Tipos de luz ptimas para el crecimiento de las plantas.

[Tipos de luz ptimas para el crecimiento de las plantas.]Practica N2

Tipos de luz ptimas para el crecimiento de las plantas.

Introduccin

La mayora de los grmenes de la leche elaboran reductasas que modifican el potencial de xido-reduccin de la misma. Para demostrar ese fenmeno basta aadir a la leche una sustancia que se decolore al pasar de la forma oxidada a la forma reducida. La rapidez con que cambia de color est en funcin de la poblacin bacteriana y, por ello, puede ser un ndice del grado de contaminacin de la leche. El colorante ms empleado es el azul de metileno, pero tambin se pueden utilizar la resazurina y el cloruro de 2, 3, 5, trifenil-tetrazolium, ya que son colorantes fcilmente absorbibles por las clulas vivas.En general se admite que la decoloracin es ms rpida cuanto mayor es el nmero de microorganismos en la leche. Sin embargo, las bacterias presentan distinta habilidad para reducir el azul de metileno, as el Streptococcus liquefaciens, los grmenes del grupo coliaergenos y los de la putrefaccin (Bacillus subtilis) se muestran muy activos. Las clulas somticas presentes en la leche tambin influye mucho en la velocidad de decoloracin, sobre todo los leucocitos.

Desarrollo ExperimentalA.-Determinacin del grado de contaminacin de la lecheLas enzimas reductasas presentes en las bacterias actan sobre los sustratos reducindolos. Una de estas enzimas, la deshidrogenasa lctica acta sobre la leche liberando iones de hidrogeno los cuales son captados por el azul de metileno. El tiempo que tarda una muestra de leche en decolorarse es un indicador de la presencia de bateras y del grado de contaminacin.Procedimiento1) Obtener 4 o ms muestra de leche de diferencia procedencia:-Leche de materna de canino refrigerada (tubo 3)-Leche materna de canino sin refrigerar (tubo 4)-Leche evaporada del es leche del estado (tubo 6)-Leche mater de ser humano (tubo 2)

2) Vierta 5cc de las muestras en 4 tubos diferentes3) Etiquetar cada tuvo con un nmero4) Adicione cuatro gotas de azul de metileno a cada tubo5) Ten cada tubo con el tapn estril preparado y colquelos en la estufa a 37C.-10:12 se coloco el azul de metileno

-10:15 Se coloco a la estufa a 37C2 pequeas grnulos3 Forma burbujas4 Cambio de color celeste6 no se observa ningn cambio

-10:302 hay tonalidades3 hay precipitaciones4 se condensa el azul de metileno6 sigue igual

-10:552 diferencia y tonalidades de colores3 espuma blanca celeste claro4 blanco con una franjita azul6 verdoso una espuma blanca

-11:304 Muy contaminado3 contaminado6 Poco contaminado2 no contaminado

Observaciones:En este experimento nos hemos podido que hay factores que hay factores que pueden afectar al tiempo de reduccin, entre ellos en tipo de microorganismos, el numero de leucocitos, el periodo ala exposicin a la luz, la cantidad de oxigeno disuelto y la tendencia del a leche a elevar los microorganismos hacia la superficie a medida que este se va separando la crema en el tubo de prueba.

B.-Identificacin de BacteriasUn mtodo de identificacin directa de las bacterias es la tincin Diferencial de Gram que permite identificar la morfologa de la clula bacteriana en coco y bacilos Gram positivos y Gram negativos segn la estructura des u pared celularLas gran positivas se tien de color violeta y las Gram negativas se tien de color rosado debido a las diferencias den la composicin de su pared celular.La pared celular est formada por peptidoglucano; la diferencia consiste en que la pared de las bacterias Gram positivas es gruesa y est formada por varias capas de peptidoglucano (aproximadamente 80%-90%) y algo de acido teicoico, mientras que la pared de la bacterias Gram negativas est formada por una sola capa delgada de peptidoglucano (hasta un 20%) y est rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolipido lipopolisacarid, y lipoprotenas.Hay otro grupo de bacterias denominados bacilos acido alcohol resistentes que son diferenciados utilizando la coloracin de Ziehl Nielsen, estas bacterias son resistentes a la decoloracin acida permaneciendo teidos de fucsia.

Procedimiento:1) Usamos el palito mondadientes obtenga nuestra muestra de sarro dental.2) Sobre una laminita porta-objetos extienda la muestra en movimiento circular.3) Fije la muestra al medio ambiente durante 54) Agregue unas gotas de violeta de genciana y djelo 1

5) Lave con agua corriente

6) Agregue unas gotas de Fucsina, djelo 1 .Luego lavar con agua corriente.

9) Secar al medio ambiente.10) Ponga una gota de aceite de inmersin

11) Identificar la muestra al microscopio

Observaciones:Presencia de bacilos Gram positivos largos y Gran negativos en la muestra de sarro dental.

Cuestionario1.- De acuerdo a su coloracin como se clasifican las bacterias?-Gram Positivo.-Gram Negativo.2.- Por qu se decoloran algunas muestras de leche?El potencial de oxido-reduccin (Eh) de la leche fresca aireada, el cual se debe principalmente al contenido de oxigeno disuelto en el producto, si por cualquier causa el oxigeno es separado el Eh disminuye .Esto ocurre cuando los microorganismos crecen en la leche y consumen el oxigeno. Si el numero de oxigeno es elevado en consumo de oxigeno ser mayor y por consiguiente el Eh caer rpidamente; si por el contrario, el numero de microorganismos es pequeo, el Eh disminuir lentamente.3.- Haga esquemas de todas sus observaciones.Esta tcnica nos permite diferenciar a dos grupos de bacterias que son las gram positivas y las gram negativas .Mediante la coloracin , en el caso de las gram poritivas las colonias se observaran color violeta, debido a su pared de peptidoglucano gruesa el colorante nose pierde al agregarle el alcohol acetona , en cambio en las gram negativas , debido a su pared delgada , este pierde con facilidad el colorante , por lo que al agregarle la fucsina esta ingresa y las colonias se observan de color rosada.Generalmente esta es una tcnica muy utilizada en el rea de salud ya que de acuerdo al coloracin gram podremos determinar que medio utilizar para aislar el microorganismo.En caso de los gran positivos mayormente son cocos, pero algunos bacilos tambin se encuentran en este grupo, como Bacillus.En el caso de los gram negativos tenemos a los que presentan forma bacilar conocidos como los BGN.

Ilustracin de la apariencia de cocos gram positivos y de bacilos gram negativos en diferentes estadiosdel procedimiento de tincin de Gram.

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