caracteristicas mofologicas tomate

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Cultivos Tropicales, 2008, vol. 29, no. 1, p. 53-60

Key words: tomato, biodiversity, tomato yellow leaf curlgeminivirus, disease resistance

Palabras clave: tomate, biodiversidad, geminivirus rizadoamarillo tomate, resistencia a la enfermedad

INTRODUCCIN

Los recursos fitogenticos constituyen un acervogentico importante a manejar y explotar, de manera ra-cional, en la bsqueda de genes relacionados con la re-

CARACTERIZACIN AGROMORFOLGICA Y EVALUACINDE LA RESISTENCIA AL TYLCV EN NUEVOS GENOTIPOSDE TOMATE (Solanum lycopersicum L.) COMO APOYOAL PROGRAMA DE MEJORAMIENTO GENTICODE LA HORTALIZA PARA LA ENFERMEDAD

F. Dueas, Yamila Martnez, Marta lvarez, C. Moya, Belkis Peteira,Yailn Arias, Mara J. Diez, P. Hanson y T. ShagarodskyABSTRACT. One of the major viral pathogens of tomato(Solanum lycopersicum L.) crop in Cuba and many othercountries is the tomato yellow leaf curl virus (TYLCV), aBegomovirus from Geminiviridae family, which are transmittedby the whitefly Bemisia tabaci (Genn.). At present, plantbreeding for disease resistance or tolerance constitutes oneof the most promising ways to reduce damages caused by thisvirus, since most existing tomato seedlings are susceptible toit. This study evaluated the agromorphological characteristicsand resistance to TYLCV of eight tomato genotypesintroduced in our country. From the agromorphologicviewpoint, a phenotypical variability was detected in allmaterials evaluated. Except the susceptible control, everyaccession was asymptomatic to the virus; however, viralconcentrations were recorded just in some sampled plants ofthese accessions.

RESUMEN. Uno de los mayores patgenos virales del cultivodel tomate (Solanum lycopersicum L.) en Cuba y en variospases del mundo es el virus del encrespamiento amarillo de lahoja del tomate (TYLCV), Begomovirus de la familiaGeminiviridae, que es transmitido por la mosca blanca Bemisiatabaci (Genn.). Actualmente, el mejoramiento gentico para laresistencia o tolerancia a la enfermedad constituye una de lasvas ms promisorias para reducir los daos provocados por lavirosis en el cultivo, pues se conoce que gran parte de loscultivares de tomate existentes son susceptibles. En este tra-bajo se evaluaron las caractersticas agromorfolgicas y resis-tencia al TYLCV de ocho genotipos de tomate introducidos enel pas. Se detect, desde el punto de vista agromorfolgico,variabilidad fenotpica en todos los materiales evaluados. Aexcepcin del control susceptible, las accesiones caracteriza-das fueron asintomticas ante el virus, aunque se registraronconcentraciones virales en pocas plantas muestreadas de al-gunas de las accesiones vegetales.

Ms.C. F. Dueas, Investigador, Dra.C. Marta lvarez y Dr.C. C. Moya,Investigadores Titulares del Departamento de Gentica y Mejoramien-to Vegetal, Instituto Nacional de Ciencias Agrcolas (INCA), GavetaPostal 1, San Jos de las Lajas; Dra. C. Yamila Martnez, InvestigadoraTitular, Dra.C. Belkis Peteira, Investigadora Auxiliar y Yailn Arias,Reserva Cientfica del Departamento de Fitopatologa, Divisin de Pro-teccin de Plantas, Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA),Apartado 10, San Jos de las Lajas, La Habana, Cuba, CP 32700;Dra. Mara J. Diez, Profesora Titular del Centro de Conservacin yMejora de la Agrobiodiversidad Valenciana (COMAV), UniversidadPolitcnica de Valencia, Espaa; Dr. P. Hanson, Investigador de AsianVegetable Research and Development Center (AVRDC), Taiwn; Ms.C.T. Shagarodski, Investigador del Instituto de Investigaciones Fundamen-tales de la Agricultura Tropical (INIFAT), Cuba. [email protected]

sistencia a los factores biticos y abiticos que afectan alas especies cultivadas por el hombre. En el gneroSolanum spp., son numerosas las accesiones de espe-cies silvestres empleadas en la introgresin de genes deresistencia a factores estresantes, que dificultan el desa-rrollo de las especies cultivadas (1, 2).

