UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA

UNIDAD IZTAPALAPA

CIENCIAS BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD

“EFECTO HIPOGLUCÉMICO PRODUCIDO POR LAADMINISTRACIÓN CRÓNICA DE LA RAÍZ DE Ibervilleasonorae EN RATAS”.

ALUMNA: RUIZ ANGELES CRISTINA

ASESOR: DR. FRANCISCO J. ALARCÓN AGUILAR

______________________________

Vo.Bo.

Efecto hipoglucémico producido por la administración crónica de la

raíz de Ibervillea sonorae en ratas diabéticas.

INTRODUCCIÓNLa Diabetes mellitus (DM) es un grupo de enfermedades metabólicas

caracterizado por desórdenes en el metabolismo de carbohidratos, lípidos y

proteínas, que se presenta debido a una insuficiencia en la secreción y/o acción

de la insulina (ADA, 1997). Varios síntomas y signos característicos tales como

poliuria, polidipsia, polifagia, glucosuria, astenia, hiperglucemia y cetonemia son

causados por estas anormalidades y pueden llevar al paciente a desarrollar

complicaciones agudas y crónicas tales como: cetoácidosis, coma hiperosmolar,

macroangiopatías, microangiopatías, neuropatía, retinopatía e infecciones

recurrentes. Estas complicaciones son las principales causas de invalidez y

mortalidad de los pacientes con DM (Committee Report, 2000).

La DM se clasifica en 4 tipos (Committee Report, 1997):

1.- Diabetes tipo 1 (DM1)

2.- Diabetes tipo 2 (DM2)

3.-Otros tipos específicos de diabetes, tales como: defectos genéticos de la

función de la célula ß, defectos genéticos en la acción de la insulina,

endocrinopatías y otros síndromes genéticos asociados con diabetes.

4.- Diabetes mellitus gestacional.

Desde el punto de vista clínico las dos primeras son consideradas las más

importantes. Por esta razón, a continuación nos referiremos únicamente a la DM1

y DM2.

La DM tipo 1 es causada por la destrucción de las células ß, resultando en

carencia de insulina y por lo tanto hiperglucemia en el individuo que la padece,

motivo por el cual necesita administración diaria de insulina exógena. En cambio,

la DM tipo 2 es causada por deficiencias en la síntesis de insulina ya sea en

calidad o en cantidad (Islas, 1993).

A la fecha la DM es una enfermedad incurable. Una vez manifestada el paciente la

padece durante toda su vida. Por lo tanto, quien la desarrolla tiene que aprender a

controlarla y a sobrevivir con ella. La base en el control adecuado de la DM lo

constituyen:

a) La educación y participación activa del paciente para manejar mejor su

enfermedad.

b) La dieta juega un papel fundamental en el control de la DM. Es importante que

al prescribir una dieta, ésta cumpla con las necesidades energéticas de cada

individuo de acuerdo al tipo de diabetes que padece.

c) El ejercicio físico es necesario para todas las personas y en especial para los

pacientes diabéticos; gracias a la actividad muscular más o menos intensas es

posible metabolizar ácidos grasos, glucosa y cuerpos cetónicos circulantes en

la sangre.

d) El uso de medicamentos hipoglucemiantes se recomienda en aquellos casos

de DM tipo 2 en los que la dieta y el ejercicio físico no resultan ser eficaces en

el control de la glucemia, así como todos los casos de DM tipo 1 (Figuerola,

1997).

Entre los hipoglucemiantes orales se tienen principalmente a las sulfonilureas, que

incrementan la sensibilidad de las células ß a la glucosa, induciéndolas a

incrementar la síntesis de insulina, las sulfonilureas sólo pueden ser usadas en

pacientes con DM tipo 2 (Figuerola, 1997). Por su parte, las biguanidas, inhiben la

absorción y el metabolismo de la glucosa. En este grupo se encuentra la

metformina y fenformina que se administran casi siempre en combinación con una

sulfonilurea. Su mecanismo de acción es mediante la inhibición de la

gluconeogénesis hepática e incremento de la disponibilidad de la glucosa en

músculo y tejido adiposo. Tienen la ventaja de que no producen hipoglucemia,

pero en algunos casos provocan acidosis láctica, por lo que no se deben

administrar cuando hay lesión hepática. La dosis habitual es de 500mg al día que

se incrementa en caso de ser necesario (Figuerola, 1997).

