hierba bruja -...
TRANSCRIPT
Hierba bruja
1. Denominación, sinónimos y equivalencia
Definición: hojas y tallos deshidratados de Kalanchoe pinnata (Lam.) Persoon
(Crassulaceae).
Sinónimos: Cotyledon pinnata Lam., Bryophyllum calycinum Salisb., Bryophyllum germinans
P.Fr.M. Blanco., Bryophyllum pinnatum (L.f.) Oken., Bryophyllum pinnatum (Lam.) Kurz,
Cotyledon calycina A.G. Roth., Cotyledon calyculata Solander., Cotyledon rhizophilla Roxb.,
Crassuvia floripendia Comm. ex Lam., Crassuvia floripendia Comm., Kalanchoe pinnata var.
floripendula Pers., Sedum madagascariense Clus., Verea pinnata (Lam.) Spreng1.
Nombres comunes: hierba bruja, colombiana, prodigiosa, inmortal, flor de aire, hierba
de aire y hoja bruja.
Clasificación taxonómica:
Clase: Equisetopsida C. Agardh
Subclase: Magnoliidae Novák ex Takht.
Superorden: Myrothamnanae Takht.
Orden: Saxifragales Bercht. & J. Presl.
Familia: Crassulaceae J. St.-Hil.
Género: Kalanchoe Adans.
Especie: Kalanchoe pinnata (Lam.) Persoon2.
Colección de los ejemplares botánicos
Sitio de colección: Fundación Universitaria Juan N. Corpas, Jardín Medicinal. Alt. 2554m.,
Bogotá, Colombia.
Referencia geográfica: 4°, 45,722´N 74° 5,644’ O.
No. voucher: 27768 Herbario de la Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia.
2. Descripción botánica
La Kalanchoe pinnata (Lam.) Persoon es una planta suculenta perenne, que crece de 3 a 5 pies
de altura. Es comúnmente conocida como "planta del aire", porque tiene altos tallos huecos y
hojas carnosas de color verde oscuro que son claramente onduladas y adornadas en rojo; sus
flores están agrupadas en panículas terminales; la corola es campanulada y rojiza, con cuatro
lóbulos, con estambres en dos series de cuatro semillas numerosas3.
Los nombres botánicos actuales y validados por el Código Internacional de Nomenclatura
Botánica son: Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken, Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. Sin: Cotyledon
pinnata Lam., Bryophyllum calycinum Salisb., Bryophyllum pinnatum (Lam.) Kurz, Crassula
pinnata L. f4.
Figura No. 1. Vista general de la especie vegetal.
3. Distribución geográfica
La Kalanchoe pinnata (Lam.) Persoon = Bryophyllum pinnatum (Lamarck) S. Kurz, es una planta
nativa de África tropical y Madagascar, según Germosén-Robineau5, introducida y naturalizada
en los trópicos americanos donde es muy común, tanto cultivada, como escapada de otros
cultivos. Está presente en Colombia, Ecuador, Panamá y Venezuela6.
4. Datos agrotecnológicos
No se encuentra información documentada.
5. Uso tradicional
En Suramérica se prepara una bebida para la bronquitis, los resfríos, la tos y el sarampión, a
partir de las hojas. También se sabe que cocidas en poca agua y aplicadas en forma de
cataplasma tratan la erisipela y demás inflamaciones de la piel.
Se prepara un té con la miel de las flores para todos los tipos de tos y la bronquitis. Las hojas
frescas puestas sobre la frente se indican para curar dolores de cabeza y jaquecas, y una vez
aplicadas, producen sudor y alivio. Aplastadas y cocidas en poca agua, se vuelven emolientes,
hemostáticas, vulnerarias y curan dolencias de la piel como forúnculos y úlceras. En infusión
sirven como diurético y se prepara un jarabe que alivia las enfermedades de las vías
respiratorias. Esta especie se usa como resolutiva de abscesos y como antiinflamatoria cuando
sus hojas son calentadas al fuego y aplicadas directamente en la parte enferma 6.
La Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers., es considerada como una panacea por los pobladores del
Amazonas quienes la emplean con diferentes propósitos. Los Creoles utilizan las hojas
ligeramente tostadas contra el cáncer y las inflamaciones, y en infusión como un remedio
popular para aliviar la fiebre. Los Palikur mezclan su jugo con aceite de coco y aceite de
Andiroba, luego la esparcen sobre la frente para curar la migraña y el dolor de cabeza. Los
indígenas Siona la conocen como la “medicina de los forúnculos”, calientan las hojas y las
aplican tópicamente sobre los forúnculos y úlceras de la piel. A lo largo del río Pastaza en
Ecuador, los nativos utilizan una infusión de hoja para huesos rotos y contusiones internas. En
Perú, tribus indígenas mezclan la hoja con aguardiente (ron de caña de azúcar) y aplican la
mezcla a las sienes para el dolor de cabeza; sumergen las hojas y tallos durante la noche en
agua fría y luego la beben para la acidez estomacal, la uretritis y las fiebres. La raíz también es
preparada como infusión y es utilizada para la epilepsia. Otras tribus en el Amazonas exprimen
el zumo de hojas frescas y la mezclan con la leche de las madres lactantes.
A lo largo de Suramérica, la Kalanchoe pinnata ha tenido una larga historia sobre su uso.
Comúnmente se denomina “hoja de milagro” y “hoja de vida” por sus propiedades curativas
notables. En Brasil la planta se considera como sedante, vulneraria, diurética, antiinflamatoria y
antitusiva. Se utiliza para todo tipo de condiciones respiratorias relacionadas con el asma y la
tos y la bronquitis. También es empleada para los cálculos renales, las úlceras gástricas, los
trastornos de la piel y el edema de las piernas. Externamente, la infusión de las hojas o el zumo
de éstas se utilizan para los dolores de cabeza, de muela y de oído, en las infecciones de los
ojos, las heridas, las úlceras, los forúnculos, las quemaduras y las picaduras de insectos. En Perú
la planta es empleada para los mismos usos. En México y Nicaragua, la Kalanchoe pinnata es
utilizada con fines similares y también para promover la menstruación y asistir el parto7.
De Wet, et al8, encontraron que las hojas mezcladas con Opuntia stricta y Euphorbia
hypericifolia se emplean para el tratamiento de la gonorrea con alta eficacia.
En un estudio etnofarmacológico realizado en Mauritania, se encontró que la Bryophylum
pinnatum es utilizada por las comunidades del área para aliviar el dolor de pies con el agua de la
decocción de sus hojas. Según la bibliografía consultada por los autores, se emplea para las
úlceras gástricas, la artritis reumatoide, como antitumoral y para aliviar las alergias de las vías
respiratorias9.
