Universidad de San Carlos de Guatemala Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia Escuela de Química Biológica Programa EDC

Técnicas alternativas para realizar la Velocidad de Eritrosedimentacion

Wendy Paola Meléndez Mendoza 200810353 Yemsy Aly Pajares Hernández 200817011 Diego Monterroso 200810140

Guatemala 01 de octubre de 2010

Introducción La Velocidad de Eritrosedimentacion consiste en medir la velocidad con la que sedimentan los eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguíneo (Citratado o con EDTA), en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora. La medición de la velocidad de sedimentación globular (VSG) es una prueba para evaluar la respuesta inflamatoria durante la fase aguda de diversos padecimientos infecciosos y no infecciosos. La VSG se incrementa en infecciones agudas y crónicas, necrosis tisular, lesiones malignas, enfermedades de la colágena y reumáticas, niveles séricos anormales de proteínas y embarazo, así como en pacientes con falla renal crónica en hemodiálisis y pacientes con insuficiencia cardiaca congestiva, entre otras. Los factores que afectan la velocidad de eritrosedimentacion, más importantes son las proteínas plasmáticas, especialmente el fibrinógeno y las globulinas. La Albúmina posee un escaso efecto sobre la VSG. (3:16) Los valores normales de referencia son: · Recién nacidos: de 0 a 2 mm/h. · Lactantes: hasta 10 mm/h. · Hasta la pubertad: hasta 11mm/h. · Hombres jóvenes: hasta 10 mm/h. · Hombres adultos: hasta 12 mm/h. · Hombres mayores: hasta 14 mm/h. · Mujeres jóvenes: hasta 10mm/h. · Mujeres adultas: hasta 19 mm/h. · Mujeres mayores: hasta 20 mm/h

Métodos Alternativos

Para medir la VSG se puede realizar con el Método de Westergreen: Ésta consiste en extraer sangre venosa y mezclarla con citrato trisódico al 3.8% como anticoagulante. Luego se vierte en un tubo de cristal de 300 ± 1.5 mm de longitud y 2.55 ± 0.15 mm de diámetro, con una escala graduada en mm de 0 a 200, y se coloca en posición vertical durante 24 horas. Las lecturas en milímetros (a partir del borde superior del plasma y hasta las células) se realizan después de una, dos y 24 horas. (2:2)

Técnica Wintrobe Requiere 1 ml de sangre venosa anticoagulada con EDTA. La sangre se coloca en el tubo de Wintrobe (tubo de vidrio con un diámetro de 3 mm y graduado en mm en una escala de 0 a 10 cm) y se deja reposar a temperatura ambiente durante una hora en un soporte para mantener la posición vertical; al término, se cuantifica la sedimentación en milímetros desde el borde superior del plasma hasta la base de las células. (2:2) Velocidad de micro-eritrosedimentación Consiste en tomar una pequeña muestra sanguínea por punción venosa o en el talón y colectada en un capilar heparinizado para microhematocrito de 75 mm de largo y 1.1 mm de diámetro interno; posteriormente, se coloca en posición vertical durante una hora. La lectura se realiza de la misma manera que las dos técnicas anteriores y el resultado se reporta en mm/hora. (2:2) Aunque los métodos de Wintrobe y Westergreen están validados y tienen un alto grado de confiabilidad, en ocasiones presentan algunas desventajas: 1) requieren la toma de un poco más de un mililitro de sangre del paciente, lo cual es un problema en algunos recién nacidos pretérmino; 2) se requieren tubos diseñados específicamente para tal propósito (se carece de ellos en muchos países en vías de desarrollo) y el resultado con frecuencia demora varias horas; y 3) es una prueba no disponible las 24 horas del día en muchos hospitales de países en vías de desarrollo. La determinación de la VSG mediante capilares con heparina es un método simple, económico y rápido que puede realizarse en la cabecera del paciente pe-diátrico a cualquier hora. Sin embargo, se necesita la punción del paciente sólo para ese propósito, se utiliza un anticoagulante distinto (heparina) al de la técnica de Wintrobe (EDTA) y aún no se valida Método automatizado En la actualidad existen en el mercado muchos sistemas parcial o totalmente automatizados para medir la eritrosedimentación que utiliza soportes especiales y pipetas de material plástico desechable. Estos sistemas aunque basados en el principio descrito por Westergreen, utilizan recipientes cerrados que previenen contra la contaminación ambiental y del personal técnico. En algunos casos los recipientes son los mismos tubos cerrados al vacío que se emplean en el

