laboratorio de hemostasia
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Hematología Clínica I
Laboratorio de Hemostasia
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Hemostasia
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Coagulación
Fibrinolisis
Hemostasia
Plaquetas Endotelio
vascular
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Trombina Plaquetas
Endotelio
TROMBO
Sistema fibrinolítico
Lesión
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Formación del tapón hemostático
• 1. Vasoconstricción• 2. Adhesividad y agregación
plaquetaria• 3. Activación del sistema de
coagulación• 4. Activación del sistema
fibrinolítico
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LESION
Adhesividad Plaquetaria
Agregacion Plaquetaria
Relación Endotelio Vascular/Plaquetas
SISTEMA DE FLUJO MEDIO
Fibrina
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Plaquetaria Relación Endotelio Vascular/Plaquetas
Plaquetas SISTEMA DE ALTO FLUJO
Plaquetaria Agregación Plaquetaria Relación
Adhesividad Plaquetaria Agregación
LESION
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SUBENDOTELIO
ADHESIVIDAD PLAQUETARIA
Von Willebrand
GP Ib-IX-V
GP IIb-IIIa
(IIbβ3 )Plaqueta
Alto Flujo >>>
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Farmacología
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Celula Endotelial
fosfolipidos
Fosfolipasa A2
Acido araquidonico
Ciclo-oxigenasa
Prostaciclina
Prostaciclina sintetasa
PG G2 PGH2
Plaqueta
fosfolipidos
Fosfolipasa A2
Acido araquidonico
Ciclo-oxigenasa
Tromboxano A2
Tromboxano sintetasa
PG G2 PGH2
ASPIRINAAINE
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• INHIBIDORES DE LA CICLO-OXIGENASA (COX-1)
• INHIBIDORES DE LA TROMBOXANO SINTETASA
• BLOQUEADORES DE LOS RECEPTORES DEL TROMBOXANO A2
• INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA
• INHIBIDORES DEL ACOPLE AL ADP
• INHIBIDORES DE LOS RECEPTORES PLAQUETARIOS
NIVEL DE ACCION DE LOS ANTIAGREGANTES PLAQUETARIOS
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TROMBINA
COAGULAC. INTRINSECA COAGULAC. EXTRINSECA
ENDOTELIO FACTOR TISULAR
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Serino Proteasa
1
Zimógeno
Serino Proteasa
2
Péptido de activación
MECANISMO DE ACTIVACIÓN EN CASCADA
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Resumen de la cascada
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Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolipidos
X Va CalcioFosfolipidos
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
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Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolipidos
XVa Calcio
Fosfolipidos
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
Ca
ANTITROMBINA
PROTEINA CPROTEINA S
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Cal PreCal=QAPM
XII XIIa
QAPM=XI XIa
IX
VIIIa Calcio
Fosfolip.
XVa Calcio
Fosfolip.
XIIIa
XIII
FIBRINOGENO
VII
F.Tisular Calcio
VIIa
IXa
Xa
Lesión Vascular
F. Tisular
TROMBINAII
FIBRINA S FIBRINA I
TFPI
ANTITROMBINA
PROTEINA C
PROTEINA S
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TROMBINA
ACCION ACCION ACCION COAGULANTE INHIBIDORA ANTIFIBRINOLITICA
PLAQUETAS
FIBRINOGENO
FIBRINA
F V F VaF VIII F VIIIaF XIII F XIIIa
PROTEINA C
PROTEINA Ca
TAFI
INHIBE
ACTIVATRANSFORMA
TrombomodulinaEPCR
Factor V
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Factores Vitamina K dependientes
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Gama carboxilacion
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Información Genetica
Aminoacidos Sintesis Proteica
Pro-Factores II, VII, IX, X, PC, PS, etc.
Carboxilasa FACTORES K DEPENDIENTES
VITAMINA K
DICUMARINICOS
inhibe
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VIDA MEDIA DE LOS FACTORES K DEPENDIENTES
Factor VII Proteina C Factor X Factor IX Factor II Proteina S
6 horas 6 horas 48 horas 30 horas 72 horas 50 horas
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TIEMPO DE PROTROMBINA
Expresion
A. CONCENTRACION
B. TASA
C. INR (Razon Internacional Normatizada)
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Intensidad de la Anticoagulacion
Eve
ntos
Clin
icos
Ventana Terapeutica
Hemor
ragi
asTrom
boembolias
50
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PLASMINATROMBINA
AUMENTA
DISMINUYE
TROMBOSIS
TROMBOSIS
HEMORRAGIA
HEMORRAGIA
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t-PA
PLASMINÓGENO PLASMINA
Prouroquinasa
Uroquinasa
pdfFIBRINA
PK KK
XII
PAI-1
PAI-1
2APHRG
t-PA
Uroquinasa
XII
SK2macroglobulina
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MALLA DE FIBRINA FIBRINÓGENO
PLASMINA
lisislisis
DÍMERO - D PDF
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FIBRINOGENO
A A B B
NH2terminal
COOH terminal COOH terminal
COOH terminal COOH terminal
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E
D
E
E
D
E
DD
E
DD
E DD
ED
DE
E DD
ED
DE
D DD
E
D
D
D D
D
plasmina
plasmina
plasmina
trombina
A + B
F XIIIa
Xfp
Yfp
X0
Y0
DIMERO D
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ENFERMEDADES HEMORRAGICAS
Mecanismos de Hemostasia
InteracciónEndotelio-Plaquetas
Mecanismo Fibrinolítico
Extrínseca (Explosión)
Intrínseca (Ampliación)
Lesión AdhesiónAgregación
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Laboratorio de Hemostasia
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Tiempo de Protrombina
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Equipamiento y Muestra
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Técnica• Se utiliza plasma pobre en plaquetas (PPP) y
tromboplastina cálcica• En un baño a 37ºC se coloca un tubo de vidrio de Khan o
hemólisis• Agregar 50 µ de PPP• Incubar 30 segundos• Agregar 100 µ de Reactivo y disparar el cronometro• Detener el cronometro cuando se visualiza la formación
del coagulo.
