departamento de cirugía, oftalmología
TRANSCRIPT
FACULTAD de MEDICINA
DEPARTAMENTO DE CIRUGIA, OFTALMOLOGIA, OTORRI-NOLARINGOLOGIA Y FISIOTERAPIA
TESIS DOCTORAL
ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE DIFERENTES DROGAS DE ADICCION A NIVEL DEL HIGADO. VALORACION HISTOLOGICA Y MORFOMETRICA
Presentada por Doña Ana María Vaquero Saldaña, para optar al grado de
doctora por la Universidad de Valladolid
Dirigida por: Prof. Javier Agudo Bernal
Prof. Carlos Vaquero Puerta
Departamento de Cirugía, Oftalmología, Otorrinolaringología y Fisioterapia
ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE DIFERENTES DROGAS DE ADICCION A NIVEL DEL HIGADO. VALORACION HISTOLOGICA Y MORFOMETRICA
DIRECTORES: PROF. JAVIER AGUDO BERNAL PROF. CARLOS VAQUERO PUERTA
DOCTORANDA: ANA MARIA VAQUERO SALDAÑA
Valladolid abril 2012
INTRODUCCION
AGRADECIMIENTOS
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
AGRADEC
AGRADECIMIENTOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
Quisiera en primer lugar mostrar mi agradecimiento a los Di-rectores de la Tesis Profesores Agudo Bernal y Vaquero Puerta puesto que sin ellos este trabajo nunca hubiera sido posible A los integrantes de la Delegación de Sanidad del Ministerio de Sanidad del Plan Nacional contra la droga, que facilitaron la droga de decomiso para poder realizar el estudio También quisiera agradecer el trabajo realizado por la técnica de laboratorio María Victoria Valdivieso Rodríguez por el pro-cedimiento de las piezas histológicas para su valoración por microscopía óptica, así como la medición de las estructuras en el estudio morfométrico. A la técnico Maria Teresa Fernández, por el trabajo de proce-samiento de las muestras que se utilizaron para el estudio ultra-estructural del hígado. Al Profesor de Bioestadística de la Facultad de Medicina de la Universidad de Valladolid, Agustín Mayo al facilitar que alum-nos en prácticas en Bioestadística realizaran el estudio estadís-tico de los datos. A todos los integrantes del Laboratorio de Cirugía Experimental por su participación directa o indirecta en el estudio
INTRODUCCION
INDICE
INDICE
Prologo 1 Introducción 4 Generalidades 5 Definición de drogas 5 Definición de drogadicción 6 Tipos de drogas 7 Según su dependencia 7 Según sus efectos 8 Adicción a las drogas 17 Daños orgánicos de las drogas 18 Drogas utilizadas en el estudio 21 Cocaína 21 MDMA. Éxtasis 31 Heroína 39 .. El hígado 48 Fisiología del hígado 52 Histología hepática 53 Descripción del hígado del ratón 56 Anatómica 56 Histológica 58 La morfometría hepática 71 Planteamiento del problema y objetivos del trabajo 76 Material y Métodos 79
Animal de laboratorio 80 Protocolo experimental 80
Grupo de animales estudiados 81 Técnicas histológicas microscópicas 82 Técnicas histológicas
Ultraestructurales 84 Estudio morfométrico
de las preparaciones 86 Análisis estadístico 89
Resultados 90 Tasa de mortalidad 91 Estudio ponderal 92 Estudio macroscópico de los animales 93 Estudio bajo microscopia óptica 94 Valoración subjetiva 94 Estudio morfométrico 97 Estudio bajo microcopía electrónica 107 Valoración subjetiva 107 Estudio morfométrico 110 Discusión 118
Conclusiones 137
Bibliografía 140
PROLOGO
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica, ultraestructural y morfométrica
________________________________________________________________________
PROLOGO
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
Vivimos en una cultura de la droga, desde la mañana cuando tomamos ca-
feína o tefilina, al desayuno, hasta la noche, en que podemos relajarnos al
volver a la casa, con un aperitivo alcohólico, o un inductor del sueño con
un somnífero, recetado por el medico, estamos utilizando diferentes sus-
tancias, que afectan sobre el Sistema Nervioso Central, para enfrentarnos
a las peripecias de la cotidianeidad. Muchos además se activan a medida
que trascurre el día, aspirando nicotina.
Aun cuando las drogas han estado presentes en todas las culturas y en to-
das las épocas, hoy son más las personas que consumen drogas, hay más
cantidad y hay mas facilidades para conseguirlas.
Cuando se realiza una encuesta y se pregunta por los mayores problemas
de la sociedad actual, siempre sale nombrado dentro de los cinco primeros
puestos, el "problema de las drogas". Y cuando se consulta a la gente el
por qué de este problema, siempre se nombra como un problemas de po-
bres y marginales. Y hace mucho tiempo que dejo de ser un problema ca-
llejero y de marginales, y esto ocurrió cuando las drogas fueron el mejor
negocio para algunos y la peor desgracia para otros.
El consumo de sustancias es cada vez más permisivo, esto hace creer a las
personas "que no sucede nada si se consume".
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica, ultraestructural y morfométrica
________________________________________________________________________
PROLOGO
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
La drogadicción y todo lo asociado a ellas es una gran pérdida de econó-
mica para quienes sufran, sobre todo para los estados quienes deben
combatirlas desde muchos aspectos a la vez.
INTRODUCCION
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
5
GENERALIDADES SOBRE LAS DROGAS
DE ADICCION
Definición de drogas
Son aquellas sustancias cuyo consumo
puede producir dependencia, estimula-
ción o depresión del sistema nervioso
central, o que dan como resultado un
trastorno en la función del juicio, del
comportamiento o del ánimo de la per-
sona23.
Es toda sustancia capaz de alterar el or-
ganismo y su acción psíquica la ejerce
sobre la conducta, la percepción y la
conciencia. La dependencia de la droga
es el consumo excesivo, persistente y
periódico de toda sustancia tóxica26.
El término drogas visto desde un punto
de vista estrictamente científico es prin-
cipio activo, materia prima. En ese sen-
tido droga puede compararse formal-
mente dentro de la farmacología y de-
ntro de la medicina con un fármaco, es
decir que droga y fármaco pueden utili-
zarse como sinónimos. Los fármacos son
un producto químico empleado en el
tratamiento o prevención de enferme-
dades. Los fármacos pueden elaborarse
a partir de plantas, minerales, animales,
o mediante síntesis. Existe una segunda
concepción que es de carácter social,
según ésta las drogas son sustancias
prohibidas, nocivas para la salud, de las
cuales se abusan y que en alguna forma
traen un perjuicio individual y social29.
Luego nos queda el problema dónde
actúan estas sustancias, ya que todas
estas drogas tienen un elemento básico
en el organismo que es el sistema ner-
vioso central el cual es la estructura más
delicada y el más importante que tiene
el ser humano, y si estas sustancias act-
úan sobre esas estructuras dañándolas,
perjudicándolas, indudablemente que
van constituir a un elemento grave y
peligroso para la colectividad; para la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
6
salud individual y lógicamente para la
salud pública50.
La Dependencia es el estado del indivi-
duo mediante el cual le crea y mantiene
constantemente un deseo de ingerir
alguna substancia. Si este deseo se man-
tiene por mecanismos metabólicos y su
falta crea un síndrome de abstinencia,
se denomina dependencia física. Si la
dependencia se mantiene por mecanis-
mos psicosociales, suele definirse como
dependencia psíquica o psicosocial105.
Las drogas se dividen en narcóticos, co-
mo el opio y sus derivados la morfina, la
codeína y heroína; estimulantes, como
el café, las anfetaminas, el crack y la co-
caína, y alucinógenos, como el LSD, la
mezcalina, el peyote, los hongos
çpsilocibios y los derivados del cáñamo,
como el hachís130.
1. Definición de drogadicción.
Es una enfermedad que tiene su asiento
en el cerebro de un gran número de se-
res humanos. La enfermedad se caracte-
riza por su cronicidad o larga duración,
ser evolutiva y con recaídas. La droga-
dicción tiene una dependencia psíquica,
en donde el individuo siente una impe-
riosa necesidad de tomar droga o, en
caso contrario, un desplome emocional
cuando no la ingiere y una dependencia
física producida por los terribles sínto-
mas de abstinencia al no ingerirla. La
drogadicción causa problemas físicos,
psicológicos, sociales y financieros153.
Se denomina drogadicción al estado
psíquico y en muchas ocasiones físico,
causado por la interacción entre un or-
ganismo vivo y una droga190. Desde el
punto de vista psíquico se caracteriza
por modificaciones del comportamien-
to, y por otras reacciones que compren-
den siempre un impulso irreprimible al
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
7
tomar la droga en forma continua o pe-
riódica con el fin de experimentar sus
efectos psíquicos y a veces para evitar el
malestar producido por la privación. Al
hablar de dependencia de una droga se
refiere al uso compulsivo de este pero
hay que diferenciar la dependencia físi-
ca y psíquica. En la primera se presenta
el Síndrome de Abstinencia al dejar de
consumir y en la segunda dicho síndro-
me no se presenta166.
Se debe entender que el adicto seguirá
siendo un adicto mientras viva, es decir,
que el individuo se rehabilita para poder
vivir sin consumir la droga y, de allí en
adelante, éste será un adicto en remi-
sión, no estará usando la droga, pero
para mantenerse en ese estado de abs-
tinencia o remisión no podrá bajar la
guardia154
3. Tipos de Drogas173
Según Su Grado De Dependencia
Las Drogas "Duras", son aquellas que
provocan una dependencia física y psi-
cosocial, es decir, que alteran el com-
portamiento psíquico y social del adicto,
como el opio y sus derivados, el alcohol,
las anfetaminas y los barbitúricos192.
Las drogas "Blandas", son las que crean
únicamente una dependencia psicoso-
cial, entre las que se encuentran los de-
rivados del cáñamo, como el hachís o la
marihuana, la cocaína, el ácido lisérgico,
más conocido como LSD, así como tam-
bién el tabaco. Esta división de duras y
blandas, es cuestionada, y se podría de-
cir que las duras son malas y las blandas
son buenas o menos malas, pero admi-
nistradas en mismas dosis pueden tener
los mismos efectos nocivos98.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
8
Según sus efectos22,142
Narcóticos:
La palabra narcótico es un vocablo grie-
go que significa "cosa capaz de adorme-
cer y sedar". Esta palabra se usa con
frecuencia para referirse a todo tipo de
drogas psico activas, es decir, aquellas
que actúan sobre el psiquismo del indi-
viduo. Se pueden dividir en:
.Opio, opiáceos y sucedáneos sintéticos.
.Neurolépticos o tranquilizantes mayo-
res.
.Ansiolíticos o tranquilizantes menores.
.Somníferos o barbitúricos.
.Grandes narcóticos o anestésicos gene-
rales.
Es una droga con composiciones y orí-
genes distintos, que tienen en común su
efecto en el organismo, aunque este se
manifieste en manera y de grado dife-
rentes22, 142.
Neurolepticos o Tranquilizantes Mayo-
res:
Se trata de sustancias utilizadas para
tratar la depresión, las manías y las psi-
cosis, y muchas de ellas se venden sin
prescripción médica en la mayoría de
farmacias, entre estas están fenotiazi-
nas, el haloperidol y la reserpina.
Producen un estado de indiferencia
emocional, sin alterar la percepción ni
las funciones intelectuales, sumamente
tóxicos, poseen efectos secundarios ta-
les como parkinsonismo, destrucción de
células de la sangre, arritmia cardiaca,
anemia, vértigos, entre otros22,
Ansiolíticos o Tranquilizantes Menores:
Habitualmente usados para tratar las
neurosis, estas drogas constituyen la
mitad de todos los psicofármacos con-
sumidos en el mundo, a pesar de que
producen un síndrome de abstinencia
muy grave. En dosis mayores funcionan
como hipnóticos o inductores del sueño:
algunos se usan como relajantes muscu-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
9
lares. Producen letárgica, estupor y co-
ma, con relativa facilidad. Al abandonar
su consumo pueden aparecer episodios
depresivos, desasosiego o insomnio.
Somníferos ó Barbitúricos:
Su uso puede provocar lesiones en el
hígado o en los riñones, producir erup-
ciones cutáneas, dolores articulares,
neuralgias, hipotensión, estreñimiento y
tendencia al colapso circulatorio. La in-
toxicación aguda puede llegar a provo-
car la muerte. La dependencia física se
genera entre las 4 o las 6 semanas.
Grandes Narcóticos:
Existen varias sustancias usadas en
anestesia general que merecen estar
incluidas en este grupo por su capacidad
de producir sopor y estupefacción, ma-
yor que la de cualquier estupefaciente
en sentido estricto. En dosis leves pro-
duce una primara fase de excitación
cordial, como el alcohol y luego seda-
ción y sopor. También generan toleran-
cia y, en consecuencia, adicción, pu-
diendo ocasionar intoxicaciones agudas,
e incluso la muerte167.
Opio y sus derivados:
Con el nombre popular de adormidera o
amapola se conoce el fruto del cual se
obtiene el opio y sus derivados. Es un
polvo de color tostado. Se extrae de los
granos que contiene el fruto y entre sus
usos medicinales se encuentran la su-
presión del dolor, el control de los es-
pasmos y el uso como antitusígeno. En-
tre sus derivados se encuentra la morfi-
na, la heroína, la metadona y la codeína,
todos ellos pueden brindar extraordina-
rios beneficios terapéuticos si son rece-
tados y controlados por un médico22.
Los opiáceos se presentan como polvo
para fumar o solución inyectable. Este
narcótico produce un estado de euforia
y ensoñación; una sensación de éxtasis
que se acorta rápidamente a causa de la
tolerancia, cuyos efectos físicos son:
epidermis enrojecida, pupilas contraí-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
10
das, náuseas, decaimiento de la función
respiratoria, pérdida de reflejos, falta de
respuesta a los estímulos, hipotensión,
desaceleración cardíaca, convulsiones y
riesgo de muerte75.
Alucinógenas:
Las drogas conocidas como alucinóge-
nos son fármacos que provocan altera-
ciones psíquicas que afectan a la per-
cepción. La palabra "alucinógeno" hace
referencia a una distorsión en la percep-
ción de visiones, audiciones y una gene-
ración de sensaciones irreales. La aluci-
nación es un síntoma grave de la psico-
sis de la mente y su aparición distorsio-
na el conocimiento y la voluntad. Los
alucinógenos se consideran productos
psicodélicos que inhiben los mecanis-
mos de defensa del yo, y facilitan la dis-
tribución de la sensibilidad así como la
aparición de imágenes desconcertantes.
LSD (Ácido Lisérgico):
El LSD es una sustancia semi sintética,
derivado del ergot, extracto éste del
cornezuelo del centeno, usado en medi-
cina al final de la edad media. También
fue muy utilizado en obstetricia para
evitar hemorragias puerperales y pro-
mover la contracción del útero. En un
principio fue utilizado con fines terapéu-
ticos de alcohólicos, cancerosos y otros
pacientes terminales para ayudarles a
superar su enfermedad. Posteriormente
fue abandonada la práctica al compro-
barse los resultados adversos, tales co-
mo suicidios a causa de las engañosas
imágenes y terroríficas visualizaciones.
También se comprobó que podía desen-
cadenar esquizofrenia y deterioros men-
tales variados. Descubierto en 1938 se
considera el ácido lisérgico como el alu-
cinógeno más poderoso, aunque no el
más nocivo.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
11
Éxtasis o MDMA:
La metilendioximetanfetamina (MDMA),
normalmente conocida como "éxtasis",
"ectasi" o "X-TC", es un droga sintética
psicoactiva con propiedades alucinóge-
nas de gran potencial de emotivo y per-
turbador psicológico, con propiedades
similares a las anfetaminas17,96. Durante
los años 60 se utilizó con fines terapéu-
ticos dado que según determinados sec-
tores de la psiquiatría ayudaba a la co-
municación y al tratamiento de neurosis
fóbicas. El éxtasis produce efectos
psíquicos de gran potencial perturbador.
Inicialmente el sujeto experimenta sen-
saciones de confianza y excitación, a las
que siguen un estado de hiperactividad
e incremento en los pensamientos mor-
bosos. Los efectos del estimulante se
diluyen provocando trastornos sicólo-
gos, como confusión, problemas con el
sueño(pesadilla, insomnio), deseo in-
contenible de consumir nuevamente
droga, depresión, ansiedad grave y pa-
ranoia. Estos efectos han sido reporta-
dos incluso luego de varias semanas de
consumo. También se han informado
casos graves de psicosis. Entre los
síntomas físicos pueden citarse: ano-
rexia, tensión y trastornos musculares
similares a los presentes en la enferme-
dad de parkinson, bruxismo, náuseas,
visión borrosa, desmayo, escalofrío y
sudoración excesiva131. Se realiza una
descripción más pormenorizada, en el
apartado de drogas utilizadas en el es-
tudio.
Metanfetamina:
El individuo que usa "Ice" piensa que la
droga le proporciona energía instantá-
nea. La realidad es que la droga acelera
el sistema nervioso, haciendo que el
cuerpo utilice la energía acumulada. Los
efectos que causa al organismo varían
de acuerdo a la cantidad de droga utili-
zada. Entre los síntomas observados se
encuentran los siguientes: lesión nasal
cuando la droga es inhalada; sequedad y
picor en la piel; acné; irritación o infla-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
12
mación; aceleración de la respiración y
la presión arterial; lesiones del hígado,
pulmones y riñones; extenuación cuan-
do se acaban los efectos de la dro-
ga(necesidad de dormir por varios días);
movimientos bruscos e incontrolados de
la cara, cuello, brazos y manos pérdida
del apetito; depresión aguda cuando
desaparecen los efectos de la droga124.
MDA:
La MDA, es una droga similar a la anfe-
tamina que también ha sido objeto de
abuso, presentando efectos psico-físicos
similares a los de la MDMA. Está droga
destruye las neuronas productoras de
serotonina, que regulan directamente la
agresión, el estado de ánimo, la activi-
dad sexual, el sueño y la sensibilidad al
dolor116.
Cannabis sativa-hachis-marihuana:
El Cannabis Sativa es un arbusto silves-
tre que crece en zonas templadas y tro-
picales, con una altura de seis metros,
extrayéndose de su resina el hachís. Su
componente más relevante es el delta-
9-THC, conteniendo la planta más de
sesenta componentes relacionados. Se
consume preferentemente fumada,
aunque pueden realizarse infusiones
con efectos distintos. Un cigarrillo de
marihuana puede llegar a contener 150
mg. de THC, y llegar hasta el doble si
contiene aceite de hachís, lo cual puede
llevar al síndrome de abstinencia si se
consume de 10 a 20 días. La dependen-
cia se considera primordialmente
psíquica. Los síntomas característicos de
la intoxicación son: ansiedad, irritabili-
dad, temblores, insomnios. Puede pre-
sentarse en distintas modalidades de
consumo, sea en hojas que se fuman
directamente, en resina del arbusto o en
aceite desprendido de este último. De la
modalidad en que se presente la droga
dependerá su denominación: "marihua-
na" es el nombre de las hojas del cáña-
mo desmenuzadas, que después de se-
carse y ser tratadas pueden fumarse
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
13
(también es conocida como hierba, ma-
rijuana, mariguana, mota, mafú, pasto,
María, monte, moy, café, chocolate,
etc.), su efecto es aproximadamente
cinco veces menor que el del hachís. El
nombre hachís (también conocido como
hashis) deriva de los terribles asesinos
(hashiscins) árabes, que combatieran en
las cruzadas en los años 1090 y 1256. El
hachís se obtiene de la inflorescencia
del cáñamo hembra, sustancia resinosa
que se presenta en forma de láminas
compactas con un característico olor.
Durante los años sesenta comienza el
consumo casi masivo de la marihuana
así como de otras alucinógenas como el
peyote, el LSD, etc. A pesar de ser una
sustancia ilegal, su consumo sigue en
aumento. La marihuana común contiene
un promedio de 3% de THC, pudiendo
alcanzar el 5,5 %. La resina tiene desde
7,5 % llegando hasta 24%. El hachís (re-
sina gomosa de las flores de las plantas
hembras) tiene un promedio de 3.6%,
pero puede a tener 28%. El aceite de
hachís, un líquido resinoso y espeso que
se destila del hachís, tiene un promedio
de 16% de THC, pero puede llegar a te-
ner 43%. El THC afecta a las células del
cerebro encargadas de la memoria. Eso
hace que la persona tenga dificultad en
recordar eventos recientes (como lo que
sucedió hace algunos minutos), y hace
difícil que pueda aprender mientras se
encuentra bajo la influencia de la droga.
Estimulantes
Tradicionalmente usados para combatir
la fatiga, el hambre y el desánimo, los
estimulantes provocan una mayor resis-
tencia física transitoria gracias a la acti-
vación directa del sistema nervioso cen-
tral162.
Estimulantes vegetales:
El café, té, el mate, la cola, el caco, el
betel y la coca son plantas que crecen
en muchas partes del mundo, a pesar
que suelen consumirse repetidas veces
en el día, son sustancias tóxicas que po-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
14
seen efectos secundarios. Aunque los
estimulantes vegetales son considera-
dos como inocuos, conviene moderar su
consumo ya que se trata de sustancias
tóxicas susceptibles de producir efectos
secundarios nocivos.
Coca
La coca, hoja del arbusto indígena ame-
ricano, pertenece al grupo de los esti-
mulantes. Su consumo es ancestral en
ciertas partes de Latinoamérica, donde
es una práctica habitual el mascar las
hojas. Su efecto sobre el sistema nervio-
so central es menor que los de la cocaí-
na. La coca es consumida mascándola
con algún polvo alcalino como cenizas o
cal. También es fumada tanto sola como
mezclada con tabaco y marihuana. Está
comprobado que tiene síntomas de abs-
tinencia, depresión, fatiga, toxicidad y
alucinaciones. 121
Estimulantes Químicos
Cocaína
Es un poderoso estimulante de corta
duración que actúa sobre el sistema
nervioso central. La cocaína proviene
del árbol de la coca que crece en Améri-
ca del Sur. La cocaína (clorhidrato de
cocaína) de mayor consumo en los esta-
dos unidos es un polvo blanco y cristali-
no que se extrae de las hojas de la coca.
La cocaína que se compra en la calle es
una mezcla de cocaína pura y de otras
sustancias que se le añaden para au-
mentar las existencias y las ganancias
del vendedor. Estas sustancias con las
cuales se mezcla son: talco. Harina,
laxantes, azúcar, anestesia local y otros
estimulantes y polvos129.
La cocaína que se puede fumar es preci-
samente la que se obtiene en la calle, la
que se convierte en base pura al elimi-
nar la sal de hidroclorido y otras sustan-
cias que se la haya añadido. La única
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
15
forma de introducirla al sistema es
fumándola.
Síntomas del uso de la cocaína: tenden-
cias suicidas, cambios drásticos en el
ánimo, perdida de amigos y antiguos
valores, abortos, malformaciones
congénitas en los hijos de madres con-
sumidoras, pérdida de peso, como re-
sultado de perdida del apetito, dolores
de cabeza crónicos, Enfermedades res-
piratorias, deficiencia de vitaminas,
adicción y muerte. Las señales del uso
de cocaína son pupilas dilatadas, boca y
nariz seca, mal aliento, humedad de los
labios con frecuencia, actividad excesi-
va, dificultad en quedarse quieto,
hablador pero la conversación carece de
continuidad, nariz supurante, catarro o
sinusitis crónica ó problemas nasales,
disminución repentina de calificaciones
escolares y desempeño laboral, facilidad
para caer en problemas o susceptibili-
dad a accidentarse, uso o posesión de
parafernalia, incluyendo cucharitas, cu-
chillas de afeitar, espejos. Pequeñas bo-
tellas con polvo blanco, absorbentes de
plástico, vidrio o metal, pipas de vidrio y
antorchas o soplete en miniatura. La
cocaína es una de las drogas más adicti-
vas que hay, ya que su efecto, aunque
fuerte es de corta duración.
Otra forma de usar Cocaína es la Pasta
Base, también denominado "crack, ba-
zuco", forma más peligrosa de cocaína
que se puede fumar es una pasta de
cocaína hecha usando gasolina o ácido
sulfúrico para extraer una pasta fuma-
ble, la pasta se seca y se fuma en una
pipa o se tritura para hacer un cigarrillo.
Durante el desplome, el consumidor se
siente cansado, ansioso e irritado. El uso
de la cocaína proporciona un alivio in-
mediato a estos síntomas y crea un ciclo
de uso para evitar los efectos resultan-
tes no placenteros. Generalmente,
mientras mayor sea la euforia peor
serán las consecuencias del desplome.
El síndrome de retirada, seguido del uso
prolongado y extensivo de la droga,
puede causar irritación, nauseas, agita-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
16
ción, desordenes en el dormir, depre-
sión aguda, dolores musculares y una
intensa ansia por la droga107. Se am-
pliará la información sobre esta droga
en la referencia a las drogas utilizadas
en el estudio.
Anfetaminas
Fueron sintetizadas por primera vez en-
tre la última década del siglo XIX y la
primera del siglo XX. Los primeros expe-
rimentos clínicos se iniciaron hacía
1930, y desde 1935 se comercializó con
gran difusión en el Reino Unido, Francia
y Alemania. Durante la segunda guerra
mundial fue utilizada indiscriminada-
mente por todos los bandos dado el
carácter de euforizante que contiene la
sustancia y la agresividad. Las anfetami-
nas fueron utilizadas como estimulantes
luego en forma de inhalaciones para el
tratamiento de catarros y congestiones
nasales, más tarde como píldoras contra
el mareo y para disminuir el apetito en
el tratamiento de la obesidad y, final-
mente, como antidepresivo. Presentan
una elevada tolerancia que produce
habituación y necesidad de dosis pro-
gresivamente más elevada. El consumo
de este excitante está ampliamente ex-
tendido y distribuido por todas las clases
sociales. A diferencia de lo que sucede
con la cocaína que la consumen prefe-
rentemente los sectores medios y altos,
las anfetaminas son consumidas tanto
por ejecutivos que pretenden sobreexci-
tación como por amas de casa que bus-
can un anoréxico para sus dietas o por
estudiantes que preparan exámenes. Al
incidir en el sistema ortosimpático cau-
san hipertensión, taquicardia, hiper-
glucemia, midriasis, vasodilatación, pe-
riférica, hiperpnea, hiporexia, etc. El
estado de ánimo del adicto oscila entre
la distrofia y la hipomanía así como an-
siedad, insomnio, cefalea, temblores y
vértigo. Pueden aparecer cuadros de-
presivos y síndrome paranoides anfe-
tamínicos. A dosis normales sus efectos
varían de acuerdo al individuo y las con-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
17
diciones de ingesta. Pueden producir
efectos placenteros, hiperactividad y
sensación desbordante de energía, pero
también causan temblor, ansiedad, irri-
tabilidad, ira inmotivada y repentina y
trastornos amnésicos e incoherentes. En
la última fase se describe depresión,
cuadros paranoides y delirios paranoi-
des, alucinaciones y trastornos de con-
ducta. Tales situaciones se producen
cuando las dosis suministradas gene-
ralmente por vía endovenosa supera los
dos gramos. Tomadas en dosis impor-
tantes son causantes de confusión, ten-
sión, ansiedad aguda y miedo. El con-
sumo de anfetamina produce en el
cuerpo los siguientes síntomas:
Acelera el ritmo cardiaco y pulmonar,
Dilata las pupilas, Reduce el apetito,
Produce sequedad en la boca, Sudores,
Dolores de cabeza, Pérdida de visión,
mareos, insomnio, ansiedad, A largo
plazo y/o usadas en dosis elevadas
ocasionan: Temblores, Pérdida de
coordinación, Colapso físico, daño a
riñones y tejido, mal nutrición, aumento
repentino de presión sanguínea que
puede producir la muerte por ataque,
fiebre muy alta o insuficiencia
cardiaca81.
4. Adicción a las drogas
La drogadicción, drogodependencia o
también llamada dependencia a sustan-
cias psico activas es la imperiosa necesi-
dad que una persona tiene por consu-
mir cualquier clase de drogas (bebidas
alcohólicas, marihuana, cocaína, in-
halantes, tranquilizantes, alucinógenos,
etc.) 73. Esta necesidad no desaparece a
pesar de que la persona consumidora o
usuaria sufra las consecuencias negati-
vas producidas al momento de consu-
mirlas o después de dejar de usarlas. Se
trata más de una necesidad psicológica
que física186.
En nuestro país es un problema que va
en aumento cada día, involucrando a
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
18
menores de edad y a más mujeres de las
que uno puede imaginarse. Se dice que
de 10 a 15 de cada 100 personas tiene
problemas con su manera de beber o
debido a su consumo de drogas ilegales
o de las de prescripción médica, obteni-
das por algún método inadecuado.
También se dice que de esos 10 a 15 de
cada 100 personas, al menos 2 ó 3 son
mujeres. No estamos hablando de todas
las personas en general sino solamente
de aquellos que están comprendidos en
el rango de los 14 a los 60 años de edad,
es decir las edades más productivas en
la vida de cualquier persona42,43.
5. Daños orgánicos que causan las dro-
gas66:
Cerebelo: es el centro de la mayoría de
las funciones involuntarias del cuerpo. El
abuso severo de drogas daña los nervios
que controlan los movimientos motores,
lo que resulta en pérdida de coordina-
ción general. Los adictos crónicos expe-
rimentan temblores y agitación incon-
trolable.
Corazón: El uso de drogas puede produ-
cir "Síndrome de Muerte Súbita". Las
dos sustancias que más frecuentemente
han causado estas muertes son el tolue-
no y el gas butano7.
Medula Ósea: Se ha comprobado que
las drogas causan el envenenamiento
esta, causando causa leucemia
Nervios Craneales, Nervios Ópticos Y
Acústicos: las drogas atrofian estos ner-
vios, causando problemas visuales y po-
bre coordinación de los ojos. Además,
destruye las células que envían el sonido
al cerebro. Ello deriva en graves posibi-
lidades de cegueras y sorderas.
Sangre: las drogas bloquean química-
mente la capacidad de transportar el
oxigeno en la sangre9.
Sistema Respiratorio: se puede producir
asfixia cuando no se desplaza totalmen-
te el oxigeno en los pulmones. Además
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
19
se presentan graves irritaciones en las
mucosas nasales y tracto respiratorio.