hemograma y que contienen una cantidad precisa de anticoagulante. Igualmente el llenado de los tubos o pipetas se efectúa mediante bombas peristálticas y otros artilugios que aumentan la rapidez y precisión del llenado y además evitan la contaminación del personal técnico. Un ejemplo del sistema automatizado es el de Sediplast (Plymedco), que utiliza pipetas regladas con citrato sódico, al 3.8 % para un volumen de muestra de 1 mL, el procedimiento que se sigue es muy simple

1. Se destapa el recipiente-base, se llena hasta la marca indicada con la sangre del paciente y se vuelve a tapar.

2. Se introduce la pipeta de eritrosedimentación y automáticamente esta se llena de sangre hasta el enrase 0.

3. Se deja la pipeta en posición vertical durante 1 hora y se lee la longitud alcanzada por la columna de plasma (mm)

Además de este sistema, existen otros que utilizan directamente el tubo de extracción (tubo de hemograma) y así se evitan manipulaciones intermedias. En este caso se utiliza como anticoagulante EDTA. Este procedimiento ha sido adaptado a algunos analizadores hematológicos totalmente automatizados capaces de ser programados para discriminar la relación de la eritrosedimentación sin necesidad de cambiar de tubo. La mayoría de estos sistemas llevan a cabo un mezclado automático con el EDTA, y utilizan sistemas de lectura basados en fotometría de luz infrarroja que cuantifica el proceso de agregación y sedimentación de los eritrocitos en función del tiempo. Al objeto de disminuir el tiempo necesario para colocar las muestras en el analizador incorporan lectores de código de barras, lo que permite procesar más de 200 muestras en 1 hora. Aunque el valor de eritrosedimentación ya se puede conocer a los 10-15 minutos de iniciada la lectura, el resultado siempre viene expresado en milímetros por hora. (1:195)

Conclusiones

1. Los métodos de Wintrobe y Westergreen requiere tubos específicos y un volumen de sangre. Además, en países en vías de desarrollo, son pruebas de poca disponibilidad durante fines de semana o en turnos distintos al matutino.

2. La determinación de la VSG mediante capilares con heparina es un método simple, económico y rápido.

3. La medición de la velocidad de sedimentación globular mediante una muestra de sangre anticoagulada con EDTA y colocada en un capilar sin heparina es una prueba sencilla, barata, muy sensible y con una buena correlación con la prueba de Wintrobe,

4. El método automatizado posee una mayor precisión que los métodos manuales y están basados en el principio descrito por Westergreen

5. Los método que utilizan directamente el tubo de extracción (tubo de hemograma) llevan a cabo un mezclado automático con el EDTA, con el objeto de disminuir el tiempo.

6. En la actualidad el valor de eritrosedimentación ya se puede conocer a los 10-15 minutos.

Bibliografías:

1. VIVES J. & AGUILAR J. (2006) “Manual de Técnicas de Laboratorio en Hematología” España: Elsavier pp. 195

2. LEMUS V. , SIERRA A. (2009) vol. 29, núm. 2"Determinación de la velocidad de sedimentación globular mediante micrométodo comparado con el método Wintrobe", Recuperado de: http://www.amimc.org.mx/revista/2009/29-2/determinacion.pdf

3. MUÑOZ E. (1984) "Fisiología II practicas", Editorial BUHO, Santiago Domingo. pp 80