6. Descripción microscópica de la droga fresca y deshidratada (hojas)
6.1. Hoja: lámina foliar (ver figuras No. 2a y 2e)
La anatomía de la Kalanchoe pinnata es típicamente la que se espera de una planta con
metabolismo fotosintético CAM. Las epidermis adaxial y abaxial están conformadas por células
de recubrimiento típicas de ovaladas a aplanadas en sección transversal y de contorno de
redondeado a sinuoso en sección paradérmica. La hoja es anfiestomática, con estomas
pequeños y escasos, en sección transversal a nivel o ligeramente prominentes con "pestañas"
que conforman una cámara epistomática de tipo de anisocítico a helicocítico, de tres células
acompañantes, de tamaño diferente, que incrementa en forma helicoidal (ver figuras No. 2b y
2c). La cutícula es casi imperceptible.
Figura No. 2. Secciones anatómicas de hoja y tallo de la Kalanchoe pinnata. (a) Sección transversal de lámina foliar;
(b-c) Estomas en sección paradérmica y transversal; (d-e) Haces vasculares en sección longitudinal y transversal; (f)
Nervio central en sección transversal; (g) Detalle del haz vascular central; (h) Sección transversal del pecíolo; (i)
Vista general de la sección transversal del tallo. Escalas: a, g=50 m; b, d, e=10 m; c=5 m, f, h, i=200 m.
Coloración: astrablue-fucsina; b: tionina.
El mesófilo es indiferenciado, conformado por parénquima fotosintético con grandes vacuolas y
células de mayor tamaño hacia el centro de la hoja. Hay presencia de células con taninos de
color rojizo.
El nervio principal (ver figuras No. 2f y 2g) es de sección transversal planoconvexa, con
curvatura hacia el envés y estructura similar a la del la lámina foliar. Tiene un haz vascular en
arco abierto, un floema con elementos de tubos cribosos y células acompañantes pequeñas que
forman grupos irregulares inmersos entre el parénquima floemático. La zona cambial denota un
crecimiento secundario muy limitado, los vasos no están alineados entre el parénquima
xilemático. Tanto el floema, como el xilema, presentan externamente parénquima tanífero de
color azul a rojizo. Rodeando el haz vascular central, se presentan pequeños haces vasculares
menores.
Todos los nervios vasculares de primer, segundo o tercer orden están inmersos en el mesófilo y
presentan una vaina del haz vascular parenquimática indistinguible del resto de células del
mesófilo, las células de los tejidos vasculares (xilema y floema) son muy pequeñas, de tal
manera que todo el haz vascular (de segundo o tercer orden) es menor que una sola célula
parenquimática circundante (ver figuras No. 2d y 2e).
6.2. Hoja: pecíolo
Es de contorno ovalado (eje mayor horizontal), convexo hacia el envés y ligeramente cóncavo
en el haz. La epidermis es simple, dos a tres capas de colénquima hacia el haz y el envés (con
engrosamientos poco evidentes). La corteza parenquimática presenta taninos, el haz vascular
central está en forma de arco y los haces vasculares son muy pequeños, rodeándolo, de manera
similar al nervio medio de la hoja. Hay células taníferas en tejidos parenquimáticos y
colenquimáticos de la corteza, asociados externamente al floema y al xilema del haz central (ver
figura No. 2h).
6.3. Tallo (ver figuras No. 2i, 3a, 3b y 3c)
En los tallos estudiados se presenta un corcho muy delgado (ver figura No. 3ª), conformado por
células de paredes delgadas suberificadas, derivado de un cambium felógeno subepidérmico,
siendo la felodermis colenquimática. La corteza externa tiene cuatro a cinco capas celulares, es
un colénquima angular, seguido de parénquima. El floema presenta externamente células con
paredes gruesas pero no lignificadas y células taníferas enfrentadas al xilema primario,
posiblemente lleguen a lignificar en estados más avanzados de desarrollo conformando fibras
perifloemáticas en aquellas zonas asignables al floema primario (ver figura No. 3b). El floema, al
igual que en las hojas, es una mezcla de pequeños elementos conductores (células
acompañantes y elementos de tubo criboso) con células parenquimáticas, algunas taníferas. La
zona cambial es de cuatro a ocho células de grosor, continua y forma un anillo en el tallo.
Internamente se desarrolla el xilema secundario formado por vasos con engrosamientos
helicoidales o anulares y perforación simple (ver figura No. 3c). El parénquima xilemático es
abundante e incluye células taníferas. La médula es parenquimática y con células taníferas.
Tanto en corteza como en médula se observan pares de células que evidencian crecimiento en
el grosor del tallo por la división de las células parenquimáticas.
6.4. Caracteres diagnósticos de las muestras analizadas (ver figuras No. 3e y 3i)
Vasos de xilema con engrosamientos principalmente helicoidales (ver figura No. 3i).
Parénquima abundante, conformado por células muy grandes, frecuentemente con
amiloplastos y reacción positiva a lugol (ver figuras No. 3d, 3e y 3f). Se observa reacción
positiva a cloruro férrico de grandes porciones de tejido parenquimático, generando un
halo amarillo (ver figura No. 3g).
Algunas células tiñen fuertemente con azul de metileno. En un solo caso se
evidenciaron cristales prismáticos de oxalato de calcio (ver figura No. 3h). Chauhan y
Pillai10 señalan que estos cristales se presentan en el pecíolo, pero en este estudio no
fueron observados.
La presencia de estomas anisocíticos con tres células acompañantes cuyo tamaño es
desigual (ver figura No. 3b), es también una característica diagnóstica mencionada por
Chauhan y Pillai10, sin embargo la densidad estomática en la Kalanchoe pinnata es baja,
así como la probabilidad de observar fragmentos de epidermis que permitan ver los
estomas en muestra.
Figura No. 3. Secciones anatómicas de tallo (a-c) hoja (d) y caracteres diagnósticos (e-i) de la Kalanchoe pinnata. (a)
Detalle del corcho y la corteza del tallo en sección longitudinal; (b) Detalle de los tejidos vasculares del tallo en
sección transversal; (c) Detalle del xilema en sección longitudinal; (d) Sección transversal de la hoja cortada a mano
alzada y teñida con azul de metileno; (e) Parénquima con amiloplastos; (f) Tinción de amiloplastos con lugol; (g)
Tinción amarilla de tejido con cloruro férrico; (h) Célula parenquimática teñida intensamente con azul de metileno,
con cristales prismáticos de oxalato de calcio; (i) Vasos xilemáticos con engrosamientos espiralados. Escalas: a, b,
d=50 m; c, e, g=10 m; f, h, i=5 m. Coloración: a, b, c=astrablue-fucsina; d, g=azul de metileno; e-h=floroglucinol-
HCl.
7. Composición Química
La Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. (Sin: Bryophyllum pinnatum L.), es rica en alcaloides,
triterpenos, glucósidos, flavonoides, cardienólidos, esteroides, bufadienolidos y lípidos. Las
hojas contienen un grupo de químicos llamados bufadienólidos que son muy activos. Los
bufadienólidos tales como bryotoxina A, B y C son muy similares en estructura así como su
actividad de otros dos glucósidos cardiotónicos, digoxina y digitoxina11.
