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I SEMINARIO REGIONAL DE PROTECCIÓN E INNOVACIÓN EN PRODUCTOS NATURALES DE ORIGEN PERUANO EXPERIENCIA DE INVESTIGACIÓN EN RECURSOS VEGETALES NATIVOS Y DOMESTICADOS EN LA UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ REGIÓN JUNÍN - HUANCAYO Ing. Norma Gamarra Mendoza [email protected] Mayo, 2015

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I SEMINARIO REGIONAL DE PROTECCIÓN E INNOVACIÓN EN

PRODUCTOS NATURALES DE ORIGEN PERUANO

EXPERIENCIA DE INVESTIGACIÓN EN RECURSOS

VEGETALES NATIVOS Y DOMESTICADOS EN LA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ

REGIÓN JUNÍN - HUANCAYO

Ing. Norma Gamarra Mendoza [email protected]

Mayo, 2015

Identificación y caraterización morfobotánica de especies y variedades de ajíes de la

provincia de Oxapampa – Región Pasco, 2008 – 2010. Financiado por INCAGRO –

UNCP.

Cultivo en invernadero y campo abierto de ajíes nativos y domesticados en la provincia

de Oxapampa - Región Pasco, 2008 – 2010. Financiado por INCAGRO – UNCP.

Extracción con CO2 - supercrítico y cuantificación de capsaicinoides y carotenoides de

ajíes nativos y domesticados de la Provincia de Oxapampa – Región Pasco. 2008 -

2010 Financiado por INCAGRO – UNCP.

Extracción con CO- supercrítico y cuantificación de antocianinas monoméricas de tres

accesiones de oca de la Región Junín. 2011-2012. Financiado por el CONCYTEC

Formulación de un alimento deshidratado dulce a base de harina de oca morada y

cuantificación del contenido de polifenoles y capacidad antioxidante. 2011-2012.

Financiado por el CONCYTEC

Extracción de glucosinolatos de tres accesiones de mashua (Tropaelum tuberosum) y

capsaicinoides de venas de ají panca y amarillo, para la formulación de un

bioinsecticida y su aplicación en el cultivo de maca, quinua y retama (no cultivable) de

la Región Junín. 2013-2016. Financiado por el FINCYT – UNCP. En ejecución.

Extracción de carotenoides de zanahoria, ají panca y amarillo para la pigmentación

natural de truchas Arco Iris en la Región Junín. 2014 – 2016. En ejecución.

Identificación y caraterización morfobotánica de especies y variedades

de ajíes de la provincia de Oxapampa – Región Pasco, 2008 – 2010.

Financiado por INCAGRO – UNCP.

INTRODUCCIÓN

El Perú es uno de los principales centros de origen y diversificación

de una gran cantidad de especies de ajíes (Capsicum), así lo

refrendan los estudios paleobotánicos y representaciones

culturales de la época pre inca, que fueron evidentes en sus

manifestaciones religiosas, funerales y artísticas (cerámicos,

textiles, etc.). En las excavaciones de Huaca Prieta, Valle de

Chicama (La Libertad) se encontró C. baccatum var. pendulum y

var. Baccatum; y en Ucayali, Pucallpa encontraron C. Chinense.

Escaso conocimiento de

especies y variedades de ajíes

nativos y domesticados en la

provincia de Oxapampa

Identificar y evaluar las

características morfobotánicas

de las diferentes colecciones

de ajíes

Clasificar o agrupar en

especies las diferentes

colectas de ajíes.

UBICACIÓN GEOGRÁFICA PARA LA COLECCIÓN DE AJÍES

ESPECIES DE AJÍES (Capsicum) NATIVOS Y CULTIVADOS COLECTADOS EN LA PROVINCIA DE OXAPAMPA REGIÓN PASCO

Evaluación y clasificación morfobotánica

Dendograma del análisis de 42

caracteres cualitativos para 10

colecciones de ajíes, agrupados

en siete grupos a una distancia

del 35%

Leyenda:

Grupo I. C. annuum Var. annuum (3PZ1)

Grupo II. C. baccatum var. pendulum (5PB2)

C. baccatum var. pendulum (4PI7)

C. baccatum var. pendulum (4PM3)

Grupo III. C. chinense J a c q v e l a f f (4P10)

Grupo IV. C. chinense J a c q . (2HA1)

C. chinense J a c q . (4PBA4 )

Grupo V. C. frutescens L . (4PR1)

Grupo VI. C. chínense j a c q . (4PBA5 )

Grupo VII. C. pubescens R u i z & P a v

(2HA2)

Resultados de clasificación de ajíes colectados en la provincia de Oxapampa

CONCLUSIÓN

En la provincia de Oxapampa – Región Pasco existe al menos las cinco especies de ajíes:

Capsicum bacatum, chinense, annumm, frutescen, y pubescen.