El tomate (Solanum lycopersicum L.) constituye unade las principales hortalizas a nivel mundial despus dela papa (Solanum tuberosum L.) y en Cuba sus frutosgozan de gran aceptacin en la poblacin, ya sea paraser consumidos en fresco o como condimentos (3, 4, 5).

A pesar de su importancia, la explotacin comercialdel cultivo afronta numerosas dificultades en pases delas regiones productoras del mundo, debido a la suscep-tibilidad que presentan las variedades comerciales a pla-gas y enfermedades de origen viral, fngico y bacteriano (5).

El virus del encrespamiento amarillo de la hoja deltomate (TYLCV) es un geminivirus transmitido por la

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mosca blanca (Bemicia tabasi Genn.) (6) y una de lasmayores enfermedades del cultivo a nivel tropical ysubtropical del planeta, que abarca pases de los cincocontinentes (7, 8). Sus prdidas son valoradas hasta enun 100 % del rendimiento total, con un completo abando-no del cultivo por los productores (9).

En Cuba, se detect por primera vez la presencia deeste virus en plantaciones de tomate a partir de 1987 yen la dcada del 90 su presencia se hizo notar en todaslas regiones muestreadas de la isla (10). La etiologageminiviral de la enfermedad qued demostrada a travsde la caracterizacin molecular (11), la cual detect unelevado nivel de similitud entre el aislado circulante delvirus en la isla y el aislado presente en Israel.

Actualmente se cuenta en el pas con una variedad,Vyta, resistente al complejo mosca blancageminivirus,obtenida por la seleccin continua y rigurosa desarrolla-da en poblaciones segregantes de especies cultivadas ysilvestres de S. chilense (accesin LA 1969) x S.esculentum (12), la cual resulta insuficiente su explota-cin para apalear los efectos devastadores de la enfer-medad, pues se ha descrito la presencia de sntomasligeros en regiones donde es cultivada (13).

A pesar de los avances palpables que existen en losprogramas de mejora para la enfermedad, a nivel interna-cional se contina en la bsqueda de nuevas fuentes deresistencia gentica que superen las encontradas (14),orientada hacia las especies silvestres del gnero (1, 15).En la actualidad, se han descrito mecanismos anatmi-cos-fisiolgicos y genticos involucrados en la resisten-cia y/o tolerancia al virus. Los primeros se relacionan conrespuestas evasivas de la planta al vector, a travs desecreciones glandulares que presentan algunas accesio-nes silvestres relacionadas con la presencia de tricomasdel tipo VI y VII (16, 17). Los genticos han sido los msempleados, los cuales estn determinados por genescomo Ty-1 (18), Ty-2 (19) o poligenes y ms reciente-mente el gen Ty-3, detectado en una accesin de la es-pecie silvestre S. chilense (1, 14), todos involucrados enla resistencia y/o tolerancia a geminivirus.

Teniendo en cuenta las tendencias actuales de lamejora para la enfermedad a nivel mundial, el contar solocon una variedad resistente para el complejo mosca blan-ca-geminivirus portadora del gen Ty-1 en Cuba y la dispo-nibilidad existente, a nivel internacional, de nuevos mate-

riales genticos portadores de otros genes y/o mecanis-mos de resistencia, resultara interesante introducir otrosgenotipos resistentes a la enfermedad, caracterizarlos yutilizarlos en los nuevos programas de mejora genticapara TYLCV en el archipilago.

En relacin con los antecedentes enunciados y con-tando con nuevas accesiones introducidas, resistentes aotros aislados de TYLCV, se describen los objetivos fun-damentales de la presente investigacin, los cuales es-tn relacionados con la caracterizacin agromorfolgicade los nuevos materiales vegetales resistentes a otroslinajes del TYLCV y el anlisis de su comportamientoante el aislado viral circulante en Cuba, en condicionesde infeccin no controladas.