Además de los anteriores componentes posee:
Fenoles, fenilpropanoides y flavanoides: ácido siríngico, ácido caféico, ácido 4-hidroxi-3-metoxi-
cinámico, ácido 4-hidroxibenzoico, ácido p-hidroxicinámico, ácido paracumárico, ácido ferúlico,
ácido protocatecuico, fosfoenolpiruvato, ácido protocatecuico aislado de las partes aéreas de
las plantas. Las hojas contienen astragalina, 3,8-dimetoxi-4, 5, 7-trihydroxyflavona, friedelina,
epigallocatecquin-3-o-syringato, luteolina, rutina, kaempferol, quercetina, quercetina-3 L-
ramnósido-L-arabino furanósido; quercetina-3-O-diarabinósido, kaempferol-3-glucósido,
kaempferol-3-O-α-L-arabinopiranosil (1→2) α -L-ramno piranósido, quercetin-3-O-α-L-arabino
piranosil (1→2) α -L-ramno piranósido y 4', 5-dihydroxi-3', 8-dimetoxi flavona-7O-β-D-
glucopyranosido. Debido a su ocurrencia restringida y su abundancia en B. pinnatum, los
flavonoides pueden ser un marcador químico de la planta con alto potencial terapéutico.
Triterpenoides y esteroides: la planta contiene α-amirina, α-amirinacetato, β-amirina, β-
amirinacetato, bryophollenona, bryophollona, taraxerol, taraxasterol, Ψ-taraxasterol pseudo,
18-α-oleanano, friedelina, glutinol. El cardienólido y el contenido de esteroide incluye β-
sitosterol, bryophyllol, bryophynol, bryophyllina B , a. bryophyllina (bryotoxina C, bufadienolido
1, 3, 5-orthoacetato), bufadienólido y bersaldegenin-3-acetato, bryophyllina C, bryotoxina A,
bryotoxina B, bersaldegenin-1, 3, 5-orthoacetato, campesterol, 24-etil-25 - hidroxicolesterol,
isofucosterol, codisterol, peposterol, 22-dihydrobrassicasterol, cliona-esterol, clerosterol, 24 -
epiclerosterol, 24 etil - desmosterol, 25-metil-5α-ergost-24-in-3-Beta-ol, ergosta-5-24 -dien-3-
Beta-ol, 25-methyl-ergosta-5-24-dien3-β-ol5Α-stigmast-24-in-3-Beta-ol, (24s) - stigmast-25-in-3-
Beta-ol, (24r) - 5α-stigmasta-7-25-dien-3-Beta-ol (24s) - 5α - stigmasta-7, 25 dien-3-β-ol, 24 (R) -
stigmasta - 5, 25-dien-3β-ol, estigmasterol, quercetagetina, 3-O-(4-O-acetil-α-L-
rhamnopyranosil)-7O- quercetagetina (2-O-acetil-α-L-rhamno pyranosido), 3-O-α-L-rhamno
pyranosyl-7-O-(2-O-acetyl-α-L-ramno piranosido) patuletina, ramno 3-O-(4-O-acetil-α-L-
piranosil)-7-Orhamno piranósido quercetagetina están aisladas de las partes aéreas.
Ácidos grasos, minerales y otros: fracción de ácidos grasos incluye ácido palmítico (89,3 %),
ácido esteárico (10,7 %), restos de ácido araquídico y behénico. La planta también contiene
HCN, ácido oxálico, ácido cítrico, ácido isocítrico, oxalacetato, ácido málico y ácido succínico. La
planta es rica en vitaminas y aminoácidos; ácido ascórbico, riboflavina, tiamina, niacina,
piridoxina, glicina, cisteína, hidrolizado de caseína, ácido glutámico, hidrolizado de proteína,
metionina, tirosina, fenilalanina. El contenido de nutrientes son: carbohidratos, proteínas,
lípidos, ácidos, yodo. La hierba es buena fuente de elementos minerales como Na, Ca, K, P, Mg,
Mn, Fe, Cu, Zn. El contenido de azúcares incluye rafinosa, lactosa, sacarosa, glucosa, galactosa,
fructosa. Planta también contiene alcaloides, taninos, derivados del fenantreno: 2(9-decenyl)-
fenantreno, 2(9-undecenil)-fenantreno, alcanos (C25-35), alcanoles (C26-34), n-triacontano,
hentriacontano11.
8. Control de calidad
8.1. Extracto etanólico de las partes aéreas:
Caracteres Organolépticos: Líquido homogéneo, color verde oscuro y olor alcohólico
característico.
Caracteres fisicoquímicos:
pH. 4.83.
Densidad: 0.8281 g/mL.
% de alcohol: 95 %.
Materia Seca: 2.387 g/100 mL.
8.2. Planta pulverizada
Identificación:
Caracteres organolépticos: olor ligeramente aromático, sabor neutro, color parduzco.
Propiedades fisicoquímicas:
Mejor disolvente: los productos fitoterapéuticos son elaborados, principalmente, con
mezclas hidroalcohólicas. Según Sharapin12, el porcentaje de alcohol más eficiente
para la extracción es al 70 %.
pH en suspensión al 1 % en agua purificada: 5.79.
Materia extraña: no más del 2 %.
Contaminantes: Metales pesados y/o residuos de pesticidas: no exceder los límites
especificados en el Quality Control Methods for Medicinal Plant Materials, texto guía
de la Organización Mundial de la Salud.
Humedad y cenizas: humedad 5.79 %, cenizas 6.31 %, cenizas insolubles en HCl
concentrado 1.09 %.
Conservación: en recipientes herméticamente cerrados que mantengan el contenido
de humedad constante y evite la degradación y contaminación por microorganismos.
Formas farmacéuticas: no se tienen datos reportados.
8.3 Análisis fitoquímico preliminar
Metabolito Secundario
Prueba Patrón positivo Resultado
Car
ote
no
ide
s
Salkowski
Achiote (Bixa orellana L.)
-
Este
roid
es y
trit
erp
eno
ides
Liebermann-Burchard
Colesterol
+
Tan
ino
s
Cloruro férrico
Rutina
+++
Acetato de plomo
Dividivi (Etanol)
+++ Fl
avo
no
ides
Shinoda
5,7,3´,4´,tetrahidroxi flavona
+
Qu
ino
nas
Rodamina
Emodina
-
Amoniaco
Emodina
-
Sap
on
inas
Espuma
Jaboncillo (Sapindus saponaria) (Etanol)
-
Rosenthaler
Jaboncillo (Sapindus saponaria) (Etanol )
-
Car
dio
tón
ico
s
Baljet
Dedalera (Digitalis purpurea) (Etanol)
++
Co
um
arin
as
Erlich
Cumarina
(1,2 Benzopirona)
-
Fluorescencia
Umbeliferona
-
Alc
alo
ides
Valser
Atropina
-
Dragendorff
Atropina
-
Mayer
Atropina
-
Tabla No. 1. Análisis fitoquímico preliminar.
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en las pruebas químicas preliminares se sugiere la
presencia de: esteroides, triterpenos, taninos, flavonoides y cardiotónicos.
