bioquimica y farmacia de biblioteca...títulos de la facultad de farmacia y bioquímica de la...

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DEDICATORIAS

A DIOS

Por bendecir cada paso que doy, por enseñarme a valorar la vida, la salud y el amor

por el prójimo, por darme la fuerza necesaria para salir adelante a pesar de las

dificultades.

A MIS PADRES

Gracia y Wilfredo, por depositar su confianza en mí, por brindarme su apoyo

incondicional, por su amor infinito, por luchar cada día por mi bienestar y felicidad.

A MI ABUELITA

Mamá Julita, por enseñarme el amor por Dios que es el más grande y maravilloso,

por su amor y cuidado de siempre, por ser mi segunda madre.

Marjory



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A DIOS

Por bendecir cada instante de mi vida, por enseñarme a valorar la salud y el amor

por las personas que tenemos a nuestro lado y darnos las fuerzas necesarias para

salir airoso de cada dificultad que se presente en la vida.

A MIS PADRES

Rosalía y Eulalio, por apoyarme y depositar toda su confianza en mi por depositar su

confianza en mí, por brindarme su apoyo incondicional, por su amor infinito, por

luchar cada día por mi bienestar y felicidad.

A MI HERMANO

Williams, por enseñarme el camino a seguir en este mundo de dificultades y sobre

todo su apoyo incondicional en las buenas y malas.

Roosevelt



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JURADO CALIFICADOR

Dr. Segundo Guillermo Ruiz PRESIDENTE

Dr. Edmundo Venegas Casanova MIEMBRO

Dr. José Gavidia Valencia MIEMBRO



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PRESENTACIÓN

SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR:

De conformidad con las disposiciones legales y vigentes de reglamentos de Grados y

Títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de

Trujillo – La Libertad, sometemos a vuestro elevado criterio el presente trabajo de

investigación titulado:

Características farmacognósticas de las hojas de Alternanthera lanceolata (Benth.)

Schinz “lancetilla” proveniente del distrito de Urpay provincia de Sánchez Carrión

región La Libertad.

Se propicia esta oportunidad para manifestar el más profundo agradecimiento a

nuestra Alma Mater y a toda su plana docente, por su meritoria labor de educadores y

por la formación profesional que nos han brindado a través de sus enseñanzas.

De manera muy especial agradecemos la valiosa colaboración de los señores

miembros del jurado.

Dejamos de vuestra consideración Señores Miembros del Jurado, la respectiva

calificación del presente informe.

Trujillo, Enero del 2016

________________________ ________________________

Ramos Carrión, Marjory Rocio Solórzano Ramos, Roosevelt Franklin



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ÍNDICE

Pág.

DEDICATORIAS--------------------------------------------------------------------------02

JURADO DICTAMINADOR------------------------------------------------------------04

PRESENTACIÓN--------------------------------------------------------------------------05

RESUMEN----------------------------------------------------------------------------------07

ABSTRACT--------------------------------------------------------------------------------08

I. INTRODUCCIÓN-------------------------------------------------------------------09

II. PROBLEMA--------------------------------------------------------------------------14

III. HIPÓTESIS---------------------------------------------------------------------------14

IV. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL-------------------------------------------------------------14

OBJETIVOS ESPECIFICOS------------------------------------------------------14

V. MATERIALES Y MÉTODOS-----------------------------------------------------15

VI. RESULTADOS----------------------------------------------------------------------27

VII. DISCUSIÓN--------------------------------------------------------------------------29

VIII. CONCLUSIONES---------------------------------------------------------------32

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS--------------------------------------------33

ANEXOS------------------------------------------------------------------------------------36



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RESUMEN

En base a la biodiversidad que existe en nuestro país, las plantas medicinales han

contribuido como recurso esencial para cubrir ciertas necesidades terapéuticas y

alimenticias de muchas personas. Además nuestro país ofrece un potencial casi

ilimitado de material botánico para la investigación farmacéutica. El presente estudio

tiene como objetivo determinar las características farmacognósticas de las hojas de

Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla” proveniente del distrito Urpay

provincia de Sánchez Carrión región La Libertad.; empleando la metodología de

Miranda Martínez Migdalia, publicado en el artículo: “Método de análisis de extractos y

drogas de la Doctora Migdalia Martinez Miranda”. Se evaluó las características

macromorfológicas de las hojas, obteniendo similitud con otras especies analizadas. Se

determinó el porcentaje de materias extrañas, el cual se encuentra dentro del rango

establecido por la OMS.

Así mismo, se realizó el tamizaje fitoquímico; según Miranda Martinez

Migdalia, donde se evidenció la posible presencia de flavonoides, triterpenos y

esteroides, compuestos fenólicos y taninos, catequinas, saponinas, compuestos grasos

y principios amargos y astringentes. Finalmente se concluye que este trabajo cumple

con los parámetros establecidos según la Farmacopea Británica y la Guía de control de

Plantas Medicinales que reporta la OMS.

Palabras claves: Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz , tamizaje fitoquímico.



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ABSTRACT

Based on the biodiversity that exists in our country, medicinal plants have contributed

as an essential resource to meet certain therapeutic and nutritional needs of many

people. Furthermore, our country offers an almost unlimited potential of botanical

material for pharmaceutical research. This study aims to determine the characteristics

farmacognósticas leaves Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz "lancetilla" from the

district Urpay.; province Sanchez Carrion region La Libertad I using the methodology

of Miranda Migdalia Martinez, published in the article: "Analysis Method drug extracts

and Dr. Migdalia Martinez Miranda" .It macromorphological evaluated the

characteristics of the leaves, obtaining similarity with other species analyzed. It was

determined the percentage of foreign matter, which is within the range established by

WHO.

