anisakisi
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Facultad de Ciencias Biológicas
Departamento de Microbiología y Parasitología
“Efecto patogénico de larvas de Anisakis en Mesocricetus auratus “hamster””
Br. KELLYN MYLUSKA GOMEZ CASTRO
Informe de Trabajo de investigación
para obtener el título de:
BIÓLOGO – MICROBIÓLOGO
TRUJILLO – PERÚ 2008
DEDICATORIA
A Dios,
por ser fuente de
inspiración en mí
vida.
A mis padres:
Dante y Betty
con amor y eterna gratitud
por su invalorable entrega y
dedicación en mi formación.
A mis hermanas:
Liam y Sujey
Por su apoyo, confianza, fé
y optimismo en la realización
de mis ideales.
i
AUTORIDADES DE
LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. VICTOR CARLOS SABANA GAMARRA
Rector
Dr. JUAN MURO MOREY
Vice-Rector Académico
Dr. FELIX CASTILLO VIERA
Profesor Secretario General
Ms.C MANUEL RODRIGUEZ LACHERRE
Jefe de la Oficina de Registro Técnico
ii
AUTORIDADES DE
LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dr. JOSE MOSTACERO LEON
Decano de la Facultad de Ciencias Biológicas
Dr. FREDY MEJIA COICO
Secretario de la Facultad
Ms.C. MARCO SALAZAR CASTILLO
Director de la Escuela Académica
Profesional de Microbiología y Parasitología
Ms.C. BERTHA SORIANO BERNILLA
Jefe del Departamento de Microbiología y Parasitología
iii
PRESENTACIÓN
Señores Miembros del Jurado Examinador:
En cumplimiento con las disposiciones reglamentarias vigentes de la Escuela
Académico Profesional de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias
Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra consideración y
criterio el presente informe de Trabajo de investigación titulado: “Efecto patogénico de
larvas de Anisakis en Mesocricetus auratus “hamster””, realizado en el Laboratorio de
Parasitología de la Escuela de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Ciencias
Biológicas de la Universidad de Nacional de Trujillo, con lo cual cumplo con uno de
los requisitos indispensables para obtener el Título Profesional de Biólogo-
Microbiólogo.
Trujillo, Septiembre del 2008.
___________________________
Br. Kellyn Myluska Gómez Castro
iv
MIEMBROS DEL JURADO
______________________________
Dr. Hermes Mario Escalante Añorga
PRESIDENTE
______________________________
Ms. C. César Agusto Jara Campos
SECRETARIO
______________________________
Dra. Judith Roldan Rodríguez
VOCAL
v
INDICE
Pag.
Dedicatoria……………………………………….…………..……………….i
Autoridades de la Universidad Nacional Trujillo………………….…….……ii
Autoridades de la Facultad de Ciencias Biologicas…………………………..iii
Presentación…………………………………………………………………...iv
Miembros del Jurado………………………………………………………….v
Resumen
Introducción……………………………………………..………..………… ………
Material y Método……………………………………………..……...….………….
Resultados ……………………………………………………..………..…………..
Discusión……………………………………………………..…....……..................
Conclusiones…………………………………………………..………….…………
Referencia Bibliográficas…………………………………………………...............
Anexos
RESUMEN
Se determinó el efecto patogénico producido por larvas de Anisakis en 8
ejemplares de Mesocricetus auratus “hámster”, infectados experimentalmente. Se
obtuvieron 104 larvas de Anisakis de 748 vísceras de Trachurus picturatus murphyi
“jurel “, procedentes de la zona sur del océano pacífico, mantenidas en solución salina
fisiológica al 0.9% y en refrigeración por un día. Se administro 10 larvas de Anisakis
por vía oral a Mesocricetus auratus. Posteriormente los animales infectados fueron
muertos con sobredosis de Halatal (1 ml), siendo necropsiados a las 12, 24, 48 y
96 horas después de la inoculación. Para evaluar los efectos patológicos en vísceras
y en tejidos lesionados de los animales de experimentación, fueron fijados en
formol al 10%, para preparar los cortes histopatológicos se colorearon con
hematoxilina-eosina.
