curva calibracion
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Universidad Técnica de Ambato
Facultad Ciencias e Ingeniería en Alimentos
Nombre. Pablo Aguiar
Semestre. Quinto U
Profesor. Lander Pérez
Ayudante.
Módulo. Análisis Instrumental
Tema.
Curva de Calibración
Resumen.
La formación de curvas de calibración es un proceso analítico que mide la concentración del
analito que para nuestro caso fue permanganato de potasio kMnO4 en función de la señal o
absorbancia, en nuestro caso se aplicó el método de los mínimos cuadrados y se realizó
reproducibilidad del método con 4 analistas diferentes obteniendo en todos los casos un alto
nivel de confianza, ya que el coeficiente de correlación fue de 0,976; 0,9864; 0,9878 y 0,9848
respectivamente.
Introducción.
Un procedimiento analítico muy utilizado
en análisis cuantitativo es el llamado de
calibración que implica la construcción de
una “curva de calibración”. Una curva de
calibración es la representación gráfica de
una señal que se mide en función de la
concentración de un analito. (Harris, 2001)
Incluye la selección de un modelo para
estimar los parámetros que permitan
determinar la linealidad de esa curva. y, en
consecuencia, la capacidad de un método
analítico para obtener resultados que sean
directamente proporcionales a la
concentración de un compuesto en una
muestra. La recta de calibrado se encuentra
definida por una ordenada al origen (b) y
una pendiente (m), mediante la ecuación
y = mx + b. (Miller, 2002)
Materiales y Método.
Espectrofotómetro, balón aforado, pipetas,
micro pipetas, disoluciones de
permanganato de potasio.
Se preparó disoluciones de permanganato
de potasio (0,0001, 0,00025, 0,0005,
0,00075 0,001 N) y se procedió a la
medición a 545 nm de su respectiva
absorbancia y transmitancia con la ayuda de
un espectrofotómetro, iniciando la medida
con un blanco, donde la absorbancia es
igual a 0 y la transmitancia es 100% y
posteriormente con las soluciones a analizar
y de esa manera realizar la gráfica
concentración vs absorbancia, realizando el
análisis por reproducibilidad.
Resultados y Discusión.
Tabla #1. Absorbancia y transmitancia de
las soluciones, analista 1
Concentración Absorbancia Transintancia
Volumen
(uL)
0,0001 0,591 25,6 25
0,00025 0,942 11,4 63
0,0005 1,486 3,3 125
0,00075 2,067 0,9 187
0,001 3,14 0,1 250 Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Gráfica #1. Concentración vs absorbancia,
analista 1
Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Tabla #2. Absorbancia y transmitancia de
las soluciones, analista 2
Concentración Absorbancia Transintancia
Volumen
(uL)
0,0001 0,594 25,5 25
0,00025 0,933 11,7 63
0,0005 1,513 3,1 125
0,00075 2,051 0,9 187
0,001 2,978 0,1 250 Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Gráfica #2. Concentración vs absorbancia,
analista 2
Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Tabla #3. Absorbancia y transmitancia de
las soluciones, analista 3
Concentración Absorbancia Transintancia
Volumen
(uL)
0,0001 0,609 24,6 25
0,00025 0,975 10,6 63
0,0005 1,517 3 125
0,00075 2,101 0,8 187
0,001 3,011 0,1 250 Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Gráfica #3. Concentración vs absorbancia,
analista 3
Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Tabla #4. Absorbancia y transmitancia de
las soluciones, analista 4
Concentración Absorbancia Transintancia
Volumen
(uL)
0,0001 0,599 25,2 25
0,00025 0,982 10,4 63
0,0005 1,524 3 125
0,00075 2,104 0,8 187
0,001 3,072 0,1 250 Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Gráfica #4. Concentración vs absorbancia,
analista 4
Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Tabla #5. Análisis de varianza, de acuerdo a
la absorbancia
Análisis de varianza de un factor
RESUMEN
Grupos Cuent
a
Sum
a
Promedio Var
ian
za
Columna 1 5 8,22
6
1,645 1,0
11
Columna 2 5 8,06
9
1,614 0,8
91
Columna 3 5 8,21
3
1,643 0,9
03
Columna 4 5 8,28
1
1,656 0,9
49
ANÁLISIS DE VARIANZA
Origen de las variaciones
Sum
a de
cua
dra
dos
Gra
dos
de
libe
rtad
Prom
edio
de los
cuadr
ados
F Pro
babi
lida
d
Val
or
críti
co
par
a F
Entre grupos
0,00
5
3 0,002 0,
0
0
2
1,00
0
3,23
9
Dentro de los grupos
15,0
16
16 0,939
Total 15,0
21
19
Elaborado por. Aguiar Pablo FCIAL, 2015
Los ensayos realizados sobre la gráfica de
la curva de calibración de la concentración
del permanganato de potasio (kMno4)
frente la absorbancia obtenida cumplieron
con la linealidad del método, ya que el
coeficiente de correlación obtenido por
reproducibilidad de cuatro analistas
diferentes poseen una alta confiabilidad
95%, siendo que desde el primer analista
hasta al cuarto analista se obtuvieron
valores de 0,976; 0,9864; 0,9878 y 0,9848
del coeficiente de correlación, además sus
respectivos valores correspondientes al
valor de la ordenada al origen se encuentra
entre 0,27; se puede decir que las
ecuaciones encontradas por los cuatro
analistas se encuentran con un buen nivel
de confianza en su linealidad y exactitud en
el método, además se puede decir los datos
de absorbancia no se encuentran demasiado
dispersos al tener valores de varianza
pequeños, sin embargo de acuerdo al valor
de coeficiente de variación encontrado se
puede decir que el analista 4 obtuvo los
valores más confiables, al observar que su
CV es el menor con relación a los otros tres.
Conclusiones.
Se elaboró una curva de calibración
relacionando la concentración del
permanganato de potasio con la absorbancia
de cada uno y se pudo concluir la existencia
de linealidad y exactitud en el método
empleado, al observar que los coeficientes
de correlación se encuentran en un nivel
muy cercano a cero.
Referencias.
Harris (2001). Análisis químico
cuantitativo, II edición, Reverté,
España
Miller (2002). Estadística y
Quimiometria para Química
Analítica”, 4ª edición, Editorial
Prentice Hall, España