Likewise, the phytochemical screening was performed; by Miranda Migdalia

Martinez, where the possible presence of flavonoids, triterpenes and steroids, phenolics

and tannins, catechins, saponins, fatty compounds and bitter and astringent principles

evidenced. Finally it is concluded that this study meets the parameters established by

the British Pharmacopoeia and Control Guide Medicinal Plants WHO reporting.

Keywords: Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz, phytochemical screening.



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I. INTRODUCCIÓN

El empleo de las plantas con fines terapéuticos ha estado siempre presente en la

vida del hombre para mitigar su hambre y curar sus enfermedades y es

conocida como Medicina Tradicional. El Perú es depositario de una

extraordinaria y variada flora cuya aplicaciones terapéuticas y nutritivas en la

medicina tradicional cobran importancia hoy en día con la ideología ecológica

en la cual se trata de rescatar todo lo útil que la sabia naturaleza nos brinda.

Además nuestro país ofrece un potencial casi ilimitado de material botánico

para la investigación farmacéutica (1 )(2)

.

Los componentes de una planta se subdividen en dos grandes grupos: Los

metabolitos primarios y los metabolitos secundarios o productos naturales. Los

primeros (carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos) están

universalmente distribuidos y participan en la actividad celular de todo ser

viviente; mientras que los últimos, comprenden los llamados principios activos,

compuestos químicos de estructura relativamente compleja y de distribución

más restringida y característica de algunas fuentes botánicas, que los anteriores.

Los metabolitos secundarios no son indispensables en las plantas, no se ha

descubierto aún una función metabólica en la cual ellos intervienen, son

considerados “artículos de lujo” en la planta; sin embargo, su aislamiento y

conocimiento estructural, da lugar a diseñar reacciones para producir derivados

semisintéticos, con utilidad terapéutica. Es entonces de gran importancia,

aislarlos y localizarlos en los diferentes extractos y en partes de la planta; para

realizar posteriormente, los ensayos biológicos adecuados (3) (4)

.

Por otro lado, la identificación de un vegetal es indispensable en todo trabajo

químico al respecto. Para esto se le examina ordenadamente según sus

características morfológicas más sobresalientes y, a medida que se va

descendiendo en la escala de clasificación, se observan detalles más

minuciosos, pasando a caracteres microscópicos y fisiológicos, hasta llegar a la

especie en que todos los miembros son prácticamente iguales, aunque si se



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estudia cuidadosamente, se verán pequeñas variantes que, de tomarse en

cuenta, los subdividen aún más hasta llegar al individuo (5)

.

La Farmacognosia; es el estudio fitoquímico de las plantas usadas en medicina

popular es importante ya que mediante él es posible la identificación de los

metabolitos responsables de su acción terapéutica y con ella una base científica

para su uso apropiado; además estos trabajos de investigación contribuyen a un

mejor conocimiento de las plantas medicinales, los cuales pueden ser

extendidos a estudios farmacológicos e industriales, en que los principios

activos hallados lo justifiquen (3)(4)(6)

.

Además para la selección de una especie para la determinación de sus

Fitoconstituyentes se realiza basado en el uso que la gente nativa hace de ella

para curar sus enfermedades (7)(8)(9)

.

La familia Amaranthaceae es conocida porque varios de sus géneros contienen

fenoles, esteroides, flavonoides, alcaloides y sesquiterpenlactonas

(Domingues.1973:Trease.1996). Por otro lado, se realizaron análisis

fitoquímicos preliminares de varias especies de este género y se encontró que

los tallos y hojas de Alternanthera amoena y la planta entera de A. ficoidea

dieron pruebas positivas para alcaloides (Sáenz y Nasar, 1970;Saxena,1975),

mientras que las partes aéreas de A. sessilis arrojaron resultados negativos para

alcaloides (Al Shamma, et al.,1979). Las partes aeréas de esta última mostraron

resultados positivos para taninos (Atal, et al.,1978). El análisis fitoquimico de

una muestra de las partes aéreas de Alternanthera lanceolata, realizado por

Blair, et al., (1990), arrojó resultados positivos para taninos, esteroides y

triterpenos. Todos los resultados están de acuerdo a lo reportado a nivel del

género(10)

.

Una de las especies de la familia Amaranthaceae es Alternanthera lanceolata

(Benth.) Schinz (lancetilla) también conosida como: Brandesia lanceolata

Benth. AliernanMera lehmannii Rieron. Aclkyranthes lehmannü (Rieron.)

Stand'. A. panamensis Stand'. A. stenophylla Stand'. Alternanthera panamensis



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(Stand.) Stand. A. sienophylla (Stand'.) Stand. A. mexicana var. gracilis Stress.

Brandesia lanceolata Benth. Mogiphanes soratensis Rusby. TelanMera

lanceolata (Benth.) Moq. Nombres comunes: Discancer grande, discancer

chiquito, discancer punta de lanza. discancer mediano. discancer. escancel(11)

.