MATERIALES Y MTODOS

El material vegetal empleado en la investigacin fue-ron accesiones descritas como resistentes a aisladosvirales de TYLCV (Tabla I), donadas por el Centro de Con-servacin y Mejora de la Agrobiodiversidad Valenciana(COMAV) de la Universidad Politcnica de Valencia, Es-paa; el Asian Vegetable Research and DevelopmentCenter (AVRDC) de Taiwn y el Instituto de Investigacio-nes Fundamentales de la Agricultura Tropical (INIFAT) deCuba.

Los experimentos fueron efectuados en el perodode siembra ptimo para el cultivo (4), durante la campaade invierno (octubre, 2006-enero, 2007). Las evaluacio-nes se realizaron atendiendo al diseo de estos, los cua-les se describen a continuacin.Evaluacin agromorfolgica de los materiales vegetales.Se emplearon 10 plantas por accesin, las cuales sesembraron en un diseo completamente aleatorizado, encanteros de asbesto cemento al aire libre que contenanuna mezcla de suelo Ferraltico Rojo compactado(Ferralsol utrico), segn la Nueva Clasificacin Genticade los Suelos de Cuba (20) y cachaza en proporcin 3:1,emplendose una distancia de plantacin de 0,90 x 0,25 m.

Para la caracterizacin agromorfolgica se utiliz untotal de 20 caracteres; de ellos 15 cualitativos y cincocuantitativos del Instituto Internacional de RecursosFitogenticos (Tabla II), relacionados con los descriptoresde la planta y el fruto (21).

F. Dueas, Yamila Martnez, Marta lvarez, C. Moya, Belkis Peteira, Yailn Arias, Mara J. Diez, P. Hanson y T. Shagarodsky

Genotipos Genes que presenta Fuente de procedencia (pas)

Especie silvestre de donde proviene

Referencia Donante

Vyta Ty-1 Cuba S. chilense 11 INCA PIMHIR - Francia S. pimpinellifolium - COMAV Mex -121 A - Mxico S. pimpinellifolium 22 INIFAT TY-197 - Israel S. peruvianum 23 COMAV H 24 Ty-2 India S. habrochaites 24 AVRDC TY-1 Ty-1 Estados Unidos S. chilense - COMAV CLN2116B Ty-2 Taiwan S. habrochaites 25 AVRDC Campbell 28 - Estados Unidos - - INCA

Tabla I. Accesiones vegetales utilizadas, fuentes de procedencias y donantes

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A los resultados relacionados con los caracterescuantitativos se les comprob el cumplimiento de laspremisas necesarias del diseo experimental empleadoy se realiz un ANOVA de clasificacin simple, utilizn-dose para la interpretacin de estos resultados la pruebade Rangos Mltiples de Duncan para un 5 % de significa-cin estadstica.

Para una mejor interpretacin e integracin de losresultados de los caracteres evaluados, se realiz unanlisis de agrupamiento (Conglomerados Jerrquicos) apartir de una matriz de distancias Euclidianas, donde lasdeterminaciones cualitativas y cuantitativas fueronestandarizadas (26), para garantizar que todas las varia-bles tuvieran el mismo peso estadstico. De esta forma,los caracteres cualitativos codificados en forma binariase les asignaron valores de 0 y 1, donde generalmente elcero coincidi con la ausencia del carcter y 1 con lapresencia; se codificaron los caracteres cualitativos quesuponen diversos grados de expresin, dando el valor ceroal menor grado de expresin, uno al mayor y valoresfraccionarios a los grados intermedios. Por ltimo, loscaracteres cuantitativos fueron tratados de forma similar,con puntuacin de cero al valor mnimo y uno al mximo,siendo los valores intermedios codificados utilizando lasiguiente frmula: V (0-1)= (V(real)-V(mnimo))/(Rango),donde: V(0-1) es el nuevo valor comprendido entre 0-1;V(real) y V(mnimo) son los valores del carcter cuantita-tivo y su valor mnimo, respectivamente. El carcter for-ma del fruto se evalu como la relacin entre el dimetropolar y el ecuatorial. Los anlisis estadsticos se realiza-ron mediante el paquete estadstico SPSS versin 11.0sobre Windows.Evaluacin de la infeccin viral en condiciones de campoabierto. Para la evaluacin de la incidencia de virosis cau-sada por TYLCV, se emplearon los genotipos Campbell28 y Vyta como controles susceptibles y resistentes a laenfermedad, respectivamente.