Cerebro: Las drogas, introducidas en
nuestro cuerpo por diferentes vías, lle-
gan alojadas en el torrente sanguíneo
hasta el cerebro atravesando la barrera
hematoencefálica. Una vez que han lle-
gado al cerebro, lugar donde reside el
control de las funciones superiores del
ser humano, alteran su normal funcio-
namiento actuando sobre unas sustan-
cias bioquímicas naturales llamadas
'Neurotransmisores'. Las señales nervio-
sas viajan a través de las células nervio-
sas, denominadas neuronas, que están
conectadas entre sí por las sinapsis. En
la sinapsis es donde se liberan los neu-
rotransmisores, que actúan sobre la si-
guiente neurona en unos puntos especí-
ficos llamados receptores. La interacción
de los neurotransmisores en los recep-
tores produce una serie de cambios que
permiten que la información vaya de
una neurona a otra. Las drogas alteran
el funcionamiento cerebral modificando
la producción, la liberación o la degra-
dación de los neurotransmisores cere-
brales de tal forma que se produce una
modificación del proceso natural de in-
tercomunicación neuronal y en la pro-
ducción y recaptación de los neuro-
transmisores8.
De esta forma es como las drogas lo-
gran alterar nuestra percepción senso-
rial, la sensación de dolor o bienestar,
los ritmos de sueño-vigilia, la activación,
etc. Estos cambios bioquímicos que se
producen en el seno del cerebro se tra-
tan con medicación con el objeto de
restablecer el equilibrio natural y permi-
tir el normal funcionamiento de nuestro
sistema neurológico11.
Aparato digestivo: El hígado, es una de
las vísceras que se consideran que se
puede dañar más a nivel del aparato
digestivo, donde se han descrito diver-
sas alteraciones, información obtenidas
a nivel de autopsias de cadáveres de
drogadictos y biopsias de los pacien-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
20
tes38, algunas muy graves como el fallo
hepaático76
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
21
DROGAS UTILIZADAS EN EL ESTUDIO
COCAINA
La cocaína es una droga estimulante del
sistema nervioso central, concretamen-
te del sistema dopaminérgico. Su fórmu-
la química es C17H21NO4
Se extrae de la hoja de coca, una planta
originaria de Sudamérica que es usada
por los indígenas para inhibir el hambre,
la sed y el cansancio. Combate también
el mal de altura, el dolor de encía, dolor
estomacal, y otras tantas dolencias74.
La cocaína es un estimulante adictivo
que afecta directamente al cerebro. Ha
sido llamada la droga de los ochenta y
noventa por su gran popularidad y uso
durante esas décadas. Sin embargo, la
cocaína no es una droga nueva. En rea-
lidad, es una de las drogas más antiguas.
La sustancia química pura, el clorhidrato
de cocaína, se ha venido
usando por más de 100 años, mientras
que las hojas de la coca se han ingerido
Aspectos de la cocaina
Estructura química de la cocaína
(1R,2R,3S,5S)-3-(benzoiloxi)-8-metil-8-
azabiciclo[3.2.1]octano-2-carboxilato de
metilo
Número CAS
50-36-2
Código ATC
N01BC01
Fórmula química C17H21NO4
Peso molecular 303,35 g/mol
Metabolismo Hepático
Excreción Renal
Status legal Psicotrópico:
Lista I (Estados Unidos)
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
22
por miles de años. A mediados del siglo
XIX, se extrajo por primera vez la coca
pura de la hoja de la planta Erytroxilon,
que crece principalmente en Perú y Bo-
livia. A principios del siglo XX, la cocaína
se convirtió en el ingrediente principal
en la mayoría de los tónicos y elixires
que se crearon para tratar numerosas
enfermedades, incluyendo la Coca-Cola
y el Vin Mariani. En la actualidad es una
droga clasificada bajo la Lista I en Esta-
dos Unidos ("Schedule I") junto con
otros estimulantes como la anfetamina
y el LSD, lo que significa que se le atri-
buye gran potencial de abuso, pero
puede ser administrada por un médico
para usos terapéuticos legítimos, como
por ejemplo, anestesia local en ciertos
tipos de cirugías de los ojos, oídos y gar-
ganta.
Básicamente hay dos formas químicas
de la cocaína: las sales y los cristales de
cocaína (como base libre). El clorhidra-
to, la forma más común del polvo de
cocaína, se disuelve en agua, y cuando
se abusa, puede ser usada en forma in-
travenosa o intranasal (por la nariz). La
base libre se refiere a un compuesto
que no ha sido neutralizado por ácido
para producir la sal correspondiente.
Esta forma de la cocaína se puede fu-
mar, ya que no se descompone como sí
lo hace el clorhidrato46.
La cocaína usualmente se vende ilegal-
mente en forma de un polvo blanco,
fino y cristalino. Los traficantes gene-
ralmente la mezclan con otras sustan-
cias, tales como maicena, talco o azúcar;
o con ciertas drogas como la procaína
(un anestésico local de estructura quí-
mica parecida), o con otros estimulan-
tes, como las anfetaminas (por ejemplo,
metanfetamina). También se vende en
una forma llamado "crack", roca, y ba-
zuco (en Colombia y el Caribe), en forma
de piedrecitas blancas o amarillas pro-
cesada con amoníaco o bicarbonato de
sodio, que generalmente se fuma en
pipa de vidrio. Esa forma es muy popu-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
23
lar en las clases media y baja y causa
más adicción que la forma cristalina.
Esta droga se conoce como cocaína, co-
ca, merca, camerusa, pala, filete de mer-
luza, perico, pichi, papa, papuza, "la del
diego", farlopa, fariña... además de
otras muchas denominaciones depen-
diendo de la zona.
Los efectos son inmediatos y consisten
en una elevación de la autoestima y la
confianza en uno mismo, acompañado
de una gran locuacidad, excitación (pu-
diendo llegar a la extrema irritabilidad).
El efecto dura relativamente poco tiem-
po (unos 30-60 minutos) y en cuanto
empieza a declinar el sujeto experimen-
ta ansiedad por recibir otra dosis. A lar-
go plazo, su uso descontrolado produce
adicción, desórdenes mentales y muer-
te, bien sea por efectos físicos directos,
suicidio, o accidentes118.
Planta de coca
La cocaína es un alcaloide que se obtie-
ne de la hoja de coca, planta que crece
en sudamérica, de la cual existen 200
variedades de las cuales solo 4 producen
dicho alcaloide:
• Erythroxylum coca o coca
boliviana: originaria de Perú y Bolivia.
• Erythroxylum coca variedad
ipadu o coca del amazonas: orginaria de
zonas cercanas al río Amazonas.
• Erytrhoxylum novo granatense o
coca colombiana: originaria de Colom-
bia(Aunque la eradicacion de la mata de
coca a detenido el cultivo de esta) y Ec-
uador.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
24
• Erytrhoxylum truxillense o coca
de Trujillo: originaria de la vertiente ori-
ental de la cordillera de los Andes y el
Perú.
El contenido de alcaloides en la planta
está ente 0,1 y 0,8 %, el componente
principal es la cocaína. La fórmula quí-
mica de la cocaína es del metilestero del
benzoilecgonin de giro izquierdo
(2R,3S)-3-bensoiloxitropan-2-metileste-
ro de carbón ácido con la fórmula empí-
rica de C17H21NO4. Además contiene
cinamilcocaina, benzoilecgonina, trujilli-
na, así como el alcaloide anexo tropa-
caína. La planta de la coca es cultivada
en Sudamérica y Java en alturas entre
600 a 1.000 metros. Los principales paí-
ses de cultivo son Colombia, Perú, Boli-
via y Java. Para la elaboración y consu-
mo de la coca se conocen diferentes
métodos y preparaciones: hojas de coca,
pasta de coca, hidrocloruro de cocaína y
alcaloide de cocaína; cada uno presenta
diferentes niveles de potencia e intoxi-
cación, debido a los variados niveles de
pureza . Una de las formas más comu-
nes para su uso y consumo es el crack,
que es un alcaloide de la cocaína que se
extrae de una sal en polvo mezclándola
con bicarbonato sódico y secándola en
pequeñas piedras. El crack difiere de
otras formas de cocaína por ser fácil-
mente vaporizable y cuando se inhala
sus efectos son muy rápidos36.
Pasta de coca
Se necesitan una gran variedad manipu-
lación química para su producción según
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
25
la forma en que se requiera su extrac-
ción o se puede usar esta para llegar a
su forma más pura y refinada:
a) Producción de pasta de coca: quero-
seno, gasolina u otros disolventes orgá-
nicos parecidos; álcalis, por ejemplo
carbonatos de sodio, potasio o calcio,
hidróxido de sodio u óxido de calcio;
ácidos, por ejemplo: el sulfúrico.
b) Producción de cocaína base: oxidan-
tes, por ejemplo: permanganato de po-
tasio o peróxido de hidrógeno; ácido
sulfúrico; álcalis, por ejemplo: solución
acuosa de amoniaco.
c) Producción de clorhidrato de cocaína:
solventes orgánicos, por ejemplo: éter
etílico, acetona, metiletilcetona o tolue-
no y ácido clorhídrico.
Para la preparación de la pasta básica de
cocaína, se procede a la alcalinización de
la hoja de coca, secado, extracción con
solvente orgánico22, precipitación con
ácido fuerte (ácido sulfúrico), disolución
del residuo en agua y precipitación últi-
ma con álcalis.
Consumo 42 :
La preponderancia anual del uso de co-
caína se estima que afecta a 13,3 millo-
nes de personas o el 0,23 por ciento de
la población mundial. El mayor consu-
midor per cápita de cocaína es España
donde un 2,6% de la población la con-
sume, Estados Unidos, el mayor merca-
do del narcótico se coloca en segundo
lugar con un índice de consumidores del
2,5%. Le siguen Irlanda (2,4%), Reino
Unido (2,1%) Canadá (1,9%) y Argentina
(1,9%). Unos 475.000 españoles han
aspirado cocaína en noviembre de 2006
y 350.000 son menores de 35 años.
Según el European Monitoring Centre
for Drugs and Drug Addiction, en su in-
forme del 2005, la cocaína avanza como
droga de moda en Europa y cada quinto
europeo (entre 15 y 34 años) consume
marihuana, éxtasis o cocaína. Diez por
ciento de los muertos por drogas ilega-
les en Europa se le atribuyen a la cocaí-
na. Con nueve millones de personas en
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
26
Europa habrían consumido cocaína y
unos 1,5 millones de europeos son ‘con-
sumidores actuales’. En Alemania un 1,7
por ciento habría consumido cocaína en
los últimos doce meses. España y Gran
Bretaña son líderes en consumo de co-
caína, con casi cinco por ciento de los
adúltos jóvenes y con ello rebasando las
cifras de consumo de anfetaminas y
éxtasis. Además del cocainismo, se in-
crementó el consumo de marihuana. El
cannabis es la droga más consumida
diariamente en Europa con tres millones
de consumidores. En los países recién
incorporados a la Unión Europa el con-
sumo de sustancias ilegales tuvo un gran
repunte15,81.
Historia: Los primeros arbustos de coca
fueron llevados en 1750 de Sudamérica
hacia Europa. En 1859 se alcanzó por
primera vez el aislamiento del alcaloide
por Albert Niemann. En 1898 se logró la
explicación de la constitución y en 1902
la síntesis por Richard Willstätter. Desde
1879 se empleó la cocaína para tratar la
dependencia en morfina. Hacia 1884 se
empezó a usar como anestésico en clíni-
cas en Alemania. Aproximadamente al
mismo tiempo Sigmund Freud escribió
sobre sus efectos en su obra Über Co-
ca153 (sobre la coca).
“El efecto psicológico de la Cocainum
mur. e dosis de 0,05 a 0,10 gramos
consiste en la excitación y la euforia
retenida, la que no se diferencia mucho
de la euforia de las personas sanas. Falta
totalmente el sentimiento de alteración
que acompaña a la excitación por alco-
hol, también falta el efecto
característico inmediato del alcohol de
ansiedad. Se tiene la sensación de
incremento del autocontrol, se siente
gran vigor y de capacidad de trabajo.
Pero si se trabaja se extraña la excelente
y elegante excitación e incremento de
las fuerzas intelectuales por alcohol, té
o café. Se es simplemente normal y se
tiene pronto el esfuerzo de creer que se
está bajo el efecto de algo.”
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
27
La primera receta de la bebida refres-
cante Coca-Cola contenía hasta 1903 un
extracto de las hojas de coca (y por ello
el nombre), de modo que un litro de
Coca Cola contenía 250 miligramos de
cocaína, la cual fue sustituida más tarde
por cafeína. El uso de cocaína en Europa
fue amplio y legal en la primera tercera
parte del siglo XIX. La peligrosidad de la
sustancia fue reconocida lentamente.
El médico peruano Carlos Gutiérrez-
Noriega (1906-1950) -en colaboración
con Zapata– en su libro titulado “Estu-
dios sobre la coca y cocaína en el Perú”
(1947) 153 indica:
“La coca “droga que actúa como un
narcótico de las sensaciones vitales,
pues suprime el hambre, la fatiga de los
organismos debilitados, la sed, el frío y
las más elementales aspiraciones
humanas”, fue en estas circunstancias
un factor indispensable para adaptar al
organismo a tan deficientes y anómalas
condiciones de vida. Esta droga ha
actuado como un extraordinario auxiliar
del pueblo andino durante cuatro siglos,
para sobrellevar la miseria más
extremada”.
Efectos y usos medicinales
La cocaína aumenta el riesgo de sufrir
trombosis, derrame cerebral e infarto
de miocardio, acelera la arterioesclero-
sis y provoca paranoia transitoria en la
mayoría de los adictos. La cocaína es el
anestésico local más conocido. Debido a
la alta peligrosidad de adicción y la
marcada toxicidad no se emplea más. La
cocaína sirve como sustancia para
muchos anestésicos locales, como por
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
28
ejemplo: lidocaína, benzocaina y
escandicaína.
En 1884 se introdujo por primera vez en
terapias de oftalmología. El empleo de
cocaína, de acuerdo con la ley de pres-
cripción de sustancias anestésicas de
Alemania, está permitido aún hoy en
día. La cocaína se utiliza contra dolores
de dientes en 1885.
Cocaísmo:
El mascar las hojas de coca mezcladas
con harina de caliza se le conoce como
cocaísmo. Con ello se tienen raramente
síntomas de adicción, ya que la cocaína
con la caliza se transforma en ecgonina.
El mascar las hojas de coca es hasta hoy
común en las comunidades indígenas de
las zonas de cultivo, al contrario de la
toma de cocaína pura. Entre sus efectos,
bajo esta forma de consumo, están122:
Disminuye la sensación de la enferme-
dad de las alturas y el hambre. El co-
caísmo bajo consumo regular ataca los
dientes.
En el Perú se conoce como "Chacchar"
que proviene del quechua "chakchay"
que significa masticar, para ello las hojas
de coca se mezclan con "llipta" que es la
ceniza obtenida de la quinua, tabaco,
maíz o cualquier otra planta rica en sus-
tancias alcalinas, a la cual se le adiciona
sal eventualmente. El hecho de chac-
char es un acto ritual o social en las co-
munidades andinas del Perú, bajo un
contexto magico-religioso. Cabe men-
cionar que la hoja de coca esta verde
pero seca y en estas condiciones no sir-
ve para producir cocaína148.
Potencial de adicción y otros peligros:
Después de la embriaguez con cocaína
se presentan en algunos consumidores
una fuerte depresión. Este estado in-
duce al cocainómano a tomar rápido de
nuevo la droga, para así evitar la
"depresión por cocaína"
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
29
Cocaína en polvo
. Este mecanismo es peligroso, ya que
puede conducir a una dependencia de la
droga. El consumo regular de cocaína
puede conducir a una rápida dependen-
cia psicológica (adicción), pero no a una
dependencia física. Un efecto específico
aquí es (que es más remarcado cuando
se fuma cocaína base crack) la “codicia
episódica”: aún en consumidores inex-
pertos el efecto de la droga puede con-
ducir a la ansiedad extrema de consumir
más, cuando el efecto disminuye. En el
caso extremo la dinámica del consumo
(llamado “binges” en inglés: episodios
de períodos cortos de tiempo en que
ocurre el consumo) puede tener como
consecuencia que dure algunas horas o
días. Un caso especial del consumo de
cocaína de larga duración es la aparición
de la llamada locura dermatozóica, en la
que el consumidor está convencido de
que los insectos se mueven debajo de su
propia piel. Además con la dependencia
de cocaína se tiene a menudo un dete-
rioro de la conciencia del adicto –esto
en el contexto de que el efecto del au-
mento de la autoestima, en conjunto
con la dinámica de consumo, hace des-
vanecer la conciencia social (por ello la
cocaína es denominada a veces como
“ego-droga”).
Riesgos para la salud:
El riesgo de morir por una sobredosis de
cocaína es para los consumidores de
cocaína aproximadamente 20 veces
menor que para los consumidores de
heroína. En Alemania menos del 2% de
los muertos por drogas mueren por una
sobredosis de cocaína. El riesgo de morir
por una intoxicación de mezcla es sensi-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
30
blemente mayor. Cerca del 6% de los
muertos debido a drogas en Alemania
se deben a una intoxicación de mezcla.
La cocaína puede producir psicosis co-
caínica, síndrome de conducta que
guarda gran parecido con la esquizofre-
nia paranoide, con la que a veces se ha
confundido. Aspirar la cocaína puede
lesionar las membranas nasales, fumarla
daña los pulmones y la inyección es pe-
ligrosísima por la alta probabilidad de
sobredosis en esta forma de administra-
ción. La dosis mortal de cocaína, en in-
yección intravenosa única, es de un 1
gramo aproximadamente.
Además, la notable estimulación que
provoca a menudo ha llevado a tener o
provocar accidentes a los consumido-
res155.
Pureza de la cocaína
La cocaína que se encuentra en el mer-
cado ilegal de drogas raramente es pu-
ra. De acuerdo con el Informe de la Ofi-
cina Federal de Investigación Criminal
de Alemania de 2003 se diluye en las
categorías más bajas, que se encuentran
en promedio por clorhidrato de cocaína
del 85% en muestras de un kilogramo de
peso y en muestras del gramo a un kilo-
gramo en el orden del 60%. En muestras
menores a un gramo se tiene alrededor
de 35% de clorhidrato de cocaína. El
promedio de grado de pureza contenido
en muestras de cocaína base en mues-
tras del orden de un kilogramo es de
85% (porcentaje de clorhidrato de co-
caína) y sorprendentemente se ha man-
tenido en los últimos 10 años práctica-
mente estable. Sin embargo, en mues-
tras del orden de un gramo a un kilo-
gramo se ha reducido en un 10% el con-
tenido de grado de pureza, mientras
que las menores a un gramo se ha redu-
cido en un 20%.151
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
31
MDMA (Éxtasis)
La MDMA, llamada "Adam", "Éxtasis" o
"XTC" en la calle, es una droga sintética
psicoactiva (que altera la mente) con
propiedades alucinógenas y similares a
las de la anfetamina. Su estructura
química es parecida a la de otras dos
drogas sintéticas, la MDA y la
metanfetamina, las cuales producen
daño cerebral17.
Polvo de MDMA
El MDMA puro o semi-puro se
estructura en forma de cristal, que se
desmenuza con facilidad para su
manejo.
El MDMA (3,4-meti lendi oxi metanfe-
tamina), conocido vulgarmente como
tacha, es una droga psicoactiva de ori-
gen sintético derivada del éxtasis, con
propiedades estimulantes y neurotóxi-
cas y de sabor amargo. Suele relacionar-
se y confundirse con el MDA y otros de-
rivados de la anfetamina.
El MDMA se particulariza por sus efec-
tos empatógenos, relativos a una sensa-
ción subjetiva de apertura emocional e
identificación afectiva con el otro. Estas
propiedades distintivas estarían media-
das por un incremento en los niveles del
neurotransmisor serotonina en las si-
napsis neuronales y otros neurotransmi-
sores, principalmente la noradrenalina
y, en menor medida, la dopamina. La
actividad de la serotonina se ha relacio-
nado funcionalmente con los estados de
ánimo y el humor20.
Estructura química:
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
32
La fórmula química del MDMA es:
C11H15NO2 Se trata de una sustancia que
puede generar y genera momentos de
maxima comodidad sin tener en cuenta
una postura en concreto. Se trata de
una molécula perteneciente al grupo de
las fenetilaminas, emparentada estruc-
turalmente con el alcaloide mescalina, y
derivada química de la metanfetamina.
También está relacionada con el MDA
(metilendioxianfetamina), un compues-
to precursor, con efectos fisiológicos
similares. Tanto la metanfetamina como
el MDA, se han vinculado con potencia-
les efectos neurotóxicos113.
Estructura química del MDMA
Historia:
En 1912, los laboratorios Merck en
Darmstadt, sintetizaron de modo acci-
dental el MDMA. El hallazgo no fue se-
guido de estudios farmacológicos y, has-
ta 1953, el descubrimiento permaneció
en el registro de patentes sin ninguna
aplicación concreta. Es rotundamente
falso, por mucho que se afirme en multi-
tud de documentos, que se ensayara en
humanos como anorexígeno o para usos
bélicos. La primera comunicación cientí-
fica sobre efectos fisiológicos en seres
humanos es de 1976 y se debe al quími-
co y farmacólogo Alexander Shulgin96.
Pastillas de MDMA grabadas con monogramas
distintivos
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
33
En 1985, el MDMA fue prohibido en Es-
tados Unidos, en tanto que la Organiza-
ción Mundial de la Salud (OMS) incluyó
al MDMA en la Lista I de psicotrópicos,
entre los fármacos sin usos terapéuti-
cos, sólo admisibles en experimentos
con animales. Al caer en la prohibición,
quedaron interrumpidas varias investi-
gaciones sobre los efectos de esta dro-
ga. Algo que no quedó claro para algu-
nos en la historia de esta droga fue lo
drástico de su prohibición, ya que no
existían entonces pruebas de efectos
nocivos, peligrosos o fatales, siendo la
adicción menor que en otros fármacos
debido a la baja tolerancia que el cuerpo
humano desarrolla a la droga, y siendo
la sobredosis algo improbable también.
Se la incluyó en la "Lista I" junto con
drogas como LSD, heroína, cocaína y
otras drogas de riesgos altamente de-
mostrados. Se dijo que detrás de esta
prohibición existían intereses económi-
cos de grandes compañías farmacéuti-
cas fabricantes de antidepresivos y otras
drogas legales que no tenían competen-
cia con los resultados del MDMA. Su-
mado a esto estaban las investigaciones
hechas por algunos profesionales con
resultados altamente satisfactorios en el
tratamiento de algunos traumas psi-
cológicos y problemas de parejas. La
evidencia de los daños en la neurogéne-
sis en adultos y el impedimento de la
frontalización, proceso en el que el ce-
rebro alcanza su madurez y que se pro-
duce hacia al final de la adolescencia,
han dejado obsoleta esta discusión147. El
MDMA alcanza su auge de consumo ile-
gal entre la población más joven en los
años 90, en los que emerge como algo
novedoso, desligado de la figura del
"yonqui" (prototipo de drogadicto de los
años 70 y 80). El MDMA se suele vincu-
lar con un consumo masivo en ciertos
festivales de música electrónica, por lo
general en las fiestas Rave. Sin embargo,
no es exclusivamente el único contexto
"lúdico" en que se consume esta dro-
ga55.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
34
Efectos:
Algunos efectos temporales y más o
menos inmediatos por su consumo,
derivados de la liberación de serotonina
son: signos de euforia, gran dilatación
de las pupilas, pérdida de control de los
músculos de uno u ambos ojos (que
comienza a vibrar al intentar enfocar la
vista en un punto), pérdida de
sensibilidad (lo que provoca la ausencia
de sed y en caso de descuido la
deshidratación), empatía o
ensalzamiento de la amistad (por lo que
se investiga como tratamiento para
algunas enfermedades psicológicas),
aumento de la temperatura corporal,
hipertensión y pérdida de control de los
músculos del maxilar inferior. El meca-
nismo de acción se atribuye al rol del
MDMA como agonista directo de los
receptores neuronales presinápticos de
serotonina142. De esta manera, el
MDMA induce la liberación de estos
neurotransmisores desde las vesículas
en las terminales presinápticas de las
neuronas, hacia el espacio sináptico,
propagando la señal por toda la red
neuronal. Estos cambios neuroquímicos
se manifiestan fisiológicamente
produciendo templanza emocional y
apertura afectiva, comunicación
desinhibida, empatía (entactogénesis).
Además, el MDMA preserva también los
efectos estimulantes típicos de la
anfetamina, que refuerzan los ya
descritos, produciendo sensación de
gran energía física, con aumento de la
actividad motora (hiperactividad),
bienestar general y euforia. El subidón
se manifiesta en forma de oleadas con
sensaciones de euforia, alegría, felici-
dad, empatía in crescendo y de una sen-
sación de ligereza mental y física116. El
MDMA puro suele tener una bajada
muy tranquila y facilidad para dormir,
sin embargo las pastillas de clubbing son
las que van acompañadas de estados
depresivos, debido a que la liberación
de serotonina inducida pudo haber de-
pletado (vaciado) temporalmente las
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
35
vesículas que alojan los neurotransmiso-
res de reserva. En ese caso, se
produciría una caída brusca en los
niveles extracelulares de serotonina,
que tardaría varios días en
recomponerse. Para evitar estas
consecuencias es frecuente la
administración de un antidepresivo
Inhibidor de la Recaptación de la
Serotonina (IRS), sobre todo la
fluoxetina, unas 6 horas después de la
ingesta de MDMA. Evidencia científica
preliminar (en ratas) asocia esta práctica
con una acción neuroprotectora, pro-
filáctica contra la posible toxicidad del
MDMA153. Esto es particularmente pre-
dicado por algunas agrupaciones civiles
dedicadas a promover políticas de re-
ducción de daños71.
HenryContrariamente a lo que sugiere
las creencias populares, el MDMA no
tiene efectos afrodisíacos, alguien la
llamó sensual mas no sexual. Su utilidad
para facilitar la introspección con un
temor reducido ha sido comprobada en
algunos contextos terapéuticos,
llevando a la FDA (Food and Drug Ad-
ministration) estadounidense a aprobar
en el 2001 su experimentación en
pacientes con trastorno de estrés
postraumático22.
En el 2004, la DEA (Drug Enforcement
Agency) otorgó las primeras licencias
para adquirir esta droga legalmente. Los
representantes de la clase médica que
participan en estos ensayos, se han ma-
nifestado en favor de modificar el status
legal del MDMA, proponiendo que sea
retirado de la Lista I e incluido en la Lista
III de psicotrópicos. El MDMA atraviesa
la barrera hematoencefálica del cere-
bro, pero además la daña, como de-
muestran los experimentos de Brian
Yamamoto (Universidad de Boston) con
ratas. Al parecer hace que la barrera se
vuelva más permeable y por tanto más
vulnerable a agentes patógenos57.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
36
Peligros para la salud:
Síntomas físicos y psicológicos. Muchos
de los problemas que enfrentan los
usuarios de MDMA son similares a los
producidos por el uso de anfetaminas y
cocaína123. Estos son:
• Dificultades psicológicas,
incluidas confusión, depresión,
problemas para dormir, ansias de usar la
droga, ansiedad severa y paranoia du-
rante el uso y a veces semanas después
de usar la MDMA (en algunos casos se
han informado episodios psicóticos) 133.
• Síntomas físicos tales como
tensión muscular, apretar los dientes
involuntariamente, náuseas, visión
borrosa, movimientos oculares rápidos,
desmayo y escalofríos o sudores.
• Aumentos en la frecuencia
cardíaca y la tensión arterial, lo cual
representa un riesgo particular para
personas con enfermedad circulatoria o
cardíaca.
Efectos a largo plazo. Investigaciones
recientes relacionan el uso de la MDMA
con el deterioro a largo plazo de las
partes del cerebro que son cruciales pa-
ra el pensamiento y la memoria44. Se
estima que la droga causa daños a las
neuronas que utilizan la sustancia
química serotonina para comunicarse
con otras neuronas. La MDMA también
está relacionada en su estructura
química y sus efectos con la
metanfetamina, la cual ha demostrado
producir la degeneración de las
neuronas que con tratamiento con el
neurotransmisor dopamina. El deterioro
de las neuronas que con tratamiento
con dopamina es la causa subyacente
de los trastornos motores presentes en
la enfermedad de Parkinson. Los
síntomas de esta enfermedad
comienzan con falta de coordinación y
temblores y con el tiempo pueden
resultar en una forma de parálisis22.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
37
Modos de empleo:
El MDMA se puede conseguir en forma
de polvo cristalino, y en caso de ser de
alta calidad, en cristales, de ahí que se le
llame también crystal. También se
comercializa en pastillas que suelen
llevar compactantes y aglutinantes.
Cápsulas de MDMA.
Se ingieren normalmente en dosis pe-
queñas, con la intención de controlar el
efecto, lo que es difícil por el descono-
cimiento de la pureza y su contenido en
MDMA. La dosis normal para un adulto
suele ser 100mg a 120mg y suele inge-
rirse o bien en cápsulas (denominadas
"bombitas" con una cubierta superior de
papel de arroz), comprimidas en pasti-
llas e incluso de forma directa. También
se esnifa en rayas siendo sus efectos
más severos y dañinos al tomar contac-
to más directamente con el cerebro y es
molesto por los pequeños cristales que
contiene. El problema con las pastillas
de club que se le suele atribuir al MDMA
es el componente de las mismas, suelen
tener como base de la pastilla anfetami-
nas y otras drogas como MDA, DXM,
heroína, ketamina u otras sustancias
casi todas ellas alucinógenas que sí ge-
neran adicción física y que además
combinadas con el MDMA pueden llegar
a ser altamente peligrosas. Estas mez-
clas realizadas en las pastillas se pueden
deber a varios motivos, entre ellos el
hecho de que puede ser más "divertido"
el que la pastilla contenga algún alu-
cinógeno o energizante que permita
estar en una fase durante mucho tiem-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
38
po. Otra posibilidad es el conocimiento
de los fabricantes de esta droga de que
el MDMA no puede llegar a causar adic-
ción física debido a la tolerancia que el
cuerpo desarrolla, lo que llevaría a una
baja en el consumo111.
El cuerpo humano desarrolla tolerancia
a esta droga, por lo que el consumo
continuo de la misma lleva a la paulatina
ausencia de efectos, debido a esto una
persona que ingiere la droga semanal-
mente, probablemente después de uno
o dos meses no sienta los efectos de la
misma o estos sean casi imperceptibles.
Cabe aclarar que el uso más común de
la droga es netamente lúdico funda-
mentalmente en fiestas y discotecas, sin
embargo investigaciones hechas por
psicólogos y psiquiatras demuestran que
esta droga tiene un potencial altísimo
como tratamiento de ciertos desórde-
nes mentales como paranoía, fóbias,
esquizofrenia, etc. e incluso en el trata-
miento de parejas en crisis, debido a las
cualidades empáticas de la droga que
generan una gran apertura al diálogo67.