Es una hierba cespitosa, ramas ascendentes, entrenudos delgados y largos,

flojas opuestas, 4-10 cm de largo y (1,0-)1,5-2,5(4,0) cm de ancho; lámina

lanceolada elíptica a lanceolada linear. Base atenuada, decurrente sobre el

peciolo, ápice acuminado, haz verde y envés rojizo, subescencia blanca en las

ramas y hojas; siendo más abundante en las más jóvenes. Pero se vuelve

glabrescente con la edad. Inflorescencias en espigas blancas compactadas en el

extremo terminal del pedúnculo, axilares o solitarias, pubescencia blanca:

pedúnculo largo, cuatro estambres laminares; ovario superior globoso: estigma

capitado y piloso. Fruto café-rojizo, de 0,7mm encerrado en cl periantio

persistente. Observaciones: Según Burger (1983), Allernanthera lanceolata es

reconocida por la restricción a hábitats de bosques de niebla entre 1.000 y

2.200 msnm (en Costa Rica). No obstante, los ejemplares colectados que

encajan en la definición anterior de Burger presentan una gran variabilidad lo

que lleva a pensar que la especie aún no está bien delimitada o que se tienen

varias morfoespecies. En la zona de estudio se encontró en suelos húmedos y

en rastrojos o al borde de las quebradas; también se halló cultivada, siempre a

la sombra en suelos arcillosos (11)

.

Burger (1983) igualmente la reporta como maleza en sitios sombreados y

bosques húmedos entre los 1.000-2.000 msnm en Costa Rica, formando una

gran cubierta a lo largo de ríos y lechos de quebradas, restringida a áreas

sometidas a mucha humedad en Costa Rica y El Caribe. La especie se

distribuye desde Guatemala hasta Colombia (11)

.

El extracto acuoso de la parte aerea de alternanthera lanceolata no presentó

actividad contra P. falciparum cepa ITG-2 (Grupo Malaria, U. de A.,2002).

Bajo el nombre de discancer grande o escarcel, Alternanthera laguroides es



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utilizada con los mismos propósitos que A. lanceolata, la cual tiene

propiedades antiinflamatoria, citoprotectora y antioxidante (10)

.

En la zona de estudio según los pobladores informantes, la lancetilla es

utilizada para cólicos hepáticos, cirrosis, higado inflamado, acné, fiebre y

cáncer. A través de la base de datos NAPRALERT ( Natural Products Alert).

1990/2001, se se reportan varias especies de Alternanthera por sus usos

medicinales en todo el mundo como antiinflamatoria, para resfriados y gripas,

febrífuga, para purificar la sangre, secar llagas enfermedades virales, para

enfermedades del hígado, hepatitis, afrodisiaco, diurético y tónico(10,12,13)

.

Colmillo J, Para investigó componentes antitumorales a partir de extracto de

alcohol n-butílico de Alternanthera philoxeroides.Los constituyentes que se

aislaron fueron siete compuestos: ácido oleanólico 3-O-beta-D-

glucuronopyranoside (1), ácido oleanólico 28-O-beta-D-glucopiranósido (2),

ácido oleanólico 3-O-beta-D-glucuronopyranoside éster -6'-O-metil (3),

chikusetsusaponin IV un éster de metilo (4), éster hederagenina 3-O-beta-D-

glucuronopyranoside-6'-O-metilo (5), 4,5-dihydroblumenol (6 ), 6S, 7E, 9R-

6,9-di-hydroxymegastigma-4,7-dien-3-ona-9-O-beta-D-glucopiranósido

(7). Compuesto 1 mostró un efecto inhibidor significativo contra Hela y L929

con relaciones de inhibición 91,3% y 92,9% a los 30 mg x L (-1),

respectivamente. Concluyendo:Los compuestos 4, 5 y 7 se aislaron de este

género por primera vez. El compuesto 1 mostró un efecto inhibitorio

significativo contra Hela y L929 a 30 mg x L (-1) (14)

.



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II. PROBLEMA:

Por tal motivo nos planteamos el siguiente problema:

¿Cuáles son las características farmacognósticas de las hojas de Alternanthera

lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla” proveniente del?.

III. HIPÓTESIS:

Implícita

IV. OBJETIVOS:

i. OBJETIVO GENERAL

1. Determinar las características farmacognósticas de las hojas de

Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla” proveniente del

distrito de Urpay provincia de Sánchez Carrión región La Libertad.

ii. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1. Determinar las características macroscópicas de las hojas de



2. Determinar las características fisicoquímicas de las hojas de



3. Realizar el tamizaje fitoquímico de las hojas de Alternanthera

lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla” proveniente del distrito de

Urpay provincia de Sánchez Carrión región La Libertad.



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V. MATERIAL Y MÉTODO

A. MATERIAL:

1. Material Vegetal

Se utilizó 5Kg de hojas de hojas de Alternanthera lanceolata (Benth.)

Schinz “lancetilla”.

2. Material de Laboratorio

a.- Material de laboratorio

De uso común en el laboratorio de Farmacognosia.

b.- Equipos

Balanza Triple Brazo 700/800 series OHAUS US PAT. Nº 2, 729,439.

Balanza Analítica OHAUS GA 200 (precisión 0.0001 g)

Baño Maria Precisterm S- 140

Estufa Eléctrica Memmert TY U40

Horno mufla “HM 2.5”

c.- Reactivos y solventes

Ácido/Agua

Agua destilada

Cloroformo

Diclorometano

Etanol 96° G.L.

Metanol

Acetato de sodio 30%

Acetato cúprico

Acetona

Ácido 3,5 – dinitrobenzoico

Ácido acético glacial

Ácido nítrico

Ácido clorhídrico HCl: ρ: 1.19g/mL, %: 37% p/p.



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Ácido pícrico

Ácido perclórico 70%

Ácido sulfúrico (H2SO4: ρ: 1.89g/mL).

Anhídrido Acético

Carbonato de sodio cristales

Cloruro de sodio sólido

Cloruro férrico

Hidróxido de potasio al 20%.

Hidróxido de sodio

Magnesio metálico

Tricloruro férrico al 30%.