Las semillas de todos los genotipos fueron sembra-das en cepellones con sustrato estandarizado (27) parafavorecer su germinacin. A los 25 das de nacidas, las

100 plantas de cada genotipo fueron transplantadas alrea experimental de la finca Las Papas, en un sueloFerraltico Rojo lixiviado (20), a razn de 25 plantas porgenotipo, con una distancia de 0.25 m entre plantas y1.40 m entre surcos, ubicndose surcos de la variedadCampbell 28 de forma intercalada entre los surcos de lasdistintas accesiones, con el objetivo de lograr una mayorpresin de inculo en toda el rea del experimento.

El diseo experimental empleado fue de Bloques alAzar, con un total de cuatro rplicas y una distancia en-tre bloques de 2 m. Para evaluar la incidencia degeminivirus en campo se emple una escala de snto-mas (23), para las 100 plantas de cada genotipo, durantecuatro tiempos diferentes de muestreo: 15, 30, 45 y 60das despus del transplante (DPT).

Los datos de los sntomas en las plantas fueron to-mados por dos observadores. A estos valores se les com-prob la no normalidad y homogeneidad de varianza, ancon las transformaciones de los datos realizadas, por loque se procesaron empleando la prueba no paramtricade Kuskal-Wallis, con el fin de obtener los valores de lasuma de rangos, ejecutndose con estos una prueba noparamtrica de Student-Newman-Keuls (SNK) para un 5 %de significacin, con el empleo del paquete estadsticoSPSS para Windows, versin 11.5.

Para detectar la presencia del TYLCV, desde el pun-to de vista molecular, se tomaron al azar, entre las cuatrorplicas, muestras de foliolos de 10 plantas de todo elmaterial vegetal en los mismos tiempos en que se realizla evaluacin de los sntomas. A las muestras colectadasse les extrajo el ADN y se les realizaron los anlisis dehibridacin de cidos nucleicos (HAN radioactivo), utili-zando para el marcaje sondas especficas de la reginintergnica del TYLCV (7).

RESULTADOS Y DISCUSIN

Los resultados de evaluar la muestra del materialvegetal, teniendo en cuenta los 20 caracteres analiza-dos, permitieron examinar la variabilidad agromorfolgica

Caracterizacin agromorfolgica y evaluacin de la resistencia al TYLCV en nuevos genotipos de tomate

Caracteres cualitativos Nomenclatura Caracteres cuantitativos Nomenclatura Color de hipoctilo CH Peso del fruto (g) PF Tipo de crecimiento TC Dimetro polar del fruto (mm) DPF Densidad del follaje DF Dimetro ecuatorial del fruto (mm) DEF Posicin de la hoja PH Nmero de lculos NL Tipo de hoja TH Nmero de frutos del segundo racimo NFSR Tipo de inflorescencia TI Color exterior del fruto CEF Hombros en el fruto HF Intensidad del hombro IH Forma del fruto FF Color exterior del fruto maduro CEFM Forma del hombro del fruto FHF Forma del corte transversal del fruto FCTF Forma de la cicatriz del pistilo FCP Forma del terminal de la floracin del fruto FTFF

Tabla II. Caracteres cualitativos y cuantitativos utilizados en la evaluacin agromorfolgica de los materiales

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existente entre las accesiones analizadas, donde se de-tectaron las diferencias fenotpicas relacionadas con elfruto y las caractersticas vegetativas de las plantas, ascomo las relacionadas con los componentes del rendi-miento (Tablas III y IV). Estos resultados pudieron estardados por diversas razones: pas de origen de las acce-siones caracterizadas, especies silvestres a partir de lascuales se obtuvieron los genotipos y la presencia degenotipos silvestres y cultivados.

En las accesiones se apreciaron diferencias en cuan-to al tipo de crecimiento: tres con crecimiento determina-do, dos con crecimiento semideterminado y tres con cre-cimiento indeterminado, estos ltimos condicionados porla expresin del gen dominante sp+ (28), que atendiendoal tipo de crecimiento que presentan los tomates cultiva-dos, pueden ser utilizados para uno u otros fines durantesu cultivo (29).

