“CARACTERIZACIÓN DE LOS PROPÓLEOS Y FUTURA NORMATIVA LEGAL”
María Teresa Sancho Ortiz Universidad de Burgos
Facultad de Ciencias Departamento de Biotecnología y Ciencia de los Alimentos
Área de Nutrición y Bromatología
1. CARACTERIZACIÓN DE LOS PROPÓLEOS
1. Caracterización de los propóleos-IMPORTANCIA
1. Caracterización de los propóleos-IMPORTANCIA
1. Caracterización de los propóleos-CONCEPTO
Exudaciones vegetales
PROPÓLEOS Propolis
pro-: delante o en defensa de; y –polis: ciudad
pegar sella espacios abiertos
pegamento de abejas
Chopos Álamos Sauces Castaños Abetos Abedules Pinos Jaras Plantas aromáticas
Capullos Hojas Ramas Cortezas
ZONAS TEMPLADAS
1. Caracterización de los propóleos-CONCEPTO
Temperatura exterior: 22-28 oC Duración aproximada de la recolección: 1 hora
modificación
ADICIÓN cera polen enzimas
secreciones salivares
sellado
embalsamado
1. Caracterización de los propóleos-EXTRACCIÓN
Raspado
Materiales plásticos de uso alimentario
Rejillas
Mallas
50-300 g propóleos/colmena/año
Origen botánico Época de recolección
Grado de frescura Conservación
Especie de abeja
Color: amarillo, castaño, verde, rojo o negro Sabor: balsámico, resinoso, amargo o picante Consistencia: viscosa, pegajosa o quebradiza • a menos de 15 ºC es duro y quebradizo • a más de 30 ºC es pegajoso y blando Olor: penetrante, balsámico o resinoso Propiedades: antisépticas y antioxidantes
COMPOSICIÓN DEPENDIENTE:
1. Caracterización de los propóleos-PECULIARIDADES
1. Caracterización de los propóleos-PROPIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS
Densidad: 1,11-1,14 g/ml Punto de fusión: 80-105 oC Solubilidad: • muy ligeramente soluble en agua
• la mayoría de sus componentes son solubles en alcohol
• la solubilidad se incrementa con mezclas de solventes
etanol-cloroformo etanol-tolueno
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1. Caracterización de los propóleos-TIPOS
Propóleos rojo Propóleos verde
Origen geográfico
América del Norte, Europa, Zonas
templadas de Asia
Brasil, Cuba, México,
VenezuelaBrasil
Origen botánicoPrincipalmente
chopos y álamos (Populus sp.)
Granadillo o Cocobolo
(Dalbergia sp.)
Chilca o romerillo (Baccharis dracunculifolia DC.)
Principales constituyentes
Flavonoides, ácidos hidroxicinámicos y
sus ésteresIsoflavonoides
Ácidos diterpénicos, lignanos y derivados del ácido ρ-
cumárico
Propóleos de zonas tropicalesPropóleos de zonas
templadas
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1. Caracterización de los propóleos-COMPOSICIÓN. ZONAS TEMPLADAS
(1%-3%)Sustancias FENÓLICAS: fenoles, ácidos fenólicos,
ésteres, flavanonas, dihidroflavanonas,
flavonas, flavonoles, chalconas glicéridos
fenólicos
Sustancias ALIFÁTICAS: ácidos, alcoholes, ésteres, aldehidos, cetonas, ácido
benzoico y ésteres
ACEITES ESENCIALES: monoterpenos,
sexquiterpenos, sustancias aromáticas, generalmente
volátiles
OTROS COMPUESTOS
Parcialmente solubles en
etanol
(aproximadamente 5%)
sales minerales (2%), polisacáridos (2%), sustancias nitrogenadas (0.7%), lactonas,
quinonas, esteroides, vitaminas (0.3%)
(40%-70%)
COMPUESTOS BALSÁMICOS
Solubles en etanol
COMPUESTOS NO
BALSÁMICOS Insolubles en
etanol
(20-35%)
CERAS (componentes de la cera de origen principalmente animal)
Prop
óleo
s de
zon
as te
mpl
adas
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(1%-3%)
ACEITES ESENCIALES: sexquiterpenos,
sustancias aromáticas, generalmente volátiles
(10%-15%)
Alcanos, terpenoides
OTROS COMPUESTOS
Parcialmente solubles en
etanol
(aproximadamente 5%)
sales minerales (3%), carbohidratos (1%), sustancias nitrogenadas, glicerina (1%)