Yoduro de potasio

1-Propanol

B. MÉTODO (15) (16) (17) (18).

1.- ESTUDIO FARMACOGNÓSTICO

1.1.- RECOLECCIÓN

Las hojas de Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla fueron

recolectadas en los meses de Junio-Julio del distrito de Urpay, situado a

una altitud de 3600 m.s.n.m. perteneciente a la provincia de Sánchez

Carrión, región La Libertad.

1.2.- IDENTIFICACIÓN

La identificación taxonómica se realizó en el Herbarium Truxillense de la

Universidad Nacional de Trujillo.

1.3.- SELECCIÓN

Se seleccionó la materia vegetal con el objetivo de realizar una separación

de las partes deterioradas y evitar la mezcla con otra especie.



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1.4.- LAVADO Y DESECACIÓN

Para evitar cualquier tipo de alteración que pudiera afectar a la

composición de la planta, la droga fué convenientemente lavada y

desecada.

Las flores seleccionadas se colocaron sobre papel kraft en un lugar

fresco y seco durante 24 horas. Luego fueron pasadas a bolsas hechas de

papel kraft y se llevaron a estufa a una temperatura de 40 ºC, durante 48

horas.

1.5.- MOLIENDA Y TAMIZADO

Una vez desecado el material vegetal, se procedió a su molienda en

mortero de cerámica hasta tamaño de partícula adecuado. El material así

pulverizado, se tamizó (tamaño partícula 5 mm), y se almacenó

adecuadamente en frascos ámbar en un lugar sin humedad y luz directa,

hasta su posterior utilización.

2. DETERMINACIÓN DE LOS PARÁMETROS DE CALIDAD,

MÉTODO FISICO-QUÍMICO DE ANÁLISIS

2.1. Características Macroscópicas

El estudio macromorfológico se realizó a simple vista. Se describió las

características macroscópicas de las hojas tales como: forma (peciolo,

lámina, base, ápice, bordes y venación), textura (membranosa, coríacea,

frágil, suculenta); superficie (glabra, pubescente), color, olor,

dimensiones (largo, ancho), condición (fresca, seca, completa, rota),

peculiaridades (presencia de glándulas, puntuaciones, pelos, etc.); y en

los tallos: forma de pieza (curvada, aplanada, tubo simple, tubo doble,

tubo compuesto), textura (membranosa, coríacea, frágil, suculenta),

superficie (glabra o pubescente), color, olor, dimensiones (largo, ancho)

y condición (fresca, seca, completa, rota).



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3. CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS

3.1.- Determinación de las Materias Extrañas

Para esta determinación se empleó 1g de muestra, los cuales

esparcieron sobre el papel y se separaron las materias extrañas

manualmente. Se pesó el material separado en balanza técnica y se

determinó su porcentaje en base al peso de la muestra ensayo (se

empleó una lupa) (22-24)

.

Los límites para las materias extrañas, se establecen en las monografías

o especificaciones de calidad de cada droga en particular.

Los resultados se expresarán en porcentaje y se calcularán por la

siguiente fórmula:

El porciento de materia extraña ( ) se calcula mediante la fórmula

siguiente:

( )

Dónde:

Masa inicial de la muestra de ensayo (g).

Masa de materia extraña (g).

Factor matemático para los cálculos.

4.- TAMIZAJE FITOQUIMICO.

Se empleó un esquema general, el cual utiliza una extracción sucesiva

con solventes de polaridad creciente. De este modo, se realizó la

extracción sucesiva del material vegetal para la aplicación de técnicas de

tamizaje fitoquímico detallado en los esquemas (Anexo)



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Extracto de diclorometano

a. Ensayo de Sudan:

En un tubo de ensayo a una alícuota del extracto, se le añadió 1mL de

una solución diluida en agua del colorante Sudan III. Se calentó en

baño de agua hasta evaporación del solvente.

La presencia de compuestos grasos se considera positiva si aparecen

gotas o una película coloreada de rojo en el seno del líquido o en las

paredes del tubo de ensayo.

b. Ensayo de Dragendorff:

En un tubo de ensayo con una alícuota del extracto se agregó

cloroformo, este se evaporó en baño de agua y el residuo redisolvió

en 1 mL de ácido clorhídrico al 1 % en agua. Con la solución acuosa

ácida se realizó el ensayo, añadiendo III gotas del reactivo de

Dragendorff, si hay opalescencia se considera (+), turbidez definida

(++), precipitado (+++).

c. Ensayo de Mayer:

Se realizó según la forma descrita anteriormente, hasta obtener una

solución ácida. Se añadió luego, una pizca de cloruro de sodio en

polvo, se agitó y filtró. Se agregó III gotas de la solución reactiva de

Mayer, se considera (+) si se observa: opalescencia (+), turbidez

definida (++), precipitado coposo (+++).

d. Ensayo de Wagner:

Se comenzó al igual que en los casos anteriores de la solución ácida,

se añadió III gotas del reactivo y los resultados se clasificaron de la

misma forma.

e. Ensayo de Baljet: (Permite reconocer compuestos con agrupamiento

lactónico, en particular Coumarinas aunque otros compuestos

lactónicos pueden dar positivo al ensayo)



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Se evaporó el solvente en baño de agua y redisolvió en la menor

cantidad de alcohol (1 mL).

En estas condiciones se adicionó 1mL del reactivo, considerándose un

ensayo positivo la aparición de coloración o precipitado rojo (++

y+++) respectivamente.

f. Ensayo de Liebermann-Burchard: (Permite reconocer presencia de

triterpenos y/o esteroides, por ambos tipos de productos poseer un

núcleo del androstano, generalmente insaturado en el anillo B y la

posición 5-6.)

Se tomó una alícuota del extracto de diclorometano y se llevó a

evaporar en baño de agua y el residuo se redisolvió en 1mL de

cloroformo.

