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TOXICOLOGÍA AMBIENTAL
MOMENTO 3. BIOENSAYO
PRESENTADO POR:
GRUPO: 358027
TUTORA:
UNIVERSIDAD ABIERTA Y A DISTANCIA – UNAD
ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS, PECUARIAS Y DE MEDIO AMBIENTE
PROGRAMA INGENIERÍA AMBIETNAL
OCTUBRE DE 2015
INTRODUCCION
La contaminación química del agua que en su mayoría proviene del uso de agroquímicos,
actividades industriales y fuentes domésticas, y que posteriormente es expulsada al medio de
manera indiscriminada y sin ningún tipo de control, se ha convertido en los últimos años en la
principales causantes de alteraciones en el ecosistema acuático y terrestre, ya que, la mayoría de
estos vertimientos contiene sustancias potencialmente toxicas que alteran el ciclo de vida normal
de los organismos.
En relación a lo anterior, con el fin de conocer dichos efectos, se llevó a cabo un Bioensayo de
toxicidad con semillas de lechuga, a partir de una muestra de agua tomada en el Rio Pasto; donde
a partir del proceso experimental, se evidencio afectación de los agentes físico-químicos de la
muestra en las semillas de lechuga, lo que ocasiono inhibición en la germinación de la semilla y
elongación de radícula principalmente.
El trabajo lo desarrolle en mi casa, siguiendo el protocolo de la guía de actividades y empleando
todos los materiales requeridos para el montaje del bioensayo.
Diagrama de flujo del procesos
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES
Control positivo
Control negativo
Muestra Control
negativo Muestra
R1Muestra
R2
Caja de Petri + papel filtro
Caja de Petri + papel filtro
Caja de Petri + papel filtro
Caja de Petri + papel filtro
Caja de Petri + papel filtro
Caja de Petri + papel filtro
4 mL 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL 4 mL
20 semillas de lechuga
20 semillas de lechuga
20 semillas de lechuga
20 semillas de lechuga
20 semillas de lechuga
20 semillas de lechuga
Se envuelven las cajas de Petri en papel aluminio
Se introducen las cajas de Petri en una bolsa plástica
Se dejaron durante 120 horas (5 días)
Descripción de la muestra.
La muestra de agua utilizada fue tomada en el Rio Pasto, en la zona baja, sector Noroccidental
de la ciudad de Pasto. El punto donde se tomó la muestra se localiza en las coordenadas
geográficas 1°13’55.29”N – 77°17’22.49”O.
En este punto el agua presenta un color oscuro y muy mal olor; a simple vista en el rio se
observan residuos solidos que son arrastrados por la corriente. Las características físico-químicas
del agua son altamente toxicas y perjudiciales para los seres vivos, ya que recibe vertimientos de
la ciudad, principalmente de empresas industriales como las curtiembres, que vienen generado un
deterioro progresivo en la dinámica y vida del rio.
1. Calculo de porcentaje de germinación
Cajas de Petri
Variables
Control
(-)
Control
(-)
Control
(+) Muestra Muestra R1 Muestra R2
Número de
semillas
germinadas
11 7 6 9 8 6
Promedio de
controles
negativos
9
Porcentaje de
germinación100 88,89 66,67
2. Calculo del porcentaje de inhibición de la germinación
% Inhibicion germinación=(SgCneg−SgMR)
SgCneg∗100
% Inhibicion germinación=(9−7,67)
9∗100
% Inhibicion germinación=14,78
3. Medida de elongación de hipocotilo en cada caja de Petri
SemillaCaja de
Petri
Control (-)
Caja de
Petri
Control (-)
Caja de
Petri
Control (+)
