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Análisis preliminar de los determinantes genéticos de la fenología del germoplasma de cebada en Uruguay Ariel Castro 1 , Luis Viega 2 , Andrés Locatelli 1 y Nicolás Mastadrea 2 1 Departamento de Producción Vegetal, Est. Exp. “Dr. Mario A. Cassinoni”, Facultad de Agronomía, Universidad de la República, Ruta 3 Km 363, Paysandú, 60000, Uruguay; 2 Departamento de Biología Vegetal, Facultad de Agronomía, Garzón 780, Montevideo 12900, Uruguay [email protected] Este trabajo fue financiado por fondos competitivos de INIA (FPTA 227) y la Universidad de la República a través de la Comisión Sectorial de Investigación Científica (CSIC I+D) Material: 78 genotipos de cebada, representativos del germoplasma de cebada utilizado en Uruguay (variedades históricas y modernas, líneas experimentales relevantes, fuentes de variabilidad, etc) Caracterización genotípica: 1536 SNPs (1033 incluídas en el análisis) usando la plataforma Illumina Golden Gate oligonucleatide pool assay desarrollada para cebada (BOPA1) Caracterización fenotípica: 4 experimentos a campo, sembrados en Sayago, Montevideo, en parcelas de 0.4 m², en fechas contrastantes (12/6/09, 11/08/09, 24/06/10, 11/08/10). Se determinó: ciclo a antesis y sus tres subfases (siembra-Z20, Z20-Z30, Z30- antesis) y la duración de llenado de grano y la respuesta al fotoperíodo en cada subfase analizada (mediante el contraste entre fechas de siembra en el mismo año) Análisis: Análisis de asociación de genoma completo (Genome-wide association analysis) utilizando un modelo: Y = Xβ + Qυ + Zμ X: Matriz de scores genéticos Q: Matriz de estructura Z: Matriz de coancestría El análisis se realizó en TASSEL (www.maizegenetics.net) La matriz Q se calculó con STRUCTURE (Pritchard et al., 2000) Objetivos: Conocer las determinantes genéticas de la duración de las distintas subfases del desarrollo en germoplasma de cebada relevante para el mejoramiento genético nacional Se encontraron 53 regiones con asociaciones significativas para la duración de las 5 variables fenológicas analizadas. Una proporción importante de las asociaciones fue específica por experimento Se encontraron 14 asociaciones significativas para la respuesta al fotoperíodo de las 5 variables fenológicas. Ninguna de las asociaciones se detectó en más de una combinación variable/ambiente En resumen se han detectado asociaciones en todas las variables estudiadas, localizadas en distintas regiones a lo largo del genoma. Su relación con genes y QTLs detectados en trabajos anteriores están siendo estudiadas así como la relación con la estructura de la población y sus posibles efectos en la evolución del mejoramiento de cebada. 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 0 20 40 60 80 100 120 140 160 Fecha (días post 15/6) Temperatura diaria promedio (ºC) 2009 2010 JUNI O JULI OO AGOSTO SETIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE 0 5 10 15 20 25 30 40 55 70 85 100 115 130 Duración (Días) Frecuencia 2009A 2009B 2010A 2010B Ciclo a antesis 0 10 20 30 40 50 60 10 20 30 40 50 Duración (Días) Frecuencia 2009A 2009B 2010A 2010B Emergencia - Z20 0 5 10 15 20 25 30 0 10 20 30 40 50 60 Duración (Días) Frecuencia 2009A 2009B 2010A 2010B Z20 - Z30 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 10 20 30 40 50 60 Duración (Días) Frecuencia 2009A 2009B 2010A 2010B Z30 - Antesis 0 5 10 15 20 25 30 10 20 30 40 50 60 Duración (Días) Frecuencia 2009A 2009B 2010A 2010B Llenado de grano Figura 2. Distribución de frecuencias observadas para ciclo a antesis, su partición en subperíodos y la duración del llenado de grano de acuerdo al año (2009 y 2010) y la época de siembra (A para época temprana y B para época tardía) de cada experimento. Figura 1. Temperaturas diarias promedio para 2009 y 2010 en Sayago. Emerg Z20 Z20 Z30 Z30 - Antesis Antesis Llenado Duración Respuesta al fotoperíodo 0 cM 10 cM 20 cM 30 cM 40 cM 50 cM 60 cM 70 cM 80 cM 90 cM 100 cM 110 cM 120 cM 130 cM 140 cM 150 cM 160 cM 170 cM 180 cM 190 cM 200 cM 1H 2H 3H 4H 5H 6H 7H Distancias Ppd-H2 denso Vrn-H3 Vrn-H2 Vrn-H1 eam8 eps2S HvCO1 eps3L eps4L eps5L eps6L.1 eps6L.2 eps7S eps7L eam7 eam9 Ppd-H1 Figura 3. Resumen de localización de asociaciones significativas para duración de los distintas variables fenológicas estudiadas y su respuesta al fotoperíodo en el mapa de segmentos consenso para cebada (“bin Map”, ver Kleinhofs et al., 2001). Se indican los segmentos donde se encontraron asociaciones, indicando la variable. En varios casos hay más de un marcador con asociación significativa en el mismo segmento. Se incluye la ubicación reportada de genes mayores que afectan la fenología