Se adicionó 1mL de anhídrido acético y se mezcló bien. Por la pared

del tubo de ensayo se dejó resbalar III gotas de ácido sulfúrico

concentrado sin agitar. Un ensayo positivo se reconoce por un cambio

rápido de coloración:

- Rosado-azul muy rápido.

- Verde intenso-visible aunque rápido.

- Verde oscuro-negro-final de la reacción.

Muy pocas veces puede observarse el primer cambio. El tercer cambio

generalmente ocurre cuando el material evaluado tiene cantidades

importantes de estos compuestos.

Importante: Para realizar este ensayo no puede haber agua en el

medio de reacción, pues ésta con el ácido sulfúrico reacciona de forma

violenta y puede ocurrir un accidente.



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Extracto etanólico

a. Ensayo de catequinas: Se tomó I gota de la solución alcohólica, con la

ayuda de un capilar y se aplicó sobre papel filtro. Sobre la mancha se

aplicó una solución de carbonato de sodio. La aparición de una

mancha verde carmelita a la luz UV, indica un ensayo positivo.

b. Ensayo de resinas: Para detectar este tipo de compuesto, se añadió a

2mL de la solución alcohólica, 10mL de agua destilada. La aparición

de un precipitado indica un ensayo positivo.

c. Ensayo de Fehling: (Permite reconocer la presencia de azúcares

reductores). Para ello una alícuota del extracto etanólico se evaporó

en baño de agua y el residuo se redisolvió con 2mL de agua. Se

adicionaron 2mL del reactivo y se calentó en baño de agua 5 min,

considerándose un ensayo positivo la aparición de un precipitado rojo.

d. Ensayo de Baljet: Permite reconocer en un extracto la presencia de

compuestos con agrupamiento lactónico, en particular Coumarinas,

aunque otros compuestos lactónicos pueden dar positivo al ensayo.

Para ello se tomó una alícuota del extracto alcohólico y luego se

adicionó 1mL del reactivo, considerándose un ensayo positivo la

aparición de coloración o precipitado rojo (++ y +++)

respectivamente.

e. Ensayo de Liebermann-Burchard: (Permite reconocer en un extracto

alcohólico la presencia de triterpenos y/o esteroides, ambos tipos de

productos por poseer un núcleo del androstano, generalmente

insaturado en el anillo B y la posición 5-6).

Se tomó una alícuota del extracto etanólico , se llevó a evaporar en

baño de agua y el residuo se redisolvió en 1mL de cloroformo.

Se adicionó 1mL de anhídrido acético y se mezcló bien. Por la pared

del tubo de ensayo se dejaron resbalar III gotas de ácido sulfúrico



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concentrado sin agitar. Un ensayo positivo se reconoce por un

cambio rápido de coloración:

1. Rosado-azul muy rápido.

2. Verde intenso-visible aunque rápido.

3. Verde oscuro-negro-final de la reacción.

Muy pocas veces puede observarse el primer cambio. El tercer

cambio generalmente ocurre cuando el material evaluado tiene

cantidades importantes de estos compuestos. Importante: Para

realizar este ensayo no puede haber agua en el medio de reacción,

pues ésta con el ácido sulfúrico reacciona de forma violenta y puede

ocurrir un accidente.

f. Ensayo de la espuma: Permite reconocer en un extracto alcohólico la

presencia de saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica.

Cuando la alícuota se encuentra en alcohol, se diluyó con cinco

veces su volumen en agua y se agitó dicha mezcla fuertemente

durante 10min.

El ensayo se considera positivo si aparece espuma en la superficie

del líquido de más de 2mm de altura y persistente por más de 2min.

g. Ensayo del cloruro férrico: Permite reconocer la presencia de

compuestos fenólicos y/o taninos en un extracto vegetal. Cuando el

extracto de la planta se realiza con alcohol, el ensayo determina tanto

fenoles como taninos. A una alícuota del extracto alcohólico se le

añadió III gotas de una solución de tricloruro férrico al 5% en

solución salina fisiológica, un ensayo positivo da la siguiente

información general:

-Desarrollo de una coloración rojo-vino: compuestos fenólicos en

general.

-Desarrollo de una coloración verde intensa: taninos del tipo

pirocatecólicos.



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-Desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo pirogalotánicos.

h. Ensayo de la ninhidrina: Permite reconocer en los extractos

vegetales la presencia de aminoácidos libres o de aminas en general.

Se tomó una alícuota del extracto en alcohol, se mezcló con 2mL de

solución al 2 % de ninhidrina en agua. La mezcla se calentó 10

minutos en baño de agua. Este ensayo se considera positivo cuando

se desarrolla un color azul violáceo

i. Ensayo de Bornträger: Permite reconocer en un extracto alcohólico

la presencia de quinonas. Se agregó 1mL de hidróxido de sodio. Se

agitó, mezclando las fases y se dejó en reposo hasta su ulterior

separación. El ensayo se considera positivo cuando la fase acuosa

alcalina (superior) se colorea de rosado o rojo. Coloración rosada

(++), coloración roja (+++).

j. Ensayo de Shinoda: Permite reconocer la presencia de flavonoides

en extractos alcohólico, se diluyó con 1mL de ácido clorhídrico

concentrado y un pedacito de cinta de magnesio metálico. Después

de la reacción se espera 5min, se añadió 1mL de alcohol amílico, se

mezclaron las fases y se dejó reposar hasta que se separaron.