9. Datos farmacológicos y clínicos
En un estudio prospectivo multicéntrico observacional, Lambrigger-Steiner, et al13, notaron que
en 78 pacientes embarazadas, la administración por 14 días de tabletas de 350 mg de B.
pinnatum, daba como resultado una mejoría en los desórdenes del sueño.
Kalanchoe pinnata presenta algunas propiedades y acciones documentadas por Investigación:
analgésica (calmante del dolor), anti-alérgica, anti-anafiláctica (reduce las reacciones alérgicas),
anti-inflamatoria, antitumoral, antiulcerosa, antibacteriana, antihistamínica, antifúngica,
antiviral, depresora del sistema nervioso central, febrífuga (reduce la fiebre) gastroprotectora
(protege el tracto gástrico), inmunosupresora (suprime algunas células inmunes),
inmunomoduladora (modula algunas células inmunes hiperactivas), relajante insecticida,
muscular y sedante6.
En un estudio en modelo animal (en ratas), Bopda, et al15, demostraron el efecto
antihipertensivo del extracto de la Kalanchoe pinnata, la disminución de la presión sanguínea se
evidenció de manera dosis dependiente.
En un estudio realizado en Nigeria por Salami, et al16, se observó la actividad antitusiva y
antiasmática del extracto acuoso de las hojas de Bryophyllum pinnatum (= Kalanchoe pinnata).
Los cobayos sensibilizados con Ovalbumina, los cuales fueron tratados con Bryophyllum
pinnatum por 21 días consecutivos, fueron expuestos a 0.2 % aerosol con histamina en una
cámara de vidrio. Se midieron la viscosidad del moco producido, la morfometría de la pared
traqueal, además del conteo de células blancas y linfocitos. Los ataques de tos fueron contados
antes y después de la exposición aguda de aerosol de ácido cítrico a los cobayos tratados (x 7
días) con extracto. Se estimó la cantidad de expectoración coloreada con fenol rojo después de
la aplicación por 7 días de Bryophyllum pinnatum. Las dosis de 200 y 400 mg/kg/día (x 21 días)
de Bryophyllum pinnatum incrementan significativamente el tiempo disnea preconvulsiva
experimentada por los cobayos. Bryophyllum pinnatum y el salbutamol (0,5 mg/kg/días x 21 d)
redujeron la viscosidad del moco en el grupo sensibilizado a valores comparables con los
controles. Los conteos de células blancas y linfocitos y la morfometría traqueal no fueron
significativamente alterados. Ambas dosis también redujeron significativamente los accesos de
tos pero solo con la dosis de 400 mg/kg/día inhibieron significativamente la expectoración de
fenol rojo. En conclusión, Bryophyllum pinnatum demostró propiedades antitusivas y
antiasmáticas en este modelo animal. Estos resultados apoyan los usos de Bryophyllum
pinnatum en la medicina tradicional nigeriana.
Patil, et al17, mostraron el efecto antidiabético del extracto de diclorometano de la Kalanchoe
pinnata en ratas. Las ratas se volvieron diabéticas con estreptozotocina. Dicha fracción
disminuyó la glucemia de 228 mg/dl a 116 mg/dl.
En un estudio clínico controlado aleatorizado, doble ciego con placebo, en 20 pacientes,
Bestchart, et al18, determinaron que la administración de 350 mg por día de Bryophyllum
pinnatum mejoró la hiperactividad de la vejiga en mujeres postmenopáusicas.
El alto contenido de saponina justifica el uso de los extractos para detener el sangrado y en el
tratamiento de las heridas. Las saponinas tienen la propiedad de precipitar y de producir
coagulación de glóbulos rojos. Algunas de las características de las saponinas incluyen
formación de espumas en soluciones acuosas, actividad hemolítica, propiedades de enlace de
colesterol y amargor. Estas propiedades le otorgan importantes actividades medicinales a los
extractos de Bryophyllum pinnatum. Los taninos tienen propiedades astringentes, aceleran la
cicatrización de heridas e inflamación de las membranas mucosas. Estos quizás, explican por
qué algunos curanderos de medicina tradicional en el sureste de Nigeria a menudo utilizan
hierbas en el tratamiento de heridas y quemaduras. La Dra. Amalia y cols.19, investigaron la
actividad antiinflamatoria del extracto fluido de las hojas contra el edema causado por
carragenina en ratas. Se confirmó que el extracto líquido con 4,5 % de sólidos totales en dosis
de 100 mg/kg de peso tiene un efecto antiinflamatorio. Algunos compuestos de bryophyllina
han mostrado un alto valor terapéutico contra el cáncer y contra células cancerosas. El
bersaldegenin-1, 3, 5-orthoacetato inhibe el crecimiento de células cancerígenas en varias líneas
de cáncer.
En otro estudio se evaluó el efecto antiinflamatorio de 2-(3,4-dihidroxyfenil)-3, 5,7-trihidroxi-4h
H fenilcromen-4-ona aislada del tallo de la Kalanchoe pinnata (Lam.)Pers., utilizando el modelo
de inflamación aguda en pata de rata suiza albina induciendo edema. Algunos flavonoides a
dosis de 200 y 400 mg/kg, y el medicamento de síntesis con capacidad antiinflamatoria
indometacina a 10 mg/kg o el vehículo fueron administrados oralmente antes de la inyección
del compuesto pro-inflamatorio. La sustancia ensayada mostró actividad antiinflamatoria
significativa contra edema en la pata, inducido por carragenina, mostrando actividad
importante a la máxima dosis de 400 mg/kg. En estos análisis, la fracción de flavonoides en
general fue más activa a una dosis de 400 mg/kg20.
Un nuevo derivado esteroideo, el estigmast-4, 20 (21), 23-trien-3-ona y otros cuatro
compuestos fueron aislados por Azafal, et al21, de las hojas de Bryophyllum pinnatum. La
estructura de este nuevo esteroide fue aclarada y se estableció por métodos espectroscópicos
estándar. El modelo de edema inducido en la pata de rata por carragenina se utilizó como
modelo anti-inflamatorio y por otra parte el modelo de la actividad analgésica inducida por
ácido acético. Se encontró que este nuevo compuesto esteroideo fue activo en la reducción de
la inflamación (% de inhibición 87,29 y 84,45, respectivamente) en comparación con el
diclofenaco. Además, se demostró protección en un 75 y 72 % en la actividad analgésica por el
ensayo de inducción a contorsión de ratones por ácido acético. En conclusión, el porcentaje (%)
de inhibición contra la inflamación por edema de la pata de la rata inducida por carragenina y el
porcentaje (%) de protección contra contorsiones inducidas por ácido acético mostradas por el
nuevo compuesto reveló que la actividad analgésica y anti-inflamatoria del extracto acuoso
Bryophyllum pinnatum son principalmente debido a la presencia de este compuesto esteroideo.
