fermentación de aspergillus ejemplo para sandra.xlsx

Fermentación en matraz Aspergillus Limón 2 Colonia 5

pH 3.5

Día 1 Día 2 Día 3

Absorbancia g/L Absorbancia g/L Absorbancia

CMC -0.111 0.0085878 0.124 0.2882848 0.325

CMC 0.184 0.3596968 0.057 0.2085414 0.259

Control CMC 1.393 1.745 1.704

Xylosa 0.188 0.2941496 0.255 0.367796 0.639

Xylosa 0.172 0.2765624 0.243 0.3546056 0.293

Control Xyl 1.404 1.639 1.599

Pectina 0.521 1.2415621 0.595 1.3977095 0.699

Pectina 0.49 1.176149 0.648 1.5095448 0.693

Control Pec 0.781 0.415 0.342

Unidades enzimáticasDía 1 Día 2 Día 3

g/L UI g/L UI g/L

CMC 0.1841423 0.136401704 0.2484131 0.184009704 0.4882384

Xylosa 0.285356 0.211374815 0.367796 0.272441481 0.5997272Pectina 1.20885555 0.895448556 1.45362715 1.076760852 1.6108296

X Y

Absorbancia

0.068 0.20.381 0.60.715 1.00.893 1.21.290 1.61.542 2.0

Concentración (mg/ml)

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099

Curva de calibración DNS del día 1 al 3 glucosa

Concentración (mg/ml)Linear (Concentración (mg/ml))

Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.60

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 1.237792414263 x + 0.187572866984632R² = 0.986944455679347

Concentración (mg/ml) día 4 al 6, 540nm


Axis Title

Axis Title

Absorbancia

0.05 0.20.309 0.60.604 11.073 1.41.222 1.81.488 2

Absorbancia

0.069 0.20.377 0.60.773 1.41.431 1.81.56 2



0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.60

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 1.237792414263 x + 0.187572866984632R² = 0.986944455679347



Axis Title

Axis Title

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.80

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 1.16956976965544 x + 0.215222253950123R² = 0.958072569642744

Chart Title

Column CLinear (Column C)

Axis Title

Axis Title

Fermentación en matraz Aspergillus Limón 2 Colonia 5

pH 3.5

Día 3 Día 4 Día 5 Día 6

g/L Absorbancia g/L Absorbancia g/L Absorbancia g/L

0.527515 -0.019 0.1640818 0.6 1.86056 -0.022 0.3207368

0.4489618 -0.016 0.1677952 0.26 1.018856 -0.274 -0.3031144

2.107 2.25 2.882

0.7898888 0.066 0.1946716 0.083 0.2168158 0.1 0.23896

0.4095656 0.102 0.2415652 0.135 0.284551 0.12 0.265012

1.997 2.165 2.71 0.1459

1.6171599 0.511 1.2084734 0.551 1.2916494 0.435 1.050439

1.6044993 0.564 1.3186816 0.575 1.341555 0.415 1.008851

0.744 0.806 0.893

Día 3 Día 4 Día 5 Día 6UI g/L UI g/L UI g/L UI

0.361658074 0.1659385 0.122917407 1.439708 1.06645037 0.0088112 0.006526810.44424237 0.2181184 0.161569185 0.2506834 0.185691407 0.251986 0.1866563

1.193207111 1.2635775 0.935983333 1.3166022 0.975260889 1.029645 0.7627

Xilosa Alberto

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099

Curva de calibración DNS del día 1 al 3 glucosa


Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.60

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 1.237792414263 x + 0.187572866984632R² = 0.986944455679347



Axis Title

Axis Title

Absorbancia

0.2 0.0660.4 0.1820.6 0.3870.8 0.579

1 0.7181.2 0.868

1.4 1.1061.6 1.0831.8 1.29

2 1.5753 2.131 3 2.131


0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.60

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 1.237792414263 x + 0.187572866984632R² = 0.986944455679347



Axis Title

Axis Title

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.80

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 1.16956976965544 x + 0.215222253950123R² = 0.958072569642744

Chart Title

Column CLinear (Column C)

Axis Title

Axis Title

UI/g de muestra seca

Celulasas Xilanasas Pectinasas

Día 1 1.37641719192 2.1329640404 9.0358899697Día 2 1.6895436431 2.50150814815 9.886622367Día 3 2.99189861279 3.67509597306 9.8710770101Día 4 0.88277047138 1.16036051178 6.7220621212Día 5 6.49565225589 1.13102948148 5.9402254141Día 6 0.03263407407 0.93328148148 3.8135