Sobredosis:
En casos de toxicidad por sobredosis,
puede producirse hipertermia y síndro-
me serotoninérgico. Existe riesgo de
deshidratación en usuarios con alta acti-
vidad física que olvidan beber agua, da-
do que la droga puede inhibir la percep-
ción del cansancio y la sed, siendo ésta
hasta ahora la única causa de muerte
derivada debido a los consumidores que
olvidan hidratarse y ventilar el cuerpo,
menospreciando la importancia de esto
debido a los efectos eufóricos y de
bienestar de la droga. En contraste,
también han sido registrados casos de
hiponatremia (deficiencia de sodio) por
exceso de agua. Pero quizás el mayor
peligro proviene del hecho de que otras
drogas, más peligrosas (como PMA,
DXM o metanfetamina), se añaden a las
pastillas de éxtasis o muchas veces sim-
plemente se venden como tales. Por
otra parte, la ingestión de alcohol agra-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
39
va los riesgos potenciales ya que el
alcohol colabora con la deshidrata-
ción. No hay información disponible
sobre los efectos de la droga a largo
plazo en humanos, debido a que el
status legal de esta sustancia impedía
tales investigaciones hasta el 2001,
cuando se autorizaron los ensayos
clínicos antes mencionados113.
HEROINA
Descripción:
La morfina es un alcaloide fenantreno
del opio siendo preparado el sulfato
por neutralización con ácido sulfúrico.
La morfina, es una sustancia contro-
lada, opioide agonista utilizada en
premedicación, anestesia, analgesia,
tratamiento del dolor asociado a la
isquemia miocárdica y para la disnea
asociada al fracaso ventricular iz-
quierdo agudo y edema pulmonar. La
morfina es un polvo blanco, cristalino,
Datos de la heroina
Nombre (IUPAC) sistemático
(5α,6α)-7,8-didehydro-4,5-epoxy-
17-methylmorphinan-3,6-diol diacetate (ester)
Identificadores
Número CAS 561-27-3
Código ATC N02AA09
Pub Chem 3592
Datos químicos
Fórmula C21H23NO5
Peso mol. 369.41
Fármacocinética
Biodisponibilidad <35%
Unión proteica 0% (morfina metabo-
lite 35%)
Metabolismo hepatico
Vida media 2-3 hours
Excreción 90% renal como
glucuronides, rest
biliar
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
40
inodoro y soluble en agua. La estructura
molecular es (C17H19NO3)2 H2SO4
5H20 con un peso molecular 758.83. El
sulfato de morfina es quimicamente
designado como sulfato 7,-8-Didehidro-
4, 5-epoxi-17-metill-(5a,6a)morfinan-
3,6-diol sulfato (2:1)(sal), pentahidrato,
con la siguiente fórmula estructural:
Estructura química de la heroína
La heroína es una droga altamente adic-
tiva e ilegal en la mayoría de los países
del mundo. Pertenece a los opiáceos, de
los cuales es el más abusado y el de ac-
ción más rápida. La heroína se prepara a
partir de la morfina, sustancia que se
encuentra naturalmente en los conduc-
tos lactirífaros de la cápsula de la Papa-
ver somniferum o adormidera, desde
donde se extrae mediante cortes super-
ficiales por donde supura látex (opio).
Generalmente se vende en forma de
polvo blanco o marrón, o como una sus-
tancia negra pegajosa conocida en las
calles como "goma" o "alquitrán ne-
gro"39,40.
Origen:
En 1883, el quimico alemán Heinrich
Dreser, aisló un opiáceo nuevo gracias a
la acetilación del clorhidrato de morfina,
obteniendo diacetilmorfina, que es el
nombre científico de la heroína. Resulta
interesante que en principio se pensó en
la heroína como un sustituto de la mor-
fina, la cual producía gran adicción, y
por ese motivo se eligió su nombre. En
poco tiempo se demostró que la adic-
ción generada por utilizar este com-
puesto era mucho más intensa en com-
paración con la morfina51.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
41
Etimología:
La acción de esta nueva droga sobre las
vías respiratorias era tal que se creyó
que había sido vencida definitivamente
la tuberculosis, por lo que Bayer registró
la marca comercial Heroin (Heroína).
Este nombre, bajo el que este nuevo
producto sintético ha pasado a hacerse
conocido, se creó combinando el
"Heros" latín (héroe) y el sufijo medici-
nal "-in" (como en koffein / cafeína),
creando a la vez la conotación muy ven-
dible de la "Femme Heroine". La heroína
sin refinar se conoce como brown sugar
(azúcar moreno); y ya refinada como
horse (caballo) o sencillamente abrevia-
da como H60.
Mecanismos de Acción:
El preciso mecanismo de acción de la
morfina y otros opioides no es conocido,
aunque se cree que esta relacionado
con la existencia de receptores estéreo
específicos opioides presinápticos y
postsinápticos en el sistema nervioso
central (SNC) y otros tejidos. Los opioi-
des imitan la acción de las endorfinas
produciendo una inhibición de la activi-
dad de la adenilciclasa. Esto se manifies-
ta por una hiperpolarización neuronal
con supresión de la descarga esponta-
nea y respuestas evocadas. Los opioides
también interfireren en el transporte
transmembrana de iones calcio y actua
en la membrana presináptica interfe-
riendo con la liberación del neurotrans-
misor22.
Farmacodinamia, Farmacocinética y Me-
tabolismo95
Farmacodinamia:
El efecto primario de la morfina se ma-
nifiesta en el SNC y órganos que contie-
nen músculo liso. La morfina produce
analgesia, euforia, sedación, disminu-
ción de la capacidad de concentración,
náuseas, sensación de calor en el cuer-
po, pesadez en los miembros, sequedad
de boca, y prurito. La morfina es impro-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
42
bable que produzca depresión miocárdi-
ca o hipotensión directamente. Sin em-
bargo, la reducción del tono del sistema
nervioso simpático en las venas periféri-
cas produce un estancamiento con re-
ducción del retorno venoso, gasto car-
diaco y presión arterial. La morfina pue-
de reducir la presión arterial por inducir
histamino liberación, o bradicardia por
aumento de la actividad del vago. La
morfina puede también tener un efecto
directo depresor sobre el nodo sinusal y
actuar disminuyendo la conducción por
el nodo aurículo-ventricular. La morfina
produce depresión respiratoria dosis
dependiente principalmente mediante
un efecto depresor directo sobre el cen-
tro de la respiración en el cerebro. Este
se caracteriza por disminución de la res-
puesta al dióxido de carbono aumento
de la PaCO2 basal y desplazamiento de
la curva de respuesta al CO2 a la dere-
cha. La morfina disminuye el flujo san-
guíneo cerebral y la presión intracraneal
con ventilación controlada. La morfina
puede causar rigidez muscular, espe-
cialmente en los músculos abdominales
y torácicos, cuando es administrada a
grandes dosis. La morfina puede causar
espasmo del tracto biliar y aumentar las
presiones del conducto biliar común que
puede asociarse a distress epigástrico o
cólico biliar. El estreñimiento puede
acompañar a la terapia con morfina se-
cundaria a la reducción de las contrac-
ciones peristálticas de los intestinos y
aumento del tono del esfinter pilórico,
válvula ileocecal y esfinter anal. La mor-
fina puede causar vómitos y náuseas por
estimulación directa de la zona trigger
quimioreceptora en el suelo del cuarto
ventrículo, por aumento de las secre-
ciones gastrointestinales y disminución
de la propulsión intestinal. La morfina
aumenta el tono y la actividad peristálti-
ca del ureter. La morfina deprime el re-
flejo de la tos por efecto directo sobre la
médula16.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
43
Farmacocinética y Metabolismo:
La morfina es administrado normalmen-
te por vía intravenosa en el periodo pe-
rioperatorio con una iniciación del efec-
to de menos de un minuto con un efec-
to analgésico pico que aparece a los 20
minutos de la inyección. La morfina in-
tramuscular tiene una iniciación del
efecto de unos 15-30 minutos, y un
efecto pico de 45-90 minutos. La absor-
ción de la morfina del tracto gastroin-
testinal no es fiable, sin embargo, esto
no excluye su uso con dosis más grandes
para lograr niveles analgésicos. La dura-
ción de acción es de unas 4 horas. Los
niveles plasmáticos de morfina no se
correlacionan con la actividad farma-
cológica, reflejando una demora en la
penetración de la morfina a través de la
barrera hematoencefálica. La pobre pe-
netración de la morfina en el SNC es por
su relativamente pobre solubilidad en
lípidos (1), 90% de ionización a pH fi-
siológico , unión a las proteinas, y con-
jugación con el ácido glucurónico .
La morfina es metabolizada primaria-
mente por conjugación con el ácido glu-
curónico en el hígado y otro lugares,
especialmente en riñones. Alrededor del
5-10% de la morfina aparece como mor-
fina-6-glucuronido, un metabolito activo
que produce analgesia y depresión de la
ventilación acumulándose en pacientes
con insuficiencia o fallo renal.
La vida media de eliminación es de 114
minutos para la morfina y de 173 minu-
tos para la morfina-3-glucuronido, un
inactivo y predominante metabolito.
Indicaciones y uso:
La morfina está indicada para el control
del dolor severo y se usa en premedica-
ción, analgesia, anestesia, tratamiento
del dolor asociado con isquemia
miocárdica, y/o disnea asociada con el
fallo ventricular izquierdo agudo y ede-
ma pulmonar145.
Precauciones: Puede aparecer depre-
sión neonatal debido a que la placenta
no ofrece dificultad al paso de los opioi-
des por la placenta. El uso crónico en la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
44
madre de opioides puede producir adi-
ción intrauterina. La morfina debe ser
utilizada con precaución en pacientes
con traumatismo craneoencefálico o
patología intracraneal. La morfina pue-
de oscurecer el curso clínico de estos
pacientes y la depresión ventilatoria
puede conducir a un aumento de la pre-
sión intracraneal.
Contraindicaciones, Reacciones Adver-
sas, Interacción de Drogas
Contraindicaciones:
La morfina está contraindicada en pa-
cientes con hipersensibilidad a la droga,
en pacientes con depresión respiratoria
en ausencia de equipo de resucitación y
en pacientes con asma agudo o severo.
La respuesta anafiláctica a la morfina es
rara. Más normalmente se ve una libe-
ración de histamina por los mastocitos.
Reacciones Adversas
Cardiovascular:
Hipotensión, hiper-
tensión, bradicardia,
y arritmias
Pulmonar:
Broncoespasmo,
probablemente debi-
do a efecto directo
sobre el músculo liso
bronquial
SNC:
Visión borrosa,
síncope, euforia, dis-
foria, y miosis
Gastrointestinal:
Espasmo del tracto
biliar, estreñimiento,
náuseas y vómitos,
retraso del vaciado
gástrico
Las reacciones alérgicas incluyen prurito
y urticaria.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
45
Interacción de Drogas
La depresión ventilatoria puede ser po-
tenciada por anfetaminas, fenotiazinas,
antidepresivos tricíclicos, e inhibidores
de la monoamino oxidasa. Las drogas
simpaticomiméticas pueden aumentarla
analgesia producida por los opioides.
Los efectos sobre el sistema nervioso
central y respiratorio son potenciados
por el alcohol, sedantes, narcóticos, an-
tihistamínicos, fenotiazinas, butirofeno-
nas, inhibidores de la aminooxidasa,
antidepresivos tricíclicos y cimetidi-
na5,113.
Dosis y Administración.
Intravenosa
2-15 mg (0.05-0.2
mg/kg en pacientes
pediátricos; máximo
15 mg); Induccción
dosis de 1 mg/kg IV.
Oral:
10-30 mg cada 4 horas
si es necesario; libera-
ción lenta, 15-60 mg
cada 8-12 horas.
Intramuscular/
subcutanea:
2.5-20 mg (0.05-0.2
mg/kg en pacientes
pediátricos; máximo
15 mg).
Rectal: 10-20 mg cada 4
horas.
Intratecal: Adultos, 0.2 a 1.0 mg.
Epidural: Adultos, 3 a 5 mg.
Vías de Administración de la morfina
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
46
La morfina puede utilizarse por vía oral,
intramuscular, intravenosa, subcutanea,
rectal o como analgésico intratecal o
epidural. Las dosis deben ser individuali-
zadas tomando en cuenta la edad, peso,
estado físico, medicaciones, patología
asociada, tipo de anestesia utilizado, y
procedimiento quirúrgico21.
Formas de adulteración:
Como todos los opiáceos de venta ilícita,
la heroína puede adulterarse con quini-
na, lactosa, azúcar, bórax y otros fárma-
cos depresores del SNC como barbitúri-
cos y sedantes o contaminarse con bac-
terias, virus, hongos o partículas. Se han
reportado algunos casos de sustitución
total de heroína por pentazocina. La
droga llamada Speedball no es más que
cocaína mezclada con heroína. Diversas
leyendas urbanas dicen que la heroína
de la calle también puede ser cortada
con estricnina u otros venenos, extre-
mos que no están precisamente docu-
mentados.
Heroína asiática de alta calidad
Ya que los consumidores de heroína no
saben la fuerza real de la droga o su
verdadero contenido, están en riesgo de
sufrir una sobredosis o incluso de morir.
Consumo:
La heroína se administra generalmente
endovenosa, aunque también es habi-
tual la administración por vía nasal o
fumada. En este último caso se suele
realizar utilizando papel de plata. Los
efectos de esta droga comienzan entre
los 3 y los 5 minutos después de haber
sido inyectada o inhalada y duran entre
tres y cuatro horas. Al llegar al cerebro
la heroína ocupa los receptores opioi-
des, principalmente los receptores que
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
47
funcionan en el área de la analgesia y
deprimen la respiración; y los recepto-
res delta que, según teorías recientes,
pueden estar más vinculados con el es-
tado anímico que con la analgesia. Esta
droga destruye unos neurotransmisores
llamados endorfinas que generan sensa-
ciones, provocando discapacidad cere-
bral bloqueando todas la arterias y pue-
de llegar a ser una muerte cerebral.
Usos terapéuticos:
A partir de su aparición, la heroína se
utilizó principalmente para tratar la tu-
berculosis por su capacidad para supri-
mir el reflejo de la tos. Pronto se vio que
su efecto anestésico no era mayor que
el de la morfina, pero era más activa por
lo que podía utilizarse en dosis menores
logrando el mismo efecto con las consi-
guientes ventajas a nivel de acumula-
ción en los tejidos. Sin embargo, algo
más la diferenciaba de la morfina: cier-
tos efectos estimulantes y no sólo
analgésicos, por lo que durante mucho
tiempo se recomendó como cura para el
hábito producido por la morfina. Ac-
tualmente el clorhidrato de heroína se
utiliza muy poco ya sólo como antitusí-
geno en casos severos. Además el efec-
to de la heroína es más potente que el
de la morfina, pero menos duradero.
Los usuarios que comparten las agujas
(práctica que poco a poco está cayendo
en desuso) u otros materiales de inyec-
ción corren el riesgo de contagiarse con
el VIH, algunas hepatitis y cualquier en-
fermedad infecciosa. En España, un 59%
de los afectados por el virus del sida, se
infectaron por vía parenteral (inyectada)
entre 1981 y 1998.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
48
EL HIGADO
El hígado es la glándula más voluminosa
del cuerpo y una de las más importantes
en cuanto a la actividad metabólica del
organismo. Desempeña funciones úni-
cas y vitales como la síntesis de proteí-
nas (asimilación), elaboración de la bilis
(necesaria para la digestión y absorción
de las grasas), función desintoxicante,
almacén de vitaminas, glucógeno, etc.
Además, es el responsable de eliminar
de la sangre las sustancias que pueden
resultar nocivas para el organismo,
transformándolas en otras inocuas87.
Anatomía hepática:
El hígado está localizado en la región del
hipocondrio derecho del abdomen
(normalmente no sobrepasa el límite del
reborde costal), llenando el espacio de
la cúpula diafragmática, donde puede
alcanzar hasta la quinta costilla, y se
relaciona con el corazón a través del
centro frénico, a la izquierda de la cava
inferior. Normalmente es blando y de-
presible, y está recubierto por una
cápsula fibrosa. Sobre esta cápsula fi-
brosa se aplica el peritoneo en la mayor
parte de la superficie del hígado (excep-
to en el área desnuda del hígado). El
bilis producido por el hígado actúa en el
intestino delgado.
Aspectos generales
• Forma: se compara con la mitad
superior del ovoide horizontal, de gran
extremo derecho, alargado
transversalmente.
• Coloración: rojo pardo.
• Consistencia: firme. Está
constituido por un parénquima,
rodeado por una fina cápsula fibrosa,
llamada cápsula de Glisson.
• Longitud: en el adulto es de
aproximadamente 28cm por 15 cm en
sentido antero-posterior y 8 cm de
espesor a nivel del lóbulo derecho.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
49
• Peso aproximado: en el cadáver
es de 1500 g y en el ser vivo pesa 2400 g
aproximadamente. Esta diferencia se
debe a que en vida está lleno de sangre.
Está dividido en cuatro lóbulos:
• Lóbulo derecho, situado a la
derecha del ligamento falciforme.
• Lóbulo izquierdo, extendido
sobre el estómago, situado a la
izquierda del ligamento falciforme
• Lóbulo cuadrado, visible
solamente en la cara inferior del hígado.
Se encuentra limitado por el surco um-
bilical a la izquierda, el lecho vesicular a
la derecha y el híleo del hígado por
detrás.
• Lóbulo de Spigel, situado entre
el borde posterior del híleo por delante,
la vena cava por detrás.
Clínicamente, y quirúrgicamente sobre
todo, se emplea el concepto de segmen-
to hepático, basándose en las divisiones
arteriales y en el hecho de que haya po-
cas anastomosis entre segmentos. Si
miramos por la cara anterosuperior del
hígado podemos distinguir de derecha a
izquierda un segmento posterior, en el
borde del lado derecho, seguido de un
segmento anterior, un segmento medial
y un segmento lateral que forma el lími-
te izquierdo102.
Cara superior del hígado.
El hígado se relaciona principalmente
con estructuras situadas al lado derecho
del abdomen, muchas de las cuales de-
jan una impresión en la cara inferior del
lóbulo derecho del hígado. Así tenemos
de atrás a delante la impresión cólica, la
impresión duodenal, pegada a la fosa
cística, y la impresión renal, menos mar-
cada. En la cara inferior del lóbulo iz-
quierdo están la impresión gástrica y la
escotadura del esófago en el borde pos-
terior. Las relaciones con el diafragma y
con el corazón completan los órganos
vecinos al hígado.
La base del hígado da entrada al hilio
hepático, que no es sino la zona de en-
trada del omento (epiplón) menor con la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
50
vena porta, la arteria hepática y la salida
del conducto hepático. El omento
(epiplón) menor (fijado en una promi-
nencia de la cara inferior denominada
tubérculo omental) reviste el fondo de
los surcos de la base del hígado (surco
del ligamento venoso, surco del liga-
mento redondo) y alcanza el borde pos-
terior de la cara inferior, donde el peri-
toneo que lo recubre pasa a revestir el
diafragma y la pared posterior forman-
do el ligamento hepatorrenal. Por de-
lante el peritoneo reviste la cara dia-
fragmática hasta su límite superior,
donde salta a revestir la cara abdominal
del diafragma. Entre los dos repliegues
de peritoneo que saltan de la superficie
del hígado al diafragma queda com-
prendida la cara desnuda del hígado,
zona en la que el peritoneo no recubre
la cápsula hepática. Por esta zona la ca-
va inferior se relaciona con el hígado y
recibe las venas hepáticas.
Cara inferior del hígado:
En la cara diafragmática se encuentra el
ligamento falciforme, el cual se extiende
hasta alcanzar la zona umbilical. Por su
borde libre corre el ligamento redondo
del hígado (restos de la vena umbilical
embrionaria). Este resto de la vena um-
bilical se une a las venas subcutáneas
periumbilicales que irradian desde el
ombligo, las cuales drenan en la vena
ilíaca externa y finalmente en la cava
inferior. En casos patológicos con hiper-
tensión portal estas venas se dilatan
dando lugar al fenómeno de la cabeza
de medusa.
El ligamento falciforme puede ser consi-
derado como el resto del mesogastrio
ventral (en la porción no desarrollada
del septum transversum por la invasión
embrionaria del brote duodenal) que se
extiende por el mesogastrio ventral y
que contribuye a la formación del híga-
do. Este ligamento, al llegar a la parte
posterior de la cara diafragmática del
hígado se divide en dos hojas, dando
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
51
lugar al ligamento coronario (límite su-
perior del área desnuda del hígado).
Cada una de estas hojas se dirige hacia
cada uno de los bordes derecho e iz-
quierdo del hígado, en donde se une a la
hoja peritoneal de la cara visceral del
hígado que se refleja sobre el diafragma,
formando los ligamentos triangulares
derecho e izquierdo (éste último más
definido que el derecho).
La estructura del hígado va a seguir es-
trechamente las divisiones de la vena
porta. Tras la división en ramos segmen-
tarios, las ramas de la vena porta,
acompañadas de las de la arteria hepá-
tica y de las divisiones de los conductos
hepáticos, se encuentran juntos en el
espacio porta (vena interlobulillar, arte-
ria interlobulillar y conductillos interlo-
bulillares).
Circulación sanguínea del hígado:
La circulación hepática es de carácter
centrípeta y está formada por el sistema
porta y la arteria hepática. El sistema
porta constituye el 70*75% del flujo
sanguíneo (15 ml/min) y contiene san-
gre poco oxigenada y rica en nutrientes
proveniente del tracto gastrointestinal y
bazo. La circulación general depende de
la arteria hepática, rama del tronco cel-
íaco, que contiene la sangre oxigenada
(irrigación nutricia) 93,94.
Cada espacio porta se encuentra en la
confluencia de los lobulillos hepáticos,
que son formaciones más o menos
hexagonales de células hepáticas y que
posee en el centro la vena centrolobuli-
llar. La confluencia de venas centrolobu-
lillares da lugar a las venas hepáticas,
que finalmente drenan en la vena cava
inferior. Por lo tanto, la sangre rica en
nutrientes de la absorción intestinal
(vena porta) y en oxígeno (arteria hepá-
tica) se mezcla en los sinusoides hepáti-
cos (espacios entre hepatocitos), para
elaborar los metabólicamente y sinteri-
zar las sales biliares. Fenómenos infec-
ciosos, tóxicos, inflamatorios, etc., des-
estructuran los lobulillos hepáticos y los
espacios porta, conduciendo a la hiper-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
52
tensión portal porque este flujo vascular
está obstaculizado143.
Según los últimos estudios que se han
desarrollado sobre los componentes del
hígado se ha encontrado que éste tiene
la capacidad de producir gastrina y ayu-
dar al estómago en el vaciamiento
gástrico, ya que posee un citocromo
llamado AS*57. Este órgano productor
es el que excreta a la urea
El drenaje linfático del hígado corre a
cargo de vasos que desembocan hacia la
cava inferior o hacia los ganglios hepáti-
cos que siguen el recorrido inverso de la
arteria hepática. ...
Inervación del hígado
El hígado recibe sus nervios del plexo
solar, del neumogástrico izquierdo y
derecho y también del frénico derecho
por medio del plexo diafragmático. El
aporte nervioso también le viene del
plexo celíaco que inerva al hepático,
mezcla de fibras simpáticas y para-
simpáticas. Estos nervios llegan al híga-
do junto a la arteria hepática85,171
Fisiología del hígado:
El hígado desempeña múltiples funcio-
nes en el organismo como son41 (David):
• Producción de bilis: el hígado
excreta la bilis a la vía biliar y de
allí al duodeno. La bilis es
necesaria para la digestión de
los alimentos.
• Metabolismo de los carbo-
hidratos:
o Gluconeogénesis: es la
formación de glucosa a partir de
ciertos aminoácidos, lactato y
glicerol.
o Glucogenólisis: es la
formación de glucosa a partir del
glucógeno.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
53
o Glucogénesis: es la
síntesis de glucógeno a partir de
glucosa.
• Eliminación de insulina y de
otras hormonas.
• Metabolismo de los lípidos:
o Síntesis de colesterol.
o Producción de
triglicéridos.
• Síntesis de proteínas: como la
albúmina, lipoproteínas.
• Síntesis de factores de
coagulación como el fibrinógeno
(I), protrombina (II), globulina
aceleradora (V), proconvertina
(VII), Factor Xmas (IX) y factor
Stuart-Prower (X).
• Detoxificación de la sangre:
o Neutralización de
toxinas, la mayoría de fármacos y
de la hemoglobina.
• Transformación del amonio en
urea.
• Depósito de múltiples
sustancias como:
o glucosa en forma de
glucógeno (un reservorio
importante de aprox. 150 g)
o vitamina B12, hierro,
cobre...
• En el primer trimestre del
embarazo, el hígado es el principal
órgano de producción de glóbulos
rojos en el feto. A partir de la
semana 42 de la gestación, la médula
ósea asume esta función.
Histología hepática:
El tejido hepático es un tejido estable.
Presenta una gran capacidad de regene-
ración en respuesta a estímulos exter-
nos, como lesiones o procesos tumora-
les. Sin embargo las lesiones crónicas
como el alcoholismo e infecciones hepá-
ticas implican una pérdida constante y
prolongada del parénquima sin existir
proliferación compensatoria. Como re-
sultado el parénquima hepático es re-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
54
emplazado por tejido fibroso y acúmu-
los de grasa produciendo así cirrosis103.
Mak El parénquima hepático está for-
mado por61 :
• Lobulillos hepáticos: son
subunidades irregularmente
hexagonales formadas por láminas
fenestradas de hepatocitos que se
disponen en forma radiada en torno a
una vena central o vena centrolobulillar,
ubicada en el centro del lobulillo.
• Espacios porta o tríadas: son
áreas triangulares situados en los
ángulos de los lobulillos hepáticos,
constituidas por un estroma conjuntivo
laxo, que contienen en su interior una
rama de la arteria hepática, una rama de
la vena porta, un capilar linfático y un
conductillo biliar. La bilis producida por
los hepatocitos se vierte en una red de
canalículos dentro de las láminas de
hepatocitos y fluye en forma centrípeta
al lobulillo hacia los conductillos biliares
de los espacios porta.
• Sinusoides hepáticos: son
capilares que se disponen entre las
láminas de hepatocitos y donde
confluyen desde la periferia de los
lobulillos las ramas de la arteria hepática
y vena porta. La sangre fluye desde las
tríadas a la vena central, circulando en
forma centrípeta. La pared de los
sinusoides está formada por una capa
discontinua de células endoteliales
fenestradas que carecen de membrana
basal. En los sinusoides confluyen la
circulación hepática y porta. Estos
drenan su contenido a la vena hepática
central, de ésta a las venas hepáticas
derecha e izquierda y finalmente a la
vena cava inferior.
• Espacio de Disse: es un estrecho
espacio perisinusoidal que se encuentra
entre la pared de los sinusoides y las
láminas de hepatocitos, ocupado por
una red de fibras reticulares y plasma
sanguíneo que baña libremente la
superficie de los hepatocitos. En el
espacio de Disse se produce el
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
55
intercambio metabólico entre los
hepatocitos y el plasma donde se forma
la abundante linfa hepática. En este
espacio también se encuentran células
almacenadoras de grasa o células de Ito,
de forma estrellada y función poco
conocida101.
• Células de Küpffer: son
macrófagos fijos pertenecientes al
sistema fagocítico mononuclear que se
encuentran adheridos al endotelio y
emiten sus prolongaciones hacia el
espacio de Disse. Su función es fagocitar
eritrocitos envejecidos y otros
antígenos. Además actúan como células
presentadoras de antígeno.
• Los hepatocitos constituyen
alrededor del 80% de la población
celular del tejido hepático. Son células
poliédricas con 1 ó 2 núcleos esféricos
poliploides y nucléolo prominente.
Presentan el citoplasma acidófilo con
cuerpos basófilos y son muy ricos en
orgánulos. Además en su citoplasma
contienen inclusiones de glucógeno y
grasa. La membrana plasmática de los
hepatocitos presenta un dominio sinus-
oidal con microvellosidades que mira
hacia el espacio de Disse y un dominio
lateral que mira hacia el hepatocito
vecino. Las membranas plasmáticas de
dos hepatocitos contiguos delimitan un
canalículo donde será secretada la bilis.
La presencia de múltiples orgánulos en
el hepatocito se relaciona con sus
múltiples funciones, como son la síntesis
de proteínas (albúmina, fibrinógeno y
lipoproteínas del plasma), el
metabolismo de hidratos de carbono, la
formación de bilis, el catabolismo de
fármacos y tóxicos y el metabolismo de
lípidos, purinas y gluconeogénesis172.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
56
DESCRIPCION ANATOMICA DEL HIGADO
DEL RATON
El hígado en la rata y ratón32,69,
presenta algunas diferencias anatómicas
respecto a otros animales y en relación al
humano.
La mayor parte del hígado se
encuentra en estrecho contacto con el
diafragma, dentro de la caja torácica y se
extiende en sentido ventral a lo largo de
la pared abdominal, sobrepasando las
costillas. La superficie diafragmática es
convexa. La superficie visceral se
encuentra en contacto con el estómago,
la porción descendente del duodeno, la
transversa del colon, el yeyuno y el bazo.
El lóbulo caudado contacta con el riñón
derecho. El esófago pasa dorsalmente
formando una escotadura en el reborde
hepático (impresión esofágica).
El hígado es dividido por
hendiduras profundas en tres lóbulos:
izquierdo, medio y derecho. El lóbulo
izquierdo está formado por un gran
lóbulo lateral situado a la izquierda y que
se une a los demás lóbulos por medio de
los vasos y de tejido intersticial
únicamente, y por otro lóbulo más
pequeño en posición medial, que se
localiza, en su mayor parte, craneal al
anterior. Está separado del lóbulo medio
por una fisura profunda que recibe la
inserción del ligamento falciforme.
La porción supraportal del
estrecho lóbulo intermedio se extiende
cranealmente y hacia la derecha y se
superpone a la parte derecha del hígado.
De su superficie visceral emerge
el lóbulo caudado, que presenta una
forma acabada en punta y se extiende
hacia el dorso y la derecha. Su superficie
dorsal (impresión renal) contacta con la
cara ventral del riñón. Dos procesos
papilares con forma de disco sobresalen a
la izquierda de la porción hepática de la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
57
vena porta. El dorsal se extiende hacia el
lado derecho del esófago a través de la
curvatura menor hacia la superficie
caudal del estómago. El proceso papilar
ventral alcanza la superficie craneal del
estómago. El pequeño lóbulo derecho del
hígado no está dividido. Situado
dorsalmente al lóbulo caudado, también
está el riñón derecho. El hígado
representa el 4,15% del peso corporal.
La vena cava caudal penetra en el
hígado por el margen mediocaudal del
proceso caudado y recibe siete venas
segmentarias antes de abandonar el
hígado por la cara craneodorsal del lóbulo
supraportal. Tres de ellas, que provienen
de la parte izquierdo- ventral del hígado,
convergen para formar un tronco común
que afluye a la vena cava inferior. La
arteria hepática y la vena porta penetran
en el espacio portal hepático
ventralmente respecto al lugar de
entrada de la vena cava y se dividen
siguiendo un patrón similar.
