cocos gram +

4
Tinción de Gram Cocos Gram + Racimo Cadena Cocos Gram - Diplococos Aislar con: Sal Manitol Gelosa sangre S110 Baird Parker Vogel Jonson S. aureus. Lecitinasa por yema de huevo Hemolisis Agar Caldo Coagulasa Colonias amarillas = S. aureus S. aureus. Colonias rodeadas ade amarillo Catalasa Catalasa Catalasa Catalasa Catalasa Coagulasa Medio liquido Coagulasa Medio liquido Coagulasa Medio liquido Coagulasa Medio liquido Coagulasa + S. aureus - otros + S. aureus - otros + S. aureus - otros + Staphylococcus - otros Factor aglutinante Factor aglutinante Factor aglutinante Factor aglutinante Factor aglutinante Aislar con base de agar sin azucares reductores + liquidos organicos como sangre de carnero Sensibilidad a bacitracina . Agar BHI Sembrar masivamente CAMP . Gelosa sangre + azada de S. aureus Hidrolisis de hipurato (Hipuricasa) Azada perpendicular de muestra con Streptococcus Disco con 0.02-0.04U de bacitracina Crecimiento = Otros Hemolisis aumenteda en flecha = Grupo B Lancefield Hemolisis normal de S aureus = otros BHI (Caldo) + Hipurato Hupurato de sodio a benzoato y glicina Siembre e incubacion 24 h a 35°C Centrifuga sobrenadante a tubos de 13*100 #1) 0.8ml Para demostrar benzoato #2) 0.2ml Para demostrar glicina + 0.2ml FeCl3*6H2O (12%) + HCl (2%) Precipitado como cafe con leche = Grupo B lancefield No precipitado = otros +0.2ml ninhidrina 3.5% + acetona butanol (1:1) Morado = Grupo B Lancefield No morado = otros Escualinasa en presencia de bilis No crecimuento (Halo de 10 mm) = Grupo A Lancefield Gelosa nutritiva+4% bilis + 1% esculina + 1% citrato férrico (Revelador) Escualina a glucosa y esculetina (Dihidroxicumarina) la cual reacciona con citrato ferrico Precipitado negro = Grupo D Lancefield No precipitado = otros Crecimiento en NaCl 6.5% (Post escualinasa) + E. faecalis y halofilos - Otros Lancefield Extracción de carbohidrato C Cultivo + HCl 0.2N caliente Seleccionar antisuero según hemolisis α Anti-H Anti-K β Anti-A Anti-B Anti-C Anti-G NH Anti-D Llenar medio capilar con suero, y el resto con solución que tiene carbohidrato C tapar con plastilina e incubar 24 h Percipitado = + No precipitado = - Coaglutinación con cepa Cowan I de S. aureus Cultivo liquido (No necedsita extraer Carbohidrato C)+ S. aureus con Abs pegados sobre porta objetos (Principio de Lancefield) Incubar 2-3 minútos Precipitaco = + No precipitado = - Diplococo (Pneumococo) Sensibilidad a 5U de optoquina (Clorhidrato de etilhidrocupreina) Solubilidad en sales biliares al 10% por enzima autolítica L-alanina-muraminidasa "α" hemolisis La membrana pierde su selectividad Halo de inhibicion de 15mm = + No halo = - Tubo no turbio + Tubo turbio - Aislamiento con: Medios sencillos mayoría Gelosa sangre 50% de cepas de gonococos y meningococos (Base Hinton Mueller y base GC) Agar chocolate 65% de cepas de gonococos y meningococos (Base Hinton Mueller y base GC) Tayer Martin modificado con vancomicina,colistin, nistatin, trimetoprim y polienrriquecimiento. 92-93% de cepas, el resto puede ser sensible a vancomicina IsoVitaleX (Polienrriquecimiento) con VCN por lo cual deben y no contenerlo Neisseria y M. catarrhalis son aerobias estrictas y desarrollan en 24 h a 35°C. Gonococos y meningococos requieren 5-10% CO2 y desarrollan en 48h Colonia + N,N-dimetil p-fenielndiamina naftol incrementa la sensibilidad pero en azul no negro) Coloración negro o azul obscuro = + Sin coloración = -

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Identificación básica de cocos Gram +Bacteriología

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Page 1: Cocos Gram +

Tinción de Gram

Cocos Gram +

Racimo

Cadena

Cocos Gram - Diplococos

Aislar con:

Sal Manitol

Gelosa sangre

S110

Baird Parker

Vogel Jonson

S. aureus. Lecitinasa poryema de huevo

Hemolisis

Agar

Caldo

Coagulasa

Colonias amarillas= S. aureus

S. aureus. Coloniasrodeadas ade amarillo

Catalasa

Catalasa

Catalasa

Catalasa

Catalasa

Coagulasa

Medio liquido Coagulasa

Medio liquido Coagulasa

Medio liquido Coagulasa

Medio liquido Coagulasa+ S. aureus

- otros

+ S. aureus

- otros

+ S. aureus

- otros

+ Staphylococcus

- otros

Factor aglutinante

Factor aglutinante

Factor aglutinante

Factor aglutinante

Factor aglutinante

Aislar con base de agar sin azucares reductores +

liquidos organicos como sangre de carnero

Sensibilidad a bacitracina . Agar BHI Sembrar masivamente

CAMP. Gelosa sangre + azada de S. aureus

Hidrolisis de hipurato (Hipuricasa)

Azada perpendicular de muestra con Streptococcus

Disco con 0.02-0.04Ude bacitracina

Crecimiento = Otros

Hemolisis aumenteda en flecha = Grupo B Lancefield

Hemolisis normal de S aureus = otros

BHI (Caldo)+ Hipurato

Hupurato de sodio a benzoato y glicina

Siembre e incubacion24 h a 35°C

Centrifugasobrenadante a tubos de 13*100

#1) 0.8mlPara demostrar benzoato

#2) 0.2mlPara demostrar glicina

+ 0.2ml FeCl3*6H2O(12%) + HCl (2%)

Precipitado como cafe con leche = Grupo B lancefield

No precipitado = otros

+0.2ml ninhidrina 3.5% +acetona butanol (1:1)

Morado = Grupo BLancefield

No morado = otros

Escualinasa en presencia de bilis

No crecimuento (Halo de 10 mm) = Grupo A Lancefield

Gelosa nutritiva+4% bilis + 1% esculina+ 1% citrato férrico (Revelador)

Escualina a glucosa y

esculetina

(Dihidroxicumarina) la cual

reacciona con citrato

ferrico

Precipitado negro = Grupo D Lancefield

No precipitado = otros

Crecimiento en NaCl 6.5%(Post escualinasa)

+ E. faecalis y halofilos

- Otros

LancefieldExtracción de carbohidrato CCultivo + HCl 0.2N caliente

Seleccionar antisuerosegún hemolisis

αAnti-H

Anti-K

β

Anti-A

Anti-B

Anti-C

Anti-G

NH Anti-D

Llenar medio capilar con suero, y el resto con solución que

tiene carbohidrato Ctapar con plastilina e incubar 24 h

Percipitado = +

No precipitado = -

Coaglutinación con cepa Cowan I de S. aureus

Cultivo liquido (No necedsita extraer Carbohidrato C)+ S. aureus con Abs pegados

sobre porta objetos(Principio de Lancefield)

Incubar 2-3 minútosPrecipitaco = +

No precipitado = -

Diplococo (Pneumococo)

Sensibilidad a 5U de optoquina(Clorhidrato de etilhidrocupreina)

Solubilidad en sales biliaresal 10% por enzima autolítica

L-alanina-muraminidasa

"α" hemolisis

La membrana pierde su selectividadHalo de inhibicion de 15mm = +

No halo = -

Tubo no turbio +

Tubo turbio -

Aislamiento con:

Medios sencillos mayoría

Gelosa sangre 50% de cepasde gonococos y meningococos

(Base Hinton Mueller y base GC)

Agar chocolate 65% de cepasde gonococos y meningococos

(Base Hinton Mueller y base GC)

Tayer Martin modificado con vancomicina,colistin, nistatin,

trimetoprim y polienrriquecimiento.92-93% de cepas, el resto puede

ser sensible a vancomicina

IsoVitaleX (Polienrriquecimiento) con VCN por lo cual

deben y no contenerlo

Neisseria y M. catarrhalis son aerobias estrictas y desarrollan en 24 h a 35°C.

Gonococos y meningococos requieren 5-10% CO2 y desarrollan en 48h

Colonia + N,N-dimetil p-fenielndiamina(α naftol incrementa la sensibilidad

pero en azul no negro)

Coloración negro o azul obscuro = +

Sin coloración = -

Page 2: Cocos Gram +

Coagulasa0.5ml Plasma de conejo

o humano en tubo deensayo esteril

0.5ml dultivo liquido puro de 18-24hMezclar rotando tubo e

incubar a 37°CRealizar lectura cada 30min

Page 3: Cocos Gram +

Superficie bacterianaFactor aglutinante

o antes conocido comocoagulasa ligada

Sin mas factorespasa de fobrinogeno a fibrina

Mezcla de plasma + cultivo (En solucion isotonica esteril)

en portaobjetos

+ si hay precipitado en 20-30 seg.

- si no hay precipitado en 2-3 minutos

Page 4: Cocos Gram +

Cepa expuesta a 90-100°C por 15 minNucleasa Inocular agar para DNAsa Agregar 1ml de HCl 1N Esperar 3 minutos

+ S. aureus

- otros