Xilosa Alberto

0 1 2 3 4 5 6 70

2

4

6

8

10

12

Aspergillus pH 3.5


Día

Activ

idad

enz

imáti

ca

Absorbancia

0.20.40.60.8

11.2

1.61.8

23

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.50

0.5

1

1.5

2

2.5

f(x) = 0.754305301645338 x − 0.0625246800731264R² = 0.991560647951364

Chart Title

Column OLinear (Column O)

Axis Title

Axis Title

0 0.5 1 1.5 2 2.50

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

f(x) = 1.31453490488335 x + 0.0928244579540707R² = 0.991560647951364

AbsorbanciaLinear (Absorbancia)Absorbancia

Axis Title

Axis Title

0 1 2 3 4 5 6 70

2

4

6

8

10

12

Aspergillus pH 3.5


Día

Activ

idad

enz

imáti

ca

Fermentación en maraz Aspergillus

pH 5.0



CMC -0.161 -0.0509222 0.136 0.3025672 0.043

CMC -0.124 -0.0068848 0.158 0.3287516 0.07

Control CMC 1.276 1.138 1.479

Xylosa -0.016 0.0699128 0.37 0.494204 0.14

Xylosa 0.005 0.092996 0.377 0.5018984 0.131

Control Xyl 1.182 1.042 1.362

Pectina 0.416 0.9653016 0.798 1.7713598 0.635

Pectina 0.436 1.0075036 0.763 1.6975063 0.698

Control Pec 0.708 0.071 0.18


g/L UI g/L UI g/L

CMC -0.0289035 -0.02141 0.3156594 0.233821778 0.2079463

Xylosa 0.0814544 0.060336593 0.494204 0.366077037 0.241388Pectina 0.9864026 0.730668593 1.73443305 1.284765222 1.49388165

X Y

Absorbancia

0.068 0.20.381 0.60.715 1.00.893 1.21.290 1.61.542 2.0


0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099

Curva de calibración DNS


Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n


pH 5.0



0.1918786 0.051 0.1853443 0.174 0.3303982 0.662 0.9058966

0.224014 -0.035 0.0839245 0.207 0.3693151 0.506 0.7219258

1.67 1.975 2.216

0.241388 0.185 0.349681 0.198 0.3666148 0.392 0.6193192

0.2314952 0.128 0.2754328 0.269 0.4590994 0.442 0.6844492

1.567 1.887 2.166

1.4274135 0.635 1.466065 0.613 1.420327 0.553 1.295587

1.5603498 0.667 1.532593 0.619 1.432801 0.553 1.295587

0.463 0.579 0.705


0.154034296 0.1346344 0.099729185 0.34985665 0.259153074 0.8139112 0.6028971850.178805926 0.3125569 0.23152363 0.4128571 0.305820074 0.6518842 0.482877185

1.106579 1.499329 1.110614074 1.426564 1.056714074 1.295587 0.959694074

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

1. Primero se tiene la absorbancia y se resta

de las muestras que se obtuvieron por

duplicado el control de cada sustrato

2. Posteriormente se obtiene la concentración de azúcares en

gramos por litro con la ecuación de la recta que

obtienes de las curbas de calibración de DNS

3. Sacas el promedio de la curva de DNS

4. Obtienes la actividad enzimática en Unidades enzimáticas (s la cantidad de enzima que en una

reacción cataliza la conversión de 1 µmol de sustrato por minuto.

Fórmula: [(g/L de azúcares)(2mL=1.5 de sustrato y 0.5 de Sl´n de enzima )] / [(peso

molecular=0.18)(tiempo =30 minutos)(0.5mL que tomas durante la hidrólisis)]

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

Ejemplo de curva de calibración con diverss concentraciones de azúcares, para interpolar y obtener los g/L de

azucares hidrolizados por las enzimas producidas por los diveross mohos,

utilizando la ecuación de la recta


Celulasas Xilanasas Pectinasas Día 1 -2.37651 6.697361778 81.10421378Día 2 23.615999556 36.97378074 129.7612874Día 3 14.017120963 16.27133926 100.698689Día 4 0.7162368754 18.29036674 87.73851185Día 5 17.363255963 20.48994496 70.79984296Día 6 33.159345185 26.55824519 52.78317407

1. Primero se tiene la absorbancia y se resta

de las muestras que se obtuvieron por

duplicado el control de cada sustrato

2. Posteriormente se obtiene la concentración de azúcares en

gramos por litro con la ecuación de la recta que

obtienes de las curbas de calibración de DNS

4. Obtienes la actividad enzimática en Unidades enzimáticas (s la cantidad de enzima que en una

reacción cataliza la conversión de 1 µmol de sustrato por minuto.