Se observ que los tipos de hojas fueron muy diver-sos, mostrndose una representacin de todos los tipos

descritos para las especies del gnero Solanum (21);asimismo se obtuvieron resultados diferentes para el ca-rcter densidad del follaje, mostrndose genotipos conmuy buena densidad que protegan muy bien a sus fru-tos, hasta en los que el follaje era escaso y sus frutosestaban ms expuestos a las condiciones adversas queles podra proporcionar el ambiente donde crecieron lasplantas.

Sin embargo, a pesar de la variabilidad morfolgicadetectada, se observ que, en todas las accesiones, pre-valeci la inflorescencia del tipo unpara, lo cual permitique se formaran racimos sencillos en las plantas de lasaccesiones vegetales caracterizadas.

Solamente dos de las accesiones evaluadas (Mex 121 Ay TY 197) presentaron hombros verdes en sus frutos. Enla actualidad, los frutos con estas caractersticas tienencierta aceptacin en el mercado, siempre y cuando nosea muy pronunciado y no est ligado a otros genes pre-sentes en muchas especies silvestres, que le transmitensabores desagradables al tomate cultivado (30).


Caracteres Accesiones PF DPF DEF NL NFSR Vyta 1000.13 b 48.50.07 c 63.00.13 a 3.60.22 d 3.60.16 c PIMHIR 40.10.15 f 41.30.05 d 44.20.05 d 2.80.24 e 3.70.21 c Mex-121 A 1.110.00 g 10.70.06 e 12.80.10 e 2.00.00 f 9.60.16 a TY 197 80.00.12 c 41.10.02 d 55.50.09 b 4.40.26 c 3.00.21 d H 24 70.10.13 d 39.90.15 d 56.00.61 b 6.40.16 a 3.50.16 c TY 1 60.30.12 e 54.40.06 a 44.00.05 d 2.40.21 ef 3.8 0.13 c CLN 2116 B 70.10.13 d 50.10.12 b 47.40.07 c 3.00.00 de 4.90.10 b Campbell 28 140.10.15 a 50.80.09 b 64.10.04 a 5.60.37 b 2.90.17 d

Tabla III. Resultados de la evaluacin de los caracteres cuantitativos empleados para la caracterizacin de losmateriales vegetales

Para cada genotipo, letras iguales no difieren significativamente para p0.05

Accesiones Caracteres Vyta PIMHIR Mex-121 A TY 197 H 24 TY 1 CLN 2116 B Campbell 28

CH Presente Presente Presente Presente Presente Presente Ausente Presente TC Determinado Indeterminado Indeterminado Semideterminado Determinado Indeterminado Semideterminado Determinado DF Intermedia Escasa Densa Densa Intermedia Escasa Escasa Densa PH Horizontal Horizontal Horizontal Semierecta Horizontal Colgante Horizontal Horizontal TH Estndar Estndar Pimpinellifolium Perubianum Estndar Estndar Papa Estndar TI Unpara Unpara Unpara Unpara Unpara Unpara Unpara Unpara CEF Verde claro Verde Verde oscuro Verde oscuro Verde claro Verde Verde Verde HF Ausente Ausente Presente Presente Ausente Ausente Ausente Ausente IH --- --- Fuerte Fuerte --- --- --- --- FF Ligeramente

achatado Redondeado Ligeramente

achatado Ligeramente achatado

Achatado Redondo alargado

Redondo alargado Ligeramente achatado

CEFM Naranja Naranja Rojo Naranja Naranja Naranja Naranja Naranja FHF Moderadamente

hundida Ligeramente hundida

Aplanada Ligeramente hundida

Ligeramente hundida

Aplanada Ligeramente hundida

Moderadamente hundida

FCTF Redonda Redonda Redonda Redonda Redonda Angular Redonda Redonda FCP Estrella Punto Punto Estrella Estrella Punto Punto Estrella FTFF Aplanada Aplanada Aplanada Aplanada Aplanada Puntiaguda Aplanada Aplanada

Tabla IV. Resultados de la evaluacin de los caracteres cualitativos empleados para la caracterizacin de losmateriales vegetales

Para cada valor, letras iguales no difieren significativamente para p0.05

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Se distinguieron diferentes tipos de frutos: ligeramen-te achatados, redondeados, achatados y ligeramente alar-gados. Se debe destacar que la variedad Vyta presentfrutos ligeramente aplanados y de poca altura, lo que secorresponde con las dos formas tradicionales que se hanobservado en el pas: Placero y Cimarrn, los que pro-bablemente fueron introducidos en Cuba antes o a princi-pios de la conquista (5).