Los conductos biliares, que se
unen de forma parecida, fluyen hacia el
área portal para formar el conducto
hepático. Este es un tubo con una
longitud de 12-45 mm. y de 1 mm. de
diámetro que se cruza dorsalmente con el
comienzo del duodeno. Se desliza entre
los lóbulos del cuerpo del páncreas hasta
la apertura a la luz del duodeno, que está
situada a 7-35 mm. distalmente respecto
del píloro. En su recorrido el conducto
recibe varios conductos hepáticos.
Desemboca en el duodeno formando una
papila de aspecto cónico y 1 mm. de
altura. Tanto la rata como el ratón no
poseen vesícula biliar144.
Los ligamentos del hígado son
muy finos. El epiplon menor se dirige
hacia la superficie visceral caudalmente y
se inserta a lo largo de una línea que se
inclina a través del lóbulo lateral
izquierdo y entre los dos procesos
papilares hacia el espacio portal hepático.
En la cara diafragmática la línea de
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
58
inserción del ligamento falciforme se
extiende desde la fisura que separa los
lóbulos medial izquierdo y medial, hacia
el ligamento coronario que se inserta
alrededor de la desembocadura de la
vena cava inferior. Desde ahí se deslizan
dorsolateralmente las líneas de inserción
de ambos ligamentos triangulares.
DESCRIPCION HISTOLOGICA DEL HIGADO DEL
RATON
La unidad básica estructural del
hígado es el lobulillo hepático, concepto
introducido por Kiernan87. Mide
aproximadamente 1-2 mm. de diámetro y
está constituido por una vena central
rodeado en su periferia por los espacios
porta (en número de 3 ó 4) que contienen
las ramas de la vena porta, la arteria
hepática y el conducto biliar, así como los
vasos linfáticos y nervios.
Entre ambos sistemas vasculares
y de forma radial se extienden las
trabéculas de células hepáticas y los
sinusoides intercelulares.
Rappaport et al144 y la escuela de
Toronto sustituyeron el concepto de
lobulillo, como unidad estructural, por el
de acini, como una unidad estructural y
funcional. Según este concepto, cada
acini está formado por un espacio porta
central con su conducto biliar, su rama
arterial y su rama venosa portal, que
aportan la sangre a los sinusoides,
situándose en la periferia las venas
centrales. Cada acini mide unos 2 mm.
Estos acinis simples se reúnen en un
número de tres para formar acinis
complejos, los cuales a su vez constituyen
el aglomerado de acinis, porción del
parénquima hepático compuesta por 3 ó
4 acinis complejos que rodean un espacio
porta.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
59
Representación esquemática de un acini.
Cada acini está subdividido en
tres zonas. Los hepatocitos en la zona I,
muy próximos a las venas axiales,
corresponden al área periportal del
clásico lobulillo y reciben sangre muy rica
en oxígeno y nutrientes. Es considerada
metabólicamente como la zona más
activa y en ella suceden los fenómenos de
regeneración hepática . Las zonas II y III
son las más periféricas y están alejadas de
los vasos axiales y son más susceptibles a
la anoxia y a algunas formas de lesión por
tóxicos. La zona III corresponde al área de
la zona lobulillar del lobulillo clásico.
Diagrama comparativo del acini hepático con las zonas 1,
2 y 3 del lóbulo hepático (línea punteada). El tracto portal
contiene una vénula portal (v) una arteriola hepática (a) y
el conducto hepático (d). (t): vénula terminal hepática.
En los hepatocitos de la zona I es
mayor el tamaño y el número de
mitocondrias y la actividad de la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
60
fosforilación oxidativa es más intensa,
mientras que en los hepatocitos de la
zona III la glucólisis anaerobia es más
marcada produciéndose una mayor
acumulación del glucógeno.
En la estructura hepática
podemos distinguir tres partes: una
porción mesenquimatosa, compuesta por
el tejido conjuntivo de la cápsula de
Glisson y de los espacios porta, así como
fibras reticulares, etc; y una porción
parenquimatosa, cuyos principales
elementos son las células hepáticas o
hepatocitos y los sinusoides.
ESTRUCTURA DE LOS HEPATOCITOS:
Los hepatocitos constituyen la
unidad funcional elemental del hígado y
representan el 60% de todos sus
elementos celulares, ocupando
aproximadamente el 80% del parénquima
hepático.
Los hepatocitos tienen un núcleo
central y único, que mide unas 12 micras
de diámetro, frecuentemente
pleomórfico y de diferente tamaño
según las zonas, siendo los de mayor
tamaño los de la zona media. Ocupa algo
más del 7% del volumen celular y
presenta uno o más nucleolos.
El núcleo está separado del
citoplasma por una doble membrana con
gran actividad metabólica. La lámina
exterior de la membrana nuclear se
continúa con las laminillas del retículo
endoplásmico. Entre ambas láminas,
externa e interna, existe un espacio
perinuclear de unas 5 milimicras124.
La membrana nuclear está
perforada por un gran número de poros
que comunican y permiten el intercambio
de sustancias entre el nucleoplasma y el
citoplasma
El núcleo contiene ADN como
componente principal, el cual se dispone
en forma de gránulos o cúmulos que
constituyen la cromatina nuclear.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
61
El citoplasma está rodeado de
una membrana de aspecto diferente
según su situación. La cara sinusoidal
presenta unas microvellosidades de unas
0,5 milimicras de longitud que aumenta la
superficie y mantiene una gran capacidad
absortiva y secretora. Estas
microvellosidades delimitan, junto con las
células endoteliales de los sinusoides y las
células de Kupffer, el espacio Disse y por
él transcurren fibras de reticulina de la
trama de sostén de las trabéculas
hepáticas. Las microvellosidades
comunican libremente con el espacio
sinusoidal a través de poros existentes en
el citoplasma de las células endoteliales82.
La superficie canalicular del
hepatocito está también recubierta de
microvellosidades y forma con la unión
de dos hepatocitos adyacentes el canículo
biliar, los cuales drenan en los colangiolos
periportales o dúctulos terminales
(conductos de Hering) que constituyen el
comienzo del sistema biliar72.
Por el contrario, la superficie de
la membrana que linda con células
vecinas es lisa y recta, aunque tiene
excrecencias que encajan con
concavidades de las células adyacentes.
Alrededor de los canículos
biliares, las células que limitan a éstos, se
adhieren unas con otras mediante
desmosomas, barras transversales y
complejos de unión.
Las células hepáticas están
separadas de sus vecinas por un espacio
que mide unos 100 a 200 Armstrongs.
El citoplasma celular contiene
una gran cantidad de organelas y
sistemas de membrana (8) que ocupan
aproximadamente la mitad del volumen
celular y que describimos a continuación:
- El retículo endoplásmatico rugoso (RER)
está formado por un sistema de túbulos
y de vesículas limitadas por membranas
que llevan ribosomas adosados. Estos se
encargan de sintetizar proteínas que son
mandadas a los túbulos y forman
pequeños gránulos que alcanzan el
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
62
aparato de Golgi, condensándose y
formándose gránulos coalescentes que
se invaginan hacia el citoplasma con una
envoltura de la membrana del complejo
de Golgi y constituyen gránulos
secretores. En la superficie del retículo
endoplásmico se adsorben muchas
enzimas proteínicas que sintetizan
sustancias o las transportan a través de
las membranas del retículo.
- El retículo endoplámico liso (REL) está
formado por estructuras tubulares y
vesículas carentes de ribosomas. Se
encuentra localizado entre el RER y el
aparato de Golgi. A este nivel se realiza la
conjugación de la bilirrubina. Interviene
en la síntesis de triglicéridos a partir de
acidos grasos libres. Actúa en la síntesis y
degradación del glucógeno. Se encarga
de la detoxicación y transformación de
muchos medicamentos, drogas y
sustancias. Parece jugar un papel no muy
aclarado en la síntesis del colesterol.
Finalmente, parece que también realiza
funciones de transporte de
determinadas sustancias, como puede
ser la glucosa.
- El aparato de Golgi probablemente sea
una parte especializada del retículo
endoplásmico y está compuesta de 3 a 5
cisternas aplanadas, dispuestas
paralelamente, y por vesículas de
diferente tamaño. Suele localizarse
próximo al canículo biliar y a veces al
núcleo. Juega un importante papel en el
almacenamiento de sustancias
secretadas por la célula y en la prepación
temporal de las mismas para su
secreción final. En este sentido participa
en la formación y secreción de bilis y así
se suele observar migraciones del mismo
a la zona del canículo biliar en el
momento de la síntesis de ácidos
biliares.
- Los lisosomas están constituidos por
vesículas de 0,3 a 1 micras o más de
diámetro, rodeadas de membranas y que
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
63
contienen enzimas hidrolíticas que
hidrolizan proteinas, glucógeno, ácidos
nucleicos, mucopolisacáridos, etc.
Participan en el secuestro y degradación
de sustancias inútiles y en la eliminación
de células lesionadas. Son capaces de
almacenar pigmentos, ferritina, etc.
Esquema estructural del hepatocito
- Las mitocondrias, en número de 1000 o
más, son corpúsculos de unas 0,3 a 0,75
micras, ovoides o alargadas, cubiertas
por una doble membrana. La membrana
interior emite unas prolongaciones en
forma de hoja que dan lugar a crestas
mitocondriales. Contienen estructuras
cristalinas cargadas de material
enzimático, las cuales proporcionan la
energía necesaria para el metabolismo
celular, a través de los procesos de
fosforilación oxidativa. Son más
numerosas en los hepatocitos de las
zonas centrolobulillares. Son ricas en
fosfolípidos. En ellas se producen las
reacciones del ciclo de Krebs, la beta-
oxidación de ácidos grasos, la biosíntesis
de fosfolípidos y de nucleótidos, etc. 68
- Los microcuerpos, también llamados
peroxisomas, se forman a partir de los
extremos lisos del REL y contienen
peroxidasas. Tienen un tamaño entre 0,3
a 0,5 micras de diámetro.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
64
- Los microtubulos y microfilamentos son
estructuras que proporcionan el soporte
citoesquelético, manteniendo la forma
celular. Intervienen en el movimiento de
los materiales intracitoplásmicos.
- Los Gránulos de glúcogeno ocupan gran
parte del volumen de la célula hepática y
adquieren una disposición policíclica en
forma de rosetas.
- Otros compuestos citoplásmicos son:
pigmentos (generalmente lipofucsina)
partículas de naturaleza lipídica, etc.
ESTRUCTURA DE LOS SINUSOIDES:
Constituyen la red vascular
celular, tienen un tamaño de unas 20 a 30
milimicras de diámetro y están
delimitadas por las células endoteliales,
las células de Kupffer y las células del Ito.
Las células endoteliales realizan
funciones de pinocitosos, no de
fagocitosis. Sus prolongaciones celulares
se entrecruzan y forman una red laxa con
numerosos orificios, a través de los cuales
fluye plasma bañando el espacio de Disse.
En la luz del sinusoide están las
células de Kupffer con función
eritrofagocitaria fundamentalmente,
formando parte del sistema retículo-
endotelial. Intervienen en procesos
inmunitarios y forman anticuerpos y
globulinas.
Las células del Ito están en los
espacios Disse y son ricas en RER y
depósitos de grasa. Están relacinados con
los depósitos de vitamina A.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
65
IRRIGACION HEPATICA
La arteria celiaca es una rama
visceral impar y mediana que nace de la
cara arterial de la arteria aorta
abdominal, porción terminal de este vaso
que recorre el abdomen desde que
emerge por el orificio aórtico
diafragmático hasta la región pubiana
donde se divide en las arterias ilíacas
comunes.
Se localiza entre el peritoneo y la
columna vertebral del animal, a la
izquierda de la vena cava caudal con la
que comparte la adventicia, estando
rodeada de filetes nerviosos, ganglios y
vasos linfáticos, cubierta por las vísceras
abdominales y proyectándose a la
derecha de la curvatura menor.
La región celiaca de la cara
anterior de la arteria aorta, desde el
orificio aórtico del diafragma y por
encima de la arteria mesentérica
superior, la delimitan la curvatura menor
del estómago, el píloro, duodeno, hígado
y los pilares diafragmáticos, y está
cubierta por un doble peritoneo, el
parietal posterior y el epiplon menor
gastrohepático.
La arteria celiaca, tiene una
longitud común corta y un diámetro
menor que el de la arteria mesentérica
superior. Se divide en tres ramas que
llevan el nombre del órgano visceral que
irrigan. Las ramas arteriales están
destinadas a las vísceras del plano
supramesocólico, y son las siguientes:
arteria gástrica izquierda, arteria
hepática y arteria esplénica.
1. La arteria gástrica izquierda es la de
menor calibre con el origen más cefálico
de las tres ramas del tronco común. Se
distingue bien porque tiene un trayecto
particular. Se dirige arriba, a la izquierda y
hacia adelante de una forma
prácticamente vertical hasta llegar a un
punto de la curvatura menor donde se
acoda para luego descender a lo largo de
toda ella irrigándola en toda su longitud,
describiendo una curvatura convexa hacia
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
66
arriba y a la izquierda. Se anastomosa con
la arteria gástrica derecha y con la arteria
gastroepiploica por una rama, pasando
por encima de la pared dorsal del
estómago.
2. La arteria hepática se dirige
hacia la derecha en busca del hilio
hepático, al que alcanza siguiendo el
borde derecho del epiplon menor.
Termina en el hígado donde se
anastomosa con la vena porta hepática.
En su trayecto da origen a la arteria
pilórica y a la arteria gastoduodenal que
da tres ramas, la arteria gástrica derecha,
arteria pancreático-duodenal y arteria
gastroepiploica derecha, que irrigan la
curvatura del estómago, páncreas y
porción cefálica del duodeno y curvatura
mayor respectivamente.
3. La arteria esplénica nace en el
mismo nivel que la arteria hepática,
dirigiéndose hacia la izquierda,
recorriendo todo el estómago hasta
alcanzar el hilio del bazo. Se bifurca en
dos ramas, las arterias esplénicas
izquierda y derecha. Cada una de ellas
emite en el curso de su trayecto ramas
secundarias que irrigan el estómago y el
páncreas.
INERVACION HEPATICA
Los estudios sobre la inervación
hepática adquieren pleno desarrollo en la
década de los 60, tras los estudios de
Sutherland171 y los trabajos publicados
en 1969 por Unguary y Donath179. Ellos
apuntaban que el hígado estaba inervado
por el sistema nervioso autónomo y que
los hepatocitos se encuentran en íntimo
contacto con fibras colinérgicas,
presumiblemente vagales, mientras que
los vasos sólo reciben inervación
simpática143.
La existencia de dos plexos
extrahepáticos, uno anterior, que rodea
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
67
la arteria hepática, y otro posterior,
detrás de la vena porta, fueron descritos
por Karuper85
Las fibras nerviosas
intrahépaticas discurren por los tractos
porta siguiendo las ramificaciones de la
arteria hepática y ambas, fibras
adrenérgicas y colinérgicas, se observan
en la adventicia de las ramas de la arteria
hepática y en menor proporción en la
periferia de las venas portales.
Siguiendo las ramificaciones
vasculares las fibras penetran en el lóbulo
hepático y contactan con las células
hepáticas que están situadas más
próximas al espacio porta. Ya en pleno
parénquima las ramas nerviosas se
ramifican en fibras intralobulillares y
forman un fino plexo, que siguiendo el
tejido conectivo intralobulillar, alcanza a
los conductos biliares, espacio de Disse,
sinusoides, etc. predominando a este
nivel la inervación adrenérgica, que actúa
en la regulación del tronco vascular y del
flujo sanguíneo, mientras que el
parasimpático intervendría en el
metabolismo celular179.
FISIOLOGIA DE LA CIRCULACION HEPATICA
El conocimiento de las relaciones
entre el hígado, su aporte sanguíneo y el
estado homeostático general del
organismo ha sufrido un renacimiento en
las últimas décadas. Sin embargo, la
mayor orientación conceptual en casi
todos los aspectos de nuestro
conocimiento en el papel y regulación de
la circulación hepática ha tenido lugar
más recientemente.
El hígado recibe el 25% del gasto
cardiaco aún cuando sólo constituye el
2,5% del peso corporal total. Las células
parenquimatósas hepáticas son las más
ampliamente perfundidas de todos los
órganos de la economía.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
68
Como vimos antes, el hígado
recibe su aporte sanguíneo
principalmente de la arteria hepática y de
la vena pota. Sin embargo, en ciertas
situaciones el hígado puede recibir
aportes arteriales de las arterias frénicas.
Los aportes arteriales hepáticos y venosos
portales convergen a la entrada de los
sinusoides hepáticos; dicho aporte es
controlado por los esfínteres de apertura
del músculo liso vascular. En algunas
especies también existen esfínteres de
músculo liso vascular a la salida de los
sinusoides hepáticos, cuya contribución a
la regulación normal de la resistencia
vascular hepática es incierta.
Además de estos conductos principales
de flujo sanguíneo existen conexiones
intrahepáticas presinusoidales entre las
circulaciones arterial hepática y venosa
portal, las cuales pueden seguir dos
patrones por lo menos de anastomosis
directas arterio-portales y conexiones a
través de las redes capilares peribiliares,
por ejemplo, rutas arteriobilio-portales.
Estas conexiones arterioportales
proporcionán vínculos entre dos sistemas
permitiendo a la sangre pasar desde un
sistema aferente arterial de alta presión a
un sistema venoso portal de baja presión,
lo cual permite alguna posible explicación
de algunas interrelaciones funcionales
entre el sistema arterial hepático y
venoso portal.
Sin embargo, los cortocircuitos
no sirven para explicar todas las
interaciones entre los sistemas venoso
portal y arterial hepático y en este
sentido se ha sugerido que los esfínteres
que guardan la entrada a los sinusoides
desde la arteria hepática o la vena porta
presentan ritmicidad cíclica. Así, un
agente presente en circuito aferente
podría acceder a los esfínteres
reguladores de la afluencia sanguínea y,
alterando la ritmicidad antes referida,
alterar la resistencia vascular total.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
69
Los estudios de distribución del
flujo sanguíneo son escasos, pero se cree
que no existen diferencias notables entre
los diferentes lóbulos hepáticos en lo que
se refiere a la proporción de sangre
arterial hepática y venosa portal recibida
por cualquiera de ellos.
Asimismo, la elevación de la
presión venosa, la redución del flujo
venoso portal y la estimulación de los
nervios hepáticos o la infusión de
norepinefrina no da por resultado una
redistribución del flujo sanguíneo en el
hígado.
El flujo sanguíneo portal supone
alrededor del 66% del flujo total y,
aunque el hígado no regula el flujo portal,
sí que regula la presión portal.
El flujo arterial hepático está
regulado por un sistema regulatorio
intrínseco único: la respuesta
amortiguadora arterial hepática, la cual
mantiene constante el flujo sanguíneo
hepático total. El flujo sanguíneo no está
regulado por las demandas metabólicas
del hígado. El sistema amortiguador
(compensador) hepático tambien juega
un papel manteniendo las presiones
intrahepáticas y el volumen hepático. El
volumen sanguíneo hepático se compone
de volúmenes comprimidos y
expandidos. El volumen comprimido
depende de la presión intrahepática y la
distensibilidad (compliance) vascular. El
volumen expandido es el volumen
teóricamente restante en un órgano de
compresión cero. Las presiones y los
flujos sanguíneos no se alterarían si el
volumen expandido no existiese. La
constricción activa de los vasos de
capacitancia da por resultado transformar
el volumen expansivo a volumen
comprimido. Virtualmente la presión
intrahepática es igual a la presión venosa
portal en condiciones basales y está
regulada por los esfinteres venosos
hepáticos. La vasoconstricción hepática
activa puede motivar la contracción de
estos esfínteres y alguna constricción
presinusoidal también. Los esfínteres
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
70
parecen ser pasivamente distensibles y
esta característica sirve para mantener las
presiones intrahepáticas y portales a unos
niveles bastante constantes, de modo
que si disminuye el aflujo, aumenta la
resistencia del esfínter y se previene la
caida de la presión. La presión
intrahepática mantiene la permeabilidad
sinusoidal y permite que todos los
sinusoides sean uniformemente
perfundidos incluso a niveles bastante
bajos. El intercambio de fluidos y solutos
entre la sangre y las circulaciones
parenquimatosas se afecta por la barrera
de circulación sinusoidales. Las
fenestraciones endoteliales tamizan
(criban) algunos componentes
plasmáticos de alto peso molecular como
lipoproteínas y puede tamizar
parcialmente a la albúmina así como a los
múltiples componentes que viajan en la
circulación unidos a la albúmina. Como se
ha dicho antes, la vena porta aporta la
mayor parte de sangre que llega al hígado
y esta tasa de flujo sanguíneo sufre una
amplia variación según las actividades del
organísmo. EL hígado no es capaz de
controlar directamente el flujo venoso
portal. Se sabe que la activación máxima
de las zonas de resistencia intrahepática
producirá un aumento de 2-3 veces en la
presión portal sin alterar el flujo venoso
portal. Así el único control del flujo
sanguíneo en el hígado es debido a la
arteria hepática41.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
71
LA MORFOMETRIA HEPATICA
La morfometría surgió como un
intento de estudiar objetivamente y
cuantitativamente los cambios
histológicos y citológicos en diversas
situaciones patológicas. De esta manera
se pretende obviar los errores por
comisión y omisión del patólogo que
estudia cierta preparación histológica y
elimina la subjetividad de la evaluación
cualitativa, haciendo que los exámenes
histológicos sean objetivamente
comparables.
De esta forma, la morfometría
hepática se va abriendo camino en la
valoración de la patología de este órgano,
tanto a nivel clínico como experimental,
bien por microscopía óptica como
electrónica193.
Uno de los campos en que la
morfometría hepática ha sido usada es el
de la obstrucción biliar. Así, Jones et al ()
han hallado que en la obstrucción biliar
experimental en la rata existe un
aumento en el número de células del
espacio intersticial, y una disminución en
el tamaño de las mismas, así como una
reducción en el retículo endoplásmico liso
y rugoso. También describen un descenso
en la cantidad del complejo de Golgi y en
el número de mitocondrias y ribosomas.
En este mismo campo, Yamauchi et al193
describen una reducción en el volumen
del parénquima hepático que, además
disminuye proporcionalmente al tiempo
transcurrido de obstrucción. Estos
mismos autores22 describen también un
aumento en el área nuclear y en el índice
mitótico, a la vez que observan una
constancia en el peso del parénquima
hepático, lo que sugiere que la pérdida de
hepatocitos se compensa con la
regeneración de los mismos. También
observan un hinchamiento mitocondrial.
Concluyen que todas estas
modificaciones podrían deberse a un
proceso adaptativo.
El tema de la cirrosis hepática y
sus aspectos morfométricos ha concitado
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
72
la atención de diversos investigadores. En
este sentido, dos parecen ser los
parámetros más estudiados:
1.- El porcentaje de tejido conectivo o de
colágeno hepático en animales
experimentales, pero también en
clínica.
2.- El número total de hepatocitos a
nivel experimental o clínico.
La validez del método
morfométrico ha sido probada a nivel
experimental por Buschmann y Ryoo25
quienes informan que los cambios
sufridos por las estructuras
parenquimatosas se correlacionaron en
buen grado con el desarrollo de fibrosis
hepática, lo cual consistió en un aumento
en el tamaño nuclear, citoplásmico y
mitocondrial. Aparentemente los cambios
adaptativos citoplásmicos se
correlacionaron perfectamente bien con
la fibrosis. Estos mismos autores25
analizan biopsias de pacientes con cirrosis
alcohólica hepática con el fin de valorar
los datos morfométricos diagnósticos y
pronósticos de la cirrosis humana. En este
mismo campo de la lesión alcohólica
hepática la morfometría ha sido
empleada para valorar la incidencia del
estrés en esta enfermedad, hallando que
dicho factor es un factor agravante. Mak
y Lieber103 describen el cambio en
porcentaje de linfocitos a células
transicionales en la enfermedad hepática
alcohólica.
La morfometría se ha empleado
para valorar los efectos de diversas
drogas y sustancias sobre el hígado. Así,
Romert y Mathiessen150 han valorado
experimentalmente los efectos del etanol
sobre el hígado. Por otra parte, Hall et al
han descrito los efectos del metotrexate
sobre la cantidad de colágeno hepático.
Sorense ha evaluado el efecto a nivel
experimental de la indometacina en el
hígado. También la morfometría se ha
empleado para dilucidar los efectos
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
73
hepatoprotectores de algunas sustancias
tales como cyanidanol183. A nivel clínico,
Portmann et al137, al estudiar biopsias de
hígado tras sobredosis de paracetamol
encuentran un volumen de hepatocitos
inferior al 40% en las biopsia realizadas
dentro de los diez días siguientes a la
sobredosis de los pacientes que murieron
por esta causa. Paralelamente, Lange-
Brock el al92 al estudiar pacientes con
insuficiencia hepática encuentran una
gran reducción en el porcentaje de
parénquima hepático (normal 85±5%) en
los pacientes que mueren de esta
enfermedad pero dicha reducción es
menor en pacientes que mueren de
sepsis, edema cerebral o hemorragia que
en los que la muerte es debida
únicamente a insuficiencia hepática.
Un extenso capítulo y de singular
importancia es el de la morfometría en
las neoplasias hepáticas. EL diagnóstico
precoz del cáncer hepático ha sido
abordado por Gianinni et al62, quienes
han intentado en sus estudios identificar
y diferenciar por métodos morfométricos
a las células precancerosas mediante
estudios del factor de forma nuclear y
citoplásmico. Sin embargo, concluyen que
la relación núcleo/citoplasma no es
distinta en células normales que en
precancerosas y que la única diferencia
entre ellas es un menor tamaño de las
células preneoplásicas. Por otra parte,
Enzmann y Bannasch22 tras administrar
en ratas N-nitrosomorfolina, un agente
carcinogenético, estudian, entre otros
parámetros, el tamaño nuclear y la
relación núcleo/citoplasma en los
hepatocitos de las zonas periportales y
perivenosa. Encuentran un aumento del
citoplasma y núcleo de las dos zonas.
Estos cambios regresan en los
hepatocitos de la zona periportal y
persisten en los hepatocitos de la zona
perivenosa.
Otro apartado de singular
importancia dentro del diagnóstico de las
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
74
neoplasias hepáticas lo constituye el
diagnóstico diferencial entre éstas y otras
enfermedades. Así, Iwasaki et al22,
emplean la medición de área, diámetro
máximo y factor de forma de los
pseudolóbulos en pacientes cirróticos
para diferenciarlos de las neoplasias
hepáticas. Nagato et al119, describen que
el tamaño celular medio y la relación
núcleo/citoplásmica fueron los
parámetros más útiles para distinguir
entre el carcinoma hepatocelular y
microtrabecular y la cirrosis. En este
sentido, los trabajos de Zeppa et al197,
emplean las mediciones de área,
perímetro y diámetro máximo nucleares
para distinguir entre cirrosis con atipia y
hepatocarcinoma bien diferenciado. Por
otra parte, Matturi y Bauer108, amplian
el espectro a otras situaciones
patológicas y sugieren que las
denominadas células displásicas grandes
deben ser consideradas como elementos
hiperplásicos, mientras que las
denominadas células displásicas
pequeñas deben ser tenidas en cuenta
como células preneoplásicas. Los
parámetros morfométricos empleados
por Motorhasi et al117, para distinguir
entre hepatocarcinoma bien diferenciado
y lesiones "carcinoma-like" han sido:
1.- Factor de forma nuclear: debe
considerarse carcinoma si éste es inferior
a 0,93.
2.- Relación nucleo-citoplasma mayor de
0,3.
3.- Densidad celular mayor de 40 células
por campo.
4.- Area nuclear mayor de 50 micrones.
Los cambios morfométricos que
aparecen en el trasplante hepático han
sido estudiados también por Hillan et al22
.
La morfometría de la isquemia
hepática de diversas causas y bajo
distintas situaciones ha sido estudiada a
nivel agudo. Schellens et al160, describen
que tras periodos prolongados de
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
75
isquemia aguda existe una tendencia a la
disposición hexagonal de las conexiones
de los hepatocitos que sería característica
de las células dañadas irreversiblemente.
Por otra parte, Sasase158 describe que a
los treinta minutos de isquemia aguda
existe un incremento en el número de
mitocondrias, lo que sería un mecanismo
compensador para disminuir el daño
isquémico al hepatocito. Sin embargo,
tras sesenta minutos de isquemia esta
proliferación es limitada, lo que causa un
cambio necrótico severo en los
hepatocitos.
La relación de la isquemia
hepática con el tiempo ha sido estudiada
desde el punto de vista morfométrico por
Momci y Koga114, en su trabajo sobre la
preservación hepática con soluciones
conservadoras. Describen que los
primeros fenómenos isquémicos
consisten en un aumento en el área
hepatocítica total, así como una
alteración de la microcirculación y la
formación de bullas en el citoplasma.
Posteriormente, dichas bullas rellenan los
sinusoides para existir una franca
degeneración en los hepatocitos tras 48
horas de isquemia y preservación en frío.
INTRODUCCION
PLANTEAMIENTO DEL TRABAJO OBJETIVOS DEL TRABAJO
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
PLANTEAMIENTO DEL TRABAJO Y OBJETIVOS
INTRODUCCION
El consumo ilegal de drogas psicoestimulantes ha adquirido en las últimas décadas
proporciones epidémicas, tanto es así que se ha venido a considerar en épocas recientes
como uno de los peores azotes de la humanidad. El creciente interés científico por los
aspectos clínicos, neuroquímicos y sociales de dicho fenómeno se ha traducido en una serie
de estudios de investigación tanto clínica como experimental centrados en las bases
nerviosas y químicas del abuso de las drogas y sobre las alteraciones tanto a nivel
morfológico como bioquímico que las drogas producen a nivel de los distintos órganos.
Gracias a estos estudios vamos comprendiendo las alteraciones que producen las drogas y
los mecanismos responsables de dichas alteraciones.
El hígado es la víscera mas importante que dispone el organismo humano implicado en el
metabolismo de las diferentes sustancias tanto intrínsecas como introducidas desde el
exterior en el organismo. Su posibilidades de desarrollar alteraciones de las drogas en el
hígado son grandes y muy especialmente en las dosis que las mismas se introducen en el
cuerpo humano. Algunos aspectos ya han sido estudiados sobre todo a nivel de autopsias
practicadas a los drogadictos pero la información se muestra insuficiente y muy
especialmente teniendo en consideración el escaso número de estudios desarrollados a
nivel experimental. Estudios cuantitativos sobre las alteraciones provocadas por las drogas
tampoco son muy numerosos, por lo que se muestra como muy interesante incrementar
la información sobre las repercusiones de distintas drogas y muy especialmente sobre el
hígado cuantificando las alteraciones utilizando el método morfométrico.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
PLANTEAMIENTO DEL TRABAJO Y OBJETIVOS
INTRODUCCION
OBJETIVOS DEL TRABAJO
1. Valorar las repercusiones morfológicas de diferentes drogas de abuso en el híagado
2. Evidenciar sus repercusiones histológicas en el hígado
3. Valorar las repercusiones en el hepatocito a nivel ultraestructural
4. Cuantificar las alteraciones mediante morfometria
5. Intentar correlacionar la sintomatología con las bases morfológicas alteradas en los
diferentes niveles organizativos
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
80
ANIMAL DE LABORATORIO Para realizar el presente trabajo experimental, se ha procedido a la elección del ratón albino, concretamente las de la raza Swiss-Webster, procedentes del animalario de la Facultad de Medicina de la Universidad de Valladolid. Los animales han permanecido en el estudio en las siguientes condiciones ambientales: - Temperatura entre 18-25°C. - Humedad relativa del aire 40-70%. - Ciclos de luz-oscuridad de 12 horas cada uno. Los animales han estado estabulados durante el estudio en un armario climatizado instalado en el Laboratorio de Cirugía experimental con control y supervisión diaria veterinaria de su estado Se han empleado animales macho de aproximadamente unos 50 g de peso al comienzo del experimento.