Se encontró que el 15% de las larvas administradas se enquistan en los
tejidos a nivel de estomago e intestino del Mesocricetus auratus, a las 48 y 96
horas respectivamente, causándoles hemorragias, e infiltración inflamatoria leves y
severas.
El estudio histopatológico en Mesocricetus auratus “hámster”, permitió
evidenciar que las lesiones ocasionadas a nivel de estomago e intestino delgado,
fueron producidas por larvas de Anisakis, como se verifico en la identificación y
caracterización morfológica de la larva.
Palabras Claves: Anisakis, Mesocricetus auratus
INTRODUCCION
Los peces constituyen parte del alimento del hombre en todo el mundo, siendo
indispensable en su dieta debido a su alto valor nutritivo, debido a que es fácilmente
digerible y es un buen proveedor de proteínas, minerales y vitaminas en sus diferentes
formas de preparación(Narro,2001); sin embargo, se ha señalado que muchas especies de
peces están parasitadas, sirviendo de huéspedes definitivos o intermediarios de una serie de
protozoos, helmintos, o artrópodos que producen alteraciones negativas en la textura y
presentación, pudiendo disminuir su productividad y comercialización debido a estos
problemas(Narro, 2001).
El conocimiento de aspectos patológicos de helmintos presentes en especies
marinas de interés comercial de consumo directo que afectan la salud humana es
importante para determinar la magnitud de la infección y proponer medidas de control.
Entre estos patógenos están las larvas de nemátodes Anisakis simplex, Anisakis physeteris
y Pseudoterranova decipiens que ocasionan una zoonosis parasitaria denominada
anisakidosis.(Cabrera et al, 2002)
La presencia de formas parasitarias está influida por muchos factores que puede ir
desde el tamaño del pez (al ser estos parásitos acumulativos, a mayor tamaño del pez,
existe mayor probabilidad de encontrar larvas de parásitos), hasta cambios en la ecología
marina como temperatura, luz, disminución de huéspedes intermediarios, hábitat,
etc. (Pérez, I. 1999). Se encontraron larvas de Anisakis en vísceras de Trachurus
picturatus murphyi “jurel” de quien se sabe que es pez de vida pelágica, viven en aguas
libres, mar adentro y se alimenta de peces pequeños, lo cual explicaría la presencia de
formas larvarias.(Ibelice,1999)
En el ciclo biológico de estos parásitos, los hospedadores definitivos son mamíferos
marinos (ballenas, delfines y lobos marinos) que eliminan los huevos de los nemátodes con
sus heces en el mar. El primer hospedero intermediario es un copépodo o un crustáceo
eufáusido, el segundo es un pez planctófago. El parásito completa el ciclo cuando llega al
estómago del hospedero definitivo. El hombre se infecta accidentalmente al ingerir un
plato crudo como el “sushi”, “sashimi” y “cebiche” contaminado con la larva 3 ésta se
localiza en la superficie visceral o se enquista en la musculatura de un pez carnívoro
(hospedero paraténico) que se parasita al ingerir a un pez planctófago infectado (Ishikura
H,1992). En el hombre el parásito, no logra desarrollar hasta la forma adulta y solo muda
hasta el estadio L4.
La parasitación del hombre por la larva viva se conoce como anisakiasis, dando
lugar a sintomatología digestiva principalmente, describiéndose también casos raros de
invasión de otros órganos como pulmón, hígado, bazo, páncreas, etc. También han sido
descritos cuadros de alergia a Anisakis simplex IgE mediadas: reacciones por antígenos
termoestables del parásito que se desarrollan a pesar de que el pescado se consuma
cocinado o congelado y una parasitación aguda digestiva con síntomas alérgicos llamada
anisakiasis gastro-alérgica.