Schuler, et al22, demostraron que el jugo de las hojas de Bryophyllum pinnatum inhibe las
contracciones inducidas mediante la estimulación con campos eléctricos utilizando vejigas de
porcinos. El máximo efecto relajante se obtuvo a una concentración al 10 % del jugo.
Coutinho, et al23, comprobaron el efecto inmunosupresor del extracto acuoso de las flores de la
Kalanchoe pinnata. Flavonoides tipo quercetina inhibieron la mitogenesis de células T y la
producción de IL-2 y IL-4.
Mohan, et al24, encontraron que el extracto seco de la Kalanchoe pinnata mostró un efecto
inhibitorio in vitro sobre la peroxidación lipídica. Los radicales generados in vitro fueron barridos
efectivamente por la administración del extracto de manera dosis dependiente.
El extracto crudo de hojas y tallos de la Kalanchoe pinnata produjo un efecto citotóxico
significativo sobre artemia salina. Adicionalmente se evidenció actividad antibacteriana sobre
cepas Gram+. En un estudio similar también se evidenció una baja actividad antimicrobiana del
extracto clorofórmico de las hojas de la Kalanchoe pinnata25, 26.
De acuerdo con Joseph, et al27, la Kalanchoe pinnata posee propiedades, entre otras, como las
siguientes:
Antibacteriana: la hoja y el jugo o extracto de la hoja han demostrado una significativa actividad
antibacteriana in vitro sobre S. aureus, E. coli, Shigella, Bacillus y Pseudomonas, incluyendo
varias cepas de múltiples bacterias resistentes.
Anticáncer: algunos compuestos de la Kalanchoe pinnata han marcado valor terapéutico contra
el cáncer especialmente contra las células cancerosas, según Supratman, et al28, el
Bersaldegenin-1, 3,5-ortoacetato inhibió el crecimiento de células cancerosas en líneas de
cáncer de varios tipos.
Anti-alérgica: además de sus propiedades antibacterianas, los usos tradicionales de la Kalanchoe
pinnata para las dolencias de las vías respiratorias superiores y la tos se podría explicar por
investigaciones que demuestran que el zumo de la hoja tiene una potente actividad anti-
histamina y anti-alérgica. En un estudio in vivo (en ratas y conejillos de indias), el zumo de la
hoja fue capaz de proteger contra reacciones anafilácticas inducidas químicamente y la muerte
por el bloqueo selectivo de los receptores de histamina en los pulmones.
Anti-inflamatoria: otros trabajos in vivo confirman que Kalanchoe puede reducir la fiebre y
proporciona actividad anti-inflamatoria, analgésica y efectos de relajación muscular. Sus efectos
anti-inflamatorios se han atribuido al efecto inmunomodulador y al efecto inmunosupresor27.
Se ha encontrado que el extracto acuoso de la Kalanchoe pinnata, es eficaz en modelos para
reducir las reacciones anafilácticas agudas. En el presente estudio, se investigó el efecto de la
Kalanchoe pinnata y de sus flavonoides quercetina (QE) y quercitrina (QI) aislados en la
activación de los mastocitos in vitro y por otra parte, se empleó un modelo murino para valorar
la enfermedad alérgica de las vías respiratorias in vivo. El tratamiento con la Kalanchoe pinnata
y QE in vitro inhibe la degranulación y la producción de citoquinas de las células cebadas
derivadas de médula ósea seguido de la reticulación por IgE/FcɛRI, mientras que el tratamiento
con QI no tuvo ningún efecto. Del mismo modo, el tratamiento in vivo con la Kalanchoe pinnata
y QE produjo una disminución en el desarrollo de la hiperreactividad de las vías respiratorias, la
inflamación de las vías respiratorias, metaplasia de células caliciformes y la producción de IL-5,
IL-13 y TNF. En contraste, el tratamiento con QI no tuvo ningún efecto sobre estos parámetros.
Estos hallazgos demuestran que el tratamiento con la Kalanchoe pinnata o QE es eficaz en el
tratamiento de la enfermedad alérgica de las vías respiratorias disminuyendo la hiperactividad
aérea (HA) e inflamación, lo cual proporciona nuevas perspectivas sobre las funciones
inmunomoduladoras de esta planta29.
Wächter, et al30, demostraron que el jugo de las hojas de Bryophyllum pinnatum y una fracción
derivada rica en flavonoides inducen relajación miometrial.
Nayak, et al31, comprobaron la actividad cicatrizante del extracto etanólico de la Kalanchoe
pinnata en ratas. El porcentaje de reducción del área de la herida fue de 86.33 %.
Adicionalmente se observó un aumento en la concentración de hidroxiprolina.
En un estudio in vitro, Jaeger, et al32, obtuvieron que el extracto en acetona de la Kalanchoe
pinnata, mostró actividad antiviral frente a los virus HSV 1 y HSV 2.
En un estudio precedente, se informó de la acción inmunosupresora del extracto acuoso de la
Kalanchoe pinnata en ratones. En el presente estudio, se observa un efecto protector de la
Kalanchoe pinnata sobre el estado de shock anafiláctico fatal, así mismo sobre la
inmunopatología Th2 inducida, y la identificación de su componente activo. Los ratones
tratados diariamente con la Kalanchoe pinnata por vía oral durante la hipersensibilización con
ovoalbúmina fueron protegidos contra la muerte cuando se enfrentan con el alérgeno, en
comparación con el 100 % de mortalidad en el grupo no tratado. Una sola dosis intraperitoneal
3 horas antes de la exposición fue parcialmente eficaz. La protección por el suministro vía oral
de la Kalanchoe pinnata fue acompañada por una reducción de la producción de anticuerpos IgE
específicos de OVA, reducción de la eosinofilia y alteración de la producción de la IL - 5, IL - 10 y
las citocinas TNF - α. In vitro, la especie previene la degranulación de mastocitos inducida por
antígenos y actúa sobre la liberación de histamina. El tratamiento oral con la flavonoide
quercitrina aislado de la Kalanchoe pinnata detuvo la anafilaxia fatal en el 75 % de los animales.
Estos hallazgos indican que el tratamiento oral con la planta inmunosuprime eficazmente las
respuestas inmunes de inducción pro-anafilácticas. La protección alcanzada con quercitrina,
aunque no es máxima, sugiere que este flavonoide es un componente del extracto de la
Kalanchoe pinnata muy eficiente contra esta reacción alérgica extrema33.