Dentro de las especies de Capsicum bacatum y chinense existen muchas variedades de

ajíes, cuyos frutos difieren en color, tamaño y forma y más aun son originarias del país.

Cultivo en invernadero y campo abierto de ajíes nativos y domesticados

en la provincia de Oxapampa - Región Pasco, 2008 – 2010. Financiado

por INCAGRO – UNCP.

PREPARACIÓN DE ALMÁCIGOS Y CULTIVO EN INVERNADERO Y

CAMPO ABIERTO

Objetivos:

Evaluar el cultivo de ajíes

nativos y domesticados en

condiciones ambientales

controlados

Extracción con CO2 - supercrítico y cuantificación de capsaicinoides y

carotenoides de ajíes nativos y domesticados de la Provincia de

Oxapampa – Región Pasco. 2008 - 2010 Financiado por INCAGRO –

UNCP.

Capsaicinoides

Carotenoides

Problema de investigación

Insuficiente conocimiento sobre el contenido de capsaicinoides y

carotenoides de ajíes nativos y domesticados de la provincia de Oxapampa

Ajíes (Capsicum):

Ají charapita y habanero (C. chinense),

Pinchito de mono (C. frutescens), Ají corazón (C. baccatum),

Rocoto (Capsicum pubescen), Paprika (C. annumm)

Capsaicinoides

Carotenoides Ajíes (Capsicum):

Ají charapita y habanero (C. chinense),

Pinchito de mono (C. frutescens), Ají corazón (C. baccatum),

Rocoto (Capsicum pubescen), Paprika (C. annumm)

Objetivos:

Evaluar el contenido de capsaicinoides y carotenoides de ajíes nativos y

domesticados

Evaluar los parámetros de presión y temperatura de extracción con CO2-supercrítico

Flujo de extracción de oleorresina de ajíes con SC-CO2

Materia prima

Secado

Molienda y

Tamizado

Extracción

Con CO2 -SC

Separación

Oleorresina Torta

Presurizado

200 y 400 bar

35 y 55°C, 1,5 - 3h.

Despresurizado

8-10 bar

40°C x 20 h

8-12% humedad 40°C x 20 h

8-12% humedad

0,45 – 1 mm

RESULTADOS

Capsaicinoides (B)

1= nordihidrocapsaicina,

2=capsaicina

3=dihidrocapsaicina

Carotenoides (A)

1= B- Caroteno

2=B-Criptoxantina

3=Zeaxantina

4=Capxantina

Cromatogramas de

capsaicinoides y carotenoides

de ajíes nativos

DH

C

Patrón

Cromatogramas de capsaicinoides de rocoto extraído por CO2 supercrítico y

método clásico

Extracción

con soxhlet

(THF)

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 min

0

25

50

75

100

mAU

280nm,4nm (1.00)

Extracción

con SC-CO₂

ND

HC

DH

C

CA

P

SC-CO2

(Bar/ªC/t)

Especies de

Capsicum

NDHC (mg/100 g ms)

CAP (mg/100 g ms)

DHC (mg/100 g ms)

Capsaicinoides

totales (mg/100 g ms)

SHU

(Pungencia)

200/55/1.5 Paprika (C. annuum) 110.37 82.78 63.19 256.34 38 451

200/55/3 Ají corazón (C.

baccatum) 376.99 2933.09 2726.66 6036.73 905 509

400/55/3 Ají

omnicolor(C.baccatum) 198.19 1954.12 902.46 3054.78 1 041 195

400/55/3 Ají de mesa

(C.baccatum 215.91 4394.47 2330.92 6941.30 458 216

200/55/3 Ají charapita (C.

chinense) 278.42 25131.71 4255.03 29665.16 4 449 774

200/35/3 Ají habanero (C.

chinense) 232.34 4405.76 1316.21 5954.31 893 147

400/35/1.5 Ají pinchito de mono (C.

frutescens) 1028.00 24775.23 7150.18 32953.41 4 943 011

400/35/1.5 Rocoto (C. pubescens) 792.50 2422.74 1549.37 4764.61 719 691

Contenido de capsaicinoides de ajíes extraído con CO2 supercrítico

Cromatogramas de carotenoides (A) y capsaicinoides (B) de paprika

Capsaicinoides (B)

1= nordihidrocapsaicina,

2=capsaicina

3=dihidrocapsaicina

Carotenoides (A)