Fórmula: [(g/L de azúcares)(2mL=1.5 de sustrato y 0.5 de Sl´n de enzima )] / [(peso

molecular=0.18)(tiempo =30 minutos)(0.5mL que tomas durante la hidrólisis)]

5. Se obtienen las unidades enzimáticas por gramo o mL

en tu caso ya que es Fermentación en sumergido.Algo importante es que por cada día se va restando la

cantidad de mL, ya que vas extrallendo del matraz.

0 1 2 3 4 5 6 7-20

0

20

40

60

80

100

120

140

Aspergillus pH 5.0


Dia

Activ

idad

enz

imáti

ca5. Se obtienen las unidades enzimáticas por gramo o mL

en tu caso ya que es Fermentación en sumergido.Algo importante es que por cada día se va restando la

cantidad de mL, ya que vas extrallendo del matraz.

0 1 2 3 4 5 6 7-20

0

20

40

60

80

100

120

140

Aspergillus pH 5.0


Dia

Activ

idad

enz

imáti

ca


pH 5.5



CMC -0.129 -0.0128358 0.015 0.158553 0.043

CMC -0.198 -0.0949596 0.149 0.3180398 0.07

Control CMC 1.091 1.374 1.479

Xylosa 0.055 0.147956 0.111 0.2095112 0.14

Xylosa 0.046 0.1380632 0.189 0.2952488 0.131

Control Xyl 1.089 1.289 1.362

Pectina 0.458 0.6767338 0.668 0.9258148 0.635

Pectina 0.516 0.7455276 0.592 0.8356712 0.698

Control Pec 0.622 0.22 0.18


g/L UI g/L UI g/L

CMC -0.0538977 -0.03992422 0.2382964 0.176515852 0.2079463

Xylosa 0.1430096 0.105933037 0.2095112 0.155193481 0.2364416Pectina 0.7111307 0.526763481 0.880743 0.652402222 0.92403565

X Y

Absorbancia

0.068 0.20.381 0.60.715 1.00.893 1.21.290 1.61.542 2.0


0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1

f(x) = NaN x + NaNR² = 0 Curva de calibración (DNS)

Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n


pH 5.5



0.1918786 0.046 0.1794478 0.304 0.4837072 -0.752 -0.7616336

0.224014 -0.001 0.1240207 0.418 0.6181474 -0.858 -0.8866394

1.848 1.6 2.199

0.241388 0.117 0.2611042 0.36 0.577636 0.2 0.36922

0.2314952 -0.022 0.0800428 0.283 0.4773358 0.782 1.1273332

1.764 1.515 1.11

0.8866735 0.559 1.308061 0.785 1.777915 0.55 1.28935

0.9613978 0.595 1.382905 0.795 1.798705 0 0.1459

0.565 0.331 0.7

0.2918


0.154034296 0.15173425 0.112395741 0.5509273 0.408094296 -0.8241365 -0.610471480.175141926 0.1705735 0.126350741 0.5274859 0.390730296 0.7482766 0.5542789630.684470852 1.345483 0.996654074 1.78831 1.324674074 0.717625 0.531574074

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n



Día 1 -0.40287169697 1.06896064646 5.315522404Día 2 1.62073645791 1.42495832997 5.9902385859Día 4 0.80720577441 0.90742804714 7.1577883502Día 5 2.48566525926 2.3799027138 8.0684693603Día 6 -3.05235740741 2.77139481481 2.6578703704

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5

-4

-2

0

2

4

6

8

10

Aspergillus ph 5


día

Activ

idad

enz

imáti

ca

0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5

-4

-2

0

2

4

6

8

10

Aspergillus ph 5


día

Activ

idad

enz

imáti

ca


pH 6.0



CMC -0.126 -0.0092652 -0.005 0.134749

CMC -0.089 0.0347722 -0.064 0.0645272 0.005

Control CMC 1.155 1.415 1.484

Xylosa 0.115 0.213908 0.059 0.1523528 0.048

Xylosa 0.143 0.2446856 0.002 0.0896984 0.066

Control Xyl 1.063 1.326 1.396

Pectina 0.4 0.93154 0.572 1.2944772 0.548

Pectina 0.413 0.9589713 0.61 1.374661 0.599

Control Pec 0.586 0.232 0.237


g/L UI g/L UI g/L

CMC 0.0127535 0.009447037 0.0996381 0.073806 0.146651

Xylosa 0.2292968 0.169849481 0.1523528 0.112853926 0.1501544Pectina 0.94525565 0.70018937 1.3345691 0.988569704 1.29764235