Se pudo constatar que, en las accesiones estudia-das, los caracteres cuantitativos se mostraronsignificativamente variables. La masa promedio estuvocomprendida entre 1,11 y 140,1g; para los frutos de ma-yor tamao se observ un mayor nmero de lculos (H 24,Campbell 28 y Vyta), mientras que las accesiones res-tantes se caracterizaron por presentar menor nmero delculos y menor tamao de sus frutos. Al respecto, se hasealado que los frutos con mayor nmero de lculostienen mayor presencia en la mesa, lo que los hace msaptos para el consumo fresco (30).

Asimismo, otros indicadores, como la forma de lacicatriz del pistilo, se mostraron variables, predominandola forma en punta para los frutos de menor peso y la es-trellada para los frutos de mayor peso, nmero de lculosy tamao.

La accesin Mex-121 A, perteneciente a S. pimpinellifolium,present un crecimiento indeterminado, con hombro ver-de y aplanado, frutos rojos con dimetros inferiores a15 mm, hojas tpicas de la especie, as como flores conpistilos exertos, fenmeno tpico de las especies silves-tres del gnero donde la alogamia existe como sistemareproductivo (31). El anlisis de agrupamiento mostr laformacin de tres grupos bien diferenciados (Figura 1).

El grupo I estuvo conformado por los genotipos Vyta,Campbell 28 y H-24 y el grupo II por las accesionesPIMHIR, CLN 2116 B y TY 1, donde las diferencias mos-tradas por ambos estuvo dada principalmente por la for-ma y el tamao que presentaron los frutos de los mate-riales evaluados y el tipo de crecimiento que presentaronlas plantas.

Para las accesiones que conformaron el grupo III (Mex-121 A y TY 197), las diferencias estuvieron dadas porpresentar hombros verdes en sus frutos, carcter que loshizo diferentes del resto de los materiales vegetales eva-luados que conformaron los grupos I y II.

Atendiendo a los resultados alcanzados, durante lacaracterizacin agromorfolgica de los materiales evalua-dos, se pudo apreciar cierto grado de diversidad fenotpicaen cada uno de ellos, lo cual resultara interesante paraser utilizados como posibles parentales en losposprogramas de mejoramiento gentico de la hortaliza (4).

Durante el diagnstico visual de los sntomas solose detect, como genotipo muy susceptible, a la varie-dad Campbell 28, mientras que para las nuevas accesio-nes y la variedad Vyta, no se observaron los sntomastpicos de la enfermedad (Tabla V), pues los foliolos delas hojas ms apicales siempre mantuvieron su colora-cin verde y no se apreci en las plantas el amarillamientoni la rugosidad provocada por la sintomatologa tpica delos geminivirus (32, 33).

Tabla V. Valores obtenidos en los materiales vegetalesa partir de los datos de sntomas tomadosde las muestras y el anlisis de HANradioactivo

Para cada genotipo, letras iguales no difieren significativamentepara p 0.05S: escala de sntomas detectadaNo.: Nmero de plantas con TYLVC, segn los resultados de lahibridacin


Figura 1. Dendrograma formado a partir de la matriz de valores de los resultados de las evaluacionesagromorfolgicas realizadas

Das de muestreo y evaluacin de las plantas Accesiones 15 (S/No.) 30 (S/No.) 45 (S/No.) 60 (S/No.) No. total

de plantas Vyta 0 b / 0 0 b / 0 0 b / 2 0 b / 4 6

PIMHIR 0 b / 0 0 b / 0 0 b / 1 0 b / 5 6 Mex-121 A 0 b / 1 0 b / 1 0 b / 0 0 b / 3 5

TY 197 0 b / 0 0 b / 0 0 b / 1 0 b / 2 3 H 24 0 b / 0 0 b / 0 0 b / 0 0 b / 0 0 TY 1 0 b / 0 0 b / 0 0 b / 1 0 b / 0 1

CLN 2116 B 0 b / 0 0 b / 0 0 b/ 0 0 b / 0 0 Campbell 28 1.19 a / 2 2.11 a / 2 3.11 a/ 9 3,72 a/ 10 23