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Anlisis preliminar de los determinantes genticos de la

fenologa del germoplasma de cebada en Uruguay

Ariel Castro1, Luis Viega2, Andrs Locatelli1 y Nicols Mastadrea2

1Departamento de Produccin Vegetal, Est. Exp. Dr. Mario A. Cassinoni, Facultad de Agronoma, Universidad de la Repblica, Ruta 3 Km 363, Paysand, 60000, Uruguay; 2Departamento de Biologa Vegetal, Facultad de

Agronoma, Garzn 780, Montevideo 12900, Uruguay [email protected]

Este trabajo fue financiado por fondos competitivos de INIA

(FPTA 227) y la Universidad de la Repblica a travs de la

Comisin Sectorial de Investigacin Cientfica (CSIC I+D)

Material:

78 genotipos de cebada, representativos del germoplasma de cebada utilizado en

Uruguay (variedades histricas y modernas, lneas experimentales relevantes,

fuentes de variabilidad, etc)

Caracterizacin genotpica:

1536 SNPs (1033 includas en el anlisis) usando la plataforma Illumina Golden

Gate oligonucleatide pool assay desarrollada para cebada (BOPA1)

Caracterizacin fenotpica:

4 experimentos a campo, sembrados en Sayago, Montevideo, en parcelas de 0.4 m,

en fechas contrastantes (12/6/09, 11/08/09, 24/06/10, 11/08/10).

Se determin: ciclo a antesis y sus tres subfases (siembra-Z20, Z20-Z30, Z30-

antesis) y la duracin de llenado de grano y la respuesta al fotoperodo en cada

subfase analizada (mediante el contraste entre fechas de siembra en el mismo ao)

Anlisis:

Anlisis de asociacin de genoma completo (Genome-wide

association analysis) utilizando un modelo:

Y = X + Q + Z

X: Matriz de scores genticos

Q: Matriz de estructura

Z: Matriz de coancestra

El anlisis se realiz en TASSEL (www.maizegenetics.net)

La matriz Q se calcul con STRUCTURE (Pritchard et al.,

2000)

Objetivos:

Conocer las determinantes genticas

de la duracin de las distintas

subfases del desarrollo en

germoplasma de cebada relevante

para el mejoramiento gentico

nacional

Se encontraron 53 regiones con asociaciones significativas para la duracin de las 5 variables fenolgicas

analizadas. Una proporcin importante de las asociaciones fue especfica por experimento

Se encontraron 14 asociaciones significativas para la respuesta al fotoperodo de las 5 variables fenolgicas.

Ninguna de las asociaciones se detect en ms de una combinacin variable/ambiente

En resumen se han detectado asociaciones en todas las variables estudiadas, localizadas en distintas regiones a

lo largo del genoma. Su relacin con genes y QTLs detectados en trabajos anteriores estn siendo estudiadas as

como la relacin con la estructura de la poblacin y sus posibles efectos en la evolucin del mejoramiento de

cebada.

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

0 20 40 60 80 100 120 140 160

Fecha (das post 15/6)

Tem

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Duracin (Das)

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Ciclo a antesis

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Duracin (Das)

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2010A

2010B

Emergencia - Z20

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Duracin (Das)

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Duracin (Das)

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Z30 - Antesis

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10 20 30 40 50 60

Duracin (Das)

Fre

cu

en

cia

2009A

2009B

2010A

2010B

Llenado de grano

Figura 2. Distribucin de frecuencias observadas para

ciclo a antesis, su particin en subperodos y la duracin

del llenado de grano de acuerdo al ao (2009 y 2010) y la

poca de siembra (A para poca temprana y B para

poca tarda) de cada experimento.

Figura 1. Temperaturas diarias promedio para 2009 y 2010 en

Sayago.

Emerg Z20

Z20 Z30

Z30 - Antesis

Antesis

Llenado

Duracin

Respuesta al fotoperodo

0 cM

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170 cM

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1H 2H 3H 4H 5H 6H 7H Distancias

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eps6L.1

eps6L.2

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Ppd-H1

Figura 3. Resumen de localizacin de asociaciones significativas para duracin de los distintas variables fenolgicas estudiadas y su

respuesta al fotoperodo en el mapa de segmentos consenso para cebada (bin Map, ver Kleinhofs et al., 2001). Se indican los segmentos

donde se encontraron asociaciones, indicando la variable. En varios casos hay ms de un marcador con asociacin significativa en el

mismo segmento. Se incluye la ubicacin reportada de genes mayores que afectan la fenologa

http://www.maizegenetics.net/