La importancia de algunos flavonoides sobre la actividad antileishmania de la Kalanchoe pinnata
se demostró previamente por el aislamiento de quercitrina, un potente flavonoide contra
leishmania. En un estudio realizado por Muzitano, et al36, el extracto acuoso de hojas de la
planta (Crassulaceae) proveyó un kaempferol di - glucósido, llamado kapinnatosido, identificado
como kaempferol 3 - OAL - arabinopiranosil ( 1! 2) α– L rhamnopyranosido (1). Además, dos
flavonoles y flavonas glucósidos inusuales ya se ha informado, la quercetina - 3 - OAL
arabinopiranosil ( 1! 2) α L- ramnopiranósido (2) y 40,5 - dihidroxi - 30,8- dimetoxiflavona 7 -
OBD- glucopiranósido (3), fueron aislados. Sus estructuras se determinaron mediante análisis de
mono y 1H bidimensional y los experimentos espectroscópicos de RMN de 13C y de masas
MALDI -HR. Dada su incidencia restringida y su abundancia, el flavonoide (2) puede ser un
marcador químico para esta especie vegetal de gran potencial terapéutico. Los tres flavonoides
fueron probados por separado contra amastigotes de Leishmania amazonenis en comparación
con quercitrina, quercetina y afzelin. La estructura de tipo aglicona de la quercetina, así como
una unidad de ramnosil ligada en C- 3, parecen ser importantes para la actividad contra
leishmania.
Muzitano, et al35, demostraron que la quercitrina aislada de la Kalanchoe pinnata tiene un
efecto potente antileishmania (IC50= 1 ug/ml).
De acuerdo con Germosén-Robineau5, se emplea la hoja machacada para el dolor de cabeza
aplicada sobre la frente; para el resfrío y la tos, el zumo de la hoja por vía oral. Estudios
preclínicos con extractos de la hoja indican actividad sedante del SNC, aumenta el nivel de ácido
gamma amino butírico GABA provocando relajación del músculo esquelético. Los extractos
acuosos y etanólicos de la planta fresca inhibieron in vitro la actividad inmunomoduladora en el
modelo de proliferación linfocitaria experimental; la incubación de las células en el extracto
produjo un bloqueo de la respuesta proliferativa a la interleuquina- 2, que permaneció durante
todo el periodo de cultivo, aún en ausencia del extracto, con respuesta dosis-dependiente.
Un extracto de la hoja en solución salina de Bryophyllum pinnatum fue investigado para
sustentar su uso tradicional como neurofarmacológico. Cuando se probó en ratones, produjo
una prolongación, dosis-dependiente, de inicio y duración de la hipnosis inducida por
fentobarbital, asimismo la reducción de actividades exploratorias en el modelo de inmersión y
de evasión de la cabeza del ratón. Por otra parte, utilizando el modelo de coordinación
muscular, se observó la agilidad en las pruebas de pantalla, de tracción y de escalada inclinadas
dependiente de la dosis. Además, se retrasó el inicio de la convulsión en tanto ataques
inducidos por estricnina y picrotoxina, además de una protección mínima contra las
convulsiones inducidas por picrotoxina.
El extracto acuoso de las hojas de Bryophyllum pinnatum posee efectos antinflamatorios,
analgésicos y antidiabéticos, de acuerdo con un estudio in vivo realizado por Ojewole36. Estos
resultados confirman algunos de sus usos tradicionales en África.
En un estudio clínico en 14 mujeres en trabajo de parto, Gwehenberger, et al37, hallaron que
una solución de Bryophyllum pinnatum inhibió contracciones espontáneas de manera
concentración dependiente. El estudio confirmó la actividad tocolítica de la especie.
Torres-Santos, et al38, demostraron que el tratamiento con el extracto de hojas por vía oral
tiene un efecto fuerte sobre la leishmaniasis murina. Adicionalmente, se presenta evidencia que
la leishmaniasis en humanos podría ser controlada por el suministro oral. Un hombre de 36 años
de edad con una leishmaniasis cutánea activa se trató oralmente con 30 gramos de hojas de la
Kalanchoe pinnata por 14 días, durante el tratamiento la lesión paro su crecimiento y disminuyo
suavemente, no se observaron reacciones toxicas o efectos adversos. El estudio reporta por
primera vez que la planta contiene sustancias potencialmente activas y seguras para el
tratamiento oral de la leishmaniasis cutánea humana.
Las hojas de la Kalanchoe pinnata poseen actividad hepatoprotectora según un estudio
realizado por Yadav, et al39. En este estudio se determinó la capacidad protectora del jugo
concentrado de hojas y del extracto etanólico de las mismas. Por una parte, empleando un
modelo in vitro, utilizando hepatocitos aislados para establecer el nivel de enzimas
(transaminasas GTP y GTO) producidas por la aplicación de tetracloruro de carbono (CCl4), por
otra parte, in vivo empleando ratas que fueron protegidas por el suministro del jugo y de
extracto de las hojas en concentraciones de 200 mg/kg, solos o en combinación con CCl4 y éste
mismo administrado solo mostrando su profundo efecto tóxico. Se analizó la sangre después de
varios días con el objeto de identificar la presencia de altos niveles enzimáticos y de bilirrubina.
Además, se realizaron cortes histopatológicos para observar el posible daño hepático producido
por la adición de CCl4 así como el efecto protector de la Kalanchoe pinnata. De otro lado, se
trabajó un modelo in vivo empleando ratas inducidas al sueño con un barbitúrico (tiopental
sódico) y envenenadas con CCl4. En este modelo se midió la duración del sueño como un índice
de metabolismo del hígado como parámetro funcional relacionado con el tiempo de sueño. En
el modelo de los hepatocitos aislados se observó el efecto tóxico al presentar altos niveles de
GOT y GPT en el grupo envenenado con el CCl4 en comparación con el grupo normal. Con el jugo
concentrado y el extracto hidroalcohólico los niveles de estas enzimas se redujeron
significativamente (p< 0,001) en el caso de GOT, en un 55.55 % y 36.50 % y GPT por 69.57 % y
38.61 %, respectivamente. El sobrenadante (suero) de la sangre centrifugada mostró niveles
significativamente reducidos (p< 0,001) de las enzimas hepáticas SGOT, SGPT, SALP y SBLN. El
jugo concentrado redujo los niveles de estas enzimas en un 51.69, 92.47, 72.50 y 105.50 %,
respectivamente y el extracto etanólico en 29.45, 81.37, 45.82 y 49.00 %. Los estudios
histopatológicos mostraron daño hepático severo en las ratas tratadas con CCl4, en cambio en
los animales tratados el daño fue leve en las estructuras celulares de los hepatocitos
observados. Las ratas inducidas al sueño por tiopental sódico y tratados con el jugo concentrado
y el extracto etanólico redujeron el tiempo de sueño en relación con las que fueron tratadas con
el tetracloruro de carbono. En general se demostró un efecto protector en cada uno de los
modelos utilizados en este ensayo. Especialmente se destaca el poder protector del jugo
concentrado más que del extracto etanólico y la disminución significativa de los niveles de
bilirrubina sugiriendo un tratamiento de la ictericia. De otra manera se confirma el uso
tradicional de las hojas para el tratamiento de esta condición médica.
Supratman, et al28, encontraron 5 bufadienólidos aislados de las hojas de la Kalanchoe pinnata y
la Kalanchoe daigremontiana, los cuales fueron examinados por su efecto inhibidor sobre el
virus del Epstein-Barr, todos los bufadienolidos presentaron actividad inhibitoria y la
bryophylina A mostró la mayor inhibición con un IC50 de 0.4 uM.