1Vyta

Campbell 28

H 24

2PIMHIR

CLN2116B

TY 1

Mex 121 A

TY 1973

0--------------------5----------------------10----------------------15------------------20-------------------25

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A los 15 das de muestreadas las plantas de la varie-dad Campbell 28, ya presentaban los sntomas tpicosde la enfermedad, los cuales fueron acentundose en eltiempo, de manera tal que a partir del segundo muestreofueron significativamente ms severos y en una escalams avanzada (Tabla VI), atendiendo a las valoracionesde severidad y sintomatologa de los geminivirus para elcultivo (23). Similares resultados han sido obtenidos du-rante la evaluacin de cultivares de tomate portadores degenes de resistencia al TYLCV, en la regin oriental deCuba, donde la variedad Campbell 28 mostr sntomasacentuados desde los primeros das despus de realiza-do el transplante (34).

Tabla VI. Sintomatologa expresada por la variedadCampbell 28 ante la infeccin causada porgeminivirus en campo en las diferentes eta-pas en que se realiz el muestreo

Para cada valor, letras iguales no difieren significativamente parap0.05

La variedad Vyta no present sntomas en ningunode los tiempos evaluados, lo cual corrobor su carcterresistente ante la enfermedad as como el empleo acer-tado de esta variedad como progenitor en los programasde mejoramiento para la resistencia al TYLCV (12); sinembargo, en un experimento desarrollado en cuatro reasproductoras de tomate de la provincia Granma (13), parala evaluacin de la resistencia de esta variedad ageminivirus, se detect la presencia de sntomas ligerosen plantas muestreadas durante su cultivo, los cualesaparecieron despus del perodo crtico (entre 35 y 50 dasdespus del transplante) de sembrado el cultivo.

El fenotipo asintomtico expresado por la accesinH 24 se corresponde con los resultados frente al TYLCVTw(aislado de Taiwn), durante evaluaciones en parcelasexperimentales del AVRDC (35). Sin embargo, en estu-dios de resistencia al virus en campos de tomates, enGuatemala, se observ que la lnea se comportaba comoun genotipo susceptible ante las especies o linajes debegomovirus bipartitos del pas (8).

Los resultados del genotipo H 24 y CLN 2116 B tam-bin se relacionan con lo divulgado por el AVRDC deTaiwn, donde se enunci que este genotipo porta genesque le confieren tolerancia a algunos linajes de TYLCVpresentes en el mundo, como son los de Taiwn, nortede Vietnam, sur de la India e Israel, no as para los linajesdel norte de la India, Tailandia, Filipinas y Amrica Cen-tral (36). No obstante, los programas de mejora genticadel tomate han empleado este genotipo como portadordel gen Ty-2, en la creacin de materiales resistentes delAVRDC de Taiwn (25, 36), donde corporaciones asiti-cas de produccin de semillas hbridas han utilizado di-

cho gen en los nuevos materiales que salen al mercadointernacional (37).

Para el caso de la accesin PIMHIR, los resultadosse corresponden con el comportamiento expresado antelos linajes de TYLCV presentes en Espaa.

En relacin con la lnea TY 197 (8), en un estudio deresistencia y obtencin de nuevos materiales genticoscon resistencia al complejo de begomovirus bipartitospresentes en Guatemala, se observ un buen comporta-miento y ausencia de sntomas ante la incidencia de losgeminivirus, de esta regin en este material, lo cual secorrobora con los resultados de este trabajo. Estegenotipo, adems, ha sido utilizado en los trabajos deresistencia a geminivirus, presentes en Brasil (38), don-de observaron un buen comportamiento de todas las plan-tas luego de ser inoculadas cuatro semanas con moscablanca, de forma controlada, lo cual les indic que estematerial constitua una buena fuente de resistencia a losaislados circulantes en el pas.

El gen Ty-1 ha sido sin dudas uno de los ms estu-diados y empleados en los programas de mejoramientogentico del tomate a geminivirus a nivel internacional,pues ha mostrado un gran espectro de resistencia antevarios aislados del virus prospectados en diversas regio-nes del mundo (39).