Principalmente ácido cinámico y derivados, ácido cumárico, ARTEPILINA C. Menores
concentraciones de compuestos fenólicos, tales como flavonoides, ácido benoico, ácidos alifáticos
y ésteres
(40%-70%)
COMPUESTOS BALSÁMICOS
Solubles en etanol
COMPUESTOS NO
BALSÁMICOS Insolubles en
etanol
(15-25%)
CERAS (componentes de la cera de origen principalmente animal)
Propóleos verde
1. Caracterización de los propóleos-COMPOSICIÓN. PROPÓLEOS VERDE
• Recolección métodos apropiados
• Almacenamiento • Conservación
• Libre contaminantes tóxicos
• Buen rendimiento de extracción
• Bajos porcentajes
• Definir su procedencia botánica compuestos activos
• Contenidos elevados de compuestos fenólicos
• Correctas características organolépticas
1. Caracterización de los propóleos-CRITERIOS DE CALIDAD
condiciones higiénicas
sustancias insolubles: CERAS agua cenizas
Constituyente Propóleos de zonas templadas (g /100 g)*
Propóleos verde (g /100 g)**
Componentes balsámicos ≥45 ≥35
Fenoles totales ≥21 ≥7 Flavonoides totales
(de los cuales): ≥9 ≥1
Flavonas y flavonoles Flavanonas y
dehidroflavanonas
≥5 -
≥4 -
Ceras ≤25 ≤25
Componentes no balsámicos ≤5 ≤5
Cenizas No especificado ≤5
*Criterios propuestos por Popova et al., 2007 ** Criterios establecidos en la legislación brasileña, 2005
1. Caracterización de los propóleos-CRITERIOS DE CALIDAD
1. Caracterización de los propóleos-CONSERVACIÓN
Estabilidad: Muy estable Conservación a temperatura ambiente • Recipientes herméticos
• Oscuridad 1 AÑO
• Evitar calor directo Extractos etanólicos Propóleos congelado
Estabilidad de los compuestos fenólicos
Flavonas Quinonas
evita oxidación
3 AÑOS
Varios años
Mantenimiento de la actividad antibacteriana
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1. Caracterización de los propóleos-FRESCURA
Determinación de la actividad de la α-glucosidasa Disminuye exponencialmente con el tiempo
a temperatura ambiente
sustancia nitrogenada
Tinturas etanólicas Ingredientes de CREMAS UNGÜENTOS DENTÍFRICOS CARAMELOS
Comercialización Cosméticos
Alimentos
1. Caracterización de los propóleos-USOS PRINCIPALES
Medicina
Complemento alimentario
Barnizado
Embalsamado
1. Caracterización de los propóleos-OTROS USOS
Antioxidante
Antibacteriano
Antifúngico
Antiviral
Hepatoprotector
Inmunoestimulante
1. Caracterización de los propóleos-PROPIEDADES BIOACTIVAS
Dosis tóxica próxima a la dosis terapéutica
EFECTOS ATRIBUIDOS
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1. Caracterización de los propóleos-PROPIEDADES BIOACTIVAS
Falta de caracterización
de sus constituyentes
Diferencias cualitativas y cuantitativas de los
componentes (flavonoides)
NO HA CONCEDIDO NINGUNA
DECLARACIÓN DE
PROPIEDADES SALUDABLES
EFSA (2010) Autoridad europea de seguridad alimentaria
Ausencia de estudios de
relación causa-efecto
Toxicidad potencial
IRRITANTE DE LA PIEL DISRUPTOR ENDOCRINO
URL: https://www.efsa.europa.eu/en/efsajournal/pub/1810
• Los antioxidantes pueden proteger de los radicales libres, ayudando a combatir la desnutrición o aumentando la cantidad de nutrientes.
• Contribuye a incrementar la capacidad antioxidante del organismo.
• Ayuda a las defensas naturales.
• Contribuye a mantener la fluidez de la sangre.
• Contribuye a mantener el hígado sano, ayudando a la digestión y purificación corporal.
• Incrementa la resistencia fisiológica del organismo en caso de condiciones muy adversas.
• Promueve la salud del tracto respiratorio superior.
• Mantiene en buen estado el sistema inmunitario y las defensas corporales.
