Se diagnosticó por primera vez en el continente africano.

Se transmite por contacto de cualquier fluido de una persona

infectada.

No hay cura (hasta el momento)

Mortalidad del 90%

• ¿Qué tan lejos esta nuestro país de registrar el

primer caso de este virus?

Img. [Nuestro México]

¿Cómo saber con certeza que una persona contrajo el virus?

DIAGNÓSTICO POR LABORATORIO.

Se entiende por diagnosticar a recabar datos para analizarlos e

interpretarlos, para poder así evaluar cierta condición

Diagnosticar el ébola es complicado los primeros días pues los síntomas

iniciales no específicos de la enfermedad.

[iztacala.unam.mx, 2008].

Pero si se sospecha, la persona infectada debe

ponerse en tratamiento y notificar a las

autoridades de salud pública.

ÉBOLA, ¿CUÁL ES SU DIAGNÓSTICO?

• Prueba de inmunoadsorción enzimática (ELISA)

• Pruebas de detección de antígeno

• Prueba de seroneutralización

• Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR)

• Aislamiento del virus mediante cultivo celular.

PRUEBA DE INMUNOADSORCIÓN ENZIMÁTICA

(ELISA)

Permite detectar pequeñas partículas llamadas antígenos.

Se utilizan moléculas con dos componentes acoplados: Un anticuerpo (se une al antígeno de forma específica) y una enzima(Se activa y señala la unión al antígeno) .

Los resultados pueden tardar varios días .

[webconsultas,2014]

La prueba ELISA es bien conocida para detectar el VIH-SIDA.

[img. es.dreamstime.com]

Antígeno: Es una sustancia ajena al cuerpo que el sistema

inmunológico reconoce como una amenaza. Algunos ejemplos de

antígenos son las toxinas de las bacterias y los virus.

PRUEBAS DE DETECCIÓN DE ANTÍGENO

Las siguientes técnicas inmunológicas pueden utilizarse tanto para la detección de antígenos (métodos directos), como de (métodos indirectos).

Inmunofluorescencia (IF)

Enzimoinmunoanálisis (EIA)

Test de Aglutinación.

Radioinmunoensayo (RIA)

Anticuerpos: Los anticuerpos son unas proteínas en

forma de Y producidas por el sistema inmunológico

para identificar y neutralizar las sustancias dañinas y

extrañas al cuerpo.

INMUNOFLUORESCENCIA (IF)

Se utiliza para una identificación rápida delvirus directamente sobre la muestra o se lapuede emplear para la confirmación del efectoobservado en cultivos celulares.

Consiste en conjugar colorantes fluorescentescon anticuerpos o antígenos, exponiéndolos aotros anticuerpos. [microbiologiaseminario4,2009]

Cuando la reacción es positiva y se expone ala luz ultravioleta se producirá fluorescenciaobservable bajo el microscopio deinmunofluorescencia. [javeriana.edu]

ENZIMOINMUNOANÁLISIS (EIA)

Se basan habitualmente en la captura del antígeno poranticuerpos específicos unidos a una fase sólida

El antígeno viral presente en la muestra clínica se combina con el

anticuerpo fijado a la fase sólida y el antígeno viral se detectamediante la adición de otro anticuerpo específico conjugado a

una . [biologia.edu, 2007]

Enzima: Una enzima es una proteína natural que cataliza

reacciones bioquímicas específicas, reacciones que sin el

enzima se producirían demasiado lentamente o no se

producirían.

TEST DE AGLUTINACIÓN.

Dependen de la fijación inicial de anticuerpos antivirales específicossobre o partículas de látex.

Este reactivo se incuba con la muestra clínica en la cual se investigael antígeno y las partículas se aglutinan si el antígeno adecuado seencuentra presente.

Estas pruebas en general se complementan o se confirman pormedio de otros ensayos debido al elevado porcentaje de reaccionesinespecíficas. [biologia.edu, 2007]

RADIOINMUNOENSAYO (RIA)

Estos ensayos tienen una buena sensibilidad y especificidad, pero laaparición de un método como el ensayo inmunoenzimático (EIA) hareemplazado las técnicas de RIA en la mayor parte de los casos dedetección de antígeno viral. [biologia.edu, 2007]

PRUEBA DE SERONEUTRALIZACIÓN

Consiste en determinar la capacidad que tiene el suero objeto deestudio de neutralizar el efecto de un virus sobre la línea celularsensible.

