LABORATORIO Nº 1EL MICROSCOPIO

Prof. Lab.: José D. RomeroINTRODUCCIÓN

El mundo biológico tiene muchísimos aspectos que se nos escapan a la vista del ojo humano. Estos aspectos incluyen una infinidad de organismos y sus características que se lograron apreciar debido a la aparición de un instrumento muy útil inventado por Galileo Galilei en 1610 que fue llamado microscopio.

El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción.

El tipo de microscopio más utilizado es el microscopio óptico, que se sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio óptico más simple es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos microscopios ópticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.

El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo está compuesto de varias lentes que crean una imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios están dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a través del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las longitudes focales de los dos sistemas de lentes.

Los microscopios ópticos actuales tienen un poder resolutivo de 0,2 µm, unas mil veces la del ojo humano. Entre los microscopios compuestos tenemos: el microscopio estereoscópico, el microscopio de luz, el microscopio electrónico y otros.

El microscopio es un instrumento costoso y delicado que puede dañarse fácilmente por su manejo incorrecto o descuidado. Para evitar esto es necesario conocer cada una de sus partes componentes, la función que desempeñan, así como el manejo adecuado del mismo.

OBJETIVOS1. Identificar las partes que componen el microscopio compuesto y señalar sus respectivas

funciones2. Investigar el uso y cuidado del microscopio compuesto

MATERIALESPortaobjetos y cubreobjetos GoteroPapel lente MicroscopioPapel toalla Papel periódicoDos hebras de hilo (claro y oscuro) Papel milimetradoPinzas Tijeras

PROCEDIMIENTO A. Las partes del microscopio las podemos agrupar en tres sistemas y son los siguientes: sistema mecánico, sistema óptico y sistema de iluminación. Localiza las siguientes partes del microscopio: diafragma, pie, oculares, tubo, condensador, objetivos, tornillo macrométrico, tornillo micrométrico, revólver, foco o lámpara, platina, brazo, carro mecánico, pinzas sujetadoras, tornillo de desplazamiento de la platina, base.

1. Escribe en su informe la función de cada una de las partes señaladas en el microscopio2. Indica las partes pertenecientes al sistema mecánico, óptico y de iluminación de tu

microscopio3. Rotula el esquema del microscopio adjunto

B. Uso del microscopio: RECUERDA: ANOTA LO QUE OBSERVES Y DIBUJA LO MÁS DETALLADO QUE PUEDAS TUS OBSERVACIONES AL MICROSCOPIO. ANOTA ADEMÁS EL AUMENTO AL QUE PUSISTE LA MUESTRA OBSERVADA. a. Prepara una muestra húmeda con una letra de su periódico de la siguiente manera: 1. Coloca la letra en un portaobjetos de manera que quede tal como se lee correctamente, y con

un gotero agrega una gota de agua 2. Coloca el cubreobjetos formando un ángulo de 45º con respecto al portaobjetos y déjalo caer

lentamente hasta que quede en contacto con la preparación

b. Enfoque de la letra: 1. Coloca el objetivo de bajo poder (menor aumento) en una posición que coincida con la

apertura de la platina, lo logrará haciendo girar el revólver hasta escuchar un “clic” 2. Coloca la preparación sobre la platina y sujete bien el portaobjetos. Enciende la lámpara y

regula la cantidad de luz abriendo o cerrando el diafragma 3. Observa los objetivos lateralmente, bájalos lentamente usando el tornillo macrométrico, hasta

que casi toque la preparación. Ahora observa por el ocular y enfoca haciendo girar el tornillo macrométrico en el sentido que eleva los objetivos hasta que la muestra sea visible

4. Gira el tornillo micrométrico en un sentido y otro, hasta obtener un enfoque nítido, con el cual la muestra se ve con más claridad. Rectifica la cantidad de luz necesaria con el diafragma. Dibuja lo que observas

5. Observando a través del ocular, mueve el portaobjetos ligeramente hacia la derecha e izquierda y hacia delante y atrás. Explica qué ocurre al hacer cada uno de los movimientos mencionados _________________________

6. Ahora observa con el aumento que sigue, para ello gira el revólver hasta colocar dicho objetivo en posición. Este paso es de mucho cuidado ya que si no ha realizado bien la operación anterior puedes romper la preparación y dañar la lente del objetivo

7. Observa a través del ocular. La muestra debe ser visible, aunque falte enfoque. Haz la corrección del enfoque usando el tornillo micrométrico. Requiere de menos luz o más luz para observar la muestra?______________. Dibuja lo que observas

8. Una vez finalizado tu dibujo deja el microscopio en posición de trabajo, para esto, gira el revólver nuevamente hasta colocarlo en el objetivo de menor aumento y sube los objetivos girando el tornillo macrométrico.