El grupo de las tiazolidinedionas incluye una serie de nuevos fármacos muy

interesantes en cuanto a su mecanismo de acción. A éste pertenece la

desaparecida troglitazona (Rezulin), la roziglitazona y la pioglitazona, entre otras.

Su posible efecto es a través de la disminución de la glucosa, ácidos grasos libres

y triglicéridos en sangre mediante la reducción de la resistencia a la insulina,

incrementando la actividad del receptor. A pesar de las grandes expectativas

iniciales en algunos de estos medicamentos, sus efectos secundarios adversos

han sido motivo de que algunos sean retirados del mercado (Figuerola, 1997).

La acarbosa es un medicamento que interfiere en la absorción de azúcar en el

intestino, después de la comida. Para algunos pacientes, eso significa una mejor

alternativa en el control de su diabetes. En Estados Unidos de Norteamérica se le

conoce como Precose y en México es conocida como Glucobay. Sin embargo, el

uso combinado con insulina o sulfonilureas aumenta la frecuencia de episodios de

hipoglucemia (Figuerola, 1997).

Por otra parte, la insulina es una proteína sintetizada en las células ß de los islotes

de Langerhans y consiste en dos cadenas peptídicas ( A y B ) unidas por dos

puentes disulfuro. En condiciones de hiperglucemia, promueve la captación y

utilización de glucosa por las células de los diferentes órganos incluyendo hígado,

músculo, tejido adiposo y huesos. Actualmente se produce insulina humana ya

sea biosintética a partir de insulina porcina o por tecnología genética (Velasco y

col., 2003).

A pesar del amplio uso de estos medicamentos aún no se ha demostrado de

manera concluyente que tengan un efecto protector a largo plazo contra las

complicaciones cardiovasculares e inclusive, se ha llegado a asegurar que

aumentan la incidencia de éstas (Figuerola, 1997).

Cabe señalar que estas perspectivas pertenecen a una medicina que pone como

requisito cierto nivel económico de los pacientes y no están al alcance de la

población masiva de los países en desarrollo. Según datos de la Organización

Mundial de la Salud (OMS), más del 70% de la población mundial tiene que

recurrir a la medicina tradicional, como única alternativa a su alcance, para

resolver sus principales problemas de salud (Farnsworth y col., 1995).

Esto ha motivado la realización de estudios experimentales y clínicos

encaminados a la validación científica de las propiedades medicinales que la

población en forma empírica atribuye a muchas plantas (Román y col., 1992).

Existen plantas diuréticas, antimicrobianas, analgésicas y antidiabéticas entre

muchas otras. Así, con la finalidad de fundamentar científicamente el uso de las

plantas medicinales, es necesario profundizar en el conocimiento de su acción con

estudios farmacológicos y químicos, sobretodo estudiando aquellas plantas que

han mostrado actividad notable, ya que éstas representan una fuente potencial de

materia prima para la obtención de nuevos fármacos hipóglucemiantes orales

(Alarcón et al., 1994 y 2002).

ANTECEDENTES

Muchos fármacos de origen vegetal fueron el resultado del estudio científico de

plantas cuyas propiedades medicinales son consideradas en la herbolaria. En

México se han realizado estudios sobre el efecto hipoglucémico de algunas

plantas consideradas antidiabéticas y la mayoría de ellas tiene acción

hipoglucemiante.