Para obtener los resultados en % de actividad es necesario realizar la curva de calibrado donde se interpolan los resultados obtenidos en segundos
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Curva de Calibración
Pool Buffer Porcentaje Tiempo
0,100 ml 0 100
0,70 ml 0,30 ml 70
0,50 ml 0,50 ml 50
0,25 ml 0,75 ml 25
Log de cc (%)
Tpo. (seg)
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RIN
• RIN = Fórmula para expresar el TQuick en
pacientes anticoagulados con ACO que nos
independiza de la tromboplastina de trabajo
• RIN = ( PT pac/ MNPT) ISI
• MNPT: Media Geométrica del tiempo de Quick de 20 normales del día de la calibración de la tromboplastina de
trabajo • PT pac: Tiempo de Quick del paciente
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TP prolongado
• CAUSAS MÁS FRECUENTES DE DÉFICIT
• Avitaminosis K: adquirida, iatrogénica
sindromes de mala absorción, etc.
• Hepatopatías: Obstructiva,funcional.
• Inhibidores.
La anticoagulación con ACO se controla con el RIN
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TP. prolongado
TP Prolongado
Corrección c/plasma Normal
Corrige No corrige
Déficit de factores InhibidoresDosar
Factores
Repetir
Secuencia de Trabajo
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Corrección con Plasma Normal
• El TQuick se puede prolongar por déficit de los factores o por presencia de inhibidores.• Se hace una mezcla de partes iguales del plasma problema y de un normal de concentración
conocida, • se hace el TQuick de la mezcla• Corrige si el valor en % es igual o mayor que el promedio de los TQuick del paciente y el normal• TQuick teórico (%paciente +% normal) 2• Ejemplo de corrección• Plasma problema (P) TQuick de 50%• Plasma normal (N) TQuick de 80%• Mezcla P + N TQuick de 65% o más
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KPTT o APTT
• Es la prueba más sensible• Es la prueba más reproducible• Es sensible a los déficit de factores de fase
de contacto, IX y VIII• Es sensible a inhibidores neutralizantes• Es sensible a inhibidores de interferencia• Es sensible a la heparina
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Fundamento
Se incuba el PPP del paciente con una mezcla de fosfolípidos y un activador de contacto entre 2 a 4 minutos y se recalcifica con CL2Ca 25mM
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Técnica
• En baño termostatizado a 37ºC Colocar un tubo de hémolisis o Khan
de vidrio Agregar 100µl de PPP y 100µl de
Reactivo de aPTT• Incubar según indicación del
fabricante• Agregar 100µl de CL2Ca 25mM y
disparar el cronómetro• Detener el cronómetro cuando
aparece el coágulo
![Page 47: Laboratorio de hemostasia](https://reader030.vdocumento.com/reader030/viewer/2022012922/558a7a1cd8b42ab8028b4689/html5/thumbnails/47.jpg)
Utilidad
El aPTT se utiliza para el seguimiento de pacientes heparinizados con heparina regular
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Algoritmo de corrección
• Índice de Rosner
• (aPTT mezcla + aPTT normal/aPTT paciente).100
• < de 10% corrige
• ≥ de 10% no corrige
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Aplicación del Índice de Rosner
CORRIGE• Dédicit de factores de la vía intrínseca
NO CORRIGE• Inhibidor contra factor • Inhibidor de interferencia • Heparina
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DOSAJE DE FACTORES DE LA VÍA INTRÍNSECA
Es un aPTT modificado
• En un baño termostatizado colocar un tubos de vidrio
• Agregar 50µl de plasma diluido • 50µl de plasma deficiente• 50µl de reactivo de aPTT• Incubar según indicación del fabricante• Recalcificar con 50µl de CL2Ca 25mM• Cronometrar• Interpolar en la curva de calibración
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• Graficar en papel log-log tiempo vs concentración
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Evaluación de la Vía final común
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Tiempo de Trombina• Mide el tiempo que tarda en coagular una alícuota (100µl) de PPP por el agregado de una alícuota (100µl) de trombina de a 37ºC.• Se informa tiempo del paciente/normal• TT prolongado•Afibrinogenemia•Hipofibrinogenemia•Disfibrinogenemia•PDF/pdf muy elevados•Paraproteínas•Heparina
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Criterio de Corrección del TT
• TT de normal al medio N/2• TT de la mezcla P+N• Corrige si el TT de P+N es ≤
TT de N/2
• Ejemplo:TT paciente↑ TT P+N > N/2 TT cálcica Normal 18segTT cálcica Paciente 19seg
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Dimero D
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Dimero D
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Etapa pre analítica
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