Los cambios patológicos generados en el tracto gastrointestinal humano durante la
infestación con este parásito son el resultado combinado de: La acción traumática directa
causada por la larva durante la invasión tisular y la interacción compleja entre el sistema
inmunitario del hospedador y el conjunto de sustancias liberadas o contenidas en el
parásito.(Laffon et al,2000)
El diagnóstico en la fase aguda se realiza por endoscopia y el tratamiento consiste
en retirar la larva con una pinza; el diagnóstico en la etapa crónica se lleva a cabo por
medio de una biopsia para buscar restos de la larva o por serología y el tratamiento
mediante la resección de la lesión (Ishikura H,1992). En la forma gastro-alérgica, el
diagnóstico se basa en determinar la historia de haber padecido el cuadro después de la
ingesta del pescado, presentar prueba cutánea positiva, detectar anticuerpos específicos
(IgE) contra A. simplex mediante “prick test” y ausencia de reacción a las proteínas del
pescado (Audicana Mt,2002).
En la costa peruana, el primer estudio experimental de patogenicidad fue la
demostración de la invasión gástrica de Felis silvestris forma catus (gato) por larvas de A.
simplex aisladas de peces de la costa norte. En la mucosa gástrica de dos felinos se
observaron necrosis del epitelio glandular y reacción inflamatoria constituida
principalmente por polimorfonucleares, neutrófilos e histiocitos (Escalante y Murga,1987).
Posteriormente se demostró, por primera vez en el neotrópico, la patogenicidad de las
larvas L3 de A. physeteris en Canis familiaris (perro), las larvas fueron aisladas de
Scomber japonicus (caballa) procedentes de las costas de Ica (costa central); las lesiones
fueron compatibles con anisakidosis gástrica aguda humana (Cabrera,1997).
También se ha estudiado la invasión del estómago y páncreas de Mesocricetus
auratus (hamster) por larvas L3 de Anisakis sp., recuperadas de (jurel), (caballa) y
(merluza); del mismo modo, se demostraron lesiones en el estómago, intestino, mesenterio
y vejiga urinaria en C. familiaris (perro) (Narro,2001), pero los autores tampoco han
identificado las larvas; por ello, existe la posibilidad de haber inoculado simultáneamente
A. simplex y A. physeteris. El perro y el gato podrían ser buenos modelos biológicos debido
a la posibilidad de que se encuentren infectados naturalmente en la costa peruana;
En el Perú, la importancia de Anisakis y su efecto patogénico es escasamente
conocida, es por ello que el presente trabajo esta orientado a comprobar el efecto
patogénico de larvas de Anisakis en Mesocricetus auratus “hámster” infectados
experimentalmente.
II. MATERIAL Y METODO
A. MATERIALES
1. MATERIAL BIOLÓGICO
Seis especimenes de Mesocricetus auratus “hámster”, adquiridos en el
mercado Mayorista de la ciudad Trujillo, del departamento de La Libertad.
104 larvas de tipo de Anisakis, obtenidas de las vísceras de 748 ejemplares
de Trachurus picturatus murphyi “jurel”.
REACTIVOS
Solución Fisiológica al 0.9%
Halatal (50ml)
Formol 10%
B. METODO
1. OBTENCION Y SELECCIÓN DEL MATERIAL BIOLOGICO
1.1 DE LA ESPECIE ANIMAL
Para el estudio realizado los especímenes de Mesocricetus auratus
“hámster” fueron adquiridos del mercado Mayorista de la ciudad Trujillo,
del departamento de La Libertad, para lo cual se tuvo en consideración los
siguientes criterios:
Mesocricetus auratus :
Especimenes machos adultos jóvenes, aparentemente sanos.
Alimentación controlada, para evitar posibles infecciones
naturales.
1.2 OBTENCION DE LARVAS DE Anisakis
1.2.1 Obtención de las vísceras de los peces.
Las vísceras fueron obtenidas de Trachurus picturatus murphyi
“jurel” grande y mediano. Los peces procedieron de la zona sur del
océano pacifico (Chile) y fueron adquiridos en el Mercado
Mayorista de Trujillo durante los meses de agosto y septiembre del
2008.(Anexo 1)
2. TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
2.1 DE LA ESPECIE ANIMAL
Una vez obtenidos los animales de experimentación, se trasladaron al
Laboratorio de Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo, los
cuales fueron seleccionados aleatoriamente en dos grupos, respectivamente:
Mesocricetus auratus :
Grupo Problema: 4 mamíferos de experimentación.
Grupo Testigo: 2 mamíferos de experimentación.