C. Poder de aumento: El poder de aumento es la capacidad de los lentes de aumentar el tamaño de los objetos que observas. Cada sistema de lentes aumenta el tamaño del objeto el mismo número de veces en cada dimensión que el número grabado en la lente. Localiza los números de aumento del ocular y de cada uno de los objetivos del microscopio. Para calcular el aumento que sufre el objeto observado en bajo poder se multiplica el número del ocular (10X) por el número del objetivo (10X), la ampliación que sufre el objeto cuando se trabaja simultáneamente con estas dos lentes es 100X (100 veces). Determina el aumento que sufre la muestra al ser observada con el objetivo de 40X ____ y de 100X ____.

D. Determinación del tamaño de los objetos microscópicos: Coloca una tira delgada de papel milimetrado sobre la platina del microscopio de tal forma que atraviese por el medio del campo óptico. Enfoque con la lente de bajo poder (10X). Dibuja y determina el diámetro del campo óptico en milímetros ______

Señala las ventajas que obtienes al observar en bajo poder y las ventajas de observar en alto poder Alto poder (40X) Bajo poder (10X) ________________________ _________________________ ________________________ _________________________

E. El poder de resolución: El poder de resolución del microscopio es la capacidad de separar imágenes de objetos que se encuentran muy próximos entre sí, de tal manera que ellos se puedan observar por separado.

Coloca en la platina la letra del periódico. Procede a enfocarla en bajo poder (10X) y luego en alto poder (40X), dibuja lo observado. Nota que la imagen consiste de un número regular de puntos. ¿Qué diferencia observas en cuanto al número de puntos y su proximidad entre sí al observar en bajo y alto poder? El mayor poder de resolución se logra con el objetivo de _________ ¿Qué importancia tiene el poder de resolución al observar la muestra al microscopio?___________________________________

F. Profundidad de campo: La profundidad de campo se refiere al área vertical que se está enfocando cuando el objeto se mantiene en una posición fija. Coloca una gota de agua en el centro del portaobjetos; obten dos hebras de hilo (uno claro y otro oscuro) de 1,5 cm de largo y colócalas de manera que se crucen en el centro de la gota. Anota el orden en que se colocó las hebras de hilo. Procede a enfocar y observa el área donde se cruzan los dos hilos. Realiza observaciones con los objetivos de 4X, 10X y 40X, dibuja lo observado. Al observar la muestra, la posición de los hilos se ve invertida o de la misma manera de como se colocó inicialmente?__________________________ ¿Qué concluyes? ______________________ ¿Qué importancia tiene la profundidad de campo al observar una muestra al microscopio? ____________________________________

CUIDADO DEL MICROSCOPIO1. Al trasladar el microscopio de un lugar a otro, hazlo cuidadosamente transportándolo con

ambas manos, con la mano derecha toma firmemente el brazo y pon la mano izquierda debajo de la base. Debes mantener el microscopio siempre en posición vertical

2. Coloca el microscopio suavemente sobre la mesa para evitar que se desajuste la parte óptica. Nunca lo coloques en la orilla de la mesa

3. Antes de usar el microscopio observa si todas sus partes se encuentran limpias y en buen estado, cualquier daño debe ser informado de inmediato

4. Limpia suavemente la parte óptica con un papel de seda especial (papel de lente). Nunca la limpies con papel toalla, o con un pañuelo, ya que podría dañar los lentes. Esto lo haces antes y después de utilizar el microscopio

5. Mientras no estés utilizando el microscopio mantenlo apagado para evitar dañarlo6. Cuida que los objetivos no se humedezcan cuando se observan preparaciones húmedas7. Coloca el objetivo de menor aumento en su sitio haciendo girar el revólver suavemente

hasta que la lente quede en posición de trabajo tanto al iniciar sus observaciones y al finalizarlas.

Cuidados al terminar de utilizar el microscopio1. Primero apaga la lámpara y luego desconecta el cordón eléctrico y enróllalo2. Quita la muestra3. El objetivo de menor aumento debe quedar en posición de trabajo4. Las pinzas no deben quedar fuera de la platina5. La platina debe quedar limpia y seca6. El cordón del microscopio debe quedar bien enrollado

BIBLIOGRAFÍACorrea, M.1975. Manual de Laboratorio de Botánica General (Bot 100). Tercer Edición.

Universidad de Panamá.Oviedo E., Ivonne del C. 2006. Manual de Prácticas de Laboratorio de Biología Celular y

Molecular (Bio 112). Universidad Autónoma de Chiriquí.

INVESTIGACIÓN1. El microscopio que usted utilizó es simple o compuesto? Explique2. De cada una de las partes del microscopio utilizado, señale sus funciones3. Señale tres ventajas y tres desventajas del microscopio óptico4. ¿Qué características presenta la imagen de un objeto al ser observada con el microscopio

óptico? Mencione tres de ellas5. ¿Cómo se obtienen las imágenes en un microscopio electrónico6. Indique ventajas y desventajas del microscopio electrónico con respecto al microscopio

óptico7. Señala las partes del microscopio indicadas en clase