Para ello se utilizan diferentes diluciones del suero problema y secomparan sus resultados frente a un suero control. [biologia.edu,2007]

REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA

CON TRANSCRIPTASA INVERSA (RT-PCR)

Esta es una de las pruebas más utilizadas y adecuadas.

De acuerdo con el Centro Nacional de Biotecnología de EU el estudio estan acertado que si se realiza en las etapas tempranas de la infecciónpuede ser detectada de 24 a 48 horas.

La prueba analiza el ADN y es capaz de realizar varias copias queen su interior contienen variaciones.

Las diferencias en la muestra se resaltan de manera fluorescentepara indicar que se trata de un agente infeccioso en el paciente.[microbiologiaseminario4, 2009]

AISLAMIENTO DEL VIRUS MEDIANTE CULTIVO

CELULAR.

El cultivo celular es el proceso mediante el cual células, ya seancélulas procariotas, eucariotas o vegetales, pueden cultivarse encondiciones controladas.

En la práctica el término “cultivo celular” se usa normalmente enreferencia al cultivo de células aisladas de eucariotaspluricelulares. [biologia.edu, 2007]

TOMA DE MUESTRAS

Una vez se identifique un individuo con enfermedad compatiblecon EVE, se deberá tomar muestra (sangre total y/o suero) para el

diagnóstico.

a) La muestra de elección es sangre o suero obtenido en formaestéril y mantenido a 4ºC.

Todo caso compatible de EVE o caso confirmado de EVE, deberáser notificado a través de estas vías formales a las autoridades desalud pública, y de allí a la comunidad internacional a través delos canales establecidos por el Reglamento SanitarioInternacional (RSI).

b) La muestra deberá ser tomada por personal de salud entrenado.

c) La confirmación por infección por virus del Ébola sólo puede ser realizada en pacientes que ya han desarrollado síntomas.

d) Las muestras deben enviarse refrigeradas, dentro de recipientes impermeables y cerrados, y por un servicio de transporte rápido, siendo el remitente el responsable de la bioseguridad durante el traslado.

e) La muestra debe ser acompañada por la ficha clínico-epidemiológica correspondiente.

f) Las muestras deberán ser remitidas de acuerdo a los lineamientosde la Red Nacional de Dengue y otros Arbovirus.

g) Las muestras deberán canalizarse a través de la CoordinaciónJurisdiccional de Redes de Laboratorios.[epidemiologia.salud.gob, 2014]

MEDIDAS DE SEGURIDAD EN LOS LABORATORIOS

La muestra deberá ser tomada por personal de salud

entrenado, extremando las medidas de bioseguridad, y con

equipo de protección adicional (guantes, mascarillas,

protectores oculares preferiblemente con visor anti-

empañante, delantal o mandil impermeable y en lo posible

desechable). [epidemiologia.salud.gob, 2014]

Medidas de alta seguridaddurante la toma ydiagnóstico de los análisispara la detección del virusdel ébola [libertaddigital]

El ébola está clasificado como patógeno de riesgo Grupo 4, por lo que requiere ser

manipulado en un nivel de bioseguridad equivalente (BSL-4).

[epidemiologia.salud.gob]

EMBALAJE DE MUESTRAS

Los reglamentos sobre mercancías peligrosas exigen que todo elpersonal una capacitación adecuada.

Para el transporte el personal deberá recibir una capacitaciónque incluya los requisitos para el transporte de estas.

El personal capacitado para el embalaje de muestras categoríaA, recibirá las muestras, estas se deberán embalar siguiendo lainstrucción de embalaje P620 para sustancias infecciosas

[epidemiologia.salud.gob, 2014]

ENVÍO DE MUESTRAS

Las muestras deberán ser enviadas en red fría (2 a 8 grados

centígrados) y con estricta cadena de custodia.