Ibervillea sonorae, conocida popularmente como wareque o guareque, es una

planta dioica perenne que pertenece a la familia Cucurbitacea; se encuentra

distribuida en los estados de Sonora y Sinaloa. La planta ha sido usada

tradicionalmente por los indígenas Mayo, Opata, Seri y Yaqui para tratar

padecimientos de la piel desde el siglo XVIII (López-Hinojosa, 1988).

Además, desde hace aproximadamente doce años, la decocción de la raíz de

Ibervillea sonorae se ha convertido en una de las plantas más ampliamente

utilizadas en México para el control de la DM (Alpizar-Salazar y col., 1988). Se ha

estudiado la actividad hipoglucemiante de la preparación tradicional de la raíz de

Ibervillea sonorae en ratas y ratones, sanos y diabéticos. La raíz de la planta no

mostró efecto hipoglucémico importante al ser administrada por vía oral. No

obstante al administrarla por vía intraperitoneal causó disminución significativa de

la glucemia tanto en ratones sanos como en ratones con diabetes inducida por

alloxana (Alarcón y col., 2002). Cabe señalar que también se están realizando

estudios en nuestro laboratorio con esta planta para encontrar y aislar el principio

activo, a través de pruebas químico-farmacológicas. En este sentido, cabe señalar

que un extracto orgánico de Ibervillea sonorae (extracto diclorometánico) redujo la

glucemia de manera significativa en ratas con diabetes moderada, pero no en

ratas con diabetes severa y se ha detectado que la planta requiere la presencia de

insulina para ejercer su acción. Estos resultados por lo tanto validan las

propiedades antidiabéticas que la población en forma empírica le ha atribuido a

esta planta medicinal (Alarcón y col., 1993), por lo que se considera importante

continuar con la investigación químico-farmacológica y toxicológica de Ibervillea

sonorae, con la finalidad de fundamentar la necesidad de su estudio a nivel

clínico.

JUSTIFICACIÓN

Aún cuando se tienen buenas expectativas con los medicamentos utilizados

actualmente en el control de la DM, sus problemas de dosificación y sus fallas

secundarias hacen que todavía no se cuente con el medicamento ideal, por lo

cual, se siguen buscando nuevas alternativas para el control de esta enfermedad.

Ahora sabemos que existen varias plantas con actividad hipoglucemiante, entre

las cuales encontramos a Psacalium peltatum, P. de compositum, Lepechinia

caulescens, Cucurbita ficifolia e Ibervillea sonorae, entre muchas otras. La

preparación tradicional de la raíz de I.sonorae ha mostrado actividad

hipoglucemiante en diversos modelos experimentales. Sin embargo, los estudios

aún no son suficientes para poder recomendarlo a los pacientes. Por lo tanto, es

importante determinar si la administración diaria del extracto orgánico activo

(diclorometánico) presenta efectos farmacológicos y toxicológicos, utilizando como

modelo experimental ratas diabéticas.

OBJETIVO GENERAL

Estudiar el efecto hipoglucémico y determinar los probables efectos tóxicos

producidos por la administración diaria de Ibervillea sonorae en ratas diabéticas.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1. Obtener el extracto orgánico activo de la raíz de Ibervillea sonorae.

2. Estudiar la influencia de la administración diaria del extracto sobre la glucemia

de ratas diabéticas.

MATERIAL Y METÓDOS

Material vegetal

El material empleado consistió en raíces frescas de Ibervillea sonorae, las cuales

fueron adquiridas en el mercado de Sonora de la Ciudad de México. La

identificación de la planta se realizó, con ayuda de un especialista en la materia,

usando reglas taxonómicas y comparando las muestras adquiridas con los

ejemplares de I. sonorae del herbario MEXU. Un ejemplar de la muestra fue

depositado en el herbario de plantas medicinales del IMSS, con número de

registro 14,184.

Preparación del extracto orgánico de la raíz de Ibervillea sonorae.

