transferencia de embriones en vacas raza carora
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TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN LA RAZA CARORA
Aldemar Chávez RodríguezM.V.Z.U.T.
.
PLANEACION DE T.E.
Diseño de unprograma de t.e.
Selección de donadorasy receptoras
.
� 1954 PRIMER TERNERO NACIDO POR T.E.� 1979 PRIMERAS EXPERIENCIAS EN
VENEZUELA (ROMUALDO GONZALEZ)VENEZUELA (ROMUALDO GONZALEZ)� 1980 VIABLE COMERCIALMENTE LA T.E.� 1982 COMERCIO INTERNACIONAL DE
EMBRIONES CONGELADOS
.
1- PROPOSITOS.� COMERCIAL.� GENETICO.
ANIMALES EXPOSICION.� ANIMALES EXPOSICION.� CREAR REPRODUCTORES.� MULTIPLICAR LAS HEMBRAS ELITE.� MULTIPLICAR UNA RAZA PURA
2- USOS T.E.-COMERCIO DE GENETICA SUPERIOR.
-MULTIPLICAR ANIMALES FISICAMENTE IMPEDIDOS-PRUEBAS DE PROGENIE.
.
-PRUEBAS DE PROGENIE.-USOS PARA EL SEMEN DE ALTO COSTO.-TRANSPORTE DE MATERIAL GENETICO.-CONSERVAR MATERIAL GENETICO.
3 - LIMITACIONES T.E.-COSTOS.
-TIEMPO Y CONSTANCIA EN LOS TRATAMIENTOS.-RECEPTORAS DISPONIBLES.-RECEPTORAS DISPONIBLES.-EL 20% DE LA RECEPTORAS NO SE PREÑA T.E.-EL 20% DE LA DONADORAS NO PRODUCEN EMBRIONES.-NO TODAS LAS VACAS SON BUENAS DONADORAS.-PERSONAL CAPACITADO Y MOTIVADO.-INSTALACIONES BASICAS.- PROGRAMA NUTRICIONAL Y SANITARIO ADECUADO.
.
HISTORIA REPRODUCTIVAPROGRAMA SANITARIOCICLOS REGULARES>A 60 DIAS POST PARTO
EVALUACION REPRODUCTIVAPERMEABILIDAD CERVICALCUERNOS UTERINOS TAMAÑO OVARICO >A 60 DIAS POST PARTO
INTERVALO ENTRE PARTOSCONDICION CORPORALBALANCE ENERGETICO
POSITIVOEDAD MAX 13-14 AñOSNOVILLAS CICLANDO
TAMAÑO OVARICO VAGINA ANORMALIDADESNOVILLAS CTR > 3ULTRASONIDOCUERPO LUTEOOVARIOS (FOLICULOS>10)
.� NOVILLAS� CTR > 3 ANDERSON 88
� PESO > 320 KG� CICLANDO IDEAL� CRUCE LECHERO
� VACAS.� CERVIZ.� > 80 DIAS POST
PARTO.C.C. � CRUCE LECHERO
� BALANCE E +� PELVIS AMPLIA� TEMPERAMENTO� PROGRAMA
SANITARIO
� C.C. � CICLANDO .� BALANCE E+.� PROGRAMA SANITARIO� HABILIDAD MATERNA.
CONTROL DEL TRACTO REPRODUCTIVO NOVILLAS (CTR)
CALIFICATIVO CERVIS UTERO OVARIOS ESTRUCTURAS P4
IND.OVARICO
CTR Diámetro diámetro Tono long ancho grosor folículos Mm CL
Mm mm mm mm mm
Anderson 88.
1- Infantil <12 <10 - 12 8 6 - - - - 0.6
2- Inmaduro 12 12-15 - 15 10 8 F1 8 - - 1.2
3- En desarrollo 15-20 15 - 18 12 10 F1 8-10 - - 2.2
4 – Activo 20 18-20 + 24 14 12 F2 >10 +,- + 4.0
5- Cíclico >20 >25 ++ >25 16 12 F2 >12 + + >4.8
RECEPTORAS
Fuente :finca la tigra 2008
RECEPTORAS CEBUINAS
Finca el jobal 2000
ECOGRAFIA DEL CUERPO LUTEO
Fuente: Chávez 2008
CUERPO LUTEO
Fuente :Chávez 2000
.
Tratamientoshormonales
Superovulaciónde donadoras
Sincronizaciónde receptoras
HORMONAS PARA SUPEROVULAR BOVINOS
� FSHP - siux- folltropin –pluset� FSHO - ovagen� FSHB - bovina recombinante súper ova� FSHE - equina recombinante� FSHE - equina recombinante� PMSG - ecg- folligon – novormón- anti pmsg� HMG - humana – pergovet.