1= B- Caroteno

2=B-Criptoxantina

3=Zeaxantina

4=Capxantina

0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0 min

0

25

50

75

100

mAU

474nm,4nm (1.00)

B-c

aro

teno

B-c

rip

tna

osan

ti

za

xa

ntin

a

Extracción con SC-

CO2(C)

Patrón (A)

Cromatogramas de Carotenoides de rocoto extraídos con CO2, supercrítico

Extrac. soxhlet (B)

SC-CO2

(Bar/ªC/t)

Especies de

Capsicum

β –

caroteno

[mg/100gms]

β – criptoxan

tina [mg/100g

ms]

zeaxantina

[mg/100g

ms]

capsan

tina [mg/100g

ms]

Carotenoides

totales

[mg/100g

ms]

200 /55/1.5

Paprika (C. annuum) 995,07 192,71 505,01 78.97 1771,76

400 /55/3

Ají corazón (C. baccatum)

330,55 142,23 267,39 180.63 920,79

400/55/3 Ají omnicolor(C.baccatum) 144,10 135,54 216,87 131.26 627,78

400 /55/3 Ají de mesa (C.baccatum 142,63 121,31 233,28 29.33 526,54

400/55/3 Ají charapita (C. chinense) 1281,82 179,59 820,57 238.76 2520,73

400 /55/3 Ají habanero (C. chinense) 330,55 64,48 223,11 130,94 750,07

200 /55/3

Ají pinchito de mono (C.

frutescens) 281,77 50,36 82,23 41,60 455.96

400 /55/3 Rocoto (C. pubescens) 251,47 58,40 181,05 117,03 607.95

Resultado del contenido de carotenoides de ajíes extraídos con CO2- supercrítico

Los ajíes nativos charapita (C.chinense) y pinchito de mono (C. frutescen) presentan

los más altos contenidos de capsaicinoides totales 4 449 774, 4 943 011, mg/100 g,

respectivamente.

El ají charapita (400 bar /55 °C/3 h) y paprika (200 bar /55 °C/1.5 h) mostraron los más altos

contenidos de carotenoides

La extracción con SC - CO₂ de capsaicinoides,

permitió el aislamiento selectivo a 200 y 400 bar de presión y 35 – 55”C, comparado a

los métodos clasicos de extracción

CONCLUSIÓN

Extracción de carotenoides de zanahoria, ají panca y amarillo para la

pigmentación natural de truchas Arco Iris en la Región Junín. 2014 –

2016. Financido por el FINCYT –UNCP. En ejecución.

PLANTEAMIENTO Y FORMULACIÓN DEL PROBLEMA

El uso indiscriminado de astaxantina (colorante artificial) en

la pigmentación de truchas es cada vez mayor, para

enmascarar el color del tejido muscular y hacer más

atractivo al consumidor. Sin embargo, el uso de este

ingrediente artificial es una problemática que atenta contra

la salud y economía de los consumidores, ya que estos

pigmentantes sintéticos (astaxantina) tienen efectos

nocivos y son muy costosos y en cierta manera determinan

el precio del producto en el mercado. Por otro lado,

contamos con recursos vegetales (zanahoria y ajíes) con

un potencial de carotenoides, que son pigmentantes

naturales por excelencia y que no están siendo utilizados

previa investigación en la pigmentación de alimentos.

Porque el uso de zanahoria y ajíes?

Estructura química de los carotenoides

PESADO

MACERADO

FILTRADO

SEPARADO DE FASES

1 g de muestra seca molida

Con 10 mL de acetona-etanol (1:1) hasta que

quede blanca la muestra. En agitación magnética

(500 RPM, 10 °C)

Con papel filtro Whatman poro grueso

Se mezcla el aforado con 25 mL de hexano

y 12.5 mL de agua

Agitar vigorosamente.

REPOSO

Por 30 minutos. Y se lleva a lectura

la fase oleosa.

LECTURA

ESPECTROFOTOMETRIA Y

HPLC

Se afora a 50 mL el extracto coloreado con

acetona-etanol

Blanco: Hexano

A 470 nm

AFORADO

Figura 1. Diagrama de flujo de la extracción de carotenoides por maceración al frío

.

Determinación por HPLC de carotenoides totales en el ají amarillo

Cromatograma de carotenoides de ají amarillo secado a 40°C: B = Beta caroteno, BC = beta

criptoxantina, Z= zeaxantina y Cna = capxantina

Cromatograma de carotenoides de la zanahoria secado a 40°C

Acondicionamiento del alimento para truchas con harina de zanahoria

y de ají amarillo de acuerdo al contenido de carotenoides

PISIGRANJA CONSORCIO SAN

PEDRO-COMAS -

CONCEPCIÓN-REGION JUNIN

Harina de

Zanahoria

Peso

biomasa

Peso promedio

individual (g.)

Harina de Ají

Peso biomasa

Peso promedio

individual (g.)

30 días

Peso total de

truchas (kg)

28.400 242 25.400 215

Número total de

truchas x tanque

117 118

45 días

Peso total de

truchas (kg)

35.752 306 33.113 281

Número total de

truchas x tanque

117 118

60 días

Peso total de

truchas (kg)

39.250 37.250

Número total de

truchas x tanque

115 341 115 324

Evaluación de la ganancia peso de truchas durante el periodo de suministro de

carotenoides de zanahoria y ají periodos.

Comparación de truchas pigmentadas con carotenoides de ají y zanahoría

naturalmente.

a15 días. A 60 días.

A 30 días.

Harina de ají Harina de zanahoria Harina de

zanahoria Harina de ají Harina de

zanahoria

Harina

de ají

Testig

o

PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

Escaso conocimiento del contenido de capsaicinoides de residuos de venas de ajíes.

Desecho sólido con un potencial bioinsecticida.

Pocos estudios sobre el contenido de glucosinolatos de mashua

Uso agresivo de agroquímicos sintéticos en el cultivo de quinua, y maca, siendo productos

de gran valor comercial.

Presencia de insectos plaga en la planta ornamental de retama del valle del Mantaro

OBJETIVOS

Evaluar el conteniddo de capsaicinoides de venas de ají panca y amarillo

Determinar el contenido de glucosinolatos de trees accesiones de mashua

Evaluar el efecto letal de capsaicinoides y gluccosinolatos en insectos plaga de quinua, maca

y retama de la Región Junín

RESIDUO DE VENAS DE AJÍ DE LA INDUSTRIA DE PROCESAMIENTO DE AJÍES

Secado

VENAS DE AJÍ

Molienda

50 ºC hasta que las venas y semillas

alcancen una humedad entre10-12 % ± 2

Tiempo de molienda 30 segundos

Tamizado Tamaño de la partícula : 0.45 – 1,0 mm

Lavado y desinfectado

Separación de venas y

semilla

Extracción por

maceración

Evaporación

Solvente: Etanol p.a. 99.9 %, 60 ºC, 270

RPM, tiempo de 25 horas.

40º C y a una presión de vacío de 20

inHg., tiempo aproximado de 15 min

Cuantificación de

capsaicinoides por

HPLC

280 nm. Tiempo de la corrida: 20 min.

mm

Cromatograma de capsaicinoides de venas de ají panca de Sazón Lopeza. Condiciones de

extracción: tamaño de partícula 0.425 < Ø > 1mm, 50°C, maceración de 25 h, agitación 270 rpm, 4 g

de muestra

Cromatograma de glucosinolatos de maashua chispeada

N° de

Repeticiones

N° de Insectos Numero de

Insectos Totales Muertos Vivos

1 39 11 50

2 42 8 50

3 43 7 50

Promedio 41.33 8.67 50

N° de

Repeticiones

N° de Insectos Numero de

Insectos Totales Muertos Vivos

1 33 17 50

2 30 20 50

3 32 18 50

Promedio 31.67 18.33 50

Tabla 1. Resultados preliminares del efecto letal en áfidos de retama de

los extractos de Capsaicinoides a una concentración del 5%

Tabla 2.. Extracto de capsaicinoides a una concentración del 2,5%

N° de

Repeticiones

N° de Insectos Numero de

Insectos

Totales Muertos Vivos

1 48 2 50

2 47 3 50

3 43 7 50

Promedio 46.00 4.00 50

Tabla 02: Efecto letal en áfidos de retama de los extractos de

Glucosinalatos a una concentración del 75%

Tabla 02: Glucosinalatos a una concentración del 50%

N° de

Repeticiones

N° de Insectos Numero de

Insectos

Totales

Muertos Vivos

1 28 22 50

2 30 20 50

3 32 18 50

Promedio 30.00 20.00 50

Glucosinalatos en concentraciones de 75% y 50% resultaron con una Dosis

letal media (DL50) favorable in vitro, que será utilizado en campo al 50%.

Pruebas in vitro del efecto letal de capsaicinoides y glucosinolatos

de ají y mashua en áfidos de retama

CONCLUSIÓN

De acuerdo a los ensayos preliminares existe un efecto letal de capsaicinoides al 2,5% de venas de ají

panca sobre áfidos insectos plaga de retama

Se logró un efecto letal considerable de glucosinolatos al 50% en áfidos de retama

GRACIAS