La raíz fresca sin cáscara fue cortada en trozos delgados, los cuales fueron

puestos a secar a la sombra a temperatura ambiente. Una vez secas fueron

molidas en un molino tipo Wiley, modelo 4, usando una rejilla de 1mm de

diámetro. A continuación, se tomaron 100g de la raíz triturada y se dejaron

macerar durante dos semanas en 600 ml de diclorometano. Después de este

tiempo se obtuvo el extracto diclorometánico libre de disolvente con ayuda de un

rotavapor. El extracto fue administrado diariamente a razón de 600 mg/kg de peso

corporal, por vía oral, disuelto en aceite de maíz; como control se usó aceite de

maíz y como fármaco testigo tolbutamida.

Animales de experimentación

Se utilizarón 30 ratas machos Wistar con pesos de 250 a 300g. Los animales se

alimentaron con nutricubos especiales para roedores y se mantuvieron en general

bajo las condiciones especiales que se siguen en el Bioterio de la Universidad

Autónoma Metropolitana Iztapalapa .

Diseño experimental

La diabetes experimental fue inducida por 3 inyecciones intravenosas de alloxana

a intervalos de 48 horas (75mg/kg cada una). El nivel de glucosa fue determinado

7 días después de la administración. Los animales con glucemias mayores a 200

mg/dl fueron considerados con diabetes experimental. Se formaron tres grupos de

10 ratas diabéticas cada uno. El extracto diclorometánico de la raíz de I.sonorae

(600mg/kg de peso corporal por día) se administró durante 41 días al primer

grupo. Los otros dos grupos recibieron aceite de maíz (4ml/kg) y tolbutamida

(150mg/kg) durante el mismo tiempo que el extracto. El peso corporal, los niveles

de glucosa en sangre, colesterol, transaminasa glutámico oxalacética (TGO),

transaminasa glutámico pirúvica (TGP), triglicéridos y niveles plasmáticos de ácido

úrico fueron determinados los días 1,14, 28 y 42.

El extracto diclorometánico y la tobutamida fueron disueltos en aceite de maíz y

se administraron a razón de 4 ml/kg de peso corporal. El peso corporal se

determinó cada 7 días hasta finalizar el estudio.

Las muestras de sangre primero fueron obtenidas por la vena de la cola de cada

rata para determinar la glucemia (n=10), usando un aparato Accutrend Sensor

Comfort y tiras reactivas (Roche). Después, se eligieron 4 ratas al azar para la

determinación de los otros parámetros bioquímicos. Las ratas fueron

anestesiadas con éter, obteniendo 1 ml de sangre por punción cardiaca en viales

con heparina. El plasma fue separado inmediatamente por centrifugación a 3000

RPM durante 10 minutos; posteriormente, los niveles de colesterol, TGO, TGP,

triglicéridos y ácido úrico fueron cuantificados en un aparato Reflotrón (Roche)

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

El análisis estadístico de los resultados se realizó mediante la prueba t-Student

con un nivel de significancia de P< 0.05.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En el grupo control la glucemia se incrementó de manera significativa de

338.4±128.6 a 517.5±116.6 mg/dl a los 42 días de la administración (P<0.05). El

peso se vio disminuido de 290.5±30.8 a 246.5±70.0 y no se observaron cambios

notables en los niveles de colesterol, TGO y ácido úrico. En este grupo fue

importante el aumento en los triglicéridos de 77.3±14.6 a 225.6±56.1 mg/dl y de

manera moderada también se observa un incremento en el valor de TGP (Tabla1).

En el grupo tratado con tolbutamida se observó un incremento en la glucosa de

339.4±71.0 a 404.3 mg/dl (P<0.05) y de la misma manera los triglicéridos se

incrementaron de 88.2±36.5 a 152.6±58.3 mg/dl (P<0.05). El peso fue ligeramente

incrementado de 238.5±43.1 a 266.5±51.6g (P<0.05). En cuanto al colesterol,

TGO y TGP no se encontraron cambios importantes y el ácido úrico no mostró

ningún cambio después de los 42 días del tratamiento (Tabla 2).