El ensayo se considera positivo cuando el alcohol amílico se colorea

de amarillo, naranja, carmelita o rojo; intenso en todos los casos.

k. Ensayo de Kedde: Permite reconocer en un extracto alcohólico la

presencia de glucósidos cardiotónicos. Una alícuota del extracto en

etanol se mezcló con 1mL del reactivo y se dejó reposar durante 10

min. En un ensayo positivo se desarrolla una coloración violácea,

persistente durante 1 a 2h.

l. Ensayo de antocianidinas: Permite reconocer en los extractos

vegetales alcohólicos la presencia de estructuras de secuencia C6-

C3-C6 del grupo de los flavonoides. Se calentó 2mL del extracto



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etanólico 10min. con 1mL de HCl q. p. se dejó enfriar y se añadió

1mL de agua y 2mL de alcohol amílico. Se agitó y se deja separar las

dos fases. La aparición de color rojo a marrón en la fase amílica

indica un ensayo positivo.

m. Ensayo de Dragendorff: Permite reconocer en el extracto alcohólico

la presencia de alcaloides; para ello, se tomó una alícuota y se le

añadió I gota de ácido clorhídrico concentrado, (calentamos

suavemente y dejamos enfriar). Con la solución acuosa ácida se

realizó el ensayo, se añadió III gotas del reactivo de Dragendorff, Se

considera (+) cuando presenta opalescencia, (++) cuando presenta

turbidez definida, y (+++) cuando presenta precipitado.

n. Ensayo de Mayer: Se realizó según la forma descrita anteriormente,

hasta obtener una solución ácida. Se añadió luego, una pizca de

cloruro de sodio en polvo, se agitó y filtró. Se añadió III gotas de la

solución reactiva de Mayer, y se observa: opalescencia (+), turbidez

definida (++), precipitado coposo (+++).

o. Ensayo de Wagner: Se comenzó al igual que en los casos anteriores

de la solución ácida, se añadieron III gotas del reactivo y los

resultados se clasificaron de la misma forma.

p. Ensayo de Hager: Se comenzó igual que en los casos anteriores de la

solución ácida, se añadió tres gotas del reactivo y los resultados se

clasificaron de la misma forma.

Extracto Acuoso

a. Ensayo de Dragendorff: Permite reconocer en el extracto acuoso la

presencia de alcaloides; para ello, se tomó una alícuota y se le

añadió I gota de ácido clorhídrico concentrado. Con la solución

acuosa ácida se realizó el ensayo, se añadió III gotas del reactivo de



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Dragendorff, Se considera (+) cuando presenta opalescencia, (++)

cuando presenta turbidez definida, y (+++) cuando presenta

precipitado.

b. Ensayo de Mayer: Se realiza según la forma descrita anteriormente,

hasta obtener una solución ácida. Se añadió luego, una pizca de

cloruro de sodio en polvo, se agitó y filtró. Se añadió III gotas de la

solución reactiva de Mayer, y si se observa: opalescencia (+),

turbidez definida (++), precipitado coposo (+++).

c. Ensayo de Wagner: Se comenzó al igual que en los casos anteriores

de la solución ácida, se añadieron III gotas del reactivo y los

resultados se clasificaron de la misma forma.

d. Ensayo de Hager: Se comenzó igual que en los casos anteriores de la

solución ácida, se añadieron tres gotas del reactivo y los resultados

se clasificaron de la misma forma.

e. Ensayo del cloruro férrico: Permite reconocer la presencia de

taninos en un extracto acuoso. A una alícuota del extracto acuoso se

le añadió III gotas de una solución de tricloruro férrico al 5% en

solución salina fisiológica, se considera positivo cuando da la

siguiente información general:

Desarrollo de una coloración rojo-vino: compuestos fenólicos en

general.

Desarrollo de una coloración verde intensa: taninos del tipo

pirocatecólicos.

Desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo pirogalotánicos.

f. Ensayo de la gelatina: Permite reconocer la presencia de taninos en

el extracto acuoso. Se tomó 1 ml de muestra y se añadió I gota de



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solución de gelatina. Se debe observar la presencia de un precipitado

blanco que indica la presencia de taninos.

g. Ensayo de Shinoda: Permite reconocer la presencia de flavonoides

en el extracto acuoso. Se tomó 1 mL de muestra y se diluyó con

1mL de ácido clorhídrico concentrado y un pedacito de cinta de

magnesio metálico. Después de la reacción se esperó 5min, se añadió

1mL de alcohol amílico, se mezclaron las fases y se dejó reposar

hasta que se separaron.

El ensayo se considera positivo cuando el alcohol amílico se

colorea de amarillo, naranja, carmelita o rojo; intenso en todos los

casos.

h. Ensayo de Fehling: Permite reconocer en el extracto acuoso la

presencia de azúcares reductores. Para ello se tomó una alícuota del

extracto acuoso y se adicionaron 2mL del reactivo, se calentó en

baño de agua 10min. El ensayo se considera positivo si la solución

se coloreo de rojo o aparece precipitado rojo.

i. Ensayo de la espuma: Permite reconocer en el extracto acuoso la

presencia de saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica.

Se tomó 2 mL del extracto acuoso y se agitó fuertemente durante

10min.El ensayo se considera positivo si aparece espuma en la

superficie del líquido de más de 2mm de altura y persistente por

más de 2min.

j. Ensayo de mucílagos: Permite reconocer en los extractos acuosos

de vegetales la presencia de una estructura tipo polisacárido, el cual

forma un coloide hidrófilo de alto índice de masa que aumenta la

densidad del agua donde se extrae. Para ello en una alícuota del

extracto se agregó agua de 0 a 5 ºC . cuando la solución toma una

consistencia gelatinosa el ensayo se considera positivo.

k.



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VI. RESULTADOS

Tabla 1: Características macromorfológicas de las hojas de Alternanthera

lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla”.