Ratón Swiss-Webster utilizado PROTOCOLO EXPERIMENTAL Para realizar este estudio experimen-tal nos hemos adaptado a la Directiva publicada por el Consejo de Europa en noviembre de 1986, que indica las dispo-siciones legales reglamentarias y admi-nistrativas de los Estados-Miembros con relación a la experimentación animal para protocolos experimentales (arts. 2, 5, 7, 8, 9 y 10) y a la legislación española sobre protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos REAL DECRETO 1201/2005, de 10 de octubre, sobre protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos. (B.O.E. núm 252, viernes, 21 de octubre de 2005, pp.34367-91).
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
81
GRUPO DE ANIMALES Para dicho estudio se han utilizado un total de 48 animales, cuyas características han sido descritas previamente. Sobre el total de ratas se han hecho 5 grupos, uno Control y 4 experimentales GRUPOS ESTUDIADOS CONTROL Dosis 1 ml de suero fisiológico vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados COCAINA Dosis 50 mg/kg de peso por vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados NMDA (EXTASIS) estudiados Dosis 50 mg/kg de peso por vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados HEROÍNA (DIACETIL MORFINA) Dosis 125 mg/kg de peso por vía intraperitoneal durante 21 días 12 animales estudiados Los animales han sido pesados tanto al principio como al final del estudio
Concluido este periodo, se procede a anestesiar los animales con clorhidrato de ketamina (Ketolar®) a las dosis de 60 mg/Kg de peso corporal10,173 y se procede a la realización de una laparotomía media previo rasurado de la zona. Abrimos la cavidad abdominal y bajo lupa de disección visualizamos las distintas vísceras y estructuras de la cavidad abdominal valorando su estado y obteniendo las fotografías necesarias para ilustrar cada caso y se procede a obtener un fragmento visceral del lóbulo anterior hepático que inmediatamente fueron sometidas a fijación con destino al estudio con microscopio òptico y ultraestructural. Por último se procedió al sacrificio del ratón, todavía bajo los efectos de la anestesia, por dislocación cervical.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
82
Vía de administración IP de las drogas y la anestesia
Exploración de la cavidad abdominal
Extracción del material hepático para su procesamiento
histológico y estudio ultraestructural
PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE LAS PIEZAS PARA EL ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA OPTICA 24 El espécimen obtenido para el estudio de microscopía óptica, según el protocolo anteriormente descrito, fue sometido a la metodología general requerida para este tipo de estudio, pasando por tanto, por los siguientes procesos: Fijación
La muestra obtenida fue fijada mediante la inmersión de la pieza en una solución de Formaldehído al 10%, preparado con 10cc de Formaldehído 37-40% y 90cc de agua destilada, previo lavado de la luz arterial con la misma solución fijadora. En esta solución fijadora se mantuvo el segmento aórtico en un recipiente de cristal oscuro duran-te 24 horas aproximadamente. Inclusión Transcurrido el tiempo de fijación de las piezas, se las lavó con agua destilada durante dos horas, para eliminar el exceso de fijador. Para la deshidratación, aclarado e infiltración en Paraplas utilizamos un
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
83
procesador automático (Autotechnicon DUO, Mod. 2A), donde las muestras arteriales fueron sometidas a una serie de inmersiones secuenciales en diferentes soluciones según el siguiente protocolo: -alcohol al 70% I……....2 horas -alcohol al 70% II….…..2 horas -alcohol al 96% I….…….1 hora -alcohol al 96% II……….1 hora -alcohol al 100% I…….….1 hora -alcohol al 100% II……….1 hora -benzol I…..…...2 horas -benzol II…..…..2 horas -benzol III…......1 hora -paraplast I...........1 hora -paraplast II..........1 hora Una vez finalizados estos pases, las piezas fueron depositadas dentro de unos moldes metálicos que previamente se habían rellenado con paraplast fundido por calor, dejando posterior-mente que se enfriara pasando el paraplast con la pieza a su estado sólido. Cortes Los cortes de los bloques se hicieron con un Microtomo de rotación con una cuchilla biplana, a un grosor de 6 micras. El ángulo de inclinación de la cuchilla fue de 10º.
El grupo de cortes obtenidos, se introdujo en un baño a una temperatura de 45ºC. Los cortes seleccionados fueron recogidos en un portaobjetos desengrasado previa inmersión en una solución de alcohol-eter y cubierto con una mezcla de albúmina glicerinada que utilizamos como adhesivo. Posteriormente se dejaron secar en una estufa a 37ºC durante 24 horas. Desparafinación Tiene por objeto eliminar el paraplast de los cortes, de tal forma que los especímenes a estudio puedan tomar los colorantes -tinciones de hematoxilina-eosina y de fibras elásticas-. El proceso se llevó a cabo por inmersión secuencial, siguiendo los siguientes pasos: -xilol I.............................10 minutos -xilol II............................10 minutos -alcohol al 100% I..............2 minutos -alcohol al 100% II.............2 minutos -alcohol al 96%.................2 minutos -alcohol al 70%.................2 minutos Aclaramiento y montaje Una vez finalizada la tinción, se pasan las preparaciones por baños de alcohol etílico y xilol según la siguiente pauta:
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
84
-alcohol al 70%..................5 minutos -alcohol al 96%..................5 minutos -alcohol al 100% I..............5 minutos -alcohol al 100% II.............5 minutos -xilol I ................................5 minutos -xilol II................................5 minutos En la parte final de esta fase, las preparaciones son cubiertas con una sustancia viscosa de índice de refracción igual al vidrio (EUKITT) y un cubreobjetos, dejándolos secar 24 horas. Las preparaciones morfológicas se valoraron con un microscópico fotó-nico NIKON, visualizando los segmentos histológicos a 40, 100, 400, y 1000 au-mentos. En éste último caso con objetivo de inmersión. Paralelamente a la observación de microscopía óptica, se realizaron fotografías de las preparaciones mediante un sistema de fotografía automática HFX-DX de NIKON acoplado al microscopio. PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE LAS PIEZAS PARA EL ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION Para este estudio histológico, las piezas se procesaron siguiendo las indicaciones del Servicio Central de
Microscopía Electrónica de la Facultad de Medicina de Valladolid. Los pasos seguidos se describen a continuación: Fijación Se realizó por inmersión de las piezas en el liquido fijador (Glutaraldehído y buffer de cacodilato en una proporción de 10% y 90%, respectivamente, a una temperatura de 4ºC), inmediatamente después de su extracción, según exposición precedente. Posteriormente, se introdujeron las muestras en una nevera donde permanecieron a 4ºC durante 6-8 horas. Transcurrido este tiempo, las piezas se lavaron con buffer de cacodilato ajustado a la osmolaridad con sucrosa, y se mantuvieron en una solución de ácido ósmico al 2% diluido en buffer de cacodilato a 4ºC preparado 30 minutos antes, durante 1-2 horas. Pasado este tiempo se hicieron lavados repetidos con buffer de cacodilato. Deshidratación Para ello, sumergimos las muestras en una solución de acetona y óxido de propileno según la siguiente pauta: -Acetona al 30% en agua destilada .....15 minutos
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
85
-Acetona al 50% en agua destilada .......30 minutos -Acetona al 70% en agua destilada .......30 minutos -Acetona al 70% y acetato de Uranilo al 2% ...30 minutos -Acetona al 90% en agua destilada ......30 minutos -Acetona al 100% I ................30 minutos -Acetona al 100% II ...............30 minutos -Acetona al 100% y sulfato de cobre I ..30 minutos -Acetona al 100% y sulfato de cobre II ..30 minutos -Oxido de propileno I ............30 minutos -Oxido de propileno II............30 minutos En el cuarto paso se añade acetato de Uranilo para que al tiempo que se realiza la deshidratación se produzca una tinción en bloque. El Sulfato de Cobre elimina el agua que haya podido tomar la acetona y el óxido de polipropileno, y disuelve la Araldita que utilizamos posteriormente, facilitando la inclusión. Impregnación Se realiza con resinas sintéticas, en este caso utilizamos la Araldita Durcapan de FLUKA, según la pauta siguiente:
-3/4 de Oxido de Polipropileno y 1/4 de la 1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te...1-2 horas -1/2 de Oxido de Polipropileno y 1/2 de la 1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te..1-2 horas -1/4 de Oxido de Polipropileno y 3/4 de la 1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te...1-2 horas -1ª mezcla de inclusión a Tª ambien-te..24 horas - 1ª mezcla de inclusión en estufa a 37ºC..24 horas - 2ª mezcla de inclusión en estufa a 50ºC…24 horas Para conseguir una mayor penetración de las resinas sintéticas a continuación se lavó con Oxido de Polipropileno. Inclusión
Es la fase de formación de los bloques, para lo cual utilizamos cápsulas de gelatina que rellenamos con la segunda mezcla de inclusión, introduciendo los especímenes a estudio en las mismas, orientados en el centro de la cápsulas y evitando que se introdujeran burbujas de aire en su inte-rior. Las cápsulas se mantuvieron en una estufa a 60-70ºC durante 48 horas. Cortes Una vez extraídas las cápsulas, los bloques fueron tallados y cortados
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
86
según la técnica habitual, con una cuchilla de vidrio de 45º, en secciones transversales con un ultramicrotomo LKB-III. Se obtubieron dos tipos de cortes: -semifinos, de 1 micra de espesor, que fueron utilizados para controlar el área de sección y seleccionar con gran precisión las zonas de más interés para el posterior estudio al microscopio electrónico de transmisión. Estos cortes fueron visualizados en el microscopio óptico cubriendo la superficie con aceite de inmersión. -ultrafinos, de 700A de espesor, que fueron estudiados por microscopio electrónico de transmisión. Tinción Los cortes semifinos fueron colocados sobre un portaobjetos, tratado previamente con una solución de Cromoalumbre, en dos filas paralelas, sobre una gota de acetona al 20%. Se dejaron secar a 40ºC y se tiñeron con Azul de Toluidina al 1%. Los cortes ultrafinos se recogieron del ultramicrotomo sobre rejillas de cobre electrolítico de 100-300 mallas cada una, que situamos en una placa de Petri sobre una cubierta de parafina. Se tiñeron durante 30 minutos
con Acetato de Uranilo, se lavaron 3 veces con agua destilada y se secaron. Los contrastamos con una solución de Citrato de plomo 20 minutos, según el método de Reynols (1963), en ausencia total de Anhídrido Carbónico, para lo cual se cubrió la placa de Petri y se introdujeron en su interior comprimidos de Hidróxido Sódico durante 3 minutos. Finalmente lavamos 3 veces con agua bidestilada y desionizada, seca-mos y pasamos a observar los cortes en un microscopio electrónico ZEISS EM 10 CA realizando fotografías a 5.000 y a 10.000 aumentos. ESTUDIO MORFOMETRICO DE LAS PREPARACIONES El siguiente paso consistió en la medición de los distintos parámetros previa visualización de los cortes en un microscopio óptico (Nikon Labophot) usando un poder de resolución de x400 para la localización de los hepatocitos en sección transversal y más tarde de x1000 aumentos para su medición. De cada grupo se procedió a medir ciento ocho hepatocitos, seis hepatocitos por corte, de un total de tres cortes por portaobjetos y de un
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
87
portaobjetos por animal. Las características para la medición fue de células hepáticas en sección transversal en que estuviera incluido el núcleo, despreciandose aquellas células que no tuvieran núcleo. Las preparaciones histológicas fueron analizadas mediante un sistema informático morfométrico (Nikon DS Cámara Contol Unit DS-L2), que consta de un microscopio óptico convencional al que se le ha acoplado un sistema óptico e informático que permite la proyección de la imagen del microscopio (Nikon Alphaphot-2 YS2) sobre una pantalla de ordenador de alta resolución. Asimismo tiene un lápiz óptico que permite la medición de los distintosd parámetros de la imagen de la pantalla Las mediciones se hicieron en unidades pixel, siendo un pixel igual a 0,1099 micras, el motivo de ello era debido a que no se podía conocer con exactitud en que proporción estaban aumentadas las imágenes celulares. Por ello no sería correcto tomar como unidad de medida la micra, ya que los resultados obtenidos se desvían mucho de los valores reales. Tomamos, pues, como referencia el pixel (unidad de imagen en la pantalla). Las mediciones se realizaron siempre por la misma persona, con el fin
de que no hubiera diferencias de interpretación. Los parámetros que se midieron en cada uno de los cortes fueron (Fig. 6): 1- Area del hepatocito 2- Perímetro del hepatocito 3- Factor de forma del hepatocito 4- Area del núcleo 5- Perímetro del núcleo 6- Factor de forma del núcleo 7- Relación nucleo citoplasma 8- Densidad-hepatocitos El Factor de Forma nos va a detectar posibles diferencias en la configuración celular entre las distintas series de animales. Hay que reseñar que el factor de forma de una estructura circular es igual a la unidad. Otro parámetro también analizado es la densidad de hepatocitos, entendida como el número de hepatocitos por campo fotográfico.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
88
a) Dibujo esquemático del hepatocito b) Dibujo esquemático para mediciones de área y perímetro celulares; c) Dibujo esquemático para mediciones de área y perímetro nucleares d) Dibujo esquemático para medición de número de hepatocitos. Procedimiento para medición morfo- métrica del hepatocito:
Imágenes del morfometro empleado en el estudio, de la pantalla, de las preparaciones histológicas hepáticas durante el proceso de medición y de la pantalla del sistema de cuantificación
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
MATERIAL Y METODOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
89
Imágenes de la base de datos creada para la cuantificación morfométrica Análisis estadístico Con los datos obtenidos de cada grupo y cada parámetro estudiado, se procedió a su introducción en forma de base de datos en un fichero Microsoft Access y Excel Posteriormente la valoración de la relación existente entre las distintas variables se ha realizado mediante un paquete estadístico denominado SPSS+ que dispone de pruebas estadísticas bivariantes útiles para el análisis de nuestros resultados.
De esta manera se calculó la "t" de Student Fischer cuando la comparación se establecía entre una variable cuantitativa de dos categorías. Por último se calculó el análisis de la varianza y la significación estadística de la misma para todos y cada uno de los parámetros estudiados entre los distintos grupos objeto de nuestro estudio. Los datos obtenidos de las diferentes determinaciones llevadas a cabo en los grupos a estudio fueron introducidos como matriz de datos en el programa estadístico comercial SPSS/PC+ con la ayuda de un ordenador personal Toshiba Personal System/2, Model 30. Calculamos para cada parámetro de los diferentes grupos la media y desviación estándar, lo que nos permitió analizar diferentes relaciones entre las mismas. Seguidamente, emparejamos las medias obtenidas en los diferentes gru-pos con igual tiempo de evolución comparándolas con las pruebas estadís-tica de la "t" de Student y análisis de la varianza, que nos permiten hallar si las diferencias encontradas son estadísti-camente significativas.
INTRODUCCION
RESULTADOS
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica, ultraestructural y morfométrica
________________________________________________________________________
INTRODUCCION RESULTADOS
ODUCCIO
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
91
1. TASA DE MORTALIDAD De los 48 animales iniciales empleados en el estudio no ha fallecido ninguno perteneciente al grupo control en el protocolo experimental. En el grupo tratado con cocaína hemos detectado la muerte de 3 animales que se han repuesto, falleciendo 1 de estos últimos que también se ha repuesto, lo que ha representado el 30 % de los 16 empleados para completar este grupo. No se han podido determinar las causas del fallecimiento aunque sospechamos que haya sido una a efectos derivados de la droga administrada. En el grupo al que se le suministró éxtasis, se pudo comprobar la presentación de 4 fallecimientos que se repusieron, de los cuales 2 posteriormente fallecieron, reponiéndoles y falleciendo uno de estos últimos que también se repuso. El total de animales utilizados fueron 19. No se pudieron determinar de una forma, clara las causas de fallecimiento. Del grupo tratado con heroína fallecieron tres animales que se repusieron, falleciendo dos de estos últimos y falleciendo uno de estos dos que repuso con otro. En total se utilizaron 18 animales. (Tabla I y Fig.1) Sólo se utilizaron en el estudio los animales que completaron el periodo experimental. Grupo Control: no fallece ninguno de los 12 animales empleados
Grupo cocaína: fallecen 3 se reponen 3, fallece 1, se pone uno se utilizan 16 en total Grupo éxtasis: fallecen 4, se reponen, fallecen 2 se repone, fallece 1 (19 en total) Grupo heroína: fallecen 3, se repone, fallecen 2, se repone. Fallece 1, se repone (18 en total)
Tabla I. Valores de la Tasa de MORTALIDAD en los diferentes grupos estudiados Fig. 1. Histograma de la Tasa de Mortalidad
GRUPOS PORCENTAJE
CONTROL 0
COCAINA 25.00 %
EXTASIS 36.84 %
HEROINA 33.33 %
TASA DE MORTALIDAD DE LOS ANIMALES EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
020
40
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
92
2. ESTUDIO PONDERAL El estudio ponderal de los animales distribuidos en los diferentes grupos ha mostrado que partiendo de pesos aproximados a los 50 gramos en todos los grupos, se ha evidenciado un discreto aumento del peso a lo largo del tiempo en el grupo control (de 51.5±16.6 a 57.8±11.6 gramos). En los grupos experimentales no se ha evidenciado este pequeño aumento ponderal a lo largo del tiempo y por el contrario se detectaba una disminución del mismo. Así en el grupo tratado con cocaína disminuían las cifras medias de 51,4±15.6 gramos al principio del estudio a 41.8±13.7 gramos al final, y en el grupo de éxtasis de 53.7±18.6 a 41.9±14.3 gramos. Las cifras del grupo tratado con heroína pasó de pesos medios de de 54.9±13.4 a 37.2±17.3 gramos (Tabla II y Fig. 2)
Tabla II. Valores de los pesos de los animales al comienzo del estudio y al finalizar el mismo en los diferentes grupos estudiados Fig. 2. Histograma de la evolución ponderal de los animales de los diferentes grupos
INICIAL FINAL
GRUPOS MEDIA Y D.S. MEDIA Y D.S.
SIGN. E.
CONTROL 51.5±16.6 57.8±11.6 p<0.01
COCAINA 51.4±15.6 41.8±13.7 p<0.01
EXTASIS 53.7±18.6 41.9±14.3 p<0.01
HEROINA 54.9±13.4 37.2±17.3 p<0.01
EVOLUCION PONDERAL DE LOS ANIMALES EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
0
50
100
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
93
3. ESTUDIO MACROSCOPICO DE LOS ANIMALES Los animales estudiados se han controlado de forma rutinaria y diaria por el investigador, pudiéndose constatar las siguientes apreciaciones desde el punto de vista morfológico macroscópico: Aspecto general: Los animales pertenecientes al grupo tratado con cocaína, se han mostrado muy hipoactivos, presentando algunos animales cuadros convulsivos y algún signo neurológico extrapiramidal. También se evidenciaron heridas a nivel de la cola constatando que un animal la había perdido por completo. Los animales tratados con morfina mostraron también un comportamiento muy agresivo a la vez que se comportaron durante el experimento muy hiperactivos con un estado de de irritabilidad y nerviosismo. Los animales tratados con heroína mostraron un patrón similar de comportamiento y aspecto al grupo tratado con extasis. En todos los grupos tratados se disminuyó fundamentalmente su ingesta sólida. Sus deyecciones han sido normales semejantes a las del grupo control. No se ha observado patología relevante alguna salvo lo señalado. Los animales pertenecientes a los grupos experimentales han mostrado sobre todo
al final del estudio un aspecto depauperado. Han sido animales irritables, delgados y sobre todo era de resaltar un erizamiento del pelo con pérdida de su lustrosidad. Cavidad abdominal: Cuando se ha realizado la laparotomía a los animales, en todos los grupos experimentales, no se ha detectado en este tiempo grandes alteraciones a resaltar. Sus vísceras se encontraban con un aspecto más o menos normal. Ha sido de resaltar la falta de contenido intestinal existente a nivel del intestino delgado.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
94
3. ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA OPTICA. VALORACION BAJO MICROSCOPIA OPTICA DEL HIGADO Con la tinción de hematoxilina-eosina las preparaciones se han visualizado con una coloración generalizada más o menos rosácea. Los citoplasmas han aparecido de color rosáceo, mientras que los núcleos se han destacado de color azulado. Las células se han mostrado ordenadas en cordones celulares formando lobulillos muy bien diferenciados diferenciándose una zona central que ha presentado la vena centrolobulillar. Siguiendo el esquema de organización hepática ha podido ser visualizado el espacio porta, diferenciándose fundamentalmente en el mismo, la vena porta, la arteria y otras formaciones menos nítidas como han sido los linfáticos y las ramificaciones nerviosas. Fig. 3 En el grupo intoxicado con cocaína a simple vista no se ha podido apreciar grandes alteraciones. La célula hepática ha captado los colorantes normalmente y no se ha podido apreciar grandes alteraciones a nivel de la vena centrolobulillar ni de los diferentes componentes del espacio porta. Sin embargo se han podido captar en algunas preparaciones alteraciones estructurales en los hepatocitos centrolobulares a veces imágenes de
necrosis periportal y mediozonal que en un limitado número de preparaciones también han sido centrolobulares En el grupo tratado con éxtasis se ha detectado cierta vacuolización centrolobular, cierto grado de necrosis centrolobular con un grado apreciable de fibrosis hepática. Ha llamado la atención la coagulación intravascular encontrada en los vasos hepáticos de algunos animales tratados y evaluados . En las preparaciones evaluadas de los animales tratados con heroína se ha apreciado infiltrados inflamatorios a nivel lobular y portal con aparición de células características de estado, un grado grande hipertrofia y de fibrosis del espacio de Diese y en algunas preparaciones ruptura del espacio interhepatocítico. Fig. 4,5,6,7,8,9,10 y 11
Fig.3 Imagen del lobulillo hepático alrededor de la vena centrolobulillar. Grupo control H.E. 100X .
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
95
Fig.4 Imagen de la vena centrolobulillar del lobulillo hepático de un animal tratado con cocaína. H.E. 100X
Fig.5 Imagen de la vena centrolobulillar del lobulillo hepático de un animal tratado con extasis. H.E. 100X
Fig. 6 Imagen alrededor de la vena centrolobulillar en el grupo al que se le administró heroína. H.E. 100X
Fig 7. Imagen del espacio porta de un animal tratado con cocaína. H.E. 100X
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
96
Fig.8 Imagen del espacio porta del lobulillo hepático un animal tratado con extasis. H.E. 100X
Fig.9 Imagen del espacio porta del lobulillo hepático de un animal tratado con heroína. H.E. 100X
Fig.10 Imagen a mayores aumentos de las células hepáticas de un animal de un grupo tratado con éxtasis. H-EE. 400X
Fig.11 Trombosis de la ena centrolobulillar de un a preparación perteneciente a un animal tratado con heroína HE 400X
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
97
ESTUDIO MORFOMETRICO La valoración morfométrica del hígado la hemos centrado en dos aspectos, el primero sobre la célula hepática y la segunda sobre los vasos y canalículos biliares. Morfometría del hepatocito El área del hepatocito ha mostrado valores medios de 205±38 en el grupo control, siendo muy parecidos los valores obtenidos en los grupos experimentales tanto los tratados con cocaína , los que recibieron estasis como los que fueron intoxicados con heroína cuyas cifras fueron 198±39, 211±51 y 213±47 respectivamente. Las diferencias no fueron estadísticamente significativas (Tabla III y Fig. 12)
Tabla III. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA HEPATOCITO en los distintos grupos estudiados Fig.12 Histograma de los valores del area del hepatocito en los distintos grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 205±38
COCAINA 198±39 N.S.
EXTASIS 211±51 N.S.
HEROINA 213±47 N.S.
AREA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
190
195
200
205
210
215
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
98
El perímetro del hepatocito sufrió cambios paralelos a los del área. De cifras de 52±7 del grupo control, se pudieron obtener las de 47±9, 53±13 y 55±17en los grupos intoxicados con cocaína, éxtasis y heroína sin significación estadística. (Tabla IV y Fig. 13)
Tabla IV. Valores medios junto con su significación standard y significación estadística del PERIMETRO HEPATOCITO en los distintos grupos estudiados
Fig.13 Histograma de los valores del perimetro del hepatocito en los distintos grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 52±7
COCAINA 47±9 N.S.
EXTASIS 53±13 N.S.
HEROINA 55±17 N.S.
PERIMETRO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
42
44
46
48
50
52
54
56
GRUPOS
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
99
El factor de forma no sufrió cambios estadísticamente significativos en ninguno de los grupos experimentales con respecto a los datos del control. (Tabla V y Fig. 14)
Tabla V. Valores medios junto su desviación standard y significación estadística del FACTOR FORMA HEPATOCITO en los distintos grupos estudiados Fig.14 Histograma de los valores del factor de forma del hepatocito en los distintos grupos estudiados
El área nuclear del hepatocito ha sido uno de los parámetros que no ha sufrido variaciones estadísticamente significativas, estando sus valores muy próximos a los normales y sin ninguna tendencia de variación (Tabla VI y Fig. 15)
Tabla VI. Valores medios del AREA NUCLEO junto con la desviación standard y significación estadística en los diferentes grupos estudiados Fig. 15 Histograma de los valores del área del núcleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.8±0.1
COCAINA 0.8±0.1 N.S.
EXTASIS 0.9±0.2 N.S.
HEROINA 0.9±0.2 N.S.
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 34.14±6.24
COCAINA 33.23±7.35 N.S.
EXTASIS 32.67±8.44 N.S.
HEROINA 33.45±7.88 N.S.
FACTOR DE FORMA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
0,70,80,9
1
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
AREA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
30
35
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
100
El perímetro del núcleo, a semejanza del parámetro anterior tampoco sufrió alteraciones con significación estadística. (Tabla VII y Fig. 16)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 20.78±3.22
COCAINA 19.79±3.21 N.S.
EXTASIS 19.56±323 N.S.
HEROINA 21.79±3.33 N.S. Tabla VII. Valores medios del PERIMETRO del NUCLEO junto con la desviación standard y significación estadística de los diferentes grupos estudiados Fig.16 Histograma de los valores del perímetro del nucleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados
El factor de forma del núcleo tampoco evidenció alteraciones, siendo sus valores muy próximos a los ofertados por el grupo control. (Tabla VIII y Fig. 17)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.8±0.1
COCAINA 0.8±0.2 N.S.
EXTASIS 0.8±0.2 N.S.
HEROINA 0.8±0.2 N.S.
Tabla VIII. Valores medios del FACTOR de FORMA del NUCLEO junto con la desviación standard y significación estadística de los diferentes grupos estudiados Fig. 17 Histograma de los valores del factor de forma del hepatocito en los distintos grupos estudiados
PERIMETRO DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
152025
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
FACTOR DE FORMA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
0
0,5
1
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
101
Con respecto a la relación núcleo/citoplasma no se ha evidenciado valores en los grupos experimentales con diferencias estadísti- camente significativas con el grupo control. (Tabla IX y Fig. 18)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.16±0.02
COCAINA 0.17±0.02 N.S.
EXTASIS 0.15±0.02 N.S.
HEROINA 0.15±0.02 N.S.
Tabla IX. Valores medios del parámetro RELACION NUCLEO/CITOPLASMA junto con su desviación standard y significación estadística en los diferentes grupos estudiados Fig. 18 Histograma de los valores de la relación núcleo/citoplasma del hepatocito en los distintos grupos estudiados
La densidad celular, es decir el número de células hepáticas por campo histológico predefinido, ha mostrado unos valores semejantes en todos los grupos experimentales estudiados con respecto al grupo control. Los valores medios de del grupo control 9.14±3.31, se mostraron muy parecidos a los del grupo tratado con cocaína 9.12±3.88, los tratados con éxtasis 8.38±3.78 y los intoxicados con heroína de 8.12±3.29. No existieron diferencias estadísticamente significativas. (Tabla X y Fig. 19)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 9.14±3.31
COCAINA 9.12±3.88 N.S
EXTASIS 8.38±3.78 N.S.
HEROINA 8.12±3.29 N.S.
Tabla X. Valores medios de la DENSIDAD CELULAR por campo, junto con su desviación standard y significación estadística en los diferentes grupos estudiados
RELACION NUCLEO/CITOPLASMA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
0,14
0,16
0,18
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
102
Fig. 19 Histograma de los valores de la densidad celular en los distintos grupos estudiados El porcentaje de grasa por campo histológico, de detectar grasa en el grupo control del 3.21% al 6.23% del grupo tratado con cocaína, al 6.31% del tratado con éxtasis hasta 7.238% del de heroína. (Tabla XI y Fig. 20)
GRUPOS PORCENTAJE SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 3.21%
COCAINA 6.23% N.S.
EXTASIS 6.31% N.S.
HEROINA 7.23% N.S.
Tabla XI. Valores del parámetro PORCENTAJE GRASA por CAMPO HISTOLOGICO
Fig. 20 Histograma de los valores del porcentaje grasa/campo histológico en los distintos grupos estudiados Valoración morfométrica de los vasos y canalículos biliares El área de la luz de la arteria del espacio porta no ha sufrido variaciones en los grupos experimentales con respecto al grupo control. Incrementos estadísticamente significativos en todos los grupos experimentales con respecto al control. (Tabla XII Fig. 21)
DENSIDAD CELULAR EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
789
10
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
PORCENTAJE GRASA/CAMPO HISTOLOGICO DEL HEPATOCITO EN
LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
010
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
103
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 2561±425
COCAINA 2356±852 N.S
EXTASIS 2435±685 N.S
HEROINA 2349±759 N.S.