El grupo tratado con el extracto diclorometánico mostró un decremento en la

glucemia de 355.9±118.7 a 307.5±130.8 mg/dl y un importante aumento de peso

corporal de 285.2±61.2 a 334.5±47.1g ambos significativos (P<0.05). En este

grupo los triglicéridos, colesterol, TGO, TGP y ácido úrico no mostraron cambios

importantes a los 42 días del tratamiento (Tabla 3).

Tabla 1. Niveles de glucosa, peso corporal, niveles plasmáticos de ácido úrico,

transaminasa glutámico oxalacética (TGO), transaminasa glutámico pirúvica (TGP),

colesterol y triglicéridos después de la administración diaria de aceite de maíz

(control) en ratas con diabetes inducida por alloxana (media±D.E).

* Diferencia significativa con respecto a los valores iniciales (P< 0.05).

Tiempo Glucemia(mg/dl)

Pesocorporal(g)

Ácidoúrico

(mg/dl)

TGO(U/l)

TGP(U/l)

Colesterol(mg/dl)

Triglicéridos(mg/dl)

Día 0 n=10 338.4±128.6 290.5±39.8 2.0 126.5±60.2 85.3±77.5 101.5±1.9 77.3±14.6

Día 14n=6 460.8±169.7 270.7±31.5 <2.0 136.6±47.1 50.5±17.3 116.3±9.5 75.7±4.0

Día 28n=6 494.2±103.8* 261.7±45.0 2.6±0.5 71.1±4.9 113.9±24.3 102.6±4.6 449±89.8*

Día 42n=6 517.5±116.6* 246.5±70.0 2.3±0.7 93.5±14.6 169.5±41.7 100.7±1.5 225.6±56.4*

Tabla 2. Niveles de glucosa, peso corporal, niveles plasmáticos de ácido úrico,

transaminasa glutámico oxalacética (TGO), transaminasa glutámico pirúvica (TGP),

colesterol y triglicéridos después de la administración diaria de tolbutamida (testigo)

en ratas con diabetes inducida por alloxana (media±D.E).

TiempoGlucemia(mg/dl)

Pesocorporal (g)

ÁcidoÚrico

(mg/dl)

TGO(U/l)

TGP(U/l)

Colesterol(mg/dl)

Triglicéridos(mg/dl)

Día 0n=10 339.4±71.0 238.5±43.1 <2.0 76.2±16.8 77.4±31.2 <100 88.2±36.5

Día 14n=7 338.1±54.5 250.8±41.9 <2.0 67.5±26.0 53.8±21.2 <100 64.6±40.6

Día 28n=5 424±97.7* 234.1±54.1 <2.0 60.7±40.5 38.7±45.8 <100 79.7±3.2

Día 42n=5 404.3±64.9* 260.3±51.6 <2.0 47±1.4 65.4±5.7 <100 152.6±58.3*

* Diferencia significativa con respecto a los valores iniciales (P< 0.05).

Tabla 3. Niveles de glucosa, peso corporal, niveles plasmáticos de ácido úrico,

transaminasa glutámico oxalacética (TGO), transaminasa glutámico pirúvica (TGP),

colesterol y triglicéridos después de la administración diaria del extracto

diclorometánico de la raíz de Ibervillea sonorae en ratas con diabetes inducida por

alloxana (media±D.E).

Tiempo Glucemia(mg/dl)

Pesocorporal

(g)

Ácidoúrico

(mg/dl)

TGO(U/l)

TGP(U/l)

Colesterol(mg/dl)

Triglicéridos(mg/dl)

Día 0n=10 355.9±118.7 285.2±61.2 <2.0 68.1±11.9 140.1±119.7 108.3±14.4 108.2±99.9

Día 14n=7 324.4±113.9 318.7±50.7 <2.0 93.1±65.7 71.1±26.7 <100 67.5±44.4

Día 28n=5 368.5±96.5 325.8±59.3 2.1±0.2 62±13 51.8±22.4 <100 82.1±14

Día 42n=5 307.5±130.8* 334.5±47.1* 2.7±1.0 41.5±1.2 55.6±23.6* <100 76.5±28.6*

* Diferencia significativa con respecto al control con aceite de maíz (P< 0.05).

