno (Figura 4). 206

T. koningiopsis degradó las hifas externas de Armillaria sp. a los 15 días de de 207

inoculadas y afectó la resistencia de los rizomorfos manifestada por la falta de pigmentación 208

en su corteza (Figura 5). T. harzianum, T. polysporum y T. viridae atacaron y penetraron el 209

tejido exterior y melanizado del rizomorfo, y una vez dentro, desintegraron las hifas de 210

Armillaria gallica por penetración directa (Dumas y Boyonoski,1992). 211

212

213

214

215

216

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220

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228

229

230

231

232

233

234

Figura 4 Colonización de Trichoderma koningiopsis sobre cepas de Armillaria sp de 15 días de crecimiento. A 235

y C. Vista anterior de la colonia parasitada; B y D. Vista posterior. E y F. Testigo sano (Armillaria sin 236

Trichoderma) con pigmentación normal de los rizomorfos. 237

238

Las células esclerenquimatosas de los rizomorfos de Armillaria sp y A. gallica son 239

claras a amarillo oscuro, rígidas, bien estructuradas y de forma variable y se observaron hifas 240

del mismo hongo, adjuntas a las paredes de los rizomorfos (Figura 5). 241

A

B

C

D

E

F

242 Figura 5. Corte transversal de rizomorfos de Armillaria sp. sin Trichoderma A. Células esclerenquimatosas 243

rígidas con paredes celulares gruesas; se observan las capas típicas del rizomorfo: corteza con coloración café 244

oscuro y subcorteza de color transparente en el interior de las células con el contorno amarillo claro; B. Corteza 245

y subcorteza del rizomorfo con hifas en el interior y exterior de las capas. 246

247

Trichoderma utiliza la lisis celular para degradar la melanina que contienen los 248

rizomorfos (Mohammed et al. 2008), esto explica la pérdida de pigmentación en la corteza 249

de los rizomorfos en condiciones controladas. Los rizomorfos de Armillaria sp. parasitados 250

por Trichoderma koningiopsis in vitro se degradaron en un periodo de 7 a 10 días (Figura 6). 251

Sin embargo, este período puede variar en campo por las condiciones ambientales. En 252

ensayos in vivo, la eficiencia de Trichoderma para inhibir el crecimiento de Armillaria en 253

madera es más lenta debido a que carece de enzimas lignolíticas (Nicoletti et al. 1993). 254

255

256

257

258

259

260

261

262

263

264

265

266

267

268 269 270

271

Figura 6. Corte longitudinal y transversal de rizomorfos de Armillaria sp. parasitados con Trichoderma 272

koningiopsis. A. Células esclerenquimatosas con paredes degradadas; B. Lisis de las paredes celulares del 273

rizomorfo e hifas de Armillaria en presencia de Trichoderma, se observa ruptura de las paredes de las células 274

del rizomorfo. C. Hifa de Trichoderma emergiendo de las células del rizomorfo de Armillaria sp. 275

276

A B C

La pérdida de rigidez de los rizomorfos se debe a que algunas especies de 277

Trichoderma producen enzimas como celulasas, proteasas, quitinasas, exo y endonucleasas, 278

las cuales rompen los polisacáridos, quitina y glucanos que son responsables de la rigidez e 279

integridad de las paredes celulares (Howell, 2003; Mohammed et al. 2008; Raziq, 2000). T. 280

lignorum en cambio, penetró directamente y desintegró el citoplasma de Rhizoctonia solani 281

independientemente del suministro de nutrientes externos para el hospedante o el patógeno 282

(Howell, 2003). 283

Trichoderma spp en campo inhiben el crecimiento de rizomorfos y del micelio de 284

Armillaria si el antagonista tiene la capacidad de colonizar la rizósfera (Keča, 2009). 285

Especies como T. atriviridae y T. virens se han utilizado como agentes de control contra 286

Rosellinia necatrix (Ruano et al. 2014), mientras que T. harzianum, T. asperellum, T. 287

hamatum y T. rossicum se han utilizado con patógenos como Rhizoctonia solani, Sclerotium 288

rolfsii, Sclerotinia sclerotiorum (Rabeendran et al. 2005; Hoyos et al. 2008); Trichoderma 289

tolera cambios en las condiciones ambientales (Munnecke et al. 1981), y tiene la capacidad 290

de degradar sustancias orgánicas del suelo, resiste a otros microorganismos inhibidores y su 291

versatilidad metabólica produce diversos compuestos tóxicos, antibióticos y enzimas 292

(Papavizas 1985; Howell 2003). 293

294

295

Efecto del Manejo Integrado de Armillaria sp y Armillaria gallica en Persea americana 296

Mill. 297

298

El manejo integrado aplicado a los huertos, es una alternativa para la reducción de la 299

severidad de Armillaria en aguacate. Evidentemente los mejores resultados se obtuvieron en 300

los testigos sanos que no mostraron síntomas al final del experimento y se puede considerar 301

que esta es una alternativa de manejo preventivo sobre la enfermedad. La prueba de medias 302

no mostro diferencias estadísticas significativas, lo que quiere decir que cuantitativamente el 303

p-value mostró un valor de 0.0089 indicando que el comportamiento de la enfermedad fue 304

igual en todos los huertos. 305

Sin embargo, cualitativamente los huertos que tuvieron mejor respuesta al tratamiento 306

fueron Marikita Peshu, Xhanamba y Huecato, en tanto que en los huertos La Cruz y La 307

