ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICAREA DE RADIOLOGIA

CURSO DE BIOQUIMICAPRCTICA DE LABORATORIOHIDRLISIS DE LOS TRIGLICRIDOS POR ACCION DE LA LIPASA PANCRETICA

ALUMNOS:Huarcaya Matias, Gilbert AlonsoLizana Salazar, Ayrton George

FECHA DE ENTREGA: 15 de octubre de 2015

1. INTRODUCCIN El trmino lpido se refiere a toda sustancia apolar que sea insolube en agua, pero s en solventes orgnicos como el cloroformo, disulfuro de carbono, ter o etanol caliente.Dentro de ellos se encuentra los triglicridos (grasas), las ceras, los esteroides (estearinas), fosfolpidos y glicolpidos (cerebrsidos, ganglisidos).Entre sus funciones destacan: Componentes estructurales de la membrana. Almacenamiento de carbono y energa. Precursores de vitaminas, cidos biliares y hormonas esteroides. Evitan infecciones y prdidas o entradas excesivas de agua. Termoaislantes.

En los animales, pocos lpidos se encuentran en su forma libre, ya que casi todos se encuentran en complejo con las protenas, los carbohidratos y otras sustancias.Los peces los acumulan en forma de ceras, las pantas en forma de aceites.Los cidos grados determinan las propiedades de los lpidos, aunque no todos los lpidos tengan siempre cidos grasos o los derivados de stos.Un ejemplo son los triacilgliceroles, que generalmente son slidos a temperatura ambiente y constituyen la principal reserva energtica en algunos organismos.Las enzimas lipasas son las encargadas de hidrolizar a los acilgliceroles, aunque cabe destacar que estos son muy especficos al momento de hacerlo ya que actan de modo preferencial sobre los diferentes enlaces ster.En los triacilgliceroles es la lipasa pancretica y sta prefiere cidos grasos de cadena larga de ms de 10 carbonos, por eso normalmente prefieren los cidos grasos de posicin 1 o 3, rpidamente el triacilgliceriol pasa a ser diacilglicerol y sucesivamente pasa a ser monoacilglicerol.La albmina transporta los cidos grasos hacia los dems tejidos, mientras que el glicerol puede viajar libremente por la sangre y ser captado por el hgado, en donde es sustrato para la gluconeognesis.

El papel de las sales biliares en la digestin consiste en disminuir la tensin superficial de las gotas de lpidos, de 500,000 Armstrong de dimetro, originando una emulsin en gotas muy pequeas, permitiendo una mayor superficie de accin a la lipasa y aumentando consecuentemente la actividad enzimtica. Terminado el proceso digestivo, por accin de las sales biliares los productos finales forman complejos de 50 Armstrong de dimetro llamados micelas que son absorbidos, Las sales biliares se absorben en el leon y regresan al hgado por la porta.

2. OBJETIVOS: Ser capaz de explicar en qu consiste la digestin enzimtica de los triglicridos por accin de la lipasa pancretica.

Determinar la presencia de cidos grasos libres mediante la titulacin con hidrxido de sodio.

Explicar la funcin de las sales biliares en la digestin enzimtica de los triglicridos.

3. MARCO TERICO:ENZIMA + SUSTRATO PRODUCTOLipasa pancretica + TriacilglicerolMonoacilglicerol y cidos grasosAl consumir el alimento, en la boca va a haber una primera enzima que degrada las grasas llamada lipasa lingual, sin embargo la actividad de esta enzima es muy baja frente a la cantidad de grasas que consumimos; cuando el alimento llega al estmago, hay un movimiento que va a ayudar a emulsionar las grasas, pero tambin hay una enzima que va a ayudar a digerir las grasas llamada lipasa gstrica.La digestin de las grasas es mayor a nivel del intestino producto de la accin de una enzima llamada lipasa pancretica que se va a liberar junto con el jugo pancretico y las dems enzimas que van a digerir los dems componentes de los alimentos. El hgado va a producir una sustancia que va a ser almacenada en la vescula biliar llamada bilis, en la bilis se encuentran las sales biliares que emulsifican las grasas.

Cuando sometemos una masa de grasa a la accin de las sales biliares, esa masa se va a convertir en trozos mucho ms pequeos de grasa de tal manera que si se suman el volumen de cada uno de esos trozos pequeos nos dar como resultado el volumen total inicial, sin embargo al momento de sumar cada una de las superficies de estos trozos pequeos nos dar un valor mucho ms grande que el de la superficie total inicial, de lo que se puede decir que ha aumentado la superficie de contacto de estos trozos pequeos de grasa; entonces al suceder esto la enzima lipasa pancretica va a poder actuar eficientemente tanto en la parte interna como en la parte externa sobre cada uno de estos trozos pequeos.

4. PARTE EXPERIMENTAL

Siguiendo el protocolo, se prepara la batera de 4 tubos, como muestra la tabla:

1B12B2

mL. Aceite neutralizado 1.0---1.0---

mL. Buffer Fosfato 0,1M pH 8------2.02.0

mL. Sales biliares 0.5 % en buffer 2.02.0-------

mL. Agua destilada 2.03.02.03.0

mL de Pancreatina 1% (en buffer)5.05.05.05.0

Se agitan fuertemente por 1 minuto para posteriormente llevarlo por 40 minutos a 37C (Bao Mara)

Cada 10 minutos se agitan vigorosamente los 4 tubos (simulando los movimientos peristlticos). Pasada 40 minutos se procede a sacar los tubos5. RESULTADOS Se agregan 2 gotas de Fenolftalena y se comienza a titular los tubos con NaOH 0.05N hasta obtener una coloracin rosa, como se muestra a continuacin:

Batera de tubos, rotulados (B1, B2, T2 y T1 respectivamente).

Se anota el gasto en mL. Se resta el gasto de los tubos blancos (B1 y B2) a los tubos T1 y T2 respectivamente.

Se hacen los clculos para hallar los mili-equivalentes acido en cada sistema (1 y 2)

Sistema 1

Sistema 2

6. DISCUSIN DE RESULTADOSEn el tubo T1 hubo mayor generacin de protones con respecto al tubo T2, por tanto la enzima lipasa pancretica tiene mayor accin al degradar las grasas en presencia de Sales biliares 0.5 % en buffer y en menor cantidad con Buffer Fosfato 0,1M pH 8. Se puede observar en los resultados de Meq Acido.

SISTEMA 1SISTEMA 2

7. CONCLUSIONES: La lipasa pancretica ayuda a descomponer los triacilgliceridos que comemos para convertirlos encidos grasos libresymonoacilglicerol. Las sales biliares emulsifican las grasas, as incrementando la capacidad digestiva de la lipasa pancretica y haciendo que haya mayor cantidad de productos.