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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLOFACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICASDEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA BIOLGICA Y FISIOLOGA ANIMAL

MTODOS INSTRUMENTALES DE ANLISIS

T.1. Agua de uso en el laboratorio. Tipos. Tcnicas de purificacin. Control decalidad.T.2. Soluciones buffer (Amortiguadoras): Definicin. Propiedades. Regulacindel pH por una solucin amortiguadora. Buffers ms comunes. Aplicaciones.Potenciometra: Fundamento. Tipo de electrodos. Medicin del pH.Ms.C. Patricia Elizabeth Torres Plasencia

EL AGUA DE USO EN EL LABORATORIOUno de los reactivos ms comunes usado en el laboratorio y considerado como disolvente universal es el agua, por lo tanto es de vital importancia cuidar su pureza. Si se mantiene un control sistemtico de la pureza o calidad del agua para uso en el laboratorio se promueve la eliminacin de sesgo en los resultados, se evitan interferencias o reacciones colaterales y se aumenta as la confiabilidad en dichos resultados.En la actualidad los laboratorios deben establecer requisitos de calidad o pureza, as como mtodos de produccin y anlisis de agua donde deben establecerse el los procesos para su purificacin.COMPOSICIN DEL AGUAEl ciclo natural del agua tiene diferentes compuestos que se consideran impurezas (Tabla 1). Estas impurezas presentes en el agua se pueden clasificar en tres grandes grupos: Inicas Disueltas (inorgnicos).No inicas Insolubles (orgnicos, microorganismos, pirgenos, virus, partculas en suspensin, coloides). Gaseosas.

Pirgenos (lipopolisacridos)Partculas en suspensin.

En los laboratorios se requiere usar agua con mnimo de impurezas. Los requisitos de calidad o pureza se encuentran establecidos en base a diferentes normas o criterios, dependiendo de las instituciones u organismos internacionales que establecen las referencias, entre estas se encuentran la American Society for Testing and Materials (ASTM), British Standards Institution (BSI) y la International Organization for Standardization (ISO).Actualmente estn definidos los diferentes niveles de pureza del agua en funcin de los parmetros fsico-qumicos, tales como conductividad elctrica, resistividad, pH, contenido de carbono orgnico total (TOC), sodio, cloruros y slice, as como microbiolgicos.http://www.astm.org/Standards/D1193.htmPARMETROS DE CONTROL DE CALIDAD PARA INDICAR LA PUREZA DEL AGUAResistividad Tendenciadel agua sin iones a resistirsea la conduccin de electricidad.La unidad de medida es el megaohmio-centmetro (M.cm),abreviado a menudo en M o meg. Se utiliza comnmente para el agua de gran pureza.El valor mximo terico es de 18,2 M.cm a 25 C. Cuanto ms alto es el contenido inico ms baja es la resistividad y cuanto ms bajo es el contenido inico, ms alta es la resistividad (un nivel alto de resistividad es bueno). En los sistemas de agua ultrapura, este valor se determina mediante un contador en lnea. Las medidas de conductividad y resistividad son proporcionalmente inversas.Conductividad Tendenciadel agua con iones a conducir electricidad.La unidad de medida esmicrosiemens/centmetro (S/cm) o microhmio/cm. Se utiliza para medir el agua de suministro o aguas tratadas de calidad inferior.Cuantos ms iones hay en el agua, mayor es la conductividad.Se mide con un contadorde conductividad.Carbono orgnicototal (COT) medida de los contaminantes orgnicos encontrados en el agua.La unidad de medida es partes por milln (ppm) o partes por mil millones (ppb). En el agua de suministro puede oscilar entre 2 y 5 ppm, y la pureza ms alta del agua estara entre 1 y 5 ppb. La medicin del COT se realiza con un sistema en lnea.Parmetros microbiolgicos

CONDUCTIVIDAD Y RESISTIVIDADLa conductancia o resistencia elctrica se mide con dos electrodos en lnea. La corriente elctrica se desplaza por el agua mediante molculas inicas a modo de escalones en progresin. Cuantos menos escalones haya, ms difcil es el paso de la electricidad. Habr, por tanto, menos conductancia elctrica y ms resistencia. La temperatura del agua tambin afecta a la conductividad/resistividad, por lo que la lectura estndar se suele realizar a 25 C con compensacin de temperatura. Utilizamos la resistividad para medir la concentracin de iones en el agua pura.

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USOS DEL AGUA CLASIFICADA POR ASTM SEGN SUS CARACTERSTICAS FISICO-QUMICASTIPO IUsada para procedimiento que requieren de mxima exactitud y precisin; tales como espectrometra atmica, fotometra de llama, enzimologa, gas en la sangre, soluciones buffer de referencia y reconstitucin de materiales liofilizados usados como estndares. El agua Tipo I, debe seleccionarse siempre que en la prueba sea esencial un nivel mnimo de componentes ionizados o cuando se preparan soluciones para anlisis de rastreo de metales.TIPO IIRecomendada para la mayora de las pruebas analticas y generales de laboratorio, tales como los anlisis hematolgicos, serolgicos y microbiolgicos; as como para mtodos qumicos en los que especficamente no se indique o se haya comprobado que requieren agua de calidad Tipo I. La ASTM especifica que el agua Tipo II sea preparada por destilacin y como factor importante recomienda que est siempre libre de impurezas orgnicas.TIPO IIISatisfactoria para algunas pruebas generales de laboratorio; para la mayora de los anlisis cualitativos, tales como uroanlisis, procedimientos histolgicos y parasitolgicos; para el enjuague de muestras analticas; preparacin de soluciones de referencia; y para el lavado o enjuague de cristalera (el enjuague final de la cristalera debe hacerse con el tipo de agua especificado para el procedimiento realizado).TIPO IVAgua con una conductividad final mxima de 5,0 S/cm. Sirve para la preparacin de soluciones y para el lavado o enjuague de cristalera.USOS DEL AGUA CLASIFICADA POR ISO 3696: 1987 SEGN SUS CARACTERSTICAS FISICO-QUMICASGrado 1- Exenta bsicamente de contaminantes constituidos por iones disueltos o coloidales y materias orgnicas. Es apropiada para los requisitos de anlisis ms exigentes, incluyendo la cromatografa liquida de alta definicin. Se puede preparar por un tratamiento adicional del agua de grado 2 (por ejemplo osmosis inversa o desionizacin seguida de filtrado a travs de una membrana con tamao de poro de 0,2 m para separar las partculas, o por redestilacin en un aparato de slice fundido).Grado 2- Con muy pocos contaminantes inorgnicos, orgnicos o coloidales. Es apropiada para anlisis delicados, incluyendo la espectrometra de absorcin atmica (EAA) y la determinacin de componentes en cantidades mnimas. Se puede preparar por destilacin mltiple o por desionizacin u osmosis inversa seguida de destilacin.Grado 3- Apropiada para la mayora de los trabajos de qumica en laboratorios por va hmeda y la preparacin de soluciones de reactivos. Se puede preparar mediante una sola destilacin, por desionizacin o por osmosis inversa. Salvo indicacin en contrario, se puede utilizar para el trabajo normal de anlisis.PROCESOS DE PURIFICACIN DEL AGUA

Existen diferentes calidades de agua y diversas necesidades en funcin de su uso. En la purificacin existen distintos procesos para eliminar las impurezas; entre los ms importantes se encuentran: Filtracin. Ultrafiltracin. Destilacin. Osmosis Inversa. Adsorcin con carbn activado. Desionizacin.Obtener agua de buena calidad para los laboratorios, depende de la seleccin de la tecnologa de purificacin correcta y de un diseo del sistema que mida y controle de forma precisa las impurezas. Producir agua pura es slo una parte de la ecuacin; lavalidacin de la calidad, el almacenamiento del agua y el mantenimiento del sistema tambin son claves para asegurar que tenga la calidad del agua que se necesita. FILTRACINExisten filtros de profundidad (nominal) y de membrana (absoluto).Los filtros de profundidad se suelen utilizar en el pretratamiento y estn hechos de fibras reforzadas que envuelven tubos huecos y ranurados. Conforme pasa el agua por la matriz de fibra reforzada hacia el tubo central, las partculas se quedan en las fibras. Este tipo de filtro es el utilizado tradicionalmente para eliminar la mayor parte de las impurezas de tamao superior al del poro del filtro. Por lo general, estos filtros se disean para eliminar las partculas ms grandes (> 1 m) para proteger las tecnologas posteriores.A los filtros de membrana se les llama con frecuencia absolutos, ya que estn diseados para eliminar todas las partculas superiores al tamao de poro nominal del filtro. Utilizan una membrana (en forma de lmina plana o fibra hueca) y se suelen utilizar en el extremo del sistema para eliminar bacterias y otras partculas no eliminadas por los filtros anteriores. Los filtros de membrana que tradicionalmente se utilizan en los sistemas de agua de laboratorios tienen un tamao nominal de poro inferior a 0,45 m; con frecuencia, de 0,2 m.

ADSORCIN CON CARBN ACTIVADO

La adsorcin utiliza el carbono activo con un rea superficial muy alta para eliminar sustancias orgnicas y cloro del agua de suministro.La mayora de los sistemas de purificacin de agua lo utilizan, combinado con resinas de intercambio inico, como primer o segundo paso, o incluso como ltimo paso, para alcanzar la mxima resistividad y un carbono orgnico total (COT) ultrabajo. Las sustancias orgnicas y el cloro se adhieren a la superficie del carbono activo y se quedan acoplados al carbono.

DESTILACINLa destilacin es el sistema de purificacin de agua que por s solo cuenta con ms capacidad de eliminacin.La destilacin del agua consiste en separar los componentes basndose en las diferencias en los puntos de ebullicin. Los compuestos con una presin de vapor baja tendrn puntos de ebullicin altos y los que tengan una presin de vapor alta tendrn puntos de ebullicin bajos. Los tipos de destilacin ms comunes son: La Destilacin Simple, Destilacin Fraccionada y la Destilacin por Arrastre con Vapor.Durante el proceso de destilacin, el agua hierve y pasa por distintas fases, cambiando de lquido a vapor y de nuevo a lquido. En su paso de lquido a vapor es cuando el agua se separa (en distintos grados) de las impurezas disueltas en ella, como iones, contaminantes orgnicos, bacterias, pirgenos y partculas.La destilacin no basta por s sola para eliminar iones inorgnicos, gases ionizados, sustancias orgnicas con punto de ebullicin superior a 100 C o gases no ionizados disueltos.

SMOSIS INVERSALa smosis inversa es el mtodo ms econmico para eliminar hasta el 99% de los contaminantes del agua de suministro.Se ejerce presin externa en el lado de la membrana con mayor concentracin (agua de suministro) para revertir el flujo osmtico natural. As se fuerza el paso del agua de suministro por la membrana semipermeable, las impurezas se depositan en la superficie de la membrana y se envan a drenar. El agua que pasa por la membrana como agua producida, apenas tiene impurezas.Las membranas para smosis inversa tienen una superficie fina de microporos que rechaza las impurezas pero permite el paso del agua. La membrana impide el paso de bacterias, pirgenos y entre el 90 y el 95% de slidos inorgnicos. Los iones polivalentes se rechazan ms fcilmente que los monovalentes.La membrana rechaza los slidos orgnicos con un peso molecular superior a 200 Daltons, pero no puede eliminar eficazmente los gases disueltos. La pureza del agua producida depende de la pureza del agua de suministro. El producto suele tener entre un 95 y un 99% ms de pureza que el agua de suministro.

DESIONIZACINLa desionizacin tambin se puede denominar desmineralizacin o intercambio inico.El proceso elimina iones del agua de suministro (entre ellos cationes: Na, Ca, Mg y aniones Cl, SO4 y bicarbonatos (HCO) mediante resinas sintticas. Son resinas que se alteran qumicamente para que tengan afinidad con iones inorgnicos disueltos y se clasifican en dos tipos: resinas de eliminacin (o intercambio) de cationes y resinas de eliminacin de aniones.Los iones desaparecen del agua mediante una serie de reacciones qumicas. Estas reacciones tienen lugar cuando el agua atraviesa los lechos de resina de intercambio inico. La resina catinica contiene iones de hidrgeno (H+) en la superficie, que se intercambian por iones con carga positiva. La resina aninica contiene iones de hidrxido (OH-) en los puntos de intercambio, que se intercambian por iones con carga negativa. El resultado final de estos dos intercambios es H+ y OH-, que se combinan para formar agua (H2O).La desionizacin es la nica tecnologa que alcanza el requisito de resistividad del agua de tipo 1 con grado de reactivo. En los sistemas de agua de laboratorio, las resinas catinicas y aninicas se utilizan casi siempre combinadas para poder alcanzar la mxima pureza inica.

ULTRAFILTRACIN (UF)En la purificacin de agua, la ultrafiltracin se utiliza para eliminar pirgenos (endotoxinas bacterianas) y nucleasas, lo que resulta fundamental para el cultivo tisular, el cultivo celular y la preparacin de medios.Para eliminar partculas y macromolculas, los ultrafiltros utilizan la exclusin por tamao. Por su diseo, funcionan de forma similar a las membranas de smosis inversa: las partculas quedan atrapadas en la superficie de las membranas y se eliminan mediante una corriente de rechazo. Los ultrafiltros se utilizan en el extremo de los sistemas para garantizar la eliminacin de casi la totalidad de impurezas macromoleculares como pirgenos, nucleasas y partculas.COMBINACIN DE OXIDACIN UV Y ULTRAFILTRACIN (UV/UF)El uso conjunto de las tcnicas de oxidacin ultravioleta y ultrafiltracin con adsorcin y desionizacin en el mismo sistema permite obtener agua prcticamente sin impurezas. Estas tecnologas han demostrado su capacidad para eliminar nucleasas, como las ARNasas y ADNasas, as como pirgenos cuando se han enfrentado a concentraciones de material conocidas. Los sistemas de tipo 1 con opciones de UV/UF producen agua con grado de reactivo con una resistividad de hasta 18,2 M.cm, un COT de entre 1 y 5 ppb, pirgenos < 0,001 EU/mL y ARNasas, ADNasas o ADN no detectables.TRATAMIENTO DEL AGUA PARA OBTENER AGUA DE ALTA PUREZA SEGN ASTM 1193: 2001El agua ultrapura (tipo I), no se puede obtener con un solo proceso de purificacin, es necesario la combinacin de ms de uno de ellos, para lograr la calidad deseada de acuerdo a sus caractersticas fisicoqumicas.Filtracin (del agua de la red de suministro) filtros de sedimentos y de carbn activado, (eliminar partculas y el cloro residual)smosis inversa (eliminacin de sales disueltas con una eficiencia de 95 a 98%).Lecho mixto de resinas catinicas/aninicasConveniente reciclar y pasar continuamente el agua a travs de la resina mixta (incrementar su calidad).CONSERVACIN

La contaminacin del agua durante su conservacin puede aparecer, principalmente, por disolucin de componentes solubles del vidrio o plstico de los recipientes o por absorcin de CO o de cualquier otra impureza existente en la atmsfera del laboratorio.Por esta razn no se recomienda la conservacin de agua de grado 1 y 2, sino que se debe preparar para su uso inmediato, a medida que se vaya precisando. Sin embargo, el agua de grado 2 se puede preparar en una cantidad razonable y conservar en recipientes apropiados, inertes, limpios, hermticos, llenos del todo y que se hayan enjuagado previamente con agua de calidad similar.La conservacin del agua de grado 3 presenta pocos problemas, pero los recipientes y condiciones de conservacin deben ser iguales para los de grado 2.Se recomienda que los recipientes se reserven para envasar exclusivamente agua de un misma grado.

CH3COOH (aq) + H2O (l) H3O+ (aq) + CH3COO- (aq)cidobasebasecidoTransferenciaprotnicaPar cido-base conjugadoACIDOS Y BASESUn CIDO es una sustancia capaz de liberar protones (H+) y una BASE es una sustancia capaz de aceptar protones (H+). Dentro de esta sencilla definicin, se puede clasificar a los cidos y bases por su afinidad por el H+:cidos fuertes: Su afinidad por el H es baja, por lo que, en solucin, liberan fcilmente H+. El ejemplo tpico es el CIDO CLORHIDRICO, que se disocia totalmente, de HCl a Cl + H.cidos dbiles: Su afinidad por el H es alta ya que liberan con dificultad al H. El CIDO CARBNICO, FOSFRICO, ACTICO, etc. son cidos dbiles porque no se disocian totalmente y, por lo tanto, producen MENOS HIDROGENIONES LIBRES que los cidos fuertes.

Bases fuertes: Aceptan con facilidad (tienen alta afinidad) a los iones hidrgeno.Bases dbiles: Aceptan con dificultad (tienen baja afinidad) a los iones hidrgeno.FUNCIN E IMPORTANCIA BIOLGICA DE LAS SOLUCIONES BUFFER:

En los organismos vivos, las clulas deben mantener un pH casi constante para la accin enzimtica y metablica.Los fluidos intracelulares y extracelulares contienen pares conjugados cido-base que actan como buffer.OTROS SISTEMAS QUE AYUDAN A MANTENER EL pH SANGUNEO:

Protenas.cidos Nucleicos.Coenzimas.Metabolitos intermediarios.Algunos poseen grupos funcionales que son cidos o bases dbiles, por consiguiente, ejercen influencia en el pH intracelular y ste afecta la estructura y el comportamiento de tales molculas.BUFFER INTRACELULAR MS IMPORTANTE: HPO / HPO

BUFFER SANGUNEO MS IMPORTANTE:HCO/ HCO-MECANISMO DE ACCIN DE UNA SOLUCIN BUFFERECUACIN DE HENDERSON-HASSELBACH (nos permite determinar el pH de una solucin buffer, conociendo el pKa del cido y la relacin [A]/[HA]).Para comprender la forma en que un sistema buffer es capaz de mantener constante el valor de pH, es necesario tener en cuenta: [H] ( [HO]), pH, Ka y pKaAnalizaremos el caso del sistema cido actico/acetato de sodio. La constante de disociacin del cido actico (Ka) se puede expresar como:

MECANISMO DE ACCIN DE UNA SOLUCIN BUFFER

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Capacidad amortiguadora: Cantidad de cido o base que se puede agregar a un tampn antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable. La capacidad reguladora de una solucin es una medida de la resistencia al cambio de pH que se producira por el agregado de pequeas cantidades de cidos y /o bases fuertes.

De qu depende?

* Del nmero de moles (concentracin) de cido y sal base y sal.(deben ser altos para que la capacidad tambin lo sea).* Del cociente [sal]/[cido].(para que la capacidad sea alta, ha de ser prximo a 1.Mayor eficiencia: cuando pH = pKa)Caractersticas importantes de una disolucin amortiguadora

Su pH: , depende del Ka (naturaleza del cido) y de las

concentraciones de los componentes en la solucin: [A]/[HA].

POTENCIOMETRALos mtodos potenciomtricos se basan en la medida de la diferencia de potencial elctrico (fuerza electrn motriz FEM) entre dos electrodos: uno de referencia y otro que interacciona con la disolucin problema (indicador), a partir de la cual es posible establecer la concentracin de la misma directa o indirectamente. La potenciometra puede usarse desde dos puntos de vista: Potenciometra directa, consistente en la determinacin de la actividad de una especie de forma directa, a travs de la medida de un potencial elctrico. Ejm: determinacin de HO (pH) u otros.Valoracin potenciomtrica, para localizar el punto de equivalencia de una valoracin analtica (volumtrica o culombimtrica) en funcin del volumen del titulante.

La potenciometra es un proceso electroqumico que se puede explicar mediante una celda galvnica (o voltaica), en donde se produce una reaccin redox espontnea, generndose energa elctrica (flujo de electrones, FEM). El electrodo donde se produce la oxidacin es el nodo y la reduccin se produce en el ctodo. Una caracterstica importante de la celda galvnica es la FEM, que corresponde a la diferencia de los potenciales elctricos de los dos electrodos E ctodo E nodo = ? ELas celdas galvnicas,son un dispositivo en el que la transferencia de electrones, (de la semireaccin de oxidacin a la semireaccin de reduccin), se produce a travs de un circuito externo en vez de ocurrir directamente entre los reactivos; de esta manera el flujo de electrones (corriente elctrica) puede ser medido.

+El instrumental necesario en la potenciometra, incluye un electrodo de referencia, un electrodo indicador y un dispositivo para medir esa diferencia de potencial.Electrodos de ReferenciaAquel cuyo potencial elctrico es conocido, constante en el tiempo e insensible a la composicin de la solucin que se estudia. Un electrodo de referencia debe ser fcil de montar, proporcionar potenciales reproducibles y tener un potencial sin cambios. Los electrodos comnmente utilizados que satisfacen estos requisitos son: el Electrodo de Hidrgeno, el Electrodo de Calomel y el Electrodo de Plata-Cloruro de Plata.

Electrodos Indicadores.Un electrodo indicador ideal responde de forma rpida y reproducible a los cambios de actividad del ion analito (presente en la muestra), es decir su respuesta depende de la concentracin del analito. Aunque ningn electrodo indicador es absolutamente especfico en su respuesta, actualmente se dispone de unos pocos que son marcadamente selectivos. Hay dos tipos de electrodos indicadores: de membrana y metlicos.Electrodos Indicadores de MembranaExiste una gran variedad de electrodos de membrana que permiten la determinacin rpida y selectiva de numerosos cationes y aniones por medidas potenciomtricas directas. Debido a su gran selectividad a menudo se les llama electrodos selectivos de iones. Tambin se les conoce como electrodos de pIon debido a que su respuesta se registra generalmente como una funcin p, por ejemplo pH, pCa, pN0, etc.

Para medir el pH de una disolucin podemos emplear dos mtodos, en funcin de la precisin con que queramos hacer la medida:Para realizar medidas del pH que no necesiten ser muy precisas se utilizan unas sustancias llamadas indicadores, que varan reversiblemente de color en funcin del pH del medio en que estn disueltas. Se pueden aadir directamente a la disolucin o utilizarlas en forma de tiras de papel indicador. Para realizar medidas exactas se utiliza un pH-metro, que mide el pH por un mtodo potenciomtrico.

DETERMINACIN DEL pH DE UNA SOLUCINMtodo potenciomtrico: Como electrodo indicador se utiliza el:Electrodo de vidrioEl electrodo de vidrio es un electrodo indicador de membrana selectivo a iones hidronio (HO) y constituye la pieza fundamental en la medicin potenciomtrica del pH. Su uso se encuentra ampliamente difundido ya que hasta el momento no se conoce otra tcnica tan precisa como esta.El cuerpo de los electrodos de vidrio est formado por un tubo de vidrio (o plstico) no conductor y un bulbo sensible a iones HO(membrana). En su interior hay un electrodo de referencia interno que no es sensible a los cambios de pH, por ejemplo Ag/AgCl, y una solucin de concentracin conocida de iones hidronio.

Actualmente se utiliza un solo electrodo que condensa los dos electrodos anteriores y que se denomina electrodo combinado de vidrio, aqu, se unen fsicamente el electrodo de vidrio y uno de referencia externo para mayor comodidad en un mismo cuerpo fsico.Los electrodos de vidrio pueden clasificarse de acuerdo a:La composicin de su membrana: Diferentes tipos de membrana pueden hacer que el electrodo sea ms resistente, expandir su rango de temperaturas o prevenir errores a pH extremos. Existen diferentes tipos de vidrios utilizados en electrodos comerciales, algunos ejemplos son: vidrio para propsito general (varios rangos de pH y temperaturas hasta 100C), vidrio azul (pH de 0 a 13 y temperaturas hasta 110C), vidrio mbar (pH de 0 a 14, temperaturas hasta 110C y bajo error de sodio).Cuerpo: Electrodos con cuerpo de vidrio (resisten altas temperaturas y materiales y solventes altamente corrosivos, pero son mecnicamente frgiles) y Electrodos con cuerpo de Epoxi (son resistentes a los golpes pero no deben ser utilizados a altas temperaturas ni para compuestos inorgnicos).Sustancia de relleno: Recargables (tienen puertos que permiten rellenar la cavidad con la solucin de referencia y por tanto son econmicos y duraderos) y Sellados (prcticamente no necesitan mantenimiento, pero deben ser reemplazados cuando el nivel de la solucin de referencia est bajo).

La base del funcionamiento del electrodo de vidrio es el intercambio de los H+ de la disolucin con los iones monovalentes del vidrio, especialmente Na+ Li+ para los vidrios Jena (Optica Karl Zeiss Alemania, los mejores en su calidad). Este proceso de intercambio involucra casi exclusivamente a los cationes monovalentes del vidrio, puesto que los cationes divalentes y trivalentes (por ej. Ca+2 y Al+3) estn fuertemente enlazados a la estructura del silicato del vidrio. USO DEL ELECTRODO DE VIDRIO PARA LA DETERMINACIN DE pHEl mtodo potenciomtrico ofrece numerosas ventajas respecto al mtodo colorimtrico:Es ms preciso, ya que permite apreciar diferencias de 0,005 unidades de pH mientras que el mtodo colorimtrico slo aprecia diferencias de 0,1 unidades de pH. No se ve afectado por la coloracin que pueda presentar la muestra, como ocurre con el mtodo colorimtrico.

El electrodo de vidrio no se puede conservar seco. El bulbo debe estar hmedo en todo momento; de lo contrario, la capa activa se degrada siendo necesarias algunas horas para restablecer el equilibrio. El electrodo se puede conservar sumergido en una solucin de almacenamiento sino en una solucin tampn pH 4 o pH 7. Es mejor evitar la conservacin del electrodo en soluciones tampn alcalinas con valores superiores a pH 9.18. Los electrodos de referencia se conservan en ambientes acuosos, por ningn motivo en ambientes secos.Acondicionamiento y conservacin de los electrodos de pH