Tepoja hubo aumento en la severidad de la enfermedad. Los testigos absolutos de severidad 308

dos y tres cambiaron drásticamente de nivel, el 50% de los testigos de la etapa tres murieron 309

en lapsos variables mientras que los de severidad dos se mantuvieron dentro de tres etapas 310

de la enfermedad (inicial-avanzado) (Figura 7 ). El lote de testigos sanos no mostro ningún 311

síntoma de la enfermad y tampoco hubo presencia de árboles sintomáticos adyacentes a estos. 312

313

314 Figura 7. % de severidad inicial y final de Armillaria sp y Armillaria gallica en cinco huertos de 315

aguacate con aplicación un manejo integrado. 316

317

318

La combinación de todas las prácticas aplicadas influye directamente sobre el 319

desarrollo del patógeno, aunque también un factor clave es el manejo del cultivo como 320

ocurrió en las huertas Marikita Peshu y Xhanamba donde se observó que la severidad 321

disminuyo en los dos niveles. La aplicación de Acibenzolar-S-Methyl como inductor de 322

resistencia tiene resultados positivos en las dos etapas de la enfermedad. La eficiencia del 323

ASM, depende del hospedante y del patógeno, por ejemplo, contra Xanthomonas axonopodia 324

pv. citrumelo, se realizan seis aplicaciones al follaje en combinación con oxicloruro e 325

hidróxido de cobre, sin embargo no reducen significativamente la incidencia del cáncer en el 326

follaje y en frutos (Graham y Leite, 2004), comparado con Armillaria, el efecto puede estar 327

influenciado por el desarrollo lento del patógeno dentro del hospedante. En el caso de la 328

enfermedad tizón de fuego del peral, cuando se realizan aplicaciones de ASM en la fase dos 329

se observó una reducción drástica de la severidad representada por un 98.8% y 50% de 330

incidencia después de cuatro y tres aplicaciones respectivamente (Hassan y Buchenauer, 331

2007; Brisset et al. 2000), que coincide con los resultados obtenidos en las huertas Marikita 332

Peshu y Xhanamba y en menor escala en Huecato, La Cruz y La Tepoja donde la incidencia 333

se mantuvo estable en al menos los primeros cuatro huertos y los árboles aumentaron su vigor 334

como en lo reportan Jiménez et al. (2012) en Allium contra Sclerotium sp. Con Trichoderma 335

koningiopsis, los resultados obtenidos coinciden los que se reportan con patógenos como 336

Verticillium dalhiae y Armillaria mellea en hospedantes como Olea europea y Camellia 337

sinensis y la especie T. harzianum donde las aplicaciones disminuyeron en un 95% el número 338

de esclerocios y disminuyen en un 30% la viabilidad del inoculo (Otero et al. 2014; Otieno 339

et al. 2003). En el caso de Armillaria sp y A. gallica, se observó un 50% de reducción de la 340

severidad de la enfermedad, la incidencia no aumento y el vigor de los arboles mejoro en el 341

huerto Marikita Peshu, Xhanamba, Huecato. El Propiconazole, en combinación con el resto 342

de las actividades tuvo buen efecto en el 50% de los árboles evaluados de las dos etapas que 343

concuerda con Adaskaveg et al. (1999), quienes aplicaron inyecciones en campo en 344

Severidad intermedia (S3)

almendros y observaron que se prolongó la vida del hospedante. Resultados semejantes 345

también son mencionados con el cyproconazole que reduce el progreso de la enfermedad en 346

manzano, nuez y kiwi a partir de síntomas iniciales (Thomidis y Exadaktylou, 2012) El resto 347

de las prácticas se aplicaron para mantener en condiciones óptimas al hospedante y en el caso 348

del Fosetyl-Al, se aplicó como inductor de resistencia, estudios realizados por Correa (2016, 349

en proceso de publicación), demuestran que este compuesto no tiene efecto significativo 350

sobre el patógeno. 351

352

4.4. CONCLUSIONES 353

354

El principal mecanismo de inhibición de Trichoderma koningiopsis sobre Armillaria 355

sp. y A. gallica probablemente es competencia por espacio y nutrientes, así como parasitismo 356

directo donde actúan diferentes enzimas y posiblemente metabolitos secundarios, sustentado 357

por la falta de turgencia en los rizomorfos inoculados con T. koningiopsis, así como por los 358

cambios en su pigmentación y por su degradación. Sin embargo a pesar de que se observó 359

cambio en coloración de los rizomorfos, se sugiere prolongar el tiempo de evaluación de esta 360

variable para determinar el efecto del antagonista sobre esta característica del patógeno. 361

Este es el primer registro de pruebas de antagonismo de una especie nativa de 362

Trichoderma con cepas de Armillaria provenientes de aguacate y debido al potencial de T. 363

koningiopsis se está utilizando para hacer el primer estudio de manejo integrado de la 364

enfermedad. 365

El desarrollo in vitro de Trichoderma fue más rápido que el de Armillaria, lo que 366

influyó en la inhibición del desarrollo del patógeno y lo convierte en una opción eficaz de 367

control biológico preventivo y curativo en campo. 368

La aplicación del manejo integrado resulta eficiente en la etapa dos de la enfermedad 369

y como preventivo pero cabe mencionar que además de las estrategias empleadas en el 370

presente experimento, es recomendable que los productores tengan una serie de prácticas que 371

contribuyan a la disminución de la severidad de la enfermedad. 372

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