El traslado deberá ser efectuado por empresas de mensajería

especializadas y autorizadas en el transporte de sustancias

infecciosas. [epidemiologia.salud.gob, 2014]

RECEPCIÓN DE MUESTRAS EN EL INDRE

Todas las muestras que se reciban en el InDre serán

registradas en el área de Recepción de muestras y enviadas

inmediatamente para su proceso en el Laboratorio de

Bioseguridad Nivel 3. [epidemiologia.salud.gob, 2014]

InDre: Instituto de Diagnóstico

y Referencia Epidemiológicos.

PROCEDIMIENTO DE DIAGNÓSTICO

Una vez recibida la muestra en el InDre, serán trasladadas allaboratorio de Bioseguridad Nivel 3 en donde se tomará unaalícuota de 200 ml de suero.

Se extraerá el material genético para realizar el RT-PCRespecífico para detectar algún patógeno de la familiaFiloviridae.

En caso de obtenerse un resultado negativo a Filovirus, serealizara el diagnostico deferencial para otros etiológicosendémicos en el continente africano.[epidemiologia.salud.gob, 2014]

CONFIRMACIÓN DEL VIRUS

Si el resultado es positivo se realizara un RT-PCR para la

identificación de especie y se realizara la secuenciación y

genotipificación del producto obtenido.

Se enviará la muestra de suero positivo al centro colaborador

de la OMS que se encuentra en Atlanta para la confirmación

definitiva de la infección por el virus del ébola.

[epidemiologia.salud.gob, 2014].

REFERENCIAS

• Organización Mundial de la Salud (Enfermedad por el virus del ébola, implicaciones de la introducción en las Américas) Diagnostico por laboratorio [ En línea]: documento electrónico encontrado en Internet. 13 de agosto del 2014

Disponible en:

<http://www.paho.org/hq/index.php?option=com_docman >

Dirección de Epidemiología. Ministro de Salud de la Nación Argentina. (Enfermedad por virus del Ébola) [ En línea]: documento electrónico encontrado en Internet. 11 de agosto del 2014 Páginas 3, 4.

Disponible en: <http://www.msal.gov.ar/images/stories/epidemiologia/inmunizaciones/11-08-2014-alerta-6-enfermedad-virus_ebola-.pdf>

• Dirección general de Epidemiologia, Secretaria de salud México (Lineamientos estandarizados para la vigilancia Epidemiológica y Diagnostico por laboratorio de enfermedad por el virus del Ébola)[ En línea]: documento electrónico encontrado en Internet. 19 de agosto del 2014 Paginas: 25,26,27

Disponible en: <http://www.epidemiologia.salud.gob.mx/doctos/lineamientos/ebola/lineamientos_ebola_19ago14.pdf>

• Organización Mundial de la Salud (Enfermedad por el virus del ébola [Diagnóstico]) [En línea]: texto encontrado en Internet. Nota descriptiva n° 103 Abril de 2014

Disponible en:

<http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs103/es/>

• Centros para el control y la prevención de enfermedades. (Enfermedad del ébola [Diagnóstico]. [En línea]: texto encontrado en Internet. 19 de septiembre de 2014.

Disponible en:

<http://www.cdc.gov/vhf/ebola/spanish/diagnostico.html>

• Universidad Nacional Autónoma de México. Rivas Muñoz, Ricardo. (Generalidades del diagnóstico) [En línea]: texto encontrado en Internet. 2008.

Disponible en:

<http://www.iztacala.unam.mx/rrivas/diagnostico.html>

• Web consultas. Salceda, David (ELISA).[En línea]: texto encontrado en Internet. 06 de junio 2014

Disponible en:

<http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/elisa-13695>

• Seminario de Microbiología. (Toma de muestra y diagnóstico

microbiológico [Detección de antígenos- anticuerpos)).[En línea]: texto

encontrado en Internet. 29 de mayo del 2009.

Disponible en:

<http://microbiologiaseminario4.blogspot.mx/2009/05/intro.html>

• Sandin, María Daniela Clínica y Diagnóstico Microbiológico (Métodos de

estudio y Diagnóstico Viral).[En línea]: texto encontrado en Internet. 2007

Disponible en:

<http://www.biologia.edu.ar/viruslocal/diagnostico%20viral.htm>