X Y

Absorbancia

0.068 0.20.381 0.60.715 1.00.893 1.21.290 1.61.542 2.0


0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n


pH 6.0



0.226 0.4673428 0.575 1.79867 0.535 1.699646

0.146651 0.62 0.955036 0.115 0.659894 0.633 1.9422548

1.228 2.267 2.101

0.1402616 1.082 0.8786526 0.1 0.13793 1.482 2.3607452

0.1600472 0.247 0.2488121 0.105 0.1417015 -0.028 0.0827592

1.162 2.18 2.046

1.2438348 0.748 3.4025824 1.479 6.4426652 -0.124 -0.2238912

1.3514499 0.722 3.2944536 0.5 2.3712 0.588 2.7371744

0.198 0.811 0.63


0.10863037 0.7111894 0.526806963 1.229282 0.910579259 1.8209504 1.3488521480.111225481 0.56373235 0.417579519 0.13981575 0.103567222 1.2217522 0.905001630.961216556 3.348518 2.480383704 4.4069326 3.264394519 2.7371744 2.027536593

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n



Día 1 0.09532919192 1.71393567677 7.0655472828Día 2 0.67767327273 1.03620422896 9.0768672795Día 3 0.89866942761 0.92013807407 7.9518824141Día 4 3.78343182492 2.99898017845 17.813664781Día 5 5.54625548822 0.63081853535 19.883130249Día 6 6.74426074074 4.52500814815 10.137682963

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0 1 2 3 4 5 6 70

5

10

15

20

25

Aspergillus pH 6.0


Día

Activ

idad

enz

imáti

ca

0 1 2 3 4 5 6 70

5

10

15

20

25

Aspergillus pH 6.0


Día

Activ

idad

enz

imáti

ca

Fermentación en matraz Aspergillus

pH 8



CMC 0.008 0.1502216 -0.001 0.1395098 -0.223

CMC -0.004 0.1359392 -0.139 -0.0247378

Control CMC 0.987 1.607 2.16

Xylosa 0.115 0.267108 0.034 0.1780728 -0.118

Xylosa 0.575 0.77274 -0.029 0.1088232 -0.132

Control Xyl 0.897 1.514 2.046

Pectina 0.411 0.9547511 0.559 1.2670459 0.37

Pectina 0.41 0.952641 0.621 1.3978721 0.364

Control Pec 0.492 0.329 0.671


g/L UI g/L UI g/L

CMC 0.1430804 0.105985481 0.057386 0.042508148 -0.1247146

Xylosa 0.519924 0.385128889 0.1780728 0.131905778 0.0033Pectina 0.95369605 0.706441519 1.332459 0.987006667 0.8619067

X Y

Absorbancia

0.068 0.20.381 0.60.715 1.00.893 1.21.290 1.61.542 2.0


0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

Fermentación en matraz Aspergillus

pH 8



-0.1247146 0.018 0.1464274 0.188 0.3469084 0.138 0.2879434

0.007 0.1334551 0.174 0.3303982 0.092 0.2336956

2.083 1.935 2.748

0.0109944 0.155 0.310603 0.258 0.4447708 0.222 0.3978772

-0.0043944 0.138 0.2884588 0.209 0.3809434 0.142 0.2936692

2.01 1.85 2.508

0.868237 0.506 1.1980764 0.633 1.4621602 0.494 1.1731236

0.8555764 0.548 1.2854112 0.563 1.3166022 1.071 2.3729374

0.722 0.56 0.815


-0.09238119 0.13994125 0.103660185 0.3386533 0.250854296 0.2608195 0.193199630.002444444 0.2995309 0.221874741 0.4128571 0.305820074 0.3457732 0.2561282960.638449407 1.2417438 0.919810222 1.3893812 1.029171259 1.1731236 0.868980444

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n

0.000 0.500 1.000 1.500 2.0000.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

f(x) = 1.1861378341528 x + 0.133495354804493R² = 0.997076331709099



Absorbancia

Conc

entr

ació

n



Día 1 1.06948985859 3.88630060606 7.1286371414Día 2 0.39030208754 1.21113486869 9.0625157576Día 3 -0.76424435017 0.02022222222 5.2817178249Día 4 0.74446860269 1.59346404714 6.6059097778Día 5 1.5279307138 1.86272226936 6.2685885791Día 6 0.96599814815 1.28064148148 4.3449022222

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.00

0.2

0.4

0.6

0.8

1


Absorbancia

Conc

entr

ació

n m

g/m

l

0 1 2 3 4 5 6 7-2

0

2

4

6

8

10

Aspergillus pH 8.0


Dia

Activ

idad

enz

imáti

ca

0 1 2 3 4 5 6 7-2

0

2

4

6

8

10

Aspergillus pH 8.0


Dia

Activ

idad

enz

imáti

ca

fermentación de aspergillus ejemplo para sandra.xlsx

Documents