Uno de los objetivos de este trabajo fue determinar el efecto hipoglucémico y los

probables efectos tóxicos producidos por la administración diaria de la raíz de I.

sonorae en ratas con diabetes experimental, con la finalidad de fundamentar su

uso en el control de la DM y comparar su efectividad con los resultados obtenidos

previamente. En estudios anteriores el efecto hipoglucémico de la raíz de I.

sonorae fue validado usando una preparación tradicional (decocción acuosa),

administrada por vía intraperitoneal, mostrando reducciones altamente

significativas tanto en ratones sanos como en ratones diabéticos (Alarcón et al.,

2002). En estudios agudos previos realizados en el laboratorio un extracto

diclorometánico redujo los niveles de glucemia en ratas con diabetes modera.

En el presente estudio, el extracto diclorometánico de I. sonorae fue administrado

diariamente por vía oral a ratas con diabetes inducida por alloxana, causando

reducciones importantes de la glucemia con respecto al estudio control (P<0.05).

Las ratas control mostraron niveles de glucemia de 338.4 al inicio y 517.5 mg/dl al

final del estudio; mientras que en el grupo tratado con tolbutamida la glucemia

osciló entre 339.4 al inicio y 404.3 mg/dl al final del estudio; el grupo tratado con el

extracto diclorometánico mostró valores de 355.5 al iniciar y 307.5 mg/dl al final

del estudio. Con respecto al peso, el grupo control presentó una disminución de

290.5 al inicio a 246.5g al final del estudio; el grupo tratado con tolbutamida mostró

un ligero aumento y con respecto al grupo tratado con diclorometano se observó

un aumento estadísticamente significativo con respecto al control en el peso de

285.2 al inicio a 334.5g al final del estudio (P<0.05).

En el grupo control y en el grupo tratado con tolbutamida se observó un

incremento en los niveles de triglicéridos; por su parte, el grupo que recibió el

extracto diclorometánico presentó descensos importantes en este parámetro, los

cuales fueron también significativos con respecto al control (P<0.05). El grupo

tratado con tolbutamida y el grupo tratado con el extracto activo no mostraron

cambios importantes en los niveles de TGP; en cambio en el grupo control se

observó un incremento moderado, siendo las diferencias estadísticamente

significativas (P<0.05). En cuanto a los niveles de colesterol, TGO y ácido úrico no

se observaron cambios importantes a los 42 días del tratamiento en ninguno de

los grupos estudiados.

Cabe señalar que después de 7 días de iniciado el estudio algunos animales

mostraron diarreas continuas y disminución en su actividad motora. Además, los

animales de los tres grupos mostraron inflamación del colón, probablemente

inducido por el estrés provocado por el sondeo intragástrico al que fueron

sometidos todos los animales. Aparte de esto, no se observaron efectos tóxicos

importantes en ninguno de los animales tratados.

Así, la administración diaria del extracto diclorometánico a ratas diabéticas no

produce efectos tóxicos notables, pero si causa reducción de la glucemia y

disminución de los triglicéridos .

Es importante mencionar que existen varias especies de la familia Cucurbitaceae

que son consideradas como remedios antidiabéticos. Algunas de ellas, además de

causar efecto hipoglucémico producen efectos tóxicos, tanto por vía oral como por

vía intraperitoneal. Un ejemplo importante es el fruto maduro de Cucurbita ficifolia,

el cual produce normalización de los niveles de glucosa en sangre en ratas con

diabetes experimental después de 14 días de ser administrada diariamente, sin

embargo también produce efectos tóxicos y letales en estos animales (Alarcón et

al., 2002). En ratones sanos la DL50 reportada por vía intraperitoneal es de 625

mg/kg de peso corporal, mientras que por vía oral es de 3, 689 mg/kg de peso.