Tabla XII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA de la LUZ DE LA ARTERIA del ESPACIO PORTA Fig. 21 Histograma de los valores del area de la luz de la arteria del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados
El grosor de este vaso ha sufrido variaciones incrementándose su espesor en los grupos experimentales. Así se ha incrementado a valores de 183±23 en el grupo de cocaína, 178±42 en el grupo de éxtasis y 189±39 en el grupo de heparina en relación a los valores de 125±32 del grupo control, incrementos que se mostraron estadísticamente significativos (p<0.01) (Tabla XIII y Fig. 22)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 125±32
COCAINA 183±23 p<0.01
EXTASIS 178±42 p<0.01
HEROINA 189±39 p<0.01
Tabla XIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del GROSOR de la PARED de la ARTERIA del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados
AREA DE LA LUZ DE LA ARTYERIA DEL ESPACIO PORTA DEL
HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
200025003000
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
104
Fig. 22 Histograma de los valores del grosor de la pared de la arteria del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados El área de la de la luz de la vena del espacio porta no ha sufrido en ninguno de los grupos experimentales variaciones estadísticamente significativas con respecto al grupo control. (Tabla XIV y Fig. 23)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 3195±1088
COCAINA 2932±1182 N.S
EXTASIS 3229±1239 N.S
HEROINA 2830±1392 N.S.
Tabla XIV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del área de la LUZ DE LA VENA del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados
Fig.23 Histograma de los valores de la luz de la vena del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados El grosor de la pared de esta vena también sufrió incrementos y mucho mas acentuado en el grupo tratado con cocaína (162±75) , del grupo intoxicado con éxtasis (150±39) y los de heroína (139±51) con respecto a los controles (97±29) con una significación estadística del p<0.01. (Tabla XV y Fig. 24)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 97±29
COCAINA 162±75 p<0.01
EXTASIS 150±39 p<0.01
HEROINA 139±51 p<0.01
Tabla XV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del GROSOR de la PARED de la VENA del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados
GROSOR DE LA PARED DE LA ARTERIA DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO
EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
0
200
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
LUZ D ELA VENA DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
25003000
3500
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
105
Fig. 24 Histograma de los valores del grosor de la pared de la vena del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados En relación al calículo biliar, su área no sufrió variación estadísticamente significativa en el grupo de cocaína (593±116), éxtasis (591±143) y heroína (572±139) con respecto al control (599±128) sin diferencias estadística- mente significativas. (Tabla XVI y Fig. 25)
Tabla XVI. Valores medios del AREA de la LUZ DEL CANALICULO BILIAR del ESPACIO PORTA junto con su desviación estándar y significación estadística en los diferentes grupos estudiados
Fig. 25 Histograma de los valores del área de la luz del canalículo biliar del espacio porta del en los distintos grupos estudiados El grosor del canalículo no evidenció cambios en los grupos de cocaína (72±19), de éxtasis (79±24 y de heroína (72±27 con respecto al control (79±22) sin mostrar diferencias significativas. (Tabla XVII y Fig. 26)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 79±22
COCAINA 72±19 N.S.
EXTASIS 79±24 N.S
HEROINA 72±27 N.S
Tabla XVII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del GROSOR del CANALICULO BILIAR del ESPACIO PORTA en los diferentes grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 599±128
COCAINA 593±116 N.S.
EXTASIS 591±143 N.S
HEROINA 572±139 N.S
GROSOR DE LA PARED DE LA VENA DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO EN LOS
DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
0100200
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
AREA DE LA LUZ DEL CANALICULO BILIAR DEL ESPACIO PORTA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
550600650
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
106
Fig. 26 Histograma de los valores del grosor del canalículo biliar del espacio porta del hepatocito en los distintos grupos estudiados El Área de la vena centrolobulillar, no sufrió variaciones en los grupos experimentales con respecto al control sin mostrar sus diferencias de valores significación estadística. (Tabla XVIII y Fig. 27)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 995±231
COCAINA 1140±319 N.S.
EXTASIS 1069±293
N.S.
HEROINA
1012±324
N.S.
Tabla XVIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA de la VENA CENTROLOBULILLAR en los diferentes grupos estudiados Fig. 27 Histograma de los valores del area de la vena centrolobulillar del hepatocito en los distintos grupos estudiados
GROSOR DEL CANALICULO BILIAR DEL ESPACIO PORTA DEL
HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
6080
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
AREA DE LA VENA CENTROLOBULILLAR DEL
HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
50010001500
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
107
4. ESTUDIO BAJO MICROSCOPIA ELECTRONICA A nivel ultraestructural, en las preparaciones pertenecientes a los animales controles se ha podido apreciar el núcleo celular claramente diferenciado. El núcleo, presenta una morfología más o menos redondeada con densidad electrodensa y a veces hipercromático con cierto grado de picnosis en algunos casos Fig. 28. No se ha detectado depósitos lipiditos a nivel nuclear. Se ha evidenciado el citoplasma con sus organelas claramente diferenciadas y más concretamente a lo que respecta a los retículos endoplásmico liso y rugoso este con sus ribosomas, las formaciones mitocondriales, las rosetas de glucógeno y el resto de estructuras sobre todo vacuolas y lisosomas entre otras. La administración de cocaína ha conllevado alteraciones tanto a nivel del retículo endoplásmico liso como rugoso con desestructurización, alteraciones de las mitocondrias derivando su forma a balonamiento, (Fig. 29), alteraciones de los microvilli y la aparición de acumulos lipídicos intracitoplasmáticos (Fig. 30). A nivel mitocondrial ha podido ser observado un incremento lo que podríamos considerar como vacuolas autofágica. Las alteraciones del retículo endoplasmico liso se ha centrado en su dilatación, las del rugosos en la
desaparición de los ribosomas y en las mitocondrias aparte de las de la rotura de la membrana mitocondrial. Discretas formaciones grasas se han podido evidenciar en algunas preparaciones en relación con el retículo endoplasmico liso con cierta continuidad entre las membranas de estas organelas y las que limitan las vacuolas grasas que en ocasiones tiene una disposición
Fig. 28 Imagen del núcleo celular en un hepatocito de un animal del grupo control. 4000X El tratamiento con éxtasis ha provocado la aparición de apoptosis celular, descenso subjetivo del número de rosetas de glucógeno e imágenes de rabdomiolisis. Las mitocondrias se han mostrado en los animales de este grupo seriamente alteradas con formas irregulares, muy alargadas y en algunos casos abalonadas con alteraciones en su envoltura de tipo herniación. Las crestas
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
108
se muestran fragmentadas o a veces han desaparecido. El interior mitocondrial se muestra floculado con imagen de distintas densidades donde alternan zonas muy claras con otras muy obscuras. Fig. 31 y 32 A veces se han detectado cristales electrodensos dando un aspecto geográfico. Existe una tendencia a la vacuolización de estas estructuras de aspecto diferentes a las formaciones grasas. De la misma forma parece evidenciarse un incremento de las cisternas del retículo endoplásmico liso a expensas del rugoso, cuya superficie celular parece disminuida. A la simple observación no se han podido evidenciar cambios a nivel nuclear o otras estructuras citoplasmáticas. Los lisosomas
Fig. 29 Mitocondrias a nivel citoplasmático con alteraciones en sus crestas en un animal tratado con cocaína. 10.000X
se ven incrementados en número y tamaño en los animales que se les intoxicaba con heroína presentado formas no redondeadas más bien ovoides y en algunos casos con aspectos irregulares. El interior muestra una matriz heterogénea en la densidad electrónica y a veces con la presencia de pequeños gránulos electrodensos entre zonas mas claras.
Fig. 30 Imagen del citoplasma del hepatocito con cierto grado de vacuolización. Grupo tratado con cocaína. 10.000X El tratamiento con heroína ha mostrado como alteraciones mas relevantes, un espesamiento de la pared sinusoidal de las células endoteliales, alteraciones mas o menos marcadas de los microvillis celulares, cierto grado de colagenización perisinusoidal con incremento del espesor de su pared y alteraciones en las células a nivel citoplasmático, cierta
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
109
fibrogénesis del espacio de Diese. Se ha podido observar en este grupo la presencia de estructuras citoplasmáticas trilaminares y la presencia de membranas citoplásmicas fusionadas junto con un retículo endoplásmico dilatado. Fig. 33 El Aparato de Golgi y el retículo endoplásmico liso, se muestran generalmente hipertrófico e hiperplásico aumentando la extensión de los mismos con una tendencia a la balonización. A nivel del retículo endoplásmico rugoso es posible observar una pérdida de la disposición paralela de las membranas de las cisternas y un incremento de la luz de las mismas a la vez de que existe una tendencia a la degranulación a veces con fragmentación membranosa.
Fig. 31 Imagen del citoplásmico con formaciones lipídicas Animal tratado con éxtasis 10.000X
Entre las alteraciones ha sido frecuente observar roturas de la membrana mitocondrial de tipo anillado o la presencia de filamentos helicoidales en el espacio intermembranoso. Es frecuente evidenciarse un redondeamiento de la membrana celular, dando la impresión de un hinchamiento de su citoplasma con gran presencia de vacuolas grasas de gran tamaño y que en algunas ocasiones toman contacto entre sí perdiendo su limitación confluyendo entre ellas. Estas inclusiones lipídicas parecen que no presentan membranas limitantes y presentan una estructura más o menos homogénea. Y también se ha podido observar un incremento del volumen mitocondrial.
Fig. 32 Imagen del Aparato de Golgi con formaciones de retículo endoplásmico rugoso. Animal tratado con éxtasis 10.000X
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
110
Fig. 33 Imagen ultraestructural donde se pueden visualizar desestructurización citoplasmático y gran número de formaciones lisosomiales. Animal tratado con heroína. 10.000X 4. ESTUDIO MORFOMETRICO La valoración morfométrica de las preparaciones estudiadas bajo microscopía electrónica de transmisión han ofertado los siguientes resultados: El AREA del NUCLEO, presentó unos valores en el Grupo CONTROL de 723.95±141.41. A nivel del grupo COCAINA, las cifras fueron de 823.98±173.72, los de EXTASIS 753.56±123.45 y los de HEROÍNA 739.34±154.47 sin mostrar las diferencias
significación estadística. (Tabla XIX y Fig. 34)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 723.95±141.41
COCAINA 823.98±173.72 N.S.
EXTASIS 753.56±123.45 N.S.
HEROINA 739.34±154.47 N.S.
Tabla XIX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA DEL NUCLEO en los distintos grupos estudiados Fig. 34 Histograma de los valores del area del nucleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados
AREA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
600800
1000
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
111
El FACTOR de FORMA deL NUCLEO CELULAR, mostró valores de 0.90±0.07 en el grupo CONTROL y 0.89±0.09 en el COCAINA, 0.86±0.08 en el EXTASIS y 0.87±0.08 en el de HEROINA, sin ser estas diferencias mostradas estadísticamente significativas. (Tabla XX y Fig. 35)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.90±0.07
COCAINA 0.89±0.09 N.S.
EXTASIS 0.86±0.08 N.S.
HEROINA 0.87±0.08 N.S.
Tabla XX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA DEL NUCLEO en los distintos grupos estudiados Fig. 35 Histograma de los valores del factor de forma del nucleo del hepatocito en los distintos grupos estudiados
Los valores morfométricos correspon- dientes a la DENSIDAD MITOCONDRIAL, a nivel del grupo CONTROL fueron de 7.3±3.1 en relación a las cifras del grupo COCAINA que fueron de 3.2±1.1. EXTASIS de 4.8±2.2 y 4.1±2.1 en el de HEROÍNA. Las diferencias tuvieron significación estadística de p<0.05. (Tabla XXI y Fig. 36)
Tabla XXI. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD MITOCONDRIAL por campo de estudio en los distintos grupos estudiados Fig. 36 Histograma de los valores de la densidad mitocondrial del hepatocito en los distintos grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 7.3±3.1
COCAINA 3.2±6.1 p<0.01
EXTASIS 4.8±8.2 p<0.05
HEROINA 4.1±7.1 P<0.05
FACTOR DE FORMA DEL NUCLEO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
0,840,860,880,9
0,92
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
DENSIDAD MITOCONDRIAL DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
0
5
10
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
112
El AREA MITOCONDRIAL, en los animales estudiados mostraron valores CONTROLES de 0.53±0.18 y a nivel de los grupos experimentales COCAINA 1.89±0.32, EXTASIS 1.43±0.43 y HEROÍNA de 2.34±0.33, incrementos que fueron significativos con respecto al grupo CONTROL. (p<0.001). (Tabla XXII y Fig. 37)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.534±0.183
COCAINA 1.891±0.321 p<0.001
EXTASIS 1.439±0.433 p<0.001
HEROINA 2.342±0.332 P<0.001
Tabla XXII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA MITONDRIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 37 Histograma de los valores del área mitocondrial del hepatocito en los distintos grupos estudiados
El FACTOR de FORMA MITOCONRIAL, mostró variaciones estadísticamente significativas (p<0.05) en relación a los valores del grupo CONTROL 0.51±0.19 con respecto a los valores de los grupos de COCAINA 0.81±0.21, EXTASIS 0.71±0.24 y HEROÍNA 0.97±0.23 (Tabla XXIII y Fig. 38)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.510±0.193
COCAINA 0.811±0.212 p<0.05
EXTASIS 0.712±0.242 p<0.05
HEROINA 0.971±0.232 P<0.05
Tabla XXIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA MITOCONDRIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 38 Histograma de los valores del factor de forma mitocondrial del hepatocito en los distintos grupos estudiados
AREA MITOCONDRIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
0123
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
FACTOR DE FORMA MITOCONDRIAL HEPATOCITO EN
LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
0
0,5
1
1,5
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
113
Los valores de DENSIDAD LISOSOMIAL, fueron en el grupo CONTROL de 2.7±2.1 y sufrieron incrementos en el grupo COCAINA de 6.3±3.2 (p<0.01), grupo de EXTASIS 5.4±3.2 (p<0.05) y HEROÍNA 8.3±3.1 (P<0.01) (Tabla XXIV y Fig. 39)
Tabla XXIV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD LISOSOMIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 39 Histograma de los valores de la densidad lisosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados
Los valores del parámetro AREA LISOSOSMIAL fueron a nivel del grupo CONTROL de 0.64±0.16, 0.89±0.27 del de COCAINA, 0.98±0.23 del EXTASIS y 0.98±0.17 del de HEROINA, incrementos de los grupos experimentales con significación estadística en todos ellos de p<0.01. (Tabla XXV y Fig. 40)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.645±0.167
COCAINA 0.893±0.278 p<0.01
EXTASIS 0.987±0.234 p<0.01
HEROINA 0.986±0.179 P<0.01
Tabla XXV. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA LISOSOMIAL en los distintos grupos estudiados Fig. 40 Histograma de los valores del area lisosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 2.7±2.1
COCAINA 6.3±3.2 p<0.01
EXTASIS 5.4±3.2 p<0.05
HEROINA 8.3±3.1 P<0.01
DENSIDAD LISOSOMIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
0
5
10
GRUPOS
CONTROL
COCAINA
EXTASIS
HEROÍNA
AREA LISOSOMIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
00,5
11,5
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
114
El FACTOR de FORMA LISOSOMIAL, mostró un incremento de valores en los grupos experimentales con una significatividad estadística de p<0.01 mostrando cifras de 0.85±0.16 en el grupo COCAINA, 0.91±0.16 del grupo EXTASIS y 0.92±0.15 del de HEROINA, en relación de 0.53±0.12 del grupo CONTROL. (Tabla XXVI y Fig. 41)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.533±0.122
COCAINA 0.855±0.160 p<0.01
EXTASIS 0.911±0.165 p<0.01
HEROINA 0.922±0.155 P<0.01
Tabla XXVI. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA LISOSOMIAL en los distintos grupos estudiados
Fig. 41 Histograma de los valores del factor de forma lisosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados El AREA del RETICULO ENDOPLASMICO, DISMINUYÓ en los grupos experimentales COCAINA (8.28±3.78), EXTASIS (8.56±2.89) y HEROINA (5.56±2.34) con respecto al CONTROL (28.34±7.15), diferencias estadísticamente significativas (p<0.001). (Tabla XXVII y Fig. 42)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 28.345±7.154
COCAINA 8.281±3.785 p<0.001
EXTASIS 8.563±2.892 p<0.001
HEROINA 5.562±2.340 P<0.001
Tabla XXVII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la AREA DEL RETICULO ENDOPLASMICO en los distintos grupos estudiados
FACTOR DE FORMA LISOSOMIAL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
0
0,5
1
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
115
Fig. 42 Histograma de los valores del area del retículo endoplásmico del hepatocito en los distintos grupos estudiados La DENSIDAD de RIBOSOMAS por campo, también disminuyó de forma estadísticamente significativa (p<0.001) con respecto al grupo CONTROL (32.53±6.52), en los grupos experimentales COCAINA con valores de 9.83±4.16, EXTASIS con medias de 9.71±3.67, y HEROINA con cifras de 6.24±3.89. (Tabla XXVIII y Fig. 43)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 32.53±6.52
COCAINA 9.83±4.16 p<0.001
EXTASIS 9.71±3.67 p<0.001
HEROINA 6.24±3.89 P<0.001
Tabla XXVIII. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD RIBOSOMIAL en los distintos grupos estudiados
Fig. 43 Histograma de los valores de la densidad risosomial del hepatocito en los distintos grupos estudiados La DENSIDAD de ROSETAS de GLUCOGENO observada por campo también disminuyó de una forma estadísticamente significativa (p<0.001) en los grupos experimentales COCAINA (7.61±2.21), EXTASIS (8.67±3.32) y HEROINA(6.21±3.12) en relación a los valores del grupo CONTROL que fueron de 24.34±8.23. (Tabla XXIX y Fig. 44)
AREA DEL RETICULO ENDOPLASMICO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
0
10
20
30
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
DENSIDAD RIBOSOMIAL DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS
GRUPOS ESTUDIADOS
0
20
40
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
116
Tabla XXIX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística de la DENSIDAD DE ROSETAS DE GLUCOGENO en los distintos grupos estudiados Fig. 44 Histograma de los valores de la densidad de rosetas de glucógeno del hepatocito en los distintos grupos estudiados
El AREA de la VACUOLA GRASA, sufrió un incremento estadísticamente significativo (p<0.01) en los grupos experimentales con respecto al grupo CONTROL (6.44±1.23). El grupo COCAINA tuvo cifras de 16.42±3.25, el grupo EXTASIS de 18.56±7.44 y el HEROINA de 16.18±7.45. (Tabla XXX y Fig. 45)
Tabla XXX. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del AREA DE LA VACUOLA GRASA en los distintos grupos estudiados
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 24.34±8.23
COCAINA 7.61±2.21 p<0.001
EXTASIS 8.67±3.32 p<0.001
HEROINA 6.21±3.12 P<0.001
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 6.44±0.23
COCAINA 16.42±3.25 p<0.01
EXTASIS 18.56±7.44 p<0.01
HEROINA 16.18±7.45 P<0.01 DENSIDAD ROSETAS DE
GLUCOGENO DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
0
10
20
30
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
RESULTADOS
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
117
Fig. 45 Histograma de los valores del area de la vacuola grasa del hepatocito en los distintos grupos estudiados El FACTOR de FORMA de la VACUOLA GRASA, no mostró valores con diferencias estadísticamente significativas en los grupos experimentales con respecto al CONTROL. (Tabla XXXI y Fig. 46)
GRUPOS VALORES MEDIOS Y D.S.
SIGNIFICACION ESTADIST.
CONTROL 0.83±0.21
COCAINA 0.81±0.22 N.S.
EXTASIS 0.92±0.23 N.S.
HEROINA 0.93±0.22 N.S.
Tabla XXXI. Valores medios junto con su desviación standard y significación estadística del FACTOR DE FORMA DE LA VACUOLA GRASA en los distintos grupos estudiados Fig. 46 Histograma de los valores del factor de forma de la vacuola grasa del hepatocito en los distintos grupos estudiados
AREA DE LA VACUOLA GRASA DEL HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS
ESTUDIADOS
05
101520
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
FACTOR DE FORMA DE LA VACUOLA GRASA DEL
HEPATOCITO EN LOS DISTINTOS GRUPOS ESTUDIADOS
0,70,80,9
1
GRUPOS
CONTROLCOCAINAEXTASISHEROÍNA
DISCUSION
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
DISCUSION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
119
Existen numerosas aportaciones
bibliografícas, de los efectos de las
drogas de adicción a diferentes niveles y
muy especialmente en lo que respecta a
las repercusiones psicológicas, del
comportamiento del individuo e incluso
lo que representa el sujeto adicto en la
sociedad27,40,59,141
Las drogas de adicción tienen la
característica en la mayoría de las
ocasiones, independientemente de la
dependencia que desde el punto de vista
psicológico, conlleva al individuo, que
actúen a nivel orgánico, administrandose
por diferentes vías, al incorporarse al
organismo, y sufrir en este una
trasformación metabólica que
interacciona con el cuerpo humano44,98 .
Estos compuestos químicos, tratados
desde el punto de vista interactivo, como
otros medicamentos o drogas que por
diferentes motivos a veces terapéuticos
son administrados al individuo
enfermo47,48,63,134.
Por regla general las drogas se
administran en el drogadicto con una
serie de circunstancias especiales y
peculiaridades, como son la
incorporación esporádica inicial, la
continuidad de su administración el
progresivo incremento en cuanto a la
frecuencia de administración y también
de dosis161. Interactúan las drogas en
diferentes órganos y sistemas en algunos
casos con el efecto que las confieren su
carácter aditivo y en otras con el perfil de
su interacción metabólica70,165.
Órganos y vísceras y muy especialmente
sistema nervioso, riñón, pulmón y en
especial el hígado interactúan con los
compuestos químicos para su
degradación, asimilación o
eliminación109,112.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
120
El hígado por otra parte es el complejo
metabólico de trasformación de
diferentes compuestos algunos propios
del organismo, otros ajenos al mismo e
incorporados de forma artificial y en la
célula hepática se modifica, alteran,
reconvierten o se eliminan125,128. Esta
función hepática hace que la víscera
juegue un papel fundamental en el
metabolismo de estas sustancias, pero la
administración continuada, progresiva y
la dosis elevada puede conllevar el daño
hepático y en ocasiones la destrucción
tanto orgánica como funcional del
mismo132,157 .
En la bibliografía, se han encontrado
algunas aportaciones, no en muy elevado
número, de las repercusiones que las
diferentes drogas puedan ocasionar en el
hígado78,139,154,168. En la mayoría de las
ocasiones relacionados con estados ya
muy deteriorados de la funcionabilidad
hepática y con interacciones de otros
fármacos, drogas o situaciones
patológicas que el estado de drogadicción
conlleva, habiéndose aportado la
información después de graves
alteraciones de la función hepática y
desde el punto de vista morfológico en
estados ya terminales, puesto que la
información se ha ido obteniendo de los
estudios hepáticos de muestras viscerales
procedentes en la mayoría de los casos
de autopsias35,52,64,170,187
Por otro lado también se pueden
considerar escasos los estudios realizados
a nivel experimental y muy
especialmente de las repercusiones que
el estado de drogadicción ocasionado por
los diferentes compuestos causaban, a
nivel de los órganos91,120. Siempre en
estos estudios se ha dado preferencia o
prioridad a la valoración de las
repercusiones orgánicas que tenían las
drogas a nivel del sistema nervioso y muy
especialmente el central.
El hígado es una víscera muy compleja
desde el punto de vista de la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
121
funcionabilidad y también de su
organización estructural morfológica a los
distintos niveles ya sea histológico como
ultraestructural13
Las repercusiones que compuestos
extraños incorporados de una forma
continuada anómala y en cantidades
excesivas en muchas ocasiones
incrementadas de forma paulatina, sin
lugar a dudas, deben de repercutir tanto
a nivel de la funcionabilidad del
hepatocito como en la alteración de
estructuras, algunas extremadamente
sensibles a la agresión que a la corta o a
la larga también representaran un
menoscabo tanto funcional como
orgánico del individuo1,4,83
En muchas ocasiones las repercusiones
de diferentes situaciones ocasionadas por
compuestos foráneos en el cuerpo
humano no producen las alteraciones lo
suficientemente ostensibles para que
sean claramente evidenciadas en una
valoración subjetiva histológica o
ultraestructural celular22104, por lo que la
cuantificaciones de las posibles lesiones
se puede mostrar como un instrumento
fundamental que ponga en evidencia
estos cambios y lo que puede ser más
relevante que los objetive con una
valoración cuantitativa, por lo que la
morfometría se muestra como esencial
en este tipo de estudios con el fin de
poder constatar claramente las posibles
alteraciones que determinados
compuestos, y en el caso que nos afectan,
las drogas a nivel de un órgano
fundamental para el organismo como es
el hígado79,99,100 .
Desde el punto de vista metodológico, a
nivel experimental, se pueden utilizar
diferentes especies animales con
efectividad19,49 como el mono o la rata,
pero la utilización del ratón como modelo
experimental en la valoración de los
efectos de las drogas de adicción a nivel
hepático ha sido anteriormente
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
122
contrastada por otros autores y
demostrado la validez del mismo88,90,110
mostrándose como un animal manejable,
de bajo coste y adecuabilidad a la hora de
realizar las extrapolaciones de datos a la
especie humana84.
El ratón como animal de laboratorio se
nos ha mostrado en nuestro estudio
como idóneo, por su bajo precio, fácil
obtención, cómodo manejo y estabula-
ción y sobre todo por ser un animal uti-
lizado previamente por otros autores
para este tipo de estudios28,140
La edad de los animales utilizados, ha
sido la correspondiente al adulto joven,
con el fin de que la misma no interfiriera
en los resultados buscando un reactivo
biológico sano, joven en plena actividad
biológico con objeto que las
consecuencias de la aplicación de la droga
pudieran atribuirse exclusivamente a la
misma54
Desde el punto de vista metodológico, la
vía de administración elegida pasa
suministrar los diferentes tipos de droga,
puede ser discutida en consideración a
factores metabólicos, fisiopatológicos y
de eliminación de las mismas34. Se ha
seleccionado la intraperitoneal
intentando una vía de fácil absorción,
adecuada para todos los tipos de droga
estudiados, y que la misma no pudiera
interferir a nivel de la incorporación en el
organismo de los animales y que estas
pudieran realizar su acción a nivel
hepático182. Se ha de considerar que la vía
intraperitorneal no es utilizada de forma
standarizada para la aplicación de drogas
en el ser humano tanto a nivel
terapéutico como es situaciones de
drogadicción, pero este hecho no lo
hemos considerado relevante al valorar
que no interferiría en los resultados a
tenor de lo aportado en otros estudios
experimentales3,30
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
123
Las dosis utilizadas de las diferentes
drogas en el estudio corresponden a los
datos encontrados en la bibliografía en
relación a las tasas idóneas de introxica-
ción para obtener los niveles adecuados
que pudieran ocasionar daños y a la vez
pudieran permitir sobrevivir a los ani-
males106, siendo las recomendada la vía
intraperitoneal a dosis de 50 mg/kg para
el extasis, 125 mg/kg para la heroína y
50 mg/kg para la morfina en relación
con el peso corporal del animal.
Sobre los daños detectados de forma
general a nivel hepático tras la
administración de drogas,
Las alteraciones hepáticas reflejadas en la
bibliografía, se muestran poco
homogéneas, a veces no cincidentes y en
algunos casos contradictorias. Así
podíamos reseñar algunas informaciones
relevantes aportadas por diferentes
autores:
Se han detectado, por un lado, la
presencia de membranas intra-
citoplasmáticas, semejantes a las que
aparecen en los animales intoxicados por
alcohol, en organismos sujetos a
intoxicación con drogas, consideradas
como expresión de sufrimiento celular189 .
La explicación de este fenómeno estaría
en las vesículas grasas rodeadas de
formaciones membranosas tendrían su
origen en el retículo endoplásmico liso y
serían producto de transformaciones
metabólicas. En cambio la dieta grasa
crearía acúmulos lipídicos sin esta
estructura envolvente derivado de una
acumulación simple de grasas159.
El posible origen de determinadas
vesículas lipídicas, tras sufrimiento
celular del hepatocito, a partir de las
cisternas del retículo endoplásmico liso
ha sido apuntado por Novikof y
Eldestein126 Porta y cols136, Ma101 y
Rosenblum152, al encontrar las inclusiones
lipídicas intracelulares envueltas de una
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
124
membrana en todo semejantes a la del
retículo endoplásmico liso138
Las alteraciones detectadas en las
mitocondrias sobre todo a nivel de la
desestructurización celular y cambios de
la forma y tamaño descritos en el estudio
en los diferentes grupos experimentales,
fueron señalados por Trump y cols177 y
Cheville31, como respuesta a la lesión y
adaptación celular a la agresión. Según
Trump y cols177, la lesión celular de
hinchazon mitocondrial y condensación
de su interior es una lesión reversible. Sin
embargo según Cheville31, este tipo de
lesión la considera irreversible.
Las alteraciones de los lisosomas y el
incremento del número de las mismas en
nuestro estudio, fueron encontrados por
López y cols97, Arstilla y cols6 y
Petersen135, en sus investigaciones sobre
hígado graso. Parece ser que existe una
correlación entre la gravedad de la lesión
celular y la aparición de este tipo de
organelas y que están relacionadas con el
metabolismo lipídico14,135
En el trabajo de Finol y cols56 se presen-
tan alteraciones a nivel intracellular en
las muestras de las biopsia hepáticas
sobre todo en lo que concierne a los
retículos endoplásmico rugoso y liso, a
las mitocondrias, a los núcleos celulares
y tambien a los microvilli. Estos autores
tambien refieren la detección de
depósitos lipídicos intracelulares y el
incremento de vacuolas autofágicas,
demostrando que la cocaina es un
tóxico hepatocelular importante a nivel
hepático184.
Maruta y cols106 en 1999, en trabajos
realizados en ratas con extasis, heroina
y cocaina relaciona los daños histológi-
cos con las concentraciones séricas de
drogas y estudian las repercusiones me-
diante la utilización de microscopía opti-
ca a nivel de diferentes órganos entre
ellos el hígado encontrando vacuoliza-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
125
ción en el espacio centrolobulillar con
infiltrados eosinófilos que en algunos
animales evolucionan a necrosis en el
grupo tratado con heroína que en
ningún caso apareción en el grupo de
extasis . El componente inflamatorio
tenía una mayor intensidad
coincidiendo con la mayor nivel de
droga149,
A nivel hepático en los diferentes ani-
males de los grupos tratados, en los
animales tratados con cocaina las lesio-
nes histopatológicas fueron menores y
los autores lo relacionan y justifican con
una metabolización más rápida de esta
droga frente a la heroína y éxtasis141.
Powell y cols139 en 1994 aportan datos
de la inducción en animales de necrosis
perizonal y periportal que estos autores
atribuyen el daño detectado a la utiliza-
ción de dosis altas de esta droga en sus
estudios que concretan en la aparición
de degeneración de los hepatocitos de
la región periportal del lobulillo hepático
que se centran en los estudios con mi-
croscopía óptica en lo que definen como
gran desorganización del retículo en-
doplásmico considerando que existen
diferentes mecanismos para el desarro-
llo de los daños y que la repercusión
fundamental es la presencia de diferen-
tes componentes enzimáticos a nivel
sérico posiblemente por su liberación
por la destrucción celular considerándo-
los como indicadores del daño hepático
y en especial las aspartato y alamina
amino transferrasas así como los niveles
de citochrome P-450 o FAD-mono-
oxigenase cytochrome P-450 y FAD-
mono-oxigenase163,164.