Fuente: Datos experimentales

Tabla 2.Características organolépticas de las hojas de Alternanthera lanceolata

(Benth.) Schinz “lancetilla”.

CARACTERÍSTICAS HOJA

OLOR Suigéneris

COLOR Haz:verde y Envés:morado

TEXTURA Frágil


Tabla 3. Parámetros fisicoquímicos de las hojas de Alternanthera lanceolata

(Benth.) Schinz “lancetilla”.

PARÁMETROS HOJA (%)

Materias extrañas 0.04%

*tres repeticiones para cada parámetro. Valores expresados en media y desviación estándar

ASPECTO HOJA

Forma

De acuerdo a su porción mas ancha:

lanceoada

Borde: entero

Ápice: acuminado

Base: extendida

Inervación: pinnada

Divisiones de las hojas Pinnado compuesta

Superficie Glabra

Condición Fresca

Dimensiones = 8.4 cm de largo

= 1.6 cm de ancho



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Tabla 4. Tamizaje fitoquímico de las hojas de Alternanthera lanceolata (Benth.)

Schinz “lancetilla”.

METABOLITOS

ENSAYO

Ed

Ee

Ea

Alcaloides Dragendorff - - -

Mayer - - -

Wagner - - -

Compuestos

fenólicos y

taninos

Cloruro férrico - ++

Azúcares

reductores

Fehling - -

Flavonoides Shinoda + -

Saponinas Espuma + ++

Mucílagos Mucílagos -

Glucósidos

cardiotónicos

Kedde -

Cumarinas Baljet - -

Compuestos

grasos

Sudán +

Resinas Resinas -

Catequinas Catequinas +

Triterpenos y

esteroides

Lieberman

Burchard - +

Quinonas Borntrager -

Aminoácidos Ninhidrina -

Antocianidinas Antocianidina -

Aminoácidos Ninhidrina -

Taninos De la gelatina -

De principios

activos amargos

y astringentes

+++


LEYENDA:

Ed: Extracto diclorometano, Ee: Extracto etanólico, Ea: Extracto acuoso

Intensidad: + Baja

++ Mediana

Identificación: + Positivo

- Negativo

+++ alta

EXTRACTOS



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VII. DISCUSIÓN

De los resultados obtenidos, en la tabla número 1 se evaluaron las características

macromorfológicas de las hojas de Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz

“lancetilla”. Las hojas presentaron un ápice acuminado, inervación pinnada, de bordes

enteros y de superficie glabra. . El valor promedio para el ancho y largo de las hojas fue

1.6cm y 8.4 cm respectivamente Según un estudio realizado en la Universidad de

Antioquia-Colombia, Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla” , presenta

valores obtenidos del largo de sus hojas que varían entre 4 – 10cm y el ancho se

encuentra en un rango de 1.5- 2.5 cm, encontrando similitud con el resultado

obtenido(11)

.

La tabla número 2, muestra los resultados obtenidos de las características

organolépticas de las hojas. El olor fué suigéneris; de color verde el haz y morado el

envés, de textura frágil. En el estudio anterior se menciona el haz verde y envés rojizo.

Según Burger (1983), Alternanthera lanceolata presenta una gran variabilidad lo que

lleva a pensar que la especie aún no está bien delimitada o que se tienen varias

morfoespecies.(11)

.

En la determinación de Características físico-químicas. En la tabla 3 se observa que

el 0.04% de la muestra fue equivalente a las materias extrañas presentes en la planta.

Encontrándose en el rango permitido según la OMS, siendo

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La extracción nos sirve para aislar los principios activos a partir de la droga; se

tomaron criterios para los extractos: diclorometano y etanólico que cumplan como

mínimo 48 horas de maceración en refrigeración para evitar que se volatilice el etanol

con intervalos de agitación de 15 minutos, con la finalidad de agotar la droga; y para el

extracto acuoso solo 48 horas. Así los ensayos fueron estables al periodo de estudio, ya

que no existieron variaciones evidentes de color, olor, transparencia, aparición de fases

y precipitados. El uso de estos solventes es para facilitar la solubilidad de los principios

activos que contiene la droga (20)

.

Los disolventes consisten de mayor a menor polaridad: agua, etanol y diclorometano

respectivamente; para arrastrar sustancias de polaridad intermedia. El empleo de

diclorometano extrae del vegetal compuestos menos polares. El etanol, como solvente

de polaridad intermedia, extrae los metabolitos afines; su labor se ve facilitada por la

secuencia del procedimiento: diclorometano ya disolvió las membranas vesiculares, tal

es así que solo se remite a romper las interacciones que mantienen atraídos (no unidos)

a los principios activos, hacia los sistemas hidrofílicos. Finalmente, el agua extrae los

principios activos más hidrosolubles, debido a su elevada polaridad; esta es capaz de

extraerlos en sus formas ionizadas, situación que escapa a las particularidades de los

solventes anteriores (20)

.

En la tabla 4, se identificaron los distintos metabolitos secundarios, presentes en los

extractos de las hojas de Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla”, se

encontró que éstas contenían compuestos grasos, flavonoides, triterpenos y esteroides,

compuestos fenólicos y taninos, catequinas, saponinas, principios amargos y

astringentes.

El ensayo de Sudán fue el único ensayo positivo con un color verde oscuro, en el

extracto diclorometano, indicando la presencia de compuestos grasos, lo cual

representa una pequeña fuente de energía para nuestro organismo (21)

.

