1. Bio 225 Tcnicas de cultivo de tejidos Cuarto de cultivo 2. Equipos y materiales 3. Equipo Bsico de un laboratorio de Cultivo Celular 1. Campana de flujo laminar 2. Bao termostatizado 3. Incubador CO2 4. Autoclave 5. Nevera y Congelador 6. Microscopio Invertido 7. Microcentrifuga 8. Depsito de Nitrgeno lquido 4. Autoclave Cualquier recipiente, herramienta... Debe ser esterilizada 5. Autoclave El mtodo ms utilizado para esterilizar materiales es el autoclave (aproximadamente 121C, 1.0 bar, 15min). 6. Cabina de flujo laminar 7. Flujo laminar vertical, unidireccional rea segura para trabajar con partculas y aerosoles submicrn Aire pasa por filtro HEPA (High Efficiency ParticulateAir) Class II, Type A/B3 Class100 Federal Standard No. 209 partculas de 0.5 micron no exceda un conteo de 100 metros cbico 8. Cabina vertical 9. Flujo de aire 10. Cabina y flujo de aire 11. BBF 12. Tipos de Cabinas Proteger al operario de agentes patgenos o contaminantes del interior de la cabina Proteger el cultivo de patgenos o contaminantes externos o internos de la cabina Proteger el medioambiente de patgenos o contaminantes del interior de la cabina 13. Cabinas Segn importancia de la proteccin de estos tres elementos se distinguen cabinas de clase I, II y III Clase I: Protege al operario y al medioambiente (campanas de gases) Clase II: Protegen al operario, el cultivo y el medioambiente Clase III: Cabina de seguridad estanca para trabajo con agentes biolgicos de alto riesgo 14. Incubadora CO2 15. Incubadora de CO2 Esto son equipos que mantienen la temperatura, adems poseen un sistema de inyeccin de CO2 generalmente entre 4-7%, y finalmente controlan la humedad ambiente. El nivel de CO2 se ajusta para mantener equilibrio carbonato-bicarbonato del medio de cultivo. 16. Incubador CO2 Atmsfera controlada con elevada humedad y tensin de CO2 17. Incubadora CO2 18. Incubadora -roller 19. Roller - incubadora 20. Microscopio Invertido 21. Microscopio Invertido Fuente de luz y condensador estn sobre la platina . Apuntando hacia abajo Los objetivos estn debajo de la platina hacia arriba Permite observar organismos o tejidos sin preparacin previa Las observaciones se hacen a travs de diferentes recipientes con espesores y caractersticas pticas variables Los objetivos son adaptados para trabajar a largas distancias pero con magnificacin limitada 22. Microscopio invertido 23. Microscopio invertido de fase 24. Seguimiento del cultivo: viabilidad, multiplicacin, contaminacin. Control sobre cambios morfolgicos (efectos de hormonas, de tratamientos con medicamentos, de iones, interacciones, etc. 25. Tanque de nitrgeno lquido 26. Tanques de criogenia 27. Tanque de Nitrgeno lquido Congelacin de lneas estables 28. Contador de clulas 29. Contador de clulas 30. Micro Centrifuga Suspensiones celulares (lavados, concentrados, subcultivos) 31. Centrifuga 32. Metro de pH 33. Pipeteador automtico 34. Filtro sellado 35. Filtro para jeringuillas 36. Botellas y Placas de Cultivo 37. Botella de cultivo 38. Laminilla de cultivo 39. Puntos Importantes Esterilidad Asepsia Hbito de trabajo