Los grupos de experimentación se mantuvieron en jaulas separadas durante
el proceso de investigación, donde recibieron alimentación balanceada .
2.2 DE LAS LARVAS DE Anisakis
2.2.1 Transporte
Una vez recolectadas las vísceras de Trachurus picturatus murphyi
“jurel” (Fig.Nº14), fueron colocadas en bolsas plásticas apropiadas
para la recolección las cuales fueron rotuladas, y transportadas
inmediatamente en una caja de tecnoport al laboratorio de
Parasitología de la Universidad Nacional de Trujillo para los
respectivos análisis.
1.2.2 Detección y recolección de las larvas
Las vísceras de los peces fueron analizadas individualmente
observándolo directamente o con la ayuda de una lupa el peritoneo,
cavidad abdominal y la superficie de las vísceras .Las larvas
ubicadas (Fig.Nº 15) fueron extraídas con la ayuda de pinzas
evitando lesionarlas. Las larvas fueron seleccionadas bajo los
siguientes criterios:
Larvas enquistadas en los tejitos del huésped
Morfología larvaria
1.2.3 Mantenimiento de las larvas
Las larvas de Anisakis sp. encontradas en las vísceras de Trachurus
picturatus murphyi “jurel” fueron puestas en placas Petri con solución
salina fisiológica (S.S.F.) al 0.9%, para su mantenimiento en
refrigeración por espacio de un día(Fig.Nº16). En su mayoría
presentaron una cubierta fibrosa.
1.2.4 Identificación de las larvas
Parte de las larvas recolectadas fueron fijadas con formol-acético al
10% y aclaradas con lactofenol de Langeron (Fig.Nº20), e
identificadas de acuerdo a sus características morfológicas las
cuales fueron comparadas con las informaciones otorgadas por
Narro,H. (2001) y Cabrera y col. (1994).
2.3 Inoculación de larvas experimentalmente
Los especimenes del grupo problema en Mesocricetus auratus se les
administro 10 larvas de Anisakis sp. (Fig.Nº18). Para recuperar las larvas
inoculadas, los animales fueron anestesiados con una sobredosis de 1ml de
halatal inoculado por vía intraperitoneal, luego los Mesocricetus auratus y
Felis catus fueron necropsiados a las 12, 24, 48 y 96. horas,
respectivamente.
2.4 Determinación del efecto patogénico
Luego de sacrificados los animales de experimentación, para la
determinación de la migración y del efecto patogénico de las larvas de
Anisakis sp. , se examino macroscópicamente la cavidad interna del tubo
digestivo, el peritoneo visceral y parietal y la superficie de las vísceras, de
cada animal, tratando de localizar las posibles lesiones y verificando la
presencia de hipertrofia, hemorragias, o la presencia de larvas, los órganos
más afectados fueron separados y depositados en frascos con formol al 10%
, para su posterior estudio anatomopatológico.
2.5 Determinaciones histopatológicas
Para el estudio microscópico, cada pieza (yeyuno, estomago) extraídas
quirúrgicamente fue sometida a deshidratación en alcoholes, embebidos e
incluidos en parafina, para realizar los cortes histopatológicos de 4 a 5 µm
de espesor. Los cortes fueron coloreados con la técnica convencional de
hematoxilina-eosina (Anexo 4), en los cuales fueron detectadas las
alteraciones anatomopatológicas del tejido dañado.
Las lecturas de las láminas histológicas se realizo a simple ciego y estuvo a
cargo de un patólogo del Departamento de Patología del Hospital Regional
de Trujillo.
III. RESULTADOS
En la Tabla 1 y Fig. Nº 1 se presenta que las larvas administradas penetraron los
tejidos a nivel de estomago e intestino del Mesocricetus auratus, a las 48 y 96
horas respectivamente, causándoles hemorragias, edemas y infiltración
inflamatoria aguda y crónica. En los gatos no se encontraron larvas inoculadas, ni
ninguna lesión macroscópica.
En las Fig.Nº 2 muestra la observación estereoscópica de la Larva de Anisakis sp.
libre en el estomago del Mesocricetus auratus , a las 48 horas de haber sido
inoculadas.