En 1995, Da Silva, et al40, investigaron el efecto de un extracto de hoja de la Kalanchoe pinnata
en ratones BALB / c infectados con Leishmania amazonensis. El tratamiento oral con la especie
retrasó significativamente la aparición de la enfermedad en comparación con los ratones no
tratados o aquellos que la recibieron por las vías intravenosa o tópica. Al inicio en las primeras
etapas de infección, las dosis orales diarias de 8 mg previnieron el crecimiento de la lesión y el
efecto fue de larga duración, comparable al Glucantime, fármaco contra la leishmania a la que
se hace referencia. El crecimiento de la lesión disminuyó utilizando el extracto por vía oral y a su
vez, acompañado por una disminución significativa en el número de parásitos viables. El efecto
protector estuvo asociado a la disminución de la capacidad de los animales para desarrollar
hipersensibilidad de tipo retardado y para producir anticuerpos específicos.
En un estudio realizado por Siddharta y Chaudhuri41, se estableció la actividad antiiflamatoria de
la planta Bryophyllum pinnatum L., bajo varios modelos de inducción a edema por carragenina y
otros mediadores, y en particular, se encontró que la fracción metanólica del extracto de las
hojas muestra un efecto inhibidor estadísticamente significativo en el modelo de inflamación de
pata de rata con carragenina a dosis desde 100 mg/kg y más concentrado (hasta 300 mg/kg),
con un porcentaje de inhibición desde la dosis más baja, 53,65 %, hasta 87.80 % a la dosis más
alta.
10. Actividad antimicrobiana
Los resultados obtenidos sugieren que el extracto de la Kalanchoe pinnata, a la concentración
de de 4mg/mL, presenta actividad antimicrobiana contra Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027,
Salmonella tiphymurium ATCC 14028, Klebsiella pneumoniae ATCC 10031, Escherichia coli
ATCC 8739 Y Proteus mirabilis ATCC 43071; En la tabla No. 2, se pueden observar los valores de
los halos de inhibición obtenidos.
Microorganismo ATCC Kalanchoe pinnata
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
10.04 mm
10.05 mm
9.07 mm
_
Estreptococcus faecalis ATCC 29212
_
_
_
_
Salmonella tiphymurium ATCC 14028
9.52 mm
9.51 mm
9.86 mm
9.36 mm
Klebsiella pneumoniae ATCC 10031
11.19 mm
11.79 mm
11.26 mm
11.26 mm
Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 _
_
_
_
Candida albicans ATCC 10231
_
_
_
_
Escherichia coli ATCC 8739
8.78 mm
8.78 mm
8.34 mm
8.74 mm
Proteus mirabilis ATCC 43071
9.46 mm
10.44 mm
9.33 mm
10.35 mm
Tabla No. 2. Resultados de halo de inhibición para la especie vegetal Kalanchoe pinnata.
En las imágenes que se presentan a continuación se observan las placas de petri con halos de
inhibición, se evidencia que el tamaño de los halos de inhibición del extracto frente a las cepas,
son comparables con los valores obtenidos con la tetraciclina a 1mg/Ml para las bacterias y
Fluconazol a 1mg/mL para el hongo. Los controles positivos y negativos correspondieron a lo
esperado según la literatura.
Figura No. 4. Halo de Inhibición de Kalanchoe pinnata frente a Salmonella tiphymurium ATCC 14028
Figura No. 5. Halo de Inhibición de Kalanchoe pinnata frente a Klebsiella pneumoniae ATCC 10031.
Figura No. 6. Halo de Inhibición de Kalanchoe pinnata frente a Escherichia coli ATCC 8739.
Figura No. 7. Halo de Inhibición de Kalanchoe pinnata frente a Proteus mirabilis ATCC 43071
11. Estudios toxicológicos
Luego de relacionar los hallazgos clínicos, consumo de alimento, necropsia y análisis histológico
de órganos recomendados por la OECD (OECD, 407. OECD GUIDELINES FOR THE TESTING OF
CHEMICALS. Repeated Dose 28-Day Oral Toxicity Study in Rodents, 2008). Para búsqueda de
toxicidad durante 28 días; el extracto completo de Kalanchoe pinnata, no muestra toxicidad a
las dosis probadas en el presente ensayo.
12. Referencias bibliográficas
1. Gupta M. Plantas Medicinales Iberoamaricanas. Convenio Andrés Bello. Colombia: CYTED. 2008.
2. Tropicos.org [Internet] [citado 11 junio 2014] Disponible en: http://www.tropicos.org/ 3. Jessica L. Investigation of Kalanchoe Homeobox I (Kh1) Gene in Apical Meristems of
Kalanchoe Pinnatum. Undergraduate Honors Theses. USA: Butler University. 2008. 4. Missouribotanicalgarden.org [Internet] USA: Missouri Botanical Garden; 2014. [citado 11
junio 2014] Disponible en: http://www.missouribotanicalgarden.org/ 5. Germosén-Robineau L. Farmacopea Vegetal Caribeña. 2a edición. Nicargua: Editorial
Universitaria Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, 2005. p. 486. 6. Correa J, Bernal H. Especies Vegetales Promisorias de los Países del Convenio Andrés
Bello. 1a. edición. Tomos I – XII. Colombia: Editorial Guadalupe. 1989. 7. Rain-tree.com [Internet] [citado 11 junio 2014] Disponible en: http://www.rain-
tree.com/plants.htm#.U5oR5fl5Nic 8. De Wet H. Nzama V.N. Van Vuuren S.F. Medicinal plants used for the treatment of sexually
transmitted infections by lay people in northern Maputaland, KwaZulu–Natal Province, South Africa South African Journal of Botany Volume 78, January 2012, Pages 12–20
9. Mootoosamy A, Mahomoodally F. Ethnomedicinal Application of Native Remedies Used Against Diabetes and Related Complications in Mauritius Journal of Ethnopharmacology. 2014.
10. Chauhan M y Pillai A. Microscopic profile of powdered drugs used in Indian system of medicine. Institute of Ayurvedic Medicinal Plants Sciences. GujarAyurved University, Jamnagar India. 2007.
11. Pattewar S. Kalanchoe Pinnata: Phytochemical and Pharmacological Profile. Vol. 3(4). India: Sanjivani Institute of Pharmacy and Research, Kopargaon. 2012.
12. Sharapin N y Pinzón R, 20. Fundamentos de tecnología der productos fitoterapéuticos. CAB – CYTED. 2000.
13. Lambrigger-Steiner C, Simões-Wüst A, Kuck A, Fürer K, Hamburger M, Von Mandach U. Sleep Quality in Pregnancy During Treatment with Bryophyllum Pinnatum: an observational study. Phytomedicine. 2014.
14. Rain-tree.com [Internet] [citado 11 junio 2014] Disponible en: http://www.rain-tree.com/plants.htm#.U5oR5fl5Nic.
15. Bopda O, Longo F, Bella T, Edzah P, Taïwe G, Bilanda D, Tom E, Kamtchouing P, Dimo T. Antihypertensive Activities of the Aqueous Extract of Kalanchoe Pinnata (Crassulaceae) in High Salt-loaded Rats. Jounal Ethnopharmacol. 2014.