Cascales y colaboradores28 en 1994 pub-
lican un trabajo para valorar el daño
hepático por sus repercusiones
bioquímicas tras la administración de
cocaina en el ratón. En los estudios
histopatológicos también detectan ne-
crosis periportal y perivenosa a nivel del
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
126
parénquima hepático aunque en la
valoración crónica de los animales y una
vez suspendida la intoxicación parece
detectarse una respuesta de
regeneración postnecrótica muy
especialmente si estos animales se les
administraba fenobarbital. Esta
regeneración se demostraba
fundamentalmente por la presencia de
células mitóticas33.
Powell139 señala que tras la
administración de cocaína a ratones que
durante el desarrollo del daño hepático
no se alteran los ribosomas hepáticos y
que la regeneración del hígado tras el
cese de la intoxicación se muestra su
regeneración con la normalización de
los patrones bioquímicos.
Wanless y cols187 no encuentran en los
pacientes serios daños en la histopato-
logía hepática tras la administración de
cocaína y que sólo es posible detectar
ciertas alteraciones de hiperplasia del
retículo endoplásmico pero nuca necro-
sis celular. Sin embargo detectaron en
las biopsias de os pacientes cierto grado
de esteatosis en los hepatocitos de las
muestras analizadas. Desde el punto de
vista funcional detectaron alteraciones
de los enzimas hepáticos sobre todo
descensos de la aminotransferasa con
alteraciones del tiempo de
protrombina18
Copeland35 a nivel clínico no detecta en
los pacientes estudiados grandes
alteraciones de soporte hepático que
sugieran hepatotoxicidad.
Gottfried65 demuestra que la cocaína es
un potente hepatotóxico a nivel del
ratón demostrando desde el punto de
vista ultraestructural grandes
dilataciones de las estructuras del
retículo endoplásmico rugoso a nivel de
los hepatocitos centrolobulares.
Además encontró serias alteraciones en
las membranas mitocondriales con la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
127
dilatación del retículo endoplásmico
rugoso. Alteraciones en los hepatocitos
centrolobulares preceden a la muerte
celular. Se sugieren por los hallazgos
encontrados que la hepatotoxidad por
cocaína esta soportada en trastornos de
la peroxidación lipídica.
Trigueiro de Araujo y cols176 estudian
desde el punto de vista histopatológico
la acción de la heroína a nivel de sinu-
soides centrolobulares de biopsias
hepáticas de pacientes. Encuentra en
estos pacientes engrosamiento de la
pared de las células endoteliales de los
sinusoides e hipertrofia y fibrosis del
espacio de Disse. En pacientes adictos
alteraciones vasculares se encontraban
de forma constante. Consideraron que
existía un incremento funcional de la
célula sinusoidal.
Weller y cols188 analizaron la función
hepática en pacientes adictos a la
heroína mediante test funcionales y
estudios histológicos, detectaron un
aumento de enzimas como la aspartato
transaminasa. Las biopsias hepáticas
mostraron patrones de hepatitis crónica
con infiltrado inflamatorio periportal,
cambios grasos y la presencia de células
sinusoidales prominentes. En los
estudios ultraestructurales detectaron
estructura tubulares trilaminares
intracitoplasmáticas y membranas
destruidas junto con un retículo
endoplásmico dilatado. Sin embargo
estos autores apuntaron la posible
participación de otros factores sobre
todo infecciosos en el desarrollo de las
lesiones77,78.
Powel y cols139 en 1995 aportan datos
de la inducción en animales de necrosis
perizonal y periportal que estos autores
atribuyen el daño detectado a la utiliza-
ción de dosis altas de esta droga en sus
estudios que concretan en la aparición
de degeneración de los hepatocitos de
la región periportal del lobulillo hepático
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
128
que se centran en los estudios con mi-
croscopía optica en lo que definen como
gran desorganización del retículo en-
doplásmico considerando que existen
diferentes mecanismos para el desarro-
llo de los daños y que la repercusión
fundamental es la presencia de diferen-
tes componentes enzimáticos a nivel
sérico posiblemente por su liberación
por la destrucción celular considerándo-
los como indicadores del daño hepático
y en especial las aspartato y alamina
amino transferrasas así como los niveles
de citochrome P-450 o FAD-mono-
oxigenase cytochrome P-450 y FAD-
mono-oxigenase89
Weller y cols188 en 1984 señalan en su
artículo la presencia de alteraciones
funcionales hepáticas en los apacientes
drogadictos y alteraciones histológicas.
Los pacientes heroinómanos
frecuentemente una elevación de la
aspartato hidrogenasa. También
apuntan las interacciones que
infecciones concomitantes tan
frecuentes en estos enfermos pueden
suceder a nivel hepático. De esta forma
los patrones de hepatitis crónica
detectados en la biopsias de una serie
de enfermos no pueden determinarse
claramente su origen de abuso de
drogas o infección vírica que la totalidad
de los enfermos presentaban2.
Elsharkawy y cols53 en el año 2005, se-
ñalan que la fibrosis hepática es una
alteración que aparece frecuentemente
cuando confluyen diversas causas como
son la drogadicción, alcoholismo o in-
fección vírica hepática. La fibrosis es un
proceso patológico progresivo que los
miofibroblastos hepáticos responden
con proliferación ante la agresión a la
víscera con la sustitución del
parénquima por tejido conjuntivo con
especial predominio del colágeno. Hasta
hace poco tiempo se ha creído que este
proceso es irreversible, sin embargo
estudios experimentales y evidencia
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
129
clínica señala que puede evolucionar
recuperando situaciones iniciales. La
reversión del proceso fibrótico se
acompaña con la eliminación de las
células estrelladas hepática por apopto-
sis. Sin embargo recientes estudios en
roedores se ha tratado de inducir la
presencia de estas células para inducir la
desaparición de la fibrosis. También
habría que considerar el papel regulador
que juegan factores del crecimiento
como NGF, IGF-1, TGFbeta, receptores
de muerte celular como TRAIL y FAS),
componentes y reguladores de la matriz
extracelular como integritas, colágeno,
matriz de metaloproteasas, y sus tejidos
inhibidores y proteinas de transducción
o factores de transcripción como
Rho/Rho kinase, Jun N-terminal Kinase
(JNK), IkappaKinase (IKK), NF-kappa B).
Se empieza a conocer el potencial de
agentes farmacológicos tales como
gliotoxina, sulfasalazina, benzodiazepina
ligandos, curcumina and tanshinona que
inducen la apoptosis a las celulas
estrelladas referenciadas para inducir la
apoptosis y ser utilizadas
terapéuticamente.
Montiel-Duarte y cols115 en el 2002, se-
ñalan la hepatotoxidad del éxtasis aun-
que sus mecanismo de acción es todavía
pobremente conocido aunque se sospe-
chan mecanismos parecidos a lo que
suceden con neuronas serotoninergicas
o dopaminergicas. Sin embargo apuntan
los autores que no existe evidencia de
fenómenos de apoptosis en el hígado
inducidos por el extasis aunque si que se
han evidenciado a nivel experimental en
hepatocitos de rata aislados y en células
d el alinea estrellada hepática como
muestra la condensación cromatínica
por acumulación de fragmentos de
nucleosomas en el citoplasma celular37.
Beitia y cols12 en el año 2000 muestran
en su trabajo experimental que el éxta-
sis administrado a ratas incrementan los
niveles de triglicéridos y colesterol e
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
130
incrementan la actividad enzimática. De
la misma forma detectan un descenso
de los niveles de no detectan cambios
en la peroxidación lipídica y eran
onservadas células estrelladas
hepáticas. En contraste la
administración de extasis produce
alguna evidencia de stress oxidativo.
Ellis y cols52 en 1996 señalan que
drogadicción con éxtasis produce en
pacientes daño hepático con
rabdomiolisis y evidencia clara desde el
punto de vista bioquímico de daño
hepático. Desde el punto de vista his-
tológico detectan microvesiculas grasas
a nivel hepático con colestasis y colapso
masivo lobular.
Khakoo y cols86 en 1995 insisten el la
relación de la drogadicción con éxtasis y
la presencia de fibrosis hepática.
De forma genérica, Passarino y cols132
en 2005 señalan que las drogas de for-
ma genérica producen esteatosis hepá-
tica en el 66.5 % de los pacientes estu-
diados, se encuentra signos hepatitis en
el 64.5 % de los enfermos y sobre todo
las mujeres aunque no se puede concre-
tar la relación causa efecto de las drogas
sobre las alteraciones hepática pudién-
dose deberse estas a la patología con-
comitante195,196.
Considerar que en el trabajo de Finol y
cols56, se presentan alteraciones a nivel
intracelular en las muestras de las biop-
sias hepáticas sobre todo en lo que con-
cierne a los retículos endoplásmico ru-
goso y liso, a las mitocondrias, a los
núcleos celulares y también a los micro-
villi. Estos autores también refieren la
detección de depósitos lipídicos intrace-
lulares y el incremento de vacuolas au-
tofágicas, demostrando que la cocaina
es un tóxico hepatocelular importante a
nivel hepático90
En relación a nuestros resultados,
considerando los datos ofertados en la
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
131
bibliografía, se podrían realizar una serie
de comentarios y valoraciones, con
respecto a cada apartado del conjunto de
datos obtenido:
La más alta tasa de mortalidad recogida
en el estudio corresponde al grupo tra-
tado con extásis seguido por el de
heroína y menor el de cocaína. Se puede
considerar que la mortalidad se debe
concretamente a la actuación en el
organismo de la droga teniendo en
consideración que la manipulación de
los animales ha sido mínima y compara-
ble a la sufrida por el grupo control
donde no se ha registrado ningún
fallecimiento. Es posible que las dosis de
drogas utilizadas haya sido muy alta y en
periodos relativamente cortos de
tiempo, pero se han considerado
óptimas a tenor de los pocos datos
recogidos en la bibliografía para poder
provocar lesiones a nivel del órgano di-
ana que ha sido el hígado. Hay que
considerar que los animales utilizados
en el estudio han sido sanos libres de
patología y comorbilidades que existen
de forma muy frecuente en los
individuos de la especie humana que se
encuentran frecuentemente afectados
de procesos infecciosos como hepatitis,
sida o otras de asentamiento hepático
como la cirrosis. Además en muchas
ocasiones estos individuos se
administran varias drogas a la vez lo que
interaccionan e incrementan sus
efectos165.
La evolución ponderal de los animales
reflejo que la administración de las
diferentes drogas en los animales en los
grupos experimentales impedía el
adecuado incremento de peso que por
otra parte si que se verifica en el grupo
control. Independientemente de la
actuación de las drogas posiblemente,
aunque no se haya constatado en el
estudio, se deba a una disminución de la
ingesta por parte de los animales174.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
132
Si que han existido cambios en los
animales experimentales desde el punto
de vista físico. Estos animales han mos-
trado un aspecto a veces similar al de
los drogadictos de la especie humana
con piel deslustrada pero con alguna
que otra alteración física como ha sido
las detectadas a nivel de la cola. Su
comportamiento y reacciones también
se ha visto alterada mostrándose en
muchas ocasiones irritables, nerviosos o
agresivos situación que también
coinciden en muchas ocasiones a la de
adictos a la drogadicción de la especie
humana175.
A nivel abdominal no se han detectado
grandes cambios ni tan siquiera a nivel
hepático por lo que la intoxicación no se
ha reflejado a nivel visceral
macroscópico. Sin embargo si que ha
repercutido sobre la situación del tubo
digestivo que se ha encontrado vacío y
libre de contenido posiblemente por la
restricción de la ingesta191.
Insistiendo en la utilización del ratón
como animal de laboratorio y reactivo
biológico de nuestro estudio, conside-
ramos que ha sido adecuado teniendo
en cuenta la similitud biológica del ratón
con la especie humana, los requerimien-
tos técnicos para desarrollar el modelo y
diseño experimental que no necesitaba
animales de gran tamaño y sobre todo
de experiencias previas para valorar a
nivel experimental los efectos de las
drogas de adicción aunque no muy nu-
merosos en su conjunto la mayoría se
han realizado en el ratón, independien-
temente que el ratón se considera idó-
neo en muchas investigaciones por su
fácil obtención156
Las dosis utilizadas para intoxicar a los
animales es difícil de precisar para la
obtención de la información sobre la
hepatoxicidad de las diferentes drogas.
La administración de dosis bajas podrían
no llegar a producir alteraciones y dosis
altas por el contrario provocar
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
133
situaciones irreversibles para los
animales. Los escasos estudios previos
experimentales con estas drogas
podrían orientar de las dosis más
adecuadas para desarrollar el estudio
sobre todo teniendo en cuenta que
algunos de ellos relacionaban ya algunas
alteraciones histopatológicas con las
funcionales con parámetros bioquímicos
y sobre todo valoraban los niveles
séricos alcanzados tras su
administración así como la aportación
de datos sobre su farmacocinética y
farmacodinámica. Las dosis utilizadas de
las diferentes drogas en el estudio
corresponden a los datos encontrados
en la bibliografía en relación a las tasas
idóneas de intoxicación para obtener los
niveles adecuados que pudieran
ocasionar daños y a la vez pudieran
permitir sobrevivir a los animales106
(Maruta y cols, 1999), siendo las
recomendada la vía intraperitoneal a
dosis de 50 mg/kg para el extasis, 125
mg/kg para la heroína y 50 mg/kg para
la morfina en relación con el peso cor-
poral del animal.
La vía de administración podría ser otro
punto de discusión teniendo en conside-
ración que habría que buscar la más si-
milar a la que los drogadictos utilizan. La
variabilidad de la utilización de la vía por
estos enfermos drogodependientes y las
limitaciones de la especie animal
utilizada hacían recomendable la
utilización de la vía intraperitoneal que
aunque no utilizada por la especie hu-
mana si que tiene muchos nexos de
unión desde el punto de vista de
incorporación del fármaco al organismo
con el respecto de parenterales y muy
especialmente la intravenosa. Es por
otra parte la vía mas frecuentemente
utilizada en los estudios farmacológicos
para la valoración de drogas
terapéuticas185,198.
La morfometría es una técnica de inves-
tigación que objetiva la evaluación de
las alteraciones desarrolladas liberándo-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
134
la de interpretaciones subjetivas por
parte del observador-investigador. Es
una técnica de desarrollo en las últimas
décadas que no se ha utilizado
profusamente posiblemente por el
desconocimiento de su existencia por
parte de muchos investigadores no
familiarizados con la histopatología y la
necesidad de disponer de los
dispositivos técnicos adecuados. Sin
embargo la cuantificación de las
lesiones oferta una información
fácilmente interpretable libre de
subjetividad y que puede ser pasada por
el tamiz del tratamiento matemático a
través de la aplicación de la
bioestadística127,146.
Los hallazgos a nivel histológico a nivel
experimental en la mayoría de las
ocasiones coincidía con la escasa
información recogida en la bibliografía
desde el punto de vista histopatológico.
Llama la atención que en todos los
grupos experimentales las drogas
aunque diferentes han desarrollado
alteraciones histológicas hepáticas por
lo que las tres ensayadas se pueden
considerar en mayor o menor grado
como hepatotóxicas. La cocaína provoca
en nuestro estudio alteraciones a nivel
de los hepatocitos centrolobulares.
También se detectaron imágenes de
necrosis en el espacio portal169.
El extasis a diferencia de la anterior dro-
ga desarrolla las necrosis a nivel centro-
lobular, induce fibrosis a nivel del
parénquima hepático y por otra parte
provoca coagulaciones intravasculares58.
La heroína también induce la formación
de acúmulos fibrosos con rupturas del
espacio interhepatocítico y por otra par-
te se han podido detectar infiltrados
inflamatorios 45
Maruta y cols22 en 1999, en trabajos
realizados en ratas con éxtasis, heroina
y cocaína relaciona los daños histológi-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
135
cos con las concentraciones séricas de
drogas y estudian las repercusiones me-
diante la utilización de microscopía opti-
ca a nivel de diferentes órganos entre
ellos el hígado encontrando vacuoliza-
ción en el espacio centrolobulillar con
infiltrados eosinófilos que en algunos
animales evolucionan a necrosis en el
grupo tratado con heroína que en
ningún caso apareció en el grupo de
éxtasis . El componente inflamatorio
tenía una mayor intensidad
coincidiendo con la mayor nivel de
droga194
A nivel hepático en los diferentes ani-
males de los grupos tratados con dro-
gas. En los animales tratados con cocaí-
na las lesiones histopatológicas en nues-
tro studio fueron menores y los autores
lo relacionan y justifican con una meta-
bolización mas rápida de esta droga
frente a la heroína y éxtasis181.
Volver a considerar que en la revisión
documental realizada sobre el tema, las
aportaciones se pueden considerar es-
casas a pesar de la relevancia del pro-
blema, la alta incidencia y prevalencia
de la situación. Los trabajos detectados
no son muy numerosos y menos en las
últimas décadas. De la misma forma la
información de las repercusiones a nivel
orgánico se pueden considerar como
“escasas” no contemplando los aspectos
histopatológicos que se podrían
considerar como muy relevantes. Los
trabajos experimentales no se pueden
considerar numerosos y posiblemente
este hecho se puede relacionar con la
dificultad que en muchas ocasiones
existen para obtener la droga para la
intoxicación. En los clínicos la
información se podría considerar como
muy heterogénea aportando
información dispersa con la expresión
de aspectos psicológicos, bioquímicos,
pocos histopatológicos y mas en
consonancia con marcadores viscerales
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
136
pero que aportan una información en
muchas ocasiones inconexas140.
Los hallazgos ultraestructurales que se
han detectado en el grupo tratado con
cocaína las alteraciones se han centrado
a todos los niveles, incluido el núcleo
pero en especial los retículos
endoplásmicos rugosos y liso, las
alteraciones mitocondriales y cambios
en la densidad ribosomial y aparición de
vacuolas autofágicas178.
Tras el tratamiento con estasis las lesio-
nes se centraron en imágenes de apop-
tosis, descenso de las rosetas de glucó-
geno hepático y rabdomiolisis 92
La heroína a nivel ultraestructural en
nuestro estudio centro sus daños a nivel
de los sinusoides hepáticos y cierta fi-
brosis alrededor de estos vasos.
Debería de existir una correlación entre
las alteraciones morfológicas y las
bioquímicas y también desde el punto
de vista funcional lo que conllevaría que
lesiones morfológicas tuvieran su
repercusión a nivel de la función
hepática por un lado y por la relevancia
de esta víscera también con
repercusiones a otros niveles desde el
punto de vista metabólico180.
Por último considerar, que un estudio
experimental se realiza las valoraciones
causa-efecto en unas situaciones idea-
les de estudio y en animales sanos. Las
circunstancias de desarrollo de lesiones
a nivel de los diferentes órganos en los
pacientes adictos a la drogadicción, son
diferentes a las situaciones ideales de
experimentalidad, existiendo en los
primeros una variabilidad que hacen
que las repercusiones detectadas tanto
a nivel clínico, en su repercusión sin-
tomática y su expresión en las biopsias
hepáticas como en las autopsias, hacen
que circunstancias como diferente adic-
ción, pautas de drogadicción, tipos de
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
INTRODUCCION
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
137
drogas, combinación de diferentes dro-
gas, situación previa clínica de los dro-
gadictos, edad, patología concomitante,
hacen que nos muestren las repercusio-
nes no de una forma homogénea y sin
poder claramente discernir cuales son
los efectos puntuales de cada droga, la
correspondencia de dosis con el daño
celular y otros aspectos, por lo que se
hace imprescindible estudios que com-
binen la información de ambos aspectos
que nos delimiten claramente las reper-
cusiones de cada droga en cada órgano,
mostrando la importancia y entidad de
las mismas.
INTRODUCCION
CONCLUSIONES
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
CONCLUSIONES
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
139
1. Éxtasis y heroína son las drogas que mayor tasa de mortalidad han presentado en el estudio
2. El grupo de heroína el que mayor pérdida de preso ha mostrado
3. Las alteraciones evaluadas a nivel microscópico han sido muy poco definidas, en especial en los animales tratados con extasis y heroína, y poco relevantes en el de cocaína
4. Las valoraciones morfométricas en los grupos experimentales a nivel del hepato-cito no han sido muy relevantes. Los vasos sufrieron aumento del calibre en to-dos los grupos experimentales, lo que sugiere cierto grado de vasodilatación vas-cular. Los canalículos biliares y otras estructuras permanecieron con valores normales
5. Las alteraciones ultraestructurales hepatocíticas se han mostrado con destruc-ciones de las organelas, como posible reflejo del sufrimiento celular. Estas alte-raciones han sido más relevantes en el grupo tratado con heroína.
6. Se asegurar que las alteraciones a nivel hepático, no han sido excesivamente re-levantes en el estudio, en parte, alejadas a las aportadas en algunos estudios clínicos, por lo que consideramos que en estos últimos se han sumado otra serie de factores potenciadores.
7. Como valoración final, podemos asegurar por los datos derivados del estudio, que ha sido la heroína la droga que mayores daños ha producido a nivel del hígado seguido del extasis y de la cocaína.
BIBLIOGRAFIA
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
141
1. Aknine X.. Ecstasy-induced toxic hepatitis. Presse Med. 2004 23;33(18 Suppl):18-20.
2. Alford DP, Labelle CT, Kretsch
N, Bergeron A, Winter M, Botticelli M, Samet JH, Alvarenga TA, Andersen ML, Ribeiro DA, Araujo P, Hirotsu C, Costa JL, Battisti MC, Tufik S. Single exposure to cocaine or ecstasy induces DNA dam-age in brain and other organs of mice. Addict Biol. 2010;15(1):96-9
3. Alford DP, LaBelle CT, Kretsch N, Bergeron A, Winter M, Botticelli M, Samet JH. Col-laborative care of opioid-addicted patients in primary care using buprenorphine: five-year experience. Arch In-tern Med. 2011; 171(5):425-31
4. Alvarenga TA, Ribeiro DA,
Araujo P, Hirotsu C, Mazaro-Costa R, Costa JL, Battisti MC, Tufik S, Andersen ML. Sleep loss and acute drug abuse can induce DNA damage in multiple organs of mice. Hum
Exp Toxicol. 2011;30(9):1275-81
5. Antonilli L, Petecchia E,
Caprioli D, Badiani A, Nencini P. Effect of repeated admini-strations of heroin, naltrex-one, methadone, and alcohol on morphine glucuronidation in the rat. Psychopharmacol-ogy (Berl). 2005;182(1):58-64.
6. Arstila AJ, Jauregui HO, Chang
J, Trump BF: Iron metabolism and cell membranes. II The relationship of ferritin to the cytocavitary network en rat hepatic parenchimal cells. Am J Pathol. 1970; 58:419-49
7. Ayala I, Altieri PI. Cocaina in-
duced myocardial ischemia. PR Health Sci J 1993; 12(1): 73-5.
8. Badin de Montjoye B,
Podevin P, Pharo P. Absti-nence from cocaine after long-term addiction. Encephale. 2011;37(6):404-9
9. Bamber M, Murray A,
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
142
Arborgh BA, Scheuer PJ, Kernoff PB, Thomas HC, Sher-lock S. Short incubation non-A, non-B hepatitis transmit-ted by factor VIII concen-trates in patients with con-genital coagulation disorders. Gut. 1981; 22(10):854–9.
10. Barnes CD, Elthermington LG.
Drug dosage in laboratory animals. University of California. Press Berkely, 1973
11. Bartoloni Saint Omer F,
Montalto B, Chibaro G, Manfredini F. Hepatic histo-pathological aspects and hu-moral findings in drug ad-dicts: critical considerations on 37 cases. Recenti Prog Med. 1979 ;67(1):70-88
12. Beitia G, Cobreros A, Sainz L,
Cenarruzabeitia E. Ecstasy-induced toxicity in rat liver. Liver. 2000;20(1):8-15.
13. Bekheet SH. Morphine sul-
phate induced histo patho-logical and histochemical changes in the rat liver. Tis-sue Cell. 2010; 42(4):266-72
14. Bernachi AS, De Castro CR, De
Ferreyra FC: Effects of 3-amino 1,2,4 triazole administration on the early CCI induced ultrastructural alterations en rat liver. Br J Exp Pathol. 1982; 63,1: 35-42
15. Bertolini M. Screening, by
clinical observation, signs and symptoms of addiction to the use of general practice. Rev Med Suisse. 2011; 7(309): 1789-90
16. Blanck RR, Ream N, Conrad
M. Hepatitis B antigen and antibody in heroin users. Am J Gastroenterol. 1979;71(2): 164–7.
17. Bobes García J, Saiz
Mmartínez PA, Bascarán Fernández MT, Fernández Miranda JJ, López Rodríguez JL. Aproximación epide- miológica y tendencias del consumo de MDMA. Extasis. (MDMA): Un abordaje comprehensivo. Editorial Masson. Barcelona. 1998.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
143
18. Brncic N, Kraus I, Viskovic I, Mijandrusic-Sincic B, Vlahovic -Palcevski V. 3,4-methylen edi –oxyme thamphetamine (MDMA): an important cause of acute hepatitis. Med Sci Monit. 2006;12(11):CS107-9
19. Brooks FP, Deneau GA, Potter
P Jr, Reinhold JG, Norris RF. Liver function tests in mor-phine-addicted and in non addicted rhesus monkeys. Gastroenterology. 1963;44:287–90.
20. Brown C, Osterloh J. Multiple
severe complications from recreational ingestion of MDMA ('Ecstasy'). JAMA. 1987; 258(6):780–1.
21. Brown J, Setnik B, Lee K,
Wase L, Roland CL, Cleveland JM, Siegel S, Katz N. Assess-ment, stratification, and monitoring of the risk for prescription opioid misuse and abuse in the primary care setting. J Opioid Manag. 2011;7(6):467-83.
22. Brown R. "Heroin's Hell", The News Journal, 2006, pp. A1,A12.
23. Brust JC. Substance abuse
and movement disorders. Mov Disord. 2010; 25(13): 2010-20.
24. Burck HC.: Técnica histológica.
Ed. Paz. Montalvo. Madrid. 1969.
25. Buschmann RJ, Ryoo JW.
Hepatic structural correlates of liver fibrosis: a morpho- metric analysis. Exp. Mol. Pathol.1989, 50: 114-24.
26. Cameron JM, Robinson AE.
Pathology and toxicology of drug addiction: a combined approach.Med Sci Law. 1973;13(4):272-6.
27. Campelo EL, Caldas ED.
Postmortem data related to drug and toxic substance use in the Federal District, Brazil, from 2006 to 2008. Forensic Sci Int. 2010;200(1-3):136-40
28. Cascales M, Alvarez A, Gasco
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
144
P, Fernandez-Simon L, Sanz N, Bosca L. Cocaine-induced liver injury in mice elicits spe-cific changes in DNA ploidy and induces programmed death of hepatocytes. Hepatology. 1994; 20(4 Pt 1):992-1001.
29. Cecinato A, Balducci C, Gue-
rriero E, Sprovieri F, Cofone F. Possible social relevance of il-licit psychotropic substances present in the atmosphere. Sci Total Environ. 2011, 15;412: 87-92
30. Charles SJ, Powell CJ. Rapidly
developing cocaine-induced peripheral portal liver dam-age. Toxicol Lett. 1992; 64-65 Spec No:729-37.
31. Cheville NF: Cell pathology.
Iowa State University Press. Ames Iowa. 1978
32. Chiasson RB.: Laboratory
anatomy of the white rat. University of Arizona. Ed. Wim C. Brown. Company. 1980.
33. Colak Y, Tuncer I, Enc FY, Oz-turk O, Kiziltas S, Ulasoglu C. Ecstasy induced fatal hepatic failure. J Gastrointestin Liver Dis. 2011; 20(2):215-6
34. Cooper AD, Niejadlik D,
Huston K. Liver disease in nonparenteral drug abusers. JAMA. 1975; 233 (9):964-6
35. Copeland AR. The micro-
scopic pathology of the liver in fatal cocaine intoxication. J Forensic Sci Soc. 1989 ;29(3):185-9.
36. Cornette C, Serrar D,
Lallemant AM, Thevenin M. Modifications of the hepato-toxicity of cocaine on Swiss mice by various inhibitors. C R Seances Soc Biol Fil. 1985;179(3):320-6.
37. Crits-Christoph P, Johnson J,
Gallop R, Gibbons MB, Ring-Kurtz S, Hamilton JL, Tu X. A generalizability theory analy-sis of group process ratings in the treatment of cocaine de-pendence. Psychother Res. 2011; 14:1-15
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
145
38. Dal Monte PR, D'Imperio N,
Formica G, Giuliani-Piccari G, Marzot G, Milandri G, Piemontese A, Ruggieri M, Sarti F, Spongano P. Hepatic lesions in drug addiction.G Clin Med. 1981;62(2):83-92.
39. Darke S, Zador D. "Fatal
Heroin 'Overdose': a Review". Addiction 1996; 91 (12): 1765-72.
40. Darke S, Duflou J, Torok M.
Comparative toxicology of in-tentional and accidental her-oin overdose. J Forensic Sci. 2010;55(4):1015-8
41. David H. Morphogical tinding
from human and animal liver cells in phisiological and pathological conditions. Pathol. Res. Pract.1987, 182: 407-715
42. De la Fuente de Hoz L,
Rodríguez Arenas MªA, Vi-cente Orta J, Sánchez Payá J, Barrio Anta G. Epidemiología del consumo de drogas de diseño en España. Med Clin
(Barc) 1997; 108: 54-61.
43. De la Fuente L, Brugal MT, Domingo-Salvany A, Bravo MJ, Neira-Leon M, Barrio G. More than thirty years of il-licit drugs in Spain: a bitter story with some messages for the future. Rev Esp Salud Publica. 2006; 80(5):505-20.
44. De Letter EA, Stove CP, Lam-
bert WE, Piette MH. Post-mortem (re)distribution of 3,4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA, "ecstasy"): human and animal data. Curr Pharm Biotechnol. 2010; 11(5): 453-9
45. Deibler P, Haasen C, Reimer J.
Treatment of chronic hepati-tis C within a heroine-assisted treatment program. Dtsch Med Wochenschr. 2006; 131(50): 2835-7.
46. Demaria S Jr, Weinkauf JL.
Cocaine and the club drugs. Int Anesthesiol Clin. 2011; 49(1):79-101
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
146
47. Denborough MA, Lovell RRH. Anaesthetic deaths in family. Lancet, 1960; 2: 45.
48. Denborough MA. Hipertermia
maligna. Lancet (Ed. Esp). The Lancet, 1998; 352: 1131-6.
49. Devi BG, Chan AW. Cocaine-
induced peroxidative stress in rat liver: antioxidant enzymes and mitochondria. J Pharma-col Exp Ther. 1996; 279(1):359-66.