En la Fig.Nº 3 y 4 se muestra la Larva de Anisakis sp en el yeyuno y en el
estomago del Mesocricetus auratus a las 96 horas de haber sido inoculadas.
En el Tabla 2 se presentan las características histopatológicas de lesiones en
mucosa gastrointestinal de Mesocricetus auratus a las 48 y 96 horas de ser
inoculados experimentalmente con larvas de Anisakis sp., así como las estructuras
donde fueron localizadas las larvas.
TABLA 1: Número de larvas de Anisakis sp. encontradas invadiendo tejidos de Felis catus y
Mesocricetus auratus y las estructuras de ubicación de las larvas.
Periodo de infección (horas)
Nº de larvas encontradas por mamífero *
Estructuras de ubicación de las larvas
Mesocricetus auratus
12 0 -
240
-
48 2 Pared del estomago
96 4Pared del estomago y del
Yeyuno
TOTAL6
* Sólo dos de los ejemplares de Mesocricetus auratus examinados al término de los
correspondientes periodos de infección se encontró parasitado con larvas de Anisakis.
Fig. Nº 1: Pictograma que muestra la ubicación de las larvas de Anisakis por periodo de
infección. Θ = en Mesocricetus auratus, los números indican el periodo
de infección en horas, los números iguales corresponden a los hallazgos
en un solo mamífero.
Θ 48
Θ 96
Θ 48 Θ 96
Θ 96
Θ 96
Estómago
Duodeno
Yeyuno
Fig. Nº 2: Observación estereoscópica de Larva de Anisakis sp. libre en el estomago
del Mesocricetus auratus (48 horas). Aum..40x
Fig. Nº3: Observación estereoscópica de Larva de Anisakis sp. en el yeyuno del
Mesocricetus auratus (96 horas). Aum..40x
Fig. Nº 4: Observación estereoscópica de Larva de Anisakis sp. enrollada en el
estomago del Mesocricetus auratus (96 horas). Aum..40x
Tabla 2: Características histopatológicas de lesiones en mucosa gastrointestinal de Mesocricetus auratus a las 48 y 96 horas de ser inoculados experimentalmente con larvas de Anisakis sp.
Muestras
Tiempo de exposición
(horas)
INFLAMACION LESION EPITELIAL ULCERACION
INFILTRADOHIPEREMIA GASTRICA INTESTINAL GASTRICA INTESTINAL
PMN MN
Testigo 96 - - - - - - -
Problema
Mesocricetus
auratus
48 + + + ++ - ++ -
Problema
Mesocricetus
auratus
96 ++ ++ ++ +++ ++ +++ ++
Leyenda:
PMN: Polimorfonucleares ( - ) : Ausente ( ++ ) : Moderado
MN: Mononucleares ( + ) : Leve ( +++ ): Severa
Fig. Nº5: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica normal (TESTIGO) de Mesocricetus auratus a las 48 horas. Aum. 10 X.
Fig. Nº 6: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica del Mesocricetus auratus a las 48 horas,se muestra: a = proceso inflamatorio moderado con infiltración de PMN y MN (linfocitos) Aum. 10 X.
Fig. Nº 7: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica del Mesocricetus auratus a las 48 horas, se muestra : a = erosiones superficiales , b = Ulcera gástrica benigna Aum. 10x
Fig. Nº 8: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica del Mesocricetus auratus a las 48 horas, se muestra : a = Múltiples erosiones superficiales . Aum. 10 X.
Fig. Nº 9: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica normal (TESTIGO) de Mesocricetus auratus a las 96 horas. Aum. 10 X.
.
Fig. Nº 10: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica del Mesocricetus auratus a las 96 horas, se muestra : a = mucosa gastroesofagica -erosionada , b = ulcera gástrica severa Aum. 10 X.
Fig. Nº 11: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa gástrica del Mesocricetus auratus a las 96 horas, se muestra: a = Ulcera gástrica y hemorragias Aum.10x
Fig. Nº 12: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa intestinal normal (TESTIGO) de Mesocricetus auratus a las 96 horas. Aum. 10 X.