En Cuba, este gen fue aprovechado por el programade mejoramiento gentico de tomate del Instituto de In-vestigaciones Hortcolas Liliana Dimitrova, donde a tra-vs de introgresiones realizadas del gen Ty-1 en genotipossusceptibles, se obtuvieron lneas resistentes al comple-jo mosca blanca-geminivirus, hasta obtener con gran ge-neralizacin en zonas productoras del pas la variedadcomercial Vyta (12, 40), la cual ha sido empleada comocontrol resistente a TYLCV y en los programas de mejo-ra gentica e incorporacin del gen Ty-1 a variedades deinters comercial (41).

Los resultados de la lnea TY-1 coinciden con losplanteamientos, por lo que constituir un material intere-sante a explotar en funcin del mejoramiento varietal y laobtencin de nuevos materiales que se comportengenticamente resistentes al virus y con caractersticasagromorfolgicas de inters comercial.

Tambin result interesante observar que el comporta-miento asintomtico expresado por el genotipo Mex-121 Acoincidi con las descripciones realizadas en la caracte-rizacin de una coleccin del gnero Solanum en Cuba,donde se observ que por dos aos consecutivos (2003-2004), este genotipo no present las afectaciones ni lasintomatologa tpica expresada por la accin del TYLCVen las plantas muestreadas (22).

El anlisis por hibridacin de cidos nucleicos mos-tr que en las accesiones portadoras del gen Ty-2 (H 24 yCLN 2116 B), no se detectaron replicaciones del virusdurante los tiempos en que se efectu el muestreo (Tabla V).En los genotipos Vyta, PIMHIR, Mex-121 A, TY 197 y TY 1se detectaron entre una y seis plantas con replicacionesde TYLCV, mientras que la variedad Campbell 28 presen-t el mayor nmero de plantas con concentraciones virales.


Variedad Das de la evaluacin Valor 15 das despus del transplante 1.19 d 30 das despus del transplante 2.11 c 45 das despus del transplante 3.11 b Campbell 28

60 das despus del transplante 3.72 a

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La combinacin de los resultados del anlisis porsintomatologa y la hibridacin de cidos nucleicos detodos los genotipos, permiti confirmar que la variedadCampbell 28 mantiene su carcter susceptible ante laenfermedad y los materiales restantes expresaron uncarcter resistente ante el virus en estas condiciones deinfeccin, donde el insecto vector se encuentra distribui-do de forma ms heterognea o no se encuentra en can-tidades suficientes y el escape para la infeccin podraser mayor, considerando resistentes a genotipos que nocumplen con este criterio de evaluacin (42), por lo queresultara interesante retar estos materiales clasificadoscomo resistentes a travs de una infeccin mediada pormosca blanca o Agrobacterium ante el aislado cubanode forma controlada.

La hibridacin de cidos nucleicos ha sido una he-rramienta empleada en diversos programas de mejoragentica del tomate a nivel internacional, permitiendo eldiagnstico y la estimacin de las concentraciones viralesde los materiales evaluados (43). En Cuba, los resulta-dos de las aplicaciones de este mtodo en el diagnsticoy control del TYLCV han constituido una metodologa,que ofrece ventajas en el procesamiento masivo de mues-tras vegetales, con bajos riesgos de contaminacin en elanlisis y elevada especificidad (44, 45). Con los resulta-dos se demostr, una vez ms, la condicin susceptibledel cultivar Campbell 28 ante TYLCV y se corrobor laseleccin aceptada de emplear este genotipo como con-trol positivo al virus. Comportamientos similares se hanpresentado en experimentos realizados con plantastransgnicas a TYLCV (7) y en el mejoramiento genticode tomate a Begomovirus en Cuba (12, 41).

Teniendo en cuenta estos resultados, se pudo referirque los materiales vegetales introducidos se adaptaron anuestras condiciones edafoclimticas, expresando unadiversidad agromorfolgica en la caracterizacin realiza-da. Se confirm, adems, el comportamiento de estasaccesiones ante el aislado de TYLCV circulante en Cuba,donde la combinacin de las tcnicas de diagnstico si-guen constituyendo una herramienta necesaria para losprogramas de mejoramiento gentico de las enfermeda-des en plantas.

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Recibido: 16 de octubre de 2007Aceptado: 17 de abril de 2008


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