PLUSET (2 X 500 u.i) FOLLTROPIN (400 mg)
� PLUSET FOLLTROPIN� BOS TAUROS� NOVILLAS 300 u.i-30% 200 mg -50%
VACAS 500 u.i.-50% 300 mg -75%� VACAS 500 u.i.-50% 300 mg -75%� BOS INDICUS� NOVILLAS 200u.i.-20% 120mg- 30%� VACAS 300 U.I.-30% 180mg- 45%
Chávez 1996
Superovulación FOLLTROPIN70% 31dias.
� 0 implante crestar + 2 ml inyectables� 8 retiro implante +2 ml preloban� 9-10 detectar celo + 2,5 ml de conceptal ev� 19 palpación del cuerpo lúteo� 20 6 am 3 ml de FOLLTROPIN VIA im
6 pm 3 ml de folltropin im� 21 6 am 2,5 ml de folltropin im� 21 6 am 2,5 ml de folltropin im
6 pm 2,5 ml de folltropin im� 22 6 am 1 ml folltropin + 7 ml lutalyse
6 pm 1 ml folltropin + 3 ml lutalyse� 23 6 am 0,5 ml de folltropin im
6 pm 0,5 ml de folltropin im� 24 6 am DETECTAR EL CELO
6 pm i.a. 12 HORAS� 25 6 am i.a. 24 HORAS � 31 am colecta y t.e.
RESULTADOS FOLLTROPIN 70 %
� VACAS TRATADAS 12 Pro/vaca� Estructuras colectadas 40 3.3Estructuras colectadas 40 3.3� Embriones viables 18 1,5� Receptoras preñadas 10 0,83� % Efectividad t.e. = 55,55%.
COSTOS RESULTADOS FOLLTROPIN 70 %
CONCEPTO COSTO ESTIMADOMATERIAL 12 DONADORAS Y 90 RECEPTORAS
3.600 US
Costos estimados 12 donadoras (COSTO DONADORA/ 7 RECEPORAS 300 US)
RECEPTORAS
COSTO TECNICO COLECTA(100 US/DONADORA )
1.200 US
COSTO PREÑEZ CONFIRMADA(100 US/RECEPTORA) X 10
1.000 US
COSTO TOTAL /PREÑEZ 580 US
CHAVEZ 1996
LH
Ovulación
Ondas Foliculares
FSHProg.
Celo 105 21
LH
Ovulación
Ondas Foliculares
FSHProg.
Celo 105 21
Sincronización de las ondas foliculares 1995-2003,Bó
� Progestágenos y estrógenos� P4 + 17β estradiol� 50-100mg p4 + 2,5 - 5mg 17β estradiol
Nueva onda 4,3 días después� Nueva onda 4,3 días después� P4+EB (benzoato estradiol)� 50-100mg p4 + 2,5 - 5 mg estradiol� Nueva onda 3-4 días después� Iniciar 4 días después con FSH
Sincronización de las ondas foliculares 1995-2003,Bó
� Progestágenos y estrógenos� P4+ EV (valerato de estradiol)� Crestar ( 3mg norgestomet +5mg EV)� Crestar ( 3mg norgestomet +5mg EV)� Nueva onda 4 a 6 días � Iniciar FSH 5-6 días después� P4 + ECP(cipionato de estradiol)� 50-100mg p4 + 2-4 mg ECP NO RECOMENDADO
Superovulaciòn pluset 60% -20 d.-5 2 ml de pgf2 preloban 2 cc im0 2 implantes crestar sin los 2 ml inyectables +5 mg 17β + 100 mg p4
4 6 am 2,5 ml de pluset im6 pm 2,5ml de pluset im
5 6 am 2 ml de pluset im6 pm 2 ml de pluset im6 pm 2 ml de pluset im
6 6 am 1 ml pluset + 7 ml lutalyse6 pm 1 ml pluset + 3 ml lutalyse+ retiro implantes
7 6 am 0,5 ml de pluset im6 pm 0,5 ml de pluset im
8 6 am i.a. + 3000 hcg (chorulon) ev6 pm i.a.
9 6 am i.a.15 am colecta y t.e.
RESULTADOS pluset 60 % finca Agrotadeo, estado monagas
� VACAS TRATADAS 24 Pro/vaca
� Estructuras colectadas 104 4,3� Estructuras colectadas 104 4,3� Embriones viables 50 2,08� Receptoras preñadas 30 0,8� % Efectividad t.e.= 60%.
COSTOS RESULTADOS PLUSET 60 %
CONCEPTO COSTO ESTIMADOMATERIAL 24 DONADORAS Y 180 RECEPTORAS
7.200 US
Costos estimados 24 donadoras (COSTO DONADORA / 7 RECEPTORAS 300 US)
RECEPTORAS
COSTO TECNICO COLECTA(100 US/DONADORA )
2.400 US
COSTO PREÑEZ CONFIRMADA(100 US/RECEPTORA) X 30
3.000