50. Devlin RJ, Henry JA. Clinical
review: Major consequences of illicit drug consumption. Crit Care. 2008;12(1):202
51. Edland JF. Liver disease in
heroin addicts.Hum Pathol. 1972;3(1):75-84.
52. Ellis AJ, Wendon JA, Port-
mann B, Williams R. Acute liver damage and ecstasy in-gestion. Gut 1996; 38(3): 454-58.
53. Elsharkawy AM, Oakley F,
Mann DA. The role and regu-lation of hepatic stellate cell
apoptosis in reversal of liver fibrosis. Apoptosis. 2005; 10(5):927-39.
54. Filimonov PN, Sukhenko TG,
Papantonopulo AN, Gavrilova NI, Shkurupii VA.Level of liver fibrosis and immune status of mice of different age after heroin treatment and long abstinence. Bull Exp Biol Med. 2005;140(6):723-5.
55. Fineschi V. MDMA (ecstasy)
toxicity: pharmacolinetic, me-tabolism, cell response and pathological consequences. Curr Pharm Biotechnol. 2010;11(5):411-2.
56. Finol HJ, Mondragon DD,
Gonzalez YM, Marquez A, Gonzalez N, Paradisi C. Hepa-tocyte ultrastructural altera-tions in cocaine users. J Sub-microsc Cytol Pathol. 2000;32(1):111-6.
57. Fogger SA. Update on ecsta-
sy. J Psychosoc Nurs Ment Health Serv. 2011;49(4):16-8.
58. Freeman RW, Harbison RD.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
147
Hepatic periportal necrosis induced by chronic admini-stration of cocaine. Biochem Pharmacol. 1981; 30(7):777-83.
59. Frone MR, Trinidad JR. Rela-
tion of supervisor social con-trol to employee substance use: considering the dimen-sionality of social control, temporal context of sub-stance use, and substance le-gality. J Stud Alcohol Drugs. 2012;73(2):303-10.
60. Gall C (September 3 2006).
Opium Harvest at Record Level in Afghanistan. New York Times - Asia Pacific. Retrieved on 2006.
61. Gerber MA, Thung SN.
Histology of the liver. Am S Surg. Pathol. 1987, 11: 709-22
62. Giannini A, Zampi G, Bartolini
F: Morphological precursors of hepatocellular carcinoma: a morphometrical analysis. Hepatogastroenterology. 1987; 34: 95-7
63. Gibson A, Randall D, Degenhardt L. The increasing mortality burden of liver dis-ease among opioid-dependent people: cohort study. Addiction. 2011; 106(12):2186-92
64. Gorodetzky CW, Sapira JD,
Jasinski DR, Martin WR. Liver disease in narcotic addicts. I. The role of the drug. Clin Pharmacol Ther. 1968 9(6):720–4.
65. Gottfried MR, Kloss MW,
Graham D, Rauckman EJ, Rosen GM. Ultrastructure of experimental cocaine hepato toxicity. Hepatology. 1986; 6(2):299-304.
66. Gregoire F, Schmerber J,
Vandermoten G, Verhas M. Medical pathology of heroin addiction. Prospective study. Acta Clin Belg. 1979; 34(6): 332-43.
67. Gugelmann HM, Perrone J.
Can prescription drug moni-toring programs help limit
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
148
opioid abuse? JAMA. 2011; 306(20): 2258-9
68. Hall PD, Ahern MJ, Javis LR,
Stoll P, Jenner MA, Hartey H: Two methods of assessment of methotrexate hepato- toxicity en patients with rhemmatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 1991, 50: 471-6 .
69. Hebel R, Stromberg MW.
Anatomy of the laboratory rat. Ed. The Williams and Wilkins Company.1976, 50-1.
70. Hendrikson H. The burden of
prescription drug overdoses on Medicaid. NCSL Legisbrief. 2012; 20(01):1-2.
71. Henry JA, Jeffreys KJ, Dawling
S. Toxicity and deaths from 3,4-methylen edioxy metham phetamine ("ecstasy"). Lan-cet. 1992; 340(8816):384–7.
72. Hillan KJ, Burt AD, George
WD, Mac Sween RN, Griffiths MR, Bradley JA. Intrasplenic hepatocyte transplantation in rats with experimental liver injury: morphological and
morphometric studies. J Pathol.1989, 159: 67-73 .
73. Hohl CM, de Lemos J, Abu
Laban RB. Emergency hospi-talizations for adverse drug events. N Engl J Med 2011; 366(9):858-9;
74. Horta RL, Horta BL, Rosset
AP, Horta CL. Crack cocaine users who attend outpatient services. Cad Saude Publica. 2011;27(11):2263-70
75. Hosztafi S. Heroin addiction.
Acta Pharm Hung. 2011; 81(4):173-83.
76. Ibranyi E, Schonleber J. Acute
liver failure caused by Ec-stasy. Orv Hetil. 2003 20; 144(29):1455-6.
77. Ilić G, Gligorijević J,
Milosavljević I, Karadzić R. Evaluation of morphological changes of the liver caused by heroin abuse in forensic practice. Medicinski fakultet, Zavod za sudsku medicinu, Nis, Srbija. Vojnosanit Pregl. 2010; 67(5):403-10
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
149
78. Ilic G, Karadzic R, Kostic-
Banovic L, Stojanovic J, Antovic A. Ultrastructural changes in the liver of intra-venous heroin addicts. Bosn J Basic Med Sci. 2010;10(1):38-43.
79. Imamura H, Kamasaki S, Shiga
J, Bandai J, Sanjo K, Idezuki Y. Quantitative evaluation of parenchymal liver cell volume and total hepatocyte number in cirrhotic patients. Hepatology. 1991; 14: 448-53
80. Iwasaki T, Ku Y, Saito Y, Ito H.
Morphometrical analysis of non-cancerous liver tissue with special reference to clinicopathological features of hepatocellular carcinoma. Nipon Geka Gakkai Zasshi. 1992; 93: 488-93.
81. Jiménez Pérez M, Marín
García D, Santaella Leiva I, Olmedo García R. Cocaine-induced hepatotoxicity. Med Clin (Barc). 2008; 130(7):279
82. Jones AL, Schmucker DL,
Mooney JS, Adler RD, Oockner RK. Morphometric analysis of rat hepatocytes after total biliar obstruction. Gastroenterology. 1976; 71: 1050-60.
83. Juhascik MP, Jenkins AJ.
Comparison of tissue homog-enate analytical results with and without standard addi-tion. J Anal Toxicol. 2011; 35(3):179-82.
84. Kanel GC, Cassidy W, Shuster
L, Reynolds TB. Cocaine-induced liver cell injury: Comparison of morphological features in man and in ex-perimental models. Hepatol-ogy 1990; 11(4): 646-51.
85. Karuper VJ. Some data on the
peripheral nervous system of the liver. Arkh. Anat. Histol. Embriol.1961; 41: 83-90.
86. Khakoo SI, Coles CJ, Arm-
strong JS, Barry RE. Hepato-toxicity and accelerated fi-brosis following 3,4-methylenedioxy metam-phetamine ("ecstasy") usage.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
150
J Clin Gastroenterol. 1995; 20(3):244-7.
87. Kiernan F. The anatomy and
physiology of the liver. Philos. Trans. R. Soc. (London) Biol 1983; 123: 711-70.
88. Kloss MW, Rosen GM,
Rauckman EJ. Acute cocaine-induced hepatotoxicity in DBA/2Ha male mice.Toxicol Appl Pharmacol. 1982; 65(1):75-83.
89. Kobeissy FH, Sadasivan S, Bu-
chanan M, Zhang Z, Gold MS, Wang KK. Methods in sys-tems biology of experimental methamphetamine drug abuse. Methods Mol Biol. 2010; 662: 303-16.
90. Labib R, Turkall R, Abdel-
Rahman MS. Endotoxin po-tentiates the hepatotoxicity of cocaine in male mice.J Toxicol Environ Health A. 2002; 65(14):977-93.
91. Labib R, Turkall R, Abdel-
Rahman MS. Oral cocaine produces dose-related
hepato- toxicity in male mice. Toxicol Lett. 2001;125(1-3):29-37.
92. Lange-Brock N, Berg T, Muller
AR, Fliege H, Neuhaus P, Wiedenmann B, Klapp BF, Monnikes H. Acute liver fail-ure following the use of ec-stasy (MDMA). Z Gastroen-terol. 2002; 40(8):581-6.
93. Lautt WW, Greenway CV.
Conceptual review of the hepatic vascular bed. Hepatology.1987; 7: 952-63.
94. Lautt WW, Legare DJ, Ezzart
WR. Quantitation of the hepatic Arterial Buffer response to graded changes in portal blood flow. Gastroenterology.1990; 98: 1024-8.
95. Liu C, Liu JK, Kan MJ, Gao L,
Fu HY, Zhou H, Hong M. Mor-phine enhances purine nu-cleotide catabolism in vivo and in vitro. Acta Pharmacol Sin. 2007; 28(8):1105-15
96. Logan AS, Stickle B, O'Keefe N, Hewitson H. Survival fol-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
151
lowing 'Ecstasy' ingestion with a peak temperature of 42 degrees C. Anaesthesia. 1993; 48(11): 1017–8.
97. López A, Gonzalez J, Vilches J,
Aparicio J: Caracteres morfoestructurales y morfométricos del hepatocito en la esteatosis experimental inducida por dieta. Rev Esp Ap Digest, 1986, 69,6: 493-500
98. Lotsof HS. Ibogaine in the
Treatment of Chemical Dependence Disorders: Clinical Perspectives. MAPS Bulletin 1995; V(3):19-26
99. Loud AV. A quantitative
stereological description of the ultrastructure of normal rat liver parenchymal cells. The Journal of Cel Biology. 1968; 37: 27-46.
100. Low O. Studies on quantitative morphology. XV. Morphometry of connective tissue in normal and cirrhotic rat livers between accuracy and working expense. Exp
Toxicol. Pathol.1992; 44: 158-60 .
101. Ma MH:
Ultrastructural pathologic findings of the human hepatocyte. Arch Pathol, 1972; 94:554-71
102. MacSween RNM,
Scothorne RJ. Developmental anatomy and normal structure. En: Mcsween, R. N. M. Ed. Pathology of the liver. Anthony P. P., Schenrer, P. J. Edimburgo, Churchill Livingstone., 1,31.1979.
103. Mak KM, Lieber CS.
Lipocytes and transitional cells in alcoholic liver disease: a morphometric study. Hepatology. 1988; 8(5): 1027-33
104. Marinković NS,
Malicević Z, Dimitrijević J. Ambient temperature impact on hepatocellular liver dam-age in rats following intake of 3,4-methylenedioxymethamphet
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
152
amine. Vojnosanit Pregl. 2011; 68(7):561-6
105. Martin WR, Fraser HF.
National Institute of Mental Health, Addiction Research Center, U. S. Public Health Service Hospital, Lexington, Kentucky. Journal of Pharmacology And Experimental Therapeutics 1961; 133: 388-99
106. Maruta T, Nihira M,
Tomita Y. Histopathological study on acute poisoning of methamphetamine, mor-phine or cocaine. Nihon Arukoru Yakubutsu Igakkai Zasshi. 1997; 32(2):122-38.
107. Marzuk PM, Tardiff K,
Leon AC, Hirsch CS, Portera L, Iqbal MI, et al. Ambiente temperature from uninten-tional cocaine overdose. JAMA, 1998; 279(22): 1795-1800.
108. Matturri L, Baver D.
Morphometric characteristics of hepatocellular dysplasia. Anal. Quant. Cytol. Histol.
1988; 10: 339-42.
109. Mayer EA, Bradesi S, Chang L, Spiegel BM, Bueller JA, Naliboff BD. Functional GI disorders: From animal mod-els to drug development. Gut. 2008; 57(3):384-404
110. Mehanny SZ, Abdel-
Rahman MS. Cocaine hepato-toxicity in mice: histologic and enzymatic studies. Toxi-col Pathol. 1991; 19(1):24-9.
111. Meyer MR, Maurer
HH. Metabolism of designer drugs of abuse: an updated review. Curr Drug Metab. 2010; 11(5):468-82
112. Milroy CM, Parai JL.
The histopathology of drugs of abuse. Histopathology. 2011; 59(4):579-93
113. Mohamed WM, Ben
Hamida S, Cassel JC, de Vas-concelos AP, Jones BC. MDMA: interactions with other psychoactive drugs. Pharmacol Biochem Behav. 2011; 99(4): 759-74
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
153
114. Momci S, Koga A:
Time-related morphological changes en cold-stored rat livers. Transplantation. 1990, 50: 745-50
115. Montiel-Duarte C,
Varela-Rey M, Oses-Prieto JA, Lopez-Zabalza MJ, Beitia G, Cenarruzabeitia E, Iraburu MJ. 3,4-Methylene-dioxy-metham- phetamine ("Ec-stasy") induces apoptosis of cultured rat liver cells.Biochim Biophys Acta. 2002; 1588(1):26-32.
116. Moonzwe LS,
Schensul JJ, Kostick KM. The role of MDMA (Ecstasy) in coping with negative life situ-ations among urban young adults. J Psychoactive Drugs. 2011; 43(3):199-210
117. Mothohashi I,
Okudaira M, Takai T, Kaneko S, Ikeda N: Morphological differences between hepato cellular carcinoma and hepatocellular carcinomalike lesions. Hepatology. 1992; 16:
118-26
118. Myers JA, Earnest MP. Generalized seizures and co-caine abuse. Neurology 1984; 34(5): 675-6.
119. Nagato J, Kondo F,
Kondo J, Ebara M, Ohto M. Histological and morphometrical indicators for a biopsy diagnosis of welldifferen tiated hepato cellular carcinoma. Hepatolosy. 1991; 14: 473-8.
120. Nakagawa Y, Suzuki T,
Tayama S, Ishii H, Ogata A. Cytotoxic effects of 3,4-methylenedioxy-N-alkyl-amphetamines, MDMA and its analogues, on isolated rat hepatocytes. Arch Toxicol. 2009; 83(1):69-8
121. Ndikum-Moffor FM,
Roberts SM. Cocaine-protein targets in mouse liver. Biochem Pharmacol. 2003; 66(1):105-13
122. Ness-Roberta B,
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
154
Grisso JA, Hirschinger N. Co-caine and tobacco use and the risk of spontaneous abor-tion. N Engl J Med 1999; 340: 333-9.
123. Nielsen JC, Nicholson
K, Pitzner-Jorgensen BL, Un-den M. Abuse of Ecstasy. Pharmacological, neuropsy-chiatric and behavioral as-pects. Ugeskr Laeger 1995; 157(6): 724-7.
124. Ninkovic M, Malicevic
Z, Selakovic V, Simic I, Vasil-jevic I. N-methyl-3,4-methyl –ene dioxy amphetamine-induced hepatotoxicity in rats: oxidative stress after acute and chronic administra-tion. Vojnosanit Pregl. 2004; 61(2):125-31
125. Novick DM, Stenger
RJ, Gelb AM, Most J, Yanco-vitz SR, Kreek MJ. Chronic liver disease in abusers of al-cohol and parenteral drugs: a report of 204 consecutive bi-opsy-proven cases. Alcohol Clin Exp Res. 1986; 10(5):500-5.
126. Novikoff PM,
Eldestein D: Reversal of orotic acid induced fatty liver en rats by clofibrate. Lab Invest, 1977; 36:215-31
127. Obolhdzer M, Christen
H, Ettlin R, Buser M, Oestreicher M. Gschwind R. Some fundamental aspects of morphometry in clincal pathology, demostrated on a simple, multipurpose analysis system. Anal. Quant. Cytol Histol. 1991; 13: 316-20.
128. O'Grady JG, Alexander
GJ, Hayllar KM, Williams R. Early indicators of prognosis in fulminant hepatic failure. Gastroenterology. 1989; 97(2): 439–45.
129. Olson KR, Benowitz
NL. Environmental and drug-induced hyperthermia. Pathophysiology, recognition, and management. Emerg Med Clin North Am. 1984; 2(3): 459–74.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
155
130. Owden R, Ellen M. Pharmaceutical Achievers. Philadelphia: Chemical Heritage Foundation, Philadelphia. 2002
131. Panos JJ, Baker LE.
Modulatory effects of low-dose MDMA on cocaine-induced locomotor activity and place conditioning in rats. Pharmacol Biochem Behav. 2012; 100(3):377-81
132. Passarino G, Ciccone
G, Siragusa R, Tappero P, Mollo F. Histopathological findings in 851 autopsies of drug addicts, with toxicologic and virologic correlations. Am J Forensic Med Pathol. 2005; 26(2):106-16.
133. Penning EJ, Konijn KZ,
de Wolff FA. Clinical y toxi-cologic aspects of the use of Ecstasy. Ned Tijdschr Geneeskd, 1998; 142(35): 1942-6.
134. Pesce A, West C,
Rosenthal M, Mikel C, West R, Crews B, Almazan P,
Latyshev S, Horn PS. Illicit drug use in the pain patient population decreases with continued drug testing. Pain Physician. 2011; 14(2):189-93
135. Petersen P: Glutaral-
dehide fixation for electron microscopy of deedle biopsies from human livers, Acta Path Microbiol Scand Sect A Pathol, 1977; 85:373-83
136. Porta EA, Manning C,
Hartroft WS: The lipotropic action of orotic acid. Arch Pathol, 1968; 86:217-29
137. Portmann B, Talbot IC
Day DW, Davidson AR, Murray-Lyon IM; Williams R: Histopathological changes en the liver following a paracetamol overdose: correlation with clinical and biochemical parameters. J Pathol. 1975; 117: 169-81
138. Pourahmad J,
Eskandari MR, Nosrati M, Kobarfard F, Khajeamiri AR. Involvement of mitochondri-al/lysosomal toxic cross-talk
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
156
in ecstasy induced liver toxici-ty under hyperthermic condi-tion. Eur J Pharmacol. 2010; 643(2-3):162-9
139. Powell CJ, Charles SJ,
Mullervy J. Cocaine hepato-toxicity: a study on the pathogenesis of periportal necrosis.Int J Exp Pathol. 1994 Dec;75(6):415-24.
140. Powers JF, Alroy J,
Shuster L. Hepatic morphol-ogic and biochemical changes induced by subacute cocaine administration in mice. Toxi-col Pathol. 1992; 20(1):61-70.
141. Prack G, Rosenstock J, Pohle W, Baumann H, May B. The incidence of liver dis-eases in juvenile drug addicts. Med Welt. 1979; 30(10):370-1
142. Ramcharan S, Meen-
horst PL, Otten JM, et al. Sur-vival after massive extasis overdose. J Toxicol Clin Toxicol 1998; 36(7): 727-31.
143. Rappaport AM, Borony
ZJ, Longheed WH, Loto WN. Subdivision of hexagonal liver lobul into a structural and functional unit: Role in hepatic physiology and pathology. Anat. Rec. 1954; 119: 11-34.
144. Rappaport AM. The
microcirculatory hepatic unit. Microvasc. Res. 1973; 6: 212.
145. Rasia-Filho AA, Giove-
nardi M, de Almeida RM. Drugs and aggression. Recent Patents CNS Drug Discov. 2008; 3(1):40-9.
146. Reichen J, Egger B,
Ohara N, Zeltner TB, Zysset T, Zimmerman A. Determinants of hepatic function in liver cirrhosis in the rat. Multivariate analysis. J Clin Invest.1988, 82: 2069-76.
147. Reingardiene D. Ec-
stasy toxicity. Medicina (Kau-nas). 2006;42(6):519-23.
148. Roberts SM, Roth L,
Harbison RD, James RC. Co-caethylene hepatotoxicity in mice. Biochem Pharmacol.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
157
1992; 43(9):1989-95.
149. Rofael HZ. Effect of ketamine pretreatment on cocaine-mediated hepatotox-icity in rats. Toxicol Lett. 2004; 152(3):213-22.
150. Romert P; Matthiessen
ME: Ultrastructural and morphometric study of hepatocytes from near-term minipig fetuses exposed to ethanol en vivo. Acta Anat. 1992; 143: 301-5
151. Rosenblate HJ, Eisen-
stein R, Baldwin D, Holmes AW. Nonviral hepatitis in drug addicts. Arch Pathol. 1973; 95(1):18–21.
152. Rosenblum WI;
Hadfield MG, Martines AJ, Schtzki P: Alteration of liver and spleen following intravenous infusion of fluorocarbon emulsions. Arch Path; 1977; 100:213-20
153. Roth JD. An anatomy
of addiction: Sigmund Freud, William Halsted, and the mir-
acle drug cocaine. J Am Psychoanal Assoc. 2011; 59(6):1281-6
154. Roth L, Harbison RD,
James RC, Tobin T, Roberts SM. Cocaine hepatotoxicity: influence of hepatic enzyme inducing and inhibiting agents on the site of necrosis. Hepatology. 1992; 15(5):934-40.
155. Rusyniak DE, Tandy
SL, Kamendulis LM, Sprague JE, Klaunig JE. The effects of ecstasy (MDMA) on rat liver bioenergetics. Acad Emerg Med. 2004; 11(7):723-9.
156. Salminen WF Jr,
Robers SM, Fenna M, Voellmy R. Heat shock pro-tein induction in murine liver after acute treatment with cocaine. Hepatology 1997; 25(5): 1147-53.
157. Sarin SK, Malhotra V,
Jiloha RC, Munjal GC, Anand BS. Liver in heroin smokers. J Assoc Physicians India. 1987; 35(6):421-4.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
158
158. Sasace S: Experimental
study of functional and mor-phological restoration follow-ing hepatic ischemia. Nip-pon.Geka. Gakkai. Zasshi. 1989; 90: 1899-906
159. Sato S, Mozumuna T:
Studies on lipid metabolism en rat fed on high fat and high carbohydrate diets with reference to the induction on fatty liver. Part II. Electron microscopic histochemistry. Tokushima J Exp Med, 1977; 24:105-12
160. Schellens JPM, Blange
T, De Groot K: Gap junction ultrastructure en rat liver parenchymal cells after en vi-vo ischemia. Virchows Arch B. 1987; 53: 347-52
161. Schifano F, Di Furia L,
Forza G, Minicuci N, Bricolo R. MDMA (ecstasy) consump-tion in the context of poly-drug abuse: a report on 150 patients. Drug Alcohol De-pend 1998; 52(1): 85-90.
162. Seal KH, Shi Y, Cohen G, Cohen BE, Maguen S, Krebs EE, Neylan TC. Associa-tion of mental health disor-ders with prescription opioids and high-risk opioid use in US veterans of Iraq and Afghani-stan. JAMA. 2012; 307(9):940-7
163. Seeff LB, Zimmerman
HJ, Wright EC, Schiff ER, Kier-nan T, Leevy CM, Tamburro CH, Ishak KG. Hepatic disease in asymptomatic parenteral narcotic drug abusers: a Vet-erans Administration collabo-rative study. Am J Med Sci. 1975; 270(1):41–7.
164. Shakleya DM, Kraner
JC, Kaplan JA, Callery PS. Me-thylation of 3,4-methyl ene dioxymethamphetamine in formalin-fixed human liver tissue. J Anal Toxicol. 2005; 29(7):715-7.
165. Shearman JD, Chap-
man RW, Satsangi J, Ryley NG, Weatherhead S. Misuse of ecstasy. BMJ. 1992; 305(6848):309–19.
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
159
166. Shen XY, Orson FM,
Kosten TR. Vaccines against drug abuse. Clin Pharmacol Ther. 2012; 91(1):60-70
167. Shewan D, Dalgarno
Ph Evidence for controlled heroin use? high levels of negative health and social outcomes among non-treatment heroin users in Glasgow. British Journal of Health Psychology 2005; 10: 33-48.
168. Shiloach E, Zecler E,
Horowiz M, Scapa E. Acute liver damage after using ec-stasy. Harefuah. 1998; 134(4): 266-9, 335.
169. Shuster L, Quimby F,
Bates A, Thompson ML. Liver damage from cocaine in mice. Life Sci. 1977; 20(6):1035-41.
170. Silva MO, Roth D,
Reddy KR, Fernandez JA, Albores-Saavedra J, Schiff ER. Hepatic dysfunction accom-panying acute cocaine intoxi-
cation. J Hepatol. 1991; 12(3):312-5.
171. Skaaring P, Bierring F. Funther evidence for the existence of intralobular nerves in the rat liver. Cell Tissve Res. 1977; 177: 287-90.
172. Sorense EM.
Validation of morphometric analysis procedure using indomethacin-induced alterations in cultured hepatocytes. Toxicol Lett. 1989; 45: 101-10.
173. Stoelting RK. Pharma-
cology and Physiology in An-esthetic Practice. 2nd ed., Philadelphia: JB Lippincott Company; 1991.
174. Sturgess JE, George
TP, Kennedy JL, Heinz A, Mül-ler DJ. Pharmacogenetics of alcohol, nicotine and drug addiction treatments. Addict Biol. 2010; 1369-600
175. Thomas J (May 2001).
Buprenorphine Proves Effective, Expands Options
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
160
For Treatment of Heroin Addiction (PDF). NIDA Notes: Articles that address research on Heroin 23. National Institute on Drug Abuse. Retrieved on May 5, 2006.
176. Trigueiro de Araujo
MS, Gerard F, Chossegros P, Guerret S, Barlet P, Adeleine P, Grimaud JA. Cellular and matrix changes in drug abuser liver sinusoids: a semiquantitative and mor-phometric ultrastructural study. Virchows Arch A Pathol Anat Histopathol. 1993; 422(2):145-52.
177. Trump BF, Jesudason
ML, Jones RT: Ultrastructural features of diseases cells. In Diagnostic electron microscopy. B.F. Trump and RT Jones . John Wiley and Sons. New York. 1978
178. Tsiquaye KN, Amini S,
Kessler H, Bird RG, Tovey G, Zuckerman AJ. Ultrastructural changes in the liver in ex-perimental non-A, non-B hepatitis. Br J Exp Pathol.
1981; 62(1):41–51.
179. Unguary G, Donath J. Innervation of the liver. Acta Anat.1969, 72: 446-59.
180. Valentine JL, Frem-
ming BD, Chappell RH, Stephen PM. Effects of ex-tended feeding of deco-cainized erythroxylon coca leaves on growth and se-lected organs in rats and rab-bits. Hum Toxicol. 1988; 7(1):21-6.
181. Van Beek-Verbeek G.
Het vóórkomen van hepatitis B-antigen en -antistoffen in het bloed van verslaafden aan drugs. Ned Tijdschr Geneeskd. 1979; 123(27): 1144–7.
182. Van LM, Swales J,
Hammond C, Wilson C, Har-greaves JA, Rostami-Hodjegan A. Kinetics of the time-dependent inactivation of CYP2D6 in cryopreserved human hepatocytes by me-thylenedioxymethampheta-mine (MDMA). Eur J Pharm
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
161
Sci. 2007; 31(1):53-61
183. Varga M Buris L: Some morphometric evidence of the hepatoprotec tive effects of cyanidol-3. Pharmacol. Biochem Behav. 1989; 33: 523-6
184. Visalli T, Turkall R,
Abdel-Rahman MS. Cocaine hepatotoxicity and its poten-tiation by lipo-poly-saccharide: treatment and gender effects.Int J Toxicol. 2004; 23(3):163-70.
185. Visalli T, Turkall R,
Abdel-Rahman MS. Plasma butyrylcholinesterase activity protects against cocaine hepatotoxicity in female mice. Toxicol Mech Methods. 2005; 15(6):383-9
186. Wada K. Epidemiology
of drug abuse and depend-ence. Nihon Rinsho. 2010; 68(8):1437-42.
187. Wanless IR, Dore S,
Gopinath N, Tan J, Cameron R, Heathcote EJ, Blendis LM,
Levy G. Histopathology of co-caine hepatotoxicity. Report of four patients. Gastroen-terology. 1990; 98(2): 497-501.
188. Weller IV, Cohn D, Si-
erralta A, Mitcheson M, Ross MG, Montano L, Scheuer P, Thomas HC. Clinical, bio-chemical, serological, histo-logical and ultrastructural features of liver disease in drug abusers. Gut. 1984; 25(4):417-23.
189. Westin AA, Brede WR.
Para-ethoxymethamphetamine. Tidsskr Nor Laegeforen. 2011; 131(20):208
190. Whaley WH, Galam-
bos JT. Race and risk of hepa-titis in narcotic addicts. Am J Dig Dis. 1973; 18(6):460–6.
191. Wiley JL, Evans RL,
Grainger DB, Nicholson KL. Locomotor activity changes in female adolescent and adult rats during repeated treat-ment with a cannabinoid or
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
162
club drug. Pharmacol Rep. 2011; 63(5): 1085-92
192. Wright CRA. On the
Action of Organic Acids and their Anhydrides on the Natural Alkaloids. Archived from the original on 2004-06-06. Note: this is an annotated excerpt of Wright, C.R.A. (1874). "On the Action of Organic Acids and their Anhydrides on the Natural Alkaloids". Journal of the Chemical Society 2003; 27: 1031-43.
193. Yamauchi H, Koyama
K, Otawa T, Ouchi K, Anezaki T, Sato T. Morphometric studies on the rat liver in biliary obstruction. Tohoku J Exp Med. 1976, 119: 9-25.
194. Yokell MA, Green TC,
Rich JD. Prescription drug monitoring programs. JAMA. 2012; 307(9):912; author re-ply 912-3.
195. Yoshizawa H, Itoh Y,
Iwakiri S, Kitajima K, Tanaka A, Nojiri T, Miyakawa Y, Ma-
yumi M. Demonstration of two different types of non-A, non-B hepatitis by reinjection and cross-challenge studies in chimpanzees. Gastroenterol-ogy. 1981;81(1):107–13.
196. Yoshizawa H, Itoh Y,
Iwakiri S, Kitajima K, Tanaka A, Tachibana T, Nakamura T, Miyakawa Y, Mayumi M. Non-A, non-B (type 1) hepati-tis agent capable of inducing tubular ultrastructures in the hepatocyte cytoplasm of chimpanzees: inactivation by formalin and heat. Gastroen-terology. 1982 r;82(3):502–6.
197. Zeppa P, Zabatta A,
Fulciniti F, Vetrani A, Di Benedetto G, De Rosa G, Palombini L: The role of morphometry en the cytology of well-diffentialed hepatocarcinoma and cirrhosis with atypia. Anal Quant Cytol Histol. 1988, 10: 343-8
198. Zheng D, de Vaca SC,
Carr KD. Food restriction in-creases acquisition, persis-tence and drug prime-
Estudio de los efectos de diferentes drogas de adicción a nivel del hígado. Valoración histológica,
ultraestructural y morfométrica ________________________________________________________________________
BIBLIOGRAFI
BIBLIOGRAFIA
Ana María Vaquero Saldaña. Tesis Doctoral
163
induced expression of a co-caine-conditioned place pref-erence in rats. Pharmacol
Biochem Behav. 2012; 100(3): 538-44