El ensayo de Shinoda para identificar flavonoides se realizó en los extractos acuoso y

etanólico, los cuales resultaron positivos, observándose un color amarillo, pudiendo

afirmar que se trata de flavonas e isoflavonas; además de su actividad terapéutica

antioxidante, las flavonas presentan actividad antihepatotóxica y antitumoral y las



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isoflavonas actividad antivírica y antimicótica. En esta reacción, el magnesio metálico

es oxidado por el HCl concentrado, dando como productos al hidrógeno molecular, que

es eliminado en forma de gas y el cloruro de magnesio, que es el que forma complejos

con los flavonoides dando coloraciones características(22) (23)

.

El ensayo de catequinas reultó positivo, evidenciando una mancha verde carmelita a

la luz UV, este compuesto secundarios esta clasificado dentro de los flavonoides

presentando actividad terapéutica como antihepatotóxico y en enfermedades

coronarias(22)

.

El ensayo de Lieberman-Burchard resultó positivo en el extracto alcoholico, el cuál

evidenció un color verde intenso-visible aunque rápido, afirmando la presencia de

compuestos triterpénicos y/o esteroides, los cuales tienen actividad terapéutica

principalmente, expectorante y diurética. La reacción de Liebermann- Burchard es típica

de los ciclos fusionados que contienen dos dobles enlaces conjugados, en un mismo

anillo, en dos anillos adyacentes o un doble en un anillo adyacente con un grupo

hidroxilo. La reacción debe realizarse en medio absolutamente anhidro, ya que, al

existir moléculas de agua, estas reaccionan con el anhídrido acético, anulando de esta

manera la formación de un agente oxidante, muy necesario para la efectividad del

ensayo en mención. De igual manera el ensayo de la espuma resultó positivo en el

extracto acuoso como en el alcoholico, evidenciando la presencia de saponinas, tanto

del tipo esteroidal como triterpénica(22)

.

Los ensayo de cloruro férrico se realizo en los extraxtos acuoso y etanolico, resultó

positivos sólo en el extracto acuoso, considerando el fundamento para el ensayo de

tricloruro férrico, éste da una coloración verde con catecoles o taninos no hidrosolubles

y una coloración azul con derivados del pirogalol o taninos hidrosolubles; esta

diferencia es que el pirogalol tiene un grupo hidroxilo más que no se encuentra

formando complejos con el hierro trivalente, entonces intensifica la coloración. Los

cuales tienen acción astringente, usados como cicatrizantes de manera externa y como

antidiarréicos vía oral(23)(22)

.

El análisis fitoquimico de una muestra de las partes aéreas de Alternanthera

lanceolata, realizado por Blair, et al., (1990), arrojó resultados positivos para taninos,



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esteroides y triterpenos (10)

.Lo cual evidencia similitud con los resultados obtenidos. En

base a las referencias de otras especies, se encontró similitud en los resultados obtenidos

de los estudios de la especie Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb, en el que se

encontraron metabolitos a los cuales se les atribuye sus propiedades antiviricas y

antitumorales(12,13,14)

.

Finalmente, se considera que ésta planta en estudio, cumple con los parámetros

establecidos por la Farmacopea Británica, la Guía de métodos de control de calidad de

plantas medicinales; dándole la calidad necesaria y apropiada, para su posterior

utilización. Es también interesante reconocer que no se hallaron referencias del estudio

de la bibliografía farmacognóstica clásica de esta planta hasta el presente, lo que avala

el trabajo de investigación(24)

.

VIII. CONCLUSIONES

En el presente trabajo de investigación se concluye:

1. Se determinó las características macroscópicas de las hojas de

Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla”, obteniendo

resultados similares a los de su género, de olor suigéneris y textura

frágil.

2. Se determinó información fisicoquímica: el porcentaje de materias

extrañas fué de 0.04%, el cual se encuentra dentro del rango

establecido por la OMS.

3. Se identificó mediante el tamizaje fitoquímico de las hojas de

Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla”, la posible

presencia de flavonoides, triterpenos y esteroides, compuestos

fenólicos y taninos, catequinas, saponinas, compuestos grasos y

principios amargos y astringentes.



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IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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ANEXOS



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ESQUEMA I

Extracto DCM

Extracto DCM



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ESQUEMA II

ESQUEMA III

Extracto DCM



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ESQUEMA IV

Alternanthera lanceolata (Benth.) Schinz “lancetilla”.



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TAMIZAJE FITOQUÍMICO

DETERMINACION DE METABOLITOS EN EL EXTRACTO

DICLOROMETANO:

Ensayo de Sudan (+)

DETERMINACION DE METABOLITOS EN EL EXTRACTO ACUOSO:

Ensayo de Espuma (+)



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Ensayo del cloruro ferrico (++)

DETERMINACION DE METABOLITOS EN EL EXTRACTO DE

ALCOHÓLICO O ETANÓLICO:

Ensayo de Espuma (+)

Ensayo de Shinoda (+)



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Ensayo de Lieberman- Burchard (++)

Ensayo de catequinas (+)



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REACCIONES QUÍMICAS

i. PARA IDENTIFICAR COMPUESTOS FENOLICOS

a. Reacción de Tricloruro Férrico

OH

O

H+ Fe

Cl

Cl

Cl

O+

H Fe

Cl

Cl

ClO

H

-

O

O

H

Fe

Cl

ClO

O+

H

Fe

Cl

ClO

O

Fe

ClO

OH

H



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O

O

Fe

Cl

O+

OH

H

-

O

O

FeO

OH

O

O

FeO

O+

H

-O

O

FeO

O

-O

H

OH

O

O

FeO

OO

+H

OH

-2-

O

O

FeO

OO

OH

-2-

O

O

FeO

OO

O+

H-

3- O

O

FeO

OO

O-

(verde)

3-

H

H

H

+

+

+



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