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1. Caracterización de los propóleos-PROPIEDADES BIOACTIVAS DENEGADAS
Registro de propiedades nutricionales y saludables de la Unión Europea (2015)
URL: http://ec.europa.eu/nuhclaims
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1. Caracterización de los propóleos-AFIRMACIONES ACEPTABLES
• Se puede indicar en la etiqueta que un producto
CONTIENE PROPÓLEOS
• OBLIGATORIO
Indicar la cantidad de propóleos
Registro de propiedades nutricionales y saludables de la Unión Europea (2015)
URL: http://ec.europa.eu/nuhclaims
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1. Caracterización de los propóleos-PROPIEDADES BIOACTIVAS
Tratamiento post-cosecha
para la protección de
plantas
FUNGICIDA
EXTRACTO DE PROPÓLEOS
EFSA (2018) Autoridad europea de seguridad alimentaria
Tratamiento superficial
de frutas con piel no
comestible (PLATANOS)
BACTERICIDA
URL: https://www.efsa.europa.eu/en/supporting/pub/en-1494
2. FUTURA NORMATIVA LEGAL PARA LOS
PROPÓLEOS
Legislación específica: China, Rusia, Argentina y Brasil
En España: o No existe legislación específica
o Propóleos procesado se considera un complemento alimentario
2. Futura normativa legal para los propóleos
NECESIDAD DE UNA CARACTERIZACIÓN COMÚN
En la actualidad:
1. Caracterización de los propóleos-ESTUDIO INTERLABORATORIO
ENSAYO INTERLABORATORIO
DESARROLLO DE MÉTODOS ANALÍTICOS PARA EL PROPÓLEOS
2. Futura normativa legal para los propóleos
2015
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13 Participantes – 9 Países
Bulgaria - Vassya Bankova, Milena Popova, Boryana Trusheca and Nartsislav Petrov, Institute of Organic Chemistry Alemania - Christof Kunert and Martin Linkogel, Intertek Food Services
- Gudrun Beckh; Juergen Wehlitz and Petra Wessel, QSI GmbH - Hartmut Schreiter and Machie Jewski, Allwex
Grecia - Chrysa Tananaki, Aristotle University of Thessaloniki Francia - S. Georgé, CTCPA; Naïma Dlalah
Italia - Silvia Gardini, CRA-API
Portugal - Miguel Vilas-Boas and Soraia Falcão, IPB -Paulo Antunes and Luisa Paulo - CATAA
Eslovenia - Adriana Pereyra, Medex ;
España - Teresa Sancho, Universidad de Burgos;
Turquía - Kadriye Sorkun and Omur Gencay, Hacettepe University
- Tuğçe Dastan, AltiparmaK
COORDINADOR
2. Futura normativa legal para los propóleos. ENSAYO INTERLABORATORIO
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• Brasil • Bulgaria • Eslovenia • España • Francia • Italia • Países Bálticos • Polonia • Portugal • Ucrania • Turquía
15 Muestras
2. Futura normativa legal para los propóleos. ENSAYO INTERLABORATORIO
29
CONDICIONES VARIABLES
PATRONES
EQUIPAMIENTO
REACTIVOS
MÉTODOS
TEMPERATURAS
2. Futura normativa legal para los propóleos. ENSAYO INTERLABORATORIO
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Propóleos bruto
Cenizas
Cera
Contenido balsámico
• Extracción Soxhlet (6 h) • Extracción ultrasonidos (30 min)
• Extracción: agitación durante (24 h) • Extracción: ultrasonidos (30 min)
2. Futura normativa legal para los propóleos. ENSAYO INTERLABORATORIO
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Flavanonas
Flavonas Flavonoles
Fenoles totales
2. Futura normativa legal para los propóleos. ENSAYO INTERLABORATORIO
Extracto de propóleos
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Métodos apropiados para el análisis de propóleos: - Cenizas - Cera (extracción Sohxlet) - Contenido balsámico (extracción por agitación) - Fenoles totales - Flavonas/Flavonoles Métodos no apropiados y que deben mejorarse: - Cera (ultrasonidos) - Contenido balsámico (ultrasonidos) - Flavanonas
2. Futura normativa legal para los propóleos. ENSAYO INTERLABORATORIO
1. Caracterización de los propóleos-ESTUDIO INTERLABORATORIO 2. Futura normativa legal para los propóleos
NORMA ISO
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2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
ESTANDARIZACIÓN DEL PROCESADO Y CIRCULACIÓN DE
PRODUCTOS APÍCOLAS
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
Normas ISO
91 Estados miembros
Organismos nacionales de normalización
Garantía de satisfacción
Decretadas por el Organismo Internacional de
Estandarización (ISO) 1947
Asociación Española de Normalización
(AENOR)
necesidades expectativas
CONSUMIDORES