Caja de
Petri
Muestra
Caja de
Petri
Muestra
R1
Caja de
Petri
Muestra
R2
1 31 25 2 27 20 31
2 20 23 25 22 4
3 13 17 5 14 19
4 29 29 22 19 28
5 26 18 20 9 25
6 18 13 13 18
7 15 21
8 22
9 28
10 17
11 18
Promedio EH 21,55 20,86 2,00 18,67 16,80 20,83
Desviación
estándar 6,09 5,37 8,26 5,26 9,66
Coheficiente
de variación 28,26 25,73 44,26 31,33 46,38
4. Cálculo de porcentaje de inhibición de hipocotilo.
% Inhibición DesarrolloHipocotilo=( PromedioEHCneg−Promedio EH MPromedio EHCneg )∗100% Inhibición DesarrolloHipocotilo=( 21,20−18,7721,20 )∗100% Inhibición DesarrolloHipocotilo=11,46
5. Medida de elongación de la radícula en cada caja de Petri.
SemillaCaja de
Petri
Control (-)
Caja de
Petri
Control (-)
Caja de
Petri
Control (+)
Caja de
Petri
Muestra
Caja de
Petri
Muestra
R1
Caja de
Petri
Muestra
R2
1 28 21 0 13 15 13
2 21 19 10 28 9
3 9 15 0 9 12
4 17 21 14 12 18
5 23 10 11 7 16
6 16 11 6 12
7 13 18
8 19
9 22
10 14
11 16
Promedio EH 18,00 16,43 9,00 14,20 13,33
Desviación
estándar 5,31 4,54 5,22 8,29 3,20
Coheficiente
de variación 29,50 27,64 57,95 58,37 24,03
6. Cálculo de la inhibición de radícula
% Inhibición Desarrollo Radícula=( PromedioEH Cneg−Promedio EH MPromedio EHCneg )∗100% Inhibición Desarrollo Radícula=( 17,21−12,1817,21 )∗100% Inhibición Desarrollo Radícula=29,23
7. Cálculo de índice de germinación IG
% Longitud deradícula muestra=Longitud radículaMuestra (mm)
Longitud radículaCont rolnegativo (mm)∗100
% Longitud deradícula muestra=12,1817,21
∗100
% Longitud deradícula muestra=70,77
% germinaciónmuestra= Numerode semillas germinadasmuestraNumerode semillas germinadasControl negativo
∗100
% germinaciónmuestra=5,679
∗100
% germinaciónmuestra=63
IG=Longitud deradículamuestra (% )∗Germinaciónde lamuestre (%)
100
IG=70,77%∗63%100
IG=44,58%
8. Análisis de resultados
En algunas semillas germinadas de la muestra se observa un color café oscuro en los
cotiledones. Así mismo se evidencia esta coloración leve en las semillas que no germinaron, lo
cual es un indicador de fitotoxicidad.
Los porcentajes de inhibición obtenidos y calculados fueron germinación 14,78%, elongación
hipocotilo 11,46% y elongación de radícula 29,23%, con lo cual podemos asumir que los tóxicos
presentes en la muestra de agua del Rio Pasto, tuvo mas efecto en el desarrollo del hipocotilo y
en la germinación de las semillas principalmente.
En cuanto al índice de germinación – IG, se presenta una inhibición en crecimiento y germinación
significativa del 44,58%.
Conclusiones
1. ¿Su muestra supera el porcentaje de inhibición de crecimiento de radícula o hipocotilo en un
50%?
De acuerdo a la experiencia y a los cálculos realizados la muestra tomada no supera el porcentaje
del 50% de inhibición de crecimiento de radícula o hipocotilo.
2. ¿Hay riesgo de toxicidad en la muestra tomada?
Evidentemente, existe un alto riesgo de toxicidad en la muestra tomada del rio pasto, ya que esta
fuente hídrica recibe constantemente descargas de empresas industriales como curtiembres,
plantas de sacrificio, servitecas, entre otras; dicha toxicidad se pudo observar en el bioensayo,
mediante la presencia de manchas de color café en las semillas y afectaciones en la germinación
de las mismas durante las 120 horas de exposición.
Anexo 1. Registro Fotográfico.
BIBLIOGRAFÍA
CORPONARIÑO. (2011). Plan de Ordenamiento del Rio Pasto. Recuperado de http://corponarino.gov.co/expedientes/descontaminacion/porhriopasto.pdf