Fig. Nº 13: Vista microscópica de corte trasversal de la mucosa del intestino delgado del Mesocricetus auratus a las 96 horas, se muestra: a = erosión múltiple b = Ulcera moderada Aum. 10x.
IV. DISCUSION
La ausencia o presencia de signos clínicos en algunos animales de
experimentación, infectados con larvas de Anisakis podría deberse al daño causado
en la pared intestinal y a la misma sensibilidad del huésped. Es por ello que en el
presente trabajo solo se llegaron a encontrar larvas en Mesocricetus auratus y no en
Felis catus, esto puede deberse a que las larvas inoculadas no hayan pertenecido al
estado larvario infectivo. También se puede deberse a que la larva discurra a lo largo
del tubo digestivo sin que produzcan algún problema puesto que no están adaptadas
a organismo seleccionado, eliminándose con la defecación.
La capacidad invasora y penetradora de las larvas concuerda con los hallazgos
hechos por otros autores; tales como Narro (2001), quien registró haber observado la
penetración de la mucosa, submucosa, serosa hasta el peritoneo e invasión a otros
órganos por parte de las larvas. Narro (2001)
El estudio histopatológico de las lesiones encontradas concuerdan con los
resultados encontrados por otros autores (Murga,1988;Narro,2001) quienes reportan
que la penetración de las larvas ocasionan en el tejido circundante una respuesta
inflamatoria con presencia de linfocitos polimorfonucleares, linfocitos cuya fase
puede ser aguda y luego evolucionar a crónica lo cual dependerá del grado y tiempo
de la lesión. Siendo estas las manifestaciones más comunes para este tipo de
infección en animales de experimentación.
En los especimenes de Mesocricetus auratus del grupo testigo se mostraron
microscópicamente una mucosa gástrica con leves cambios inflamatorios
superficiales, es decir una superficie con un epitelio cilíndrico simple superficial y
glandular de aspecto normal, en donde se evidenció la integridad de la mucosa
gástrica como resultado de un equilibrio entre los factores agresivos y defensivos de
la mucosa.
En el Tabla 2 del grupo problema, muestra que el Mesocricetus auratus
evaluado a las 96 horas de la inoculación, presento microscópicamente infiltración
de polimorfonucleares(PMN) y mononucleares(MN), hiperemia, gastritis aguda
severa, erosión gástrica multifocal, duodenitis crónica moderada a severa multifocal.
La inflamación observada por la presencia de PMN y MN constituyen una respuesta
fisiológica a la agresión celular causada posiblemente por las larvas de Anisakis
dado a que se ha determinado que las larvas se proteasas y hialuronidasas para
fijarse a la mucosa gastroinstestinal, la unión del parasito a la mucosa se debe a una
enzima colagenolítica producida en el esófago y que factores locales, como lesiones
previas a la mucosa, alteraciones de la motilidad gastrointestinal y pH del medio,
influyen tanto en la capacidad de fijación como en la penetración de la larva(López
et al,2000;Ortega.E,2000)
Las alteraciones de los vasos sanguíneos, observadas microscópicamente
facilitarían el transporte de leucocitos principalmente PMN provenientes de la
sangre con la finalidad de fagocitar productos como proteínas y tejido necrótico
originados por las larvas de Anisakis.
La hiperemia observada microscópicamente a nivel de la mucosa gástrica del
Mesocricetus auratus es debido a la liberación de sustancias químicas en los sitios
lesionados a causa del poder gastrolesivo que mostraban las larvas de Anisakis, tales
sustancias químicas como histamina, bradicina y serotonina estimularían una
vasodilatación de arteriolas, esfínteres pre capilares y venulas, incrementando la
permeabilidad microvascular y disminuyendo el liquido intravascular.
En la Tabla 2 el grupo problema de Mesocricetus auratus evaluado a las 48
horas de su inoculación presentó microscópicamente infiltración polimorfonucleares
y mononuclares leve, hiperemia leve, lesión epitelial leve, esto se debería al periodo
de exposición que este ejemplar experimentó y a la viabilidad que presentaron las
larvas de Anisakis después de ser inoculadas
CONCLUSIONES
Las larvas de Anisakis sp. inoculadas experimentalmente a Mesocricetus auratus
provocaron en el tejido reacciones inflamatorias leves y moderadas, hiperemia leve y
moderada y lesiones de la mucosa gastrointestinal.