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procesos requerimientos
envasado almacenamiento transporte
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
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ISO – PROPÓLEOS (en preparación)
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
Beneficios:
Estandarizar Propóleos
PRODUCCIÓN CALIDAD SEGURIDAD
Facilitar Soporte técnico para el comercio internacional bilateral o multilateral
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Criterios comunes
Envasado
Almacenamiento
Transporte
Normativa común
Procesado
Características
Composición
Calidad
ISO – PROPÓLEOS (en preparación)
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
Líder hasta finalizar 2023: Dr Chi ZHANG (China)
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2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19: BORRADOR
Términos y definiciones
Concepto de propóleos
Artepilina C
Extracto etanólico de propóleos
Fuentes botánicas de propóleos
Flavonoides totales
Requisitos
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2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19: BORRADOR
Requisitos físco-químicos para el propóleos
Propóleos de zonas templadas Propóleos verde
Otros tipos frecuentes de
propóleos
Valor máximo para la pérdida en el secado (%) 6 9 ISO 662 GRAVIMETRÍA
Valor máximo para el contenido en cenizas (%) - 5 ISO 6884 GRAVIMETRÍA
Valor mínimo para el extracto etanólico del propóleos (%) 30 50 Apéndice A GRAVIMETRÍA. Diferencia de pesada con
respecto al residuo insoluble
Valor mínimo para el contenido en flavonoides totales (%) 5 4 Apéndice B
Separación en COLUMNA de los flavonoides. Medida por ESPECTROFOTOMETRÍA (360 nm)
Valor mínimo para el contenido en artepillina C (%) - 1,4 Apéndice C
EXTRACCIÓN con etanol (85%). Cuantificación por CROMATOGRAFÍA (RHPLC-UV)
Valor máximo para el tiempo de oxidación (s) 22 22 Apéndice D TIEMPO en el que el color púrpura del
permanganato potásico se desvanece
Contenido mínimo en compuestos fenólicos (%) 6 8 Apéndice E GRAVIMETRÍA
RequerimientoParámetro Método analítico
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2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19: BORRADOR
Requisitos físco-químicos para el extracto etanólico de propóleos
Propóleos de zonas templadas Propóleos verde
Otros tipos frecuentes de
propóleos
Valor máximo para la pérdida en el secado (%)
ISO 662 GRAVIMETRÍA
Valor máximo para el contenido en cenizas (%)
ISO 6884 GRAVIMETRÍA
Valor mínimo para el extracto etanólico del propóleos (%)
Apéndice A GRAVIMETRÍA. Diferencia de pesada con respecto al residuo insoluble
Valor mínimo para el contenido en flavonoides totales (%)
18 8 Apéndice BSeparación en COLUMNA de los flavonoides. Medida por ESPECTROFOTOMETRÍA (360 nm)
Valor mínimo para el contenido en artepillina C (%) - 2,5 Apéndice C
EXTRACCIÓN con etanol (85%). Cuantificación por CROMATOGRAFÍA (RHPLC-UV)
Valor máximo para el tiempo de oxidación (s)
Apéndice D TIEMPO en el que el color púrpura del permanganato potásico se desvanece
Contenido mínimo en compuestos fenólicos (%) 12 16 Apéndice E GRAVIMETRÍA
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ParámetroRequerimiento
Método analítico
5
5
98
42
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19: BORRADOR
Requisitos sanitarios
Valor máximo para el contenido en plomo (mg/kg)
ISO 12193 ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA en cámara de grafito
RequerimientoParámetro Método analítico
2
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
ISO/TC 34/SC 19 - Secretariat SAC China Standardization Administration of China No. 9 Madian Donglu, Haidian District Beijing 100088 China Tel: +8610 8226 2644 Fax: +8610 8226 0660 Email: [email protected] Web: http://www.sac.gov.cn Secretariat direct: Ms Xuan Li Tel: 008625823182 Email: [email protected]
Responsable: Dr Chi ZHANG
2. Futura normativa legal para los propóleos NORMAS ISO TC34/SC19
MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN
M. Teresa Sancho Universidad de Burgos Área de Nutrición y Bromatología Departamento de Biotecnología y Ciencia de los Alimentos Facultad de Ciencias Plaza Misael Bañuelos s/n 09001 BURGOS (Burgos) - Castilla y León Teléfono: 947-258-813 FAX: 947-258-831 Correo electrónico: [email protected]