contaminaciÓn alimentaria dioxinas · lancia y monitoreo en europa, ee.uu., japón, iberoamérica...
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l termino “dioxinas” es utilizadoen la legislación europea parareferirse a una familia de com-puestos relacionados entre sí desde
el punto de vista estructural y químico yque pertenecen al grupo de los llamadosContaminantes Orgánicos Persistentes(COP).
Esta familia está constituida por 75policlorodibenzo-p-dioxinas (PCDD) y135 policlorodibenzofuranos (PCDF),solo 17 de estos congéneres presentanriesgos toxicológicos. También se inclu-yen 12 bifenilos policlorados (PCB) que
poseen propiedades tóxicas similares alas de las dioxinas, conocidos con elnombre de “PCBs similares a lasdioxinas”.
El compuesto más tóxico es la 2,3,7,8tetraclorodibenzodioxina (TCDD) y es lamolécula que ha sido tomada de referenciapor la OMS para medir el “Factor de Equi-valencia Tóxica” (FET) de cada congénere.Los resultados analíticos se expresan enuna unidad cuantificable única conocidacomo la Concentración de EquivalentesTóxicos (EQT) respecto de la molécula deTCDD.
Control del riesgo: “desde lagranja hasta el tenedor”
El Comité Mixto FAO/OMS de Expertosen Aditivos Alimentarios (JEFCA) y elComité Científico de Alimentación Humanade la Unión Europea calcularon los nivelesde ingestión tolerables y los compararoncon las estimaciones de la ingesta. Llegarona la conclusión de que una proporciónconsiderable de la población puede superarla ingestión tolerable de dioxinas y “PCBssimilares a las dioxinas”. De estos resultadossurge la necesidad de adoptar estrictasmedidas de control a través de toda la
E
CONTAMINACIÓN ALIMENTARIACONTAMINACIÓN ALIMENTARIA
Dioxinase n l a C a d e n a A l i m e n t a r i a
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ticos obtenidos en los programas de vi-gilancia o monitoreo entre los diferentespaíses, es necesario que se sigan riguro-sos procedimientos operativos que con-sideren el muestreo, transporte, análisis,expresión e interpretación de resultados.
El Reglamento (CE) N° 1883 /2006 dela Comisión, de fecha 19 de diciembrede 2006, “establece métodos de muestreoy de análisis para el control oficial delos niveles de dioxinas y PCBs similaresa las dioxinas en determinados productosalimenticios”, dada la gran cantidad dealimentos a controlar, recomienda pri-mero seleccionar las muestras con nivelessignificativos de dioxinas y “PCBs si-milares a las dioxinas” utilizando unmétodo de screening con enfoque cuan-titativo. Este método debe ser de alta
productividad, con una validez demos-trada mediante estudios de validaciónque cumplan con los requisitos, partici-pación en ensayos interlaboratorios ycon acreditación ISO 17025.
Bioensayo DR CALUX® paradetección de dioxinas y PCBs
El bioensayo DR CALUX® (ChemicalActivated Luciferase Expression) de Bio-detection Systems es una metodologíaque emplea unas células de mamíferossensibles a las dioxinas en las cuales seha insertado el gen de luciferasa de laluciérnaga. Cuando estas células sonexpuestas a compuestos químicos, comolas dioxinas y similares, responden conla inducción de luciferasa, que en pre-sencia de su substrato produce una señalluminiscente proporcional a las respues-
cadena alimentaria, esto significa BuenasPrácticas Agrícolas (BPA), Buenas Prácti-cas de Alimentación Animal (BPAA), Bue-nas Prácticas de Fabricación (BPF), BuenasPrácticas de Almacenamiento (BPAL) yBuenas Prácticas de Laboratorio (BPL).
La única forma de controlar estos riesgosquímicos es con un buen sistema de tra-zabilidad que permita evaluar los riesgos,y mantener un Programa de Vigilanciapermanente. Estos monitoreos deben serefectuados en todos aquellos puntos dela cadena alimentaria que se haya evaluadoun posible riesgo, tanto de los procesosde producción en las plantas de alimentos,como riesgos propios de los insumos uti-lizados en la formulación.