16. Salami E, Ozolua R, Okpo S, Eze G, Uwaya D. Studies on the Anti-asthmatic and Antitussive Properties of Aqueous Leaf Extract of Bryophyllum Pinnatum in Rodent Species. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2013.
17. Patil S, Dongare V, Kulkarni C, Joglekar M, Arvindekar A. Antidiabetic Activity of Kalanchoe Pinnata in Streptozotocin-induced Diabetic Rats by Glucose Independent Insulin Secretagogue Action. Pharm Biol. 2013.
18. Betschart C, Von Mandach U, Seifert B, Scheiner D, Perucchini D, Fink D, Geissbühler V. Randomized, Double-blind Placebo-controlled Trial with Bryophyllum Pinnatum Versus Placebo for the Treatment of Overactive Bladder in Postmenopausal Women. Phytomedicine. 2013.
19. Pattewar S. Kalanchoe Pinnata: Phytochemical and Pharmacological Profile. Vol. 3(4). 2012. 20. Chaturvedi O, Joshi A, Krishna B. Pharmacognostical, Phytochemical Evaluation and
Antiinflammatory Activity of Stem of Kalanchoe Pinnata Pers. Department of Pharmacognosy. Vol. 3(4). India: College of Pharmacy. 2012.
21. Afzal M, Gupta G, Kazmi I, Rahman M, Afzal O, Alam J, Hakeem K, Pravez M, Gupta R, Anwar F. Anti-inflammatory and Analgesic Potential of a Novel Steroidal Derivative from Bryophyllum Pinnatum. Fitoteraphy. 2012.
22. Schuler V, Suter K, Fürer K, Eberli D, Horst M, Betschart C, Brenneisen R, Hamburger M, Mennet M, Schnelle M, Simões-Wüst A, Von Mandach U. Bryophyllum Pinnatum Inhibits Detrusor Contractility in Porcine Bladder Strips: a pharmacological study towards a new treatment option of overactive bladder. Phytomedicine. 2012.
23. Coutinho M, Muzitano M, Cruz E, Bergonzi M, Kaiser C, Tinoco L, Bilia A, Vincieric F, Rossi-Bergmann B, Costa S. Flowers From Kalanchoe Pinnata are a Rich Source of T Cell-suppressive Flavonoids. Nat Prod. Commun. 2012.
24. Mohan C, Balamurugan V, Elayaraja R, Prabakaran A. Antioxidant and Phytochemical Potential of Medicinal Plant Kalanchoe Pinnata. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research. 2012.
25. Biswas S, Chowdhury A, Das J, Chowdhury A, Raihan S, Muhit M. Assessment of Cytotoxicity and Antibacterial Activities of the Ethanolic Extract of the Leaves of Elaeocarpus Serratus. Journal Plant Physiol. 2012.
26. Biswas S, Chowdhury A, Raihan S, Muhit M, Akbar M, Mowla R. Phytochemical Investigation with Assessment of Cytotoxicity and Antibacterial Activities of Chloroform Extract of the Leaves of Kalanchoe Pinnata. Journal Plant Physiol. 2012.
27. Joseph B, Sridhar S, Sankarganesh J, Biby T. Rare medicinal plant-Kalanchoe Pinnata. Research Journal of Micropbiology. 2011.
28. Supratman U, Fujita T, Akiyama K, Hayashi H, Murakami A, Sakai H, Koshimizu K, Ohigashi H. Anti-tumor promoting activity of bufadienolides from Kalanchoe pinnata and Kalanchoe daigremontiana x tubiflora. Biosci Biotechnol Biochem. 2001.
29. Cruz E, Reuter S, Martin H, Dehzad N, Muzitano M, Costa S, Rossi-Bergmann B, Buhl R, Stassen M, Taube C. Kalanchoe Pinnata Inhibits Mast Cell Activation and Prevents Allergic Airway Disease. Original Research Article Phytomedicine. 2011.
30. Wächter R, Brenneisen R, Hamburger M, Mennet M, Schnelle M, Worel A, Simões-Wüst A, Von Mandach U. Leaf Press Juice From Bryophyllum Pinnatum (Lamarck) Oken Induces Myometrial Relaxation. Phytomedicine. 2011.
31. Nayak B, Marshall J, Isitor G. Wound Healing Potential of Ethanolic Extract of Kalanchoe Pinnata Lam. Leaf: a preliminary study. 2010.
32. Jaeger M, Cates R, Johnson F, Lamnaouer D, Ohai L. Activity of Acetone and Methanol Extracts from Thirty-one Medicinal Plant Species Against Herpes Simplex Virus Types 1 and 2. Pharm Biol. 2010.
33. Cruz E, Da Silva S, Muzitano M, Silva P, Costa S, Rossi-Bergmann B. Immunomodulatory Pretreatment with Kalanchoe Pinnata Extract and its Quercitrin Flavonoid Effectively Protects Mice Against Fatal Anaphylactic Shock. Vol. 8. International Immunopharmacology. 2008. p. 1616-1621.
34. Muzitano M, Luzineide W, Guette C, Kaiser C, Rossi-Bergmann B, Costa S. The Antileishmanial Activity Assessment of Unusual Flavonoids from Kalanchoe Pinnata. Phytochemistry. 2006.
35. Muzitano M, Cruz E, De Almeida A, Da Silva S, Kaiser C, Guette C, Rossi-Bergmann B, Costa S. Quercitrin: an Antileishmanial Flavonoid Glycoside from Kalanchoe Pinnata. Planta Med. 2006.
36. Ojewole J. Antinociceptive, Anti-inflammatory and Antidiabetic Effects of Bryophyllum Pinnatum (Crassulaceae) Leaf Aqueous Extract. Journal Ethnopharmacol. 2005.
37. Gwehenberger B, Rist L, Huch R, Von Mandach U. Effect of Bryophyllum Pinnatum Versus Fenoterol on Uterine Contractility. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2004.
38. Torres-Santos E, Da Silva S, Costa S, Santos A, Almeida A, Rossi-Bergmann B .Toxicological Analysis and Effectiveness of Oral Kalanchoe Pinnata on a Human Case of Cutaneous Leishmaniasis. Phytother Res. 2003.
39. Yadav N, Dixit V. Hepatoprotective Activity of Leaves of Kalanchoe Pinnata Pers. Journal of Ethnopharmacology. 2003.
40. Da Silva S, Costa S, Mendonga S, Silva E, Moraes V, Rossi-Bergmann B. Therapeutic Effect of Oral Kalanchoe Pinnata Leaf Extract in Murine Leishmaniasis. Acta Tropica. 1995.
41. Siddhartha P. Chaudhuri A. Antiinflamatory Action of Bryophyllum Pinnatum Leaf Extract. Vol. LXI, No. 6. Fitoterapia. 1990.