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ANEXOS
ANEXO Nº1: DE LA RECOLECCION DE LAS MUESTRAS: VISCERAS DE JUREL Y LA OBTENCION DE LARVAS DE Anisakis sp.
Fig. Nº14: Visceras de Trachurus picturatus murphyi “jurel” procedentes del mercado Mayorista de la ciudad de Trujillo
Fig. Nº15: Observación macroscópica de Larva de Anisakis en el vísceras de Trachurus picturatus murphyi “jurel”
Fig. Nº16: Observación macroscópica de larvas de Anisakis sp. obtenidas de vísceras de
Trachurus picturatus murphyi “jurel”
ANEXO Nº 2: INOCULACION DE LARVAS de Anisakis sp. a Felis catus “gato domestico” y Mesocricetus auratus “hamster”
ANEXOS Nº3: IDENTIFICACION
MORFOLOGICA DE LAS LARVAS DE
Anisakis sp. RECUPERADAS DE Mesocricetus auratus
Fig. Nº17: Inoculación de larvas de Anisakis sp. en Felis catus “gato domestico”
Fig. Nº18: Inoculación de larvas de Anisakis sp. en Mesocricetus auratus
Fig. Nº19: Tubo digestivo e intestinos de Felis catus “gato domestico”
Fig. Nº20: Tubo digestivo e intestinos de Mesocricetus auratus “hamster”
Fig. Nº 21: Observación estereoscópica de Larva de Anisakis sp. desenrollada en el
estomago del Mesocricetus auratus (96 horas).Aum.40
Fig. Nº 22: Observación estereoscòpica de Larva de Anisakis sp.Aum.10x
Diagrama Nº1: Estudio morfológico de la Larva de Anisakis sp.
Cr.
Cd.
Mucrón
Ventrículo
Esofágico
Esófago
Cd.
Cr.
Fig. Nº 23: Observación microscópica de Larva de Anisakis que muestra el extremo
craneal , donde se encuentra el: poro excretor, boca y diente
Fig. Nº 24: Observación microscópica de Larva 3 de Anisakis sp. se muestra el
extremo caudal (Cd), donde se encuentra: el poro genital, espina cuticular.
Poro excretor
Boca
Diente
Poro genital
Espina cuticular
Cd.
Mucrón
A simplex s.l. (Ventrículo
largo y final oblicuo)
A physeteris s.l. (Ventrículo muy largo y final
recto)
A typica s.l.
(Ventrículo corto y final recto)
Fig.Nº25: Diferencias en la morfología de Anisakis simplex, A.Physeteris y A.Typica
ANEXO Nº4: COLORACION DE CORTES HISTOLOGICOS DE MUCOSA
GASTROINTESTINAL EN Mesocricetus auratus inoculados con larvas
de Anisakis
Anisakis simplex puede producir una reacción
alérgica grave, que se presenta entre cinco y 26 horas
después de la ingesta, usualmente a las cinco horas19.
Las formas de presentación de esta parasitosis son
gástrica (95,6%), intestinal (4%) y extra-intestinal (0,4%).
La presentación clínica más frecuente es una gastritis
aguda, caracterizada por un dolor epigástrico intenso
y repentino, asociado a náuseas y vómitos. El dolor se
inicia entre una y 12 horas después de la ingesta, con
rangos de hasta 14 días. Si se realiza una endoscopia
precozmente se puede visualizar la larva en la mucosa
gástrica, generalmente viva y parcialmente introducida;
si es realizada posteriormente, se va a encontrar
erosión de la mucosa, placas inflamatorias con presencia
de eosinófilos y granulomas; en estos casos se
recupera la larva en forma parcial20-22. A veces se producen
accesos de tos con eliminación del ejemplar, sin
otros síntomas acompañantes. Ocasionalmente puede
eliminarse por deposiciones. La larva muere en el transcurso
de siete meses.
La respuesta alérgica de