Es importante destacar que para garantizarla comparabilidad de los resultados analí-
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Nuri Gras,Gerente Técnico Labser Ltda.
Peso (g) Límite UE LOQ Repetibilidad ReproducibilidadPCDD/F-OMS (%) (%)
Alimentos Humanos TEQ pg/g grasa
Aceites/grasas origen vegetal 7,0 0,75 0,14 18 32
Aceites/grasas origen animal 5,0 1,0 0,20 16 13
Productos lácteos 2-50 3 0,60 11 16
Huevos 17 3 0,60 10 21
Pescados 9 4 0,11 13 25
Aceite de pescado 3,5 2 0,28 26 14
Alimentos para animales
Vegetales * 9 0,75 0,11 11-19 13-26
Alimento de peces 9 2,25 0,11 14 27
Harina de pescado y otros similares 9 1,25 0,11 13 25
Aceite de pescado 1 6 1,0 26 14
Parámetros de Validación de la Técnica DR CALUX® en Alimentos
LOQ: Límite de Cuantificación, * ng TEQ/kg
Extracto muestra
Señal de luz proporcional a lacantidad de dioxinas y similares
presentes en la muestra.
Proteína Luciferasa
Luciferasa - ARNmElementos receptores de unión
Receptor
Luciferasa
Gen EndógenoEfecto Biológico
Mecanismo Molecular de la Técnica DR CALUX®
Figura 1
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tas de las células. La luminiscencia me-dida por un luminómetro es convertida enun valor de EQT por la comparación directade la respuesta para una muestra dada conuna curva dosis/respuesta obtenida con unestándar de 2,3,7,8-TCDD. La Figura 1muestra un esquema simplificado del sis-tema.
El ensayo DR CALUX® está validado paraentregar valores de EQT-OMS para PC-DD/F y para PCBs en diferentes matrices:
• Alimentos: carnes, peces, hígado, huevos,productos lácteos, aceites y grasas, tantoanimales como vegetales.
• Alimentación animal: alimentos balan-ceados, granos, cereales, harinas de origenanimal y vegetal, minerales, productosquímicos y otros.
• Tejidos y fluidos biológicos de origenanimal y humano.
• Muestras ambientales: suelos, sedimen-tos, emisiones de chimeneas, muestrasde aire, aguas superficiales y subterráneas.
Es una técnica rápida, las células son cul-tivadas en ciclo continuo y transferidas auna placa con 96 pocillos donde se mezclancon el extracto que contiene las dioxinasy/o “PCBs similares a las dioxinas”, pre-viamente extraídas de las muestras.
El ensayo DR CALUX® es altamentesensible y de gran exactitud, cumpliendocon los requerimientos técnicos y legalesde la Unión Europea para ser utilizado enanálisis de dioxinas en Programas Oficia-les de Vigilancia (en particular, con elReglamento (CE) N°1883/2006).
La implementación de esta técnica es deun costo relativamente bajo y de fácilmantención, siendo actualmente la técnicamás utilizada en los Programas de Vigi-lancia y Monitoreo en Europa, EE.UU.,Japón, Iberoamérica y en el Sudeste Asiá-tico. La rapidez y el bajo costo le permitenanalizar una gran cantidad de muestras y,solo aquellas muestras positivas con unvalor igual o superior al 75% del LímiteMáximo Permitido son enviadas a analizarpor el método confirmatorio.
El método confirmatorio es la cromato-grafía de gases de alta resolución acopladoa espectrometría de masas de alta resolu-ción (HRGC/HRMS). Esta metodología requiere de equipamiento e infraestructurade elevado costo y personal altamentecalificado, lo que lo hace un análisis muycaro y lento debido a la complejidad dela preparación de las muestras, no siendoadecuado para el monitoreo de grandescantidades de muestras y que requieranresultados rápidos.
El bioensayo DR CALUX® de BDS es latecnología de punta, más práctica y econó-mica para controlar la presencia de dioxi-nas en toda la cadena de producción dealimentos de origen animal.