EVALUACION DE LA TÉCNICA DE EVALUACION DE LA TÉCNICA DE ELISA INDIRECTA COMO TEST ELISA INDIRECTA COMO TEST

DIAGNÓSTICO PARA LA DETECCION DIAGNÓSTICO PARA LA DETECCION DE LEPTOSPIROSIS HUMANA, DE LEPTOSPIROSIS HUMANA,

ICA-LNDV,2006ICA-LNDV,2006

DOCENTE DIRECTOR: DOCENTE DIRECTOR:

MARIA CRISTINA VASQUEZMARIA CRISTINA VASQUEZ

ESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTOESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTO: :

EDWARD JOHNNY ZAMBRANO MORAEDWARD JOHNNY ZAMBRANO MORA ELIDA MAYERLITH PINTO SAAVEDRAELIDA MAYERLITH PINTO SAAVEDRA ENITH CASTILLA GOMEZENITH CASTILLA GOMEZ

INSTITUCIONES PARTICIPANTESINSTITUCIONES PARTICIPANTES

UDESUDES ICAICA BIOGENIXBIOGENIX

INTRODUCCION

TAXONOMIA

FAMILIA

Spirochaetacea Leptospiraceae

Trepomonema BorreliaLeptospira

Interrogans(180 serotipos)

Biflexa (60 serovares)

18 subgrupos

SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS REPRESENTATIVOS DE L. Interrogans

SEROGRUPOS SEROVAR (ES)

Australis australis , bratislava , lora

Autumnalis autumnalis , forbragg , bim , weerasinghe

Ballum ballum , aroborea

Bataviae bataviae

Canicola canicola

Celledoni celledoni

Cynopteri cynopteri

Djasiman djasiman

Grippotyphosa grippotyphosa , canalzonae, ratnapura

Hebdomadis hebdomadis , jules , kremastos

Hurstbridge hurstbridge

Icterohaemorrhagiae icterohaemorrhagiae , copenhageni , lai

Zimbabwe  

SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS REPRESENTATIVOS DE L. Interrogans

SEROGRUPOS SEROVAR (ES)

Javanica javanica , poi

Louisiana louisiana , lanka

Manhao manhao

Mini mini , georgia , swajizak

Panama panama , mangus

Pomona pomona

Pyrogenes pyrogenes

Ranarum ranarum

Sarmin sarmin

Sejroe sejroe,saxkoebing,hardjo

Semaranga patoc

Shermani shermani

Tarassovi tarassovi

Pumarola, 1994; Levett, 2001. (Modificado)

RESERVORIOS Y SUS SEROVARES

Pumarola, 1994; Levett, 2001. (Modificado)

ESPECIE SEROVAR

Ganados y búfalos

hardjo, pomona, icterohaemorragiae, bratislava, canícola, tarassovi

Cerdos pomona, tarassovi, bratislava

Perros

Canicola,bratislava, pomona, grippotyphosa, icterohaemorragiae

Caballos

grippotyphosa, icterohaemorragiae

LEPTOSPIROSIS

ANTROPOZOONOSIS DE DISTRIBUCION MUNDIAL

ANIMALES SILVESTRES

ANIMALES DOMESTICOS

HOMBRE

HOSPEDADOR DE

MANTENIMIENTO DENGUE HEMORRRAGICOHEPATITIS VIRAL

INFECCIONES POR HANTAVIRUS

HOSPEDADOR ACCIDENTAL

EPIDEMIOLOGIA

Los países tropicales y subtropicales son los más afectados por sus condiciones climáticas.

• La OMS ha estimado una tasa de incidencia en humanos entre 4-100 casos por 100 000 habitantes en estos países (22).

Precipitación

Temperatura

Humedad relativa

El pH, estructura

La composición de suelo

Son favorables para la presentación de Leptospira.

La seropósitividad de estudios hechos indican (2):

Colombia 18.5%,

México 14.1%,

El salvador 17.5%,

Brasil 9.8%

Argentina 3.8%

EPIDEMIOLOGIA

SEROVARES MAS FRECUENTES ENCONTRADOS EN COLOMBIA

EPIDEMIOLOGIA

TOMADO DE :Acosta Helbert, Moreno Carlos Hugo, Viafara B Daniel. Leptospirosis. Revision de tema, Colombia médica, Universidad del Valle, Cali, 1994 ; 25: 36-42.

TRANSMISION

PATOGENIA Y SINTOMAS

FORMA ICTERICA

FORMA ANICTERICA

DIAGNOSTICO

TECNICAS O METODOS

DIRECTOS INDIRECTOS

Observacion de campo oscuro

Tinciòn argenica

Tinciòn inmunohistoquimica

Deteccion de acidos nucleicos

Aislamiento

MAT

MsatFijación del complemento

ELISA

Aglutinación microscópicaAglutinación en microcapsulaHemoaglutinación indirecta

DIAGNOSTICO

TECNICA DE MICROAGLUTINACION (MAT)

Detectar anticuerpos aglutinantes en sueros Enfrentar a Ag (cultivos vivos de Leptospiras).

Se divide en dos etapas Cualitativa

Cuantitativa

Determinar el titulo exacto de un suero si este contiene anticuerpos contra Leptospiras,

NEGATIVO

POSITIVO

DIAGNOSTICO

MAT

FASE CUALITATIVA

FASE CUANTITATIVA

Determina la presencia deAc sin precisar el titulo exacto del suero.

Si se observa el 50% de las Leptospiras aglutinan se reporta el resultado con un titulo de 1:100

Determina el titulo exacto del suero.

Es la mayor dilución en la que se observa una aglutinación del 50%.

DIAGNOSTICODESVENTAJAS MAT

Necesidad de una infraestructura adecuada y de personal especializado y entrenado para su montaje, lectura e interpretación.

Mantenimiento continuo de las cepas Ag. 7 a 15 días . + aglutinante

La selección de los antígenos es un punto de vital importancia, cuando se comienza a trabajar en una zona donde no se conoce la prevalencia serológica.

Con respecto a los serovares utilizados en cada batería no existe estandarización en la selección de los mismos. Dif result

DIAGNOSTICO

VENTAJAS DEL ELISA

Los laboratorios tienen capacitación, conocimiento y equipos necesarios para el procesamiento de una prueba de ELISA .disminuye los riesgos en Bioseguridad, además en el mercado se encuentra un kit comercial con un costo razonable. Elisa IgM se muestra mas sensible que el MAT en el comienzo de la fase aguda (11) permitiendo brindar un diagnostico diferencial oportuno con otras patologías de origen viral que presentan sintomatología similar.Por su rapidez la prueba de ELISA permite una confirmación diagnostica rápida y segura, útil también en situaciones epidémicas o brotes, posibilitando dirigir medidas de vigilancia y control epidemiológico. (Manuel Céspedes)

OTROS METODOS SEROLOGICOS

LeptoTek Dri Dot Ensayo:

Aglutinacion en latex con suero.

LEPTO Dipstick Ensayo:

Detecta rápidamente anticuerpos IgM específicos de Leptospira en sangre total.

LeptoTek Flujo Lateral Ensayo:

Detecta anticuerpos IgM específicos-Leptospira en suero humano o las muestras de sangre total.

FC y PCR DE LCR

FIEBRE AMARILLA:

Duración de la viremia mas corta

DENGUE:

Intensidad de dolores musculares es mayor en dengue

HEPATITIS:

Inicio de fiebre menos brusco y de menor intensidad, desaparece cuando comienza

la Ictericia

MENINGOENCEFALITIS:

LCR: leucocitosis – Meningitis bacteriana

MALARIA:

Hepatoesplenomegalia y anemia

Protección de trabajadores mediante el

uso de calzado y vestimentas

apropiadas (botas, delantal, guantes,

antiparras, tapaboca).

Higiene personal y del ambiente

doméstico.

Impedir el ingreso de animales al interior

de los domicilios.

Higiene y desinfección en los locales de

ordeñe así como de las máquinas o

instrumentos.

Control de roedores.

Inmunización.

Antibioticoterapia.

Educación a la poblaciones de riesgo.

Limpieza y desinfección de los domicilios

que se inundan con solución de hipoclorito.

Vacunación de la población canina.

Vigilancia epidemiológica de las

poblaciones consideradas de mayor riesgo.

Educación y difusión de las posibles formas

de adquirir la enfermedad y como evitarla.

Medidas de prevención, protección y control para los animales.

Realizar el aislamiento de cepas de

Leptospira spp. en distintas especies

para conocer los serovalentes

involucrados.

Realizar estudios de reservorios

silvestres.

Realizar estudios epidemiológicos para

estudiar la evolución de la enfermedad.

Implementar programas de control de

roedores e higiene ambiental.

PLAN DE VACUNACIÓN Primo vacunación: Se vacunan todos

los animales del establecimiento,machos, hembras y terneros.2da. Dosis a los 21 días de la 1ra

dosisRevacunaciones en forma anual o

semestral de acuerdo al laboratorio productor.Machos: vacunar antes de entrar

al servicio para proteger al rodeo.Hembras: vacunar antes del

servicio y previo a la parición.

Terneros: vacunar a los 2 meses

de edad y luego revacunar.

Notificación obligatoria ( Brasil, Cuba y Uruguay).

CASO SOSPECHOSO:

a) Caso notificado hasta demostración de lo contrario en la epidemiología.

b) signos y síntomas sugestivos de la Enf mas

Epidemiología compatible.

CASO CONFIRMADO:

a) Aislamiento de leptospiras.

b) Serología positiva mediante la

prueba de aglutinación microscópica (MAT)

2 mx

PREGUNTAS? ? ? ? ? ? ?

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GRACIAS