Así, el jugo del fruto maduro de C. ficifolia se considera moderadamente toxicó

(Hernádez et al., 2002). En el caso de I. sonorae, se ha determinado en estudios

agudos previos que aún a dosis tan altas como 800 mg/kg por vía intraperitoneal,

o bien 2000 mg/kg por vía oral, no producen efectos tóxicos ni letales en ratones

sanos (Alarcón et al., 2002).

Por lo tanto, la planta no presenta efectos tóxicos notables ni en estudios agudos

ni en estudios crónicos, como fue corroborado en el presente trabajo.

CONCLUSIÓN

1) La administración diaria del extracto diclorometánico de la raíz de I. sonorae (42

días, p.o.) produce reducciones significativas de la glucemia, niveles plasmáticos

de triglicéridos y TGP con respecto al control, sin efectos tóxicos notables en

ratas con diabetes inducida por alloxana.

2) Los niveles plasmáticos de ácido úrico, TGO y colesterol no mostraron

modificaciones importantes en ninguno de los grupos estudiados.

BIBLIOGRAFíA

•ADA, 1997. Clínical practice recommendations 1997: Screening for diabetes.

Diabetes Care 20(1), 22-24.

•Alarcón, FJ; Román, R; Flores,JL. 1993. Plantas usadas en el control de la

Diabetes mellitus. Ciencia 44:363-381.

•Alarcón, FJ; Campos, AE; Xolalpa, S; Hernández, E; Román, R. 2002. Study of

the hypoglycaemic activity of Ibervillea sonorae rotos in healty and diabetic mice

and rats. Pharmaceutical Biology 40: 570-575.

•Alarcón, FJ; Hernandez, GE; Campos AE; Xolalpa S; Rivas JF; Vazquez LI,

Roman R. 2002. Evaluation of the hypoglycemic effect of Cucurbita ficifolia

(Cucurbitaceae) in different experimental. Journal of Ethnopharmacology 82: 185-

189.

•Alpizar- Salazar M, Sotomayor-Gallardo A, Castro-Ramos MA, Zarate-Aguilar A,

Madrazo-Navarro M. 1988: Diabetes Mellitus, prioridad institucional. Salud

Comunitaria 2: 31-35.

•American Diabetes Association, Report of the Expert Committee on the Diagnosis

and Diabetes mellitus ( 2002), Diabetes Care, 20: 1183-1197.

•Committee Report. 1997. Report of the expert Commite on the Diagnosis and

Classification of Diabetes Mellitus. Diabetes Care 20: 1183-1197.

•Farnsworth NR, Marles RJ. 1995. Antidiabetic plants and their active constituents.

Phytomedicine 2: 137-189.

•Figuerola D. 1997. Diabetes. Tercera edición. Ed. Masson, S.A. Madrid, España.pp. 19-25.

•Hernández E; Campos EF; Alarcón FJ; Vazquéz LI; Flores JL; Roman R. 2002.

Acute Toxicological Study of Cucurbita ficifolia juice en mice. Proceeding of

Wester Pharmacology Society 45: 42-43.

•Islas A.S. 1993. Diabetes Mellitus. Primera edición, Ed. McGraw-Hill, México, D.F

pp. 1,3-6,10,261.

•López R, Hinojosa A. (1988): Catálogo de plantas medicinales sonorenses.

Universidad de Sonora, Hermosillo Son, México pp.133.

•Román R, Lara A, Alarcón FJ, Flores JL. 1992. Hypoglucemic activity of some

antidiabetic plants. Archives of Medical Research, 23 (3): 105-109.

•Velasco Martín A, Román del Barrio L, Serrano Molina J. 2003. Farmacología

Fundamental. 1ª. Edición. Ed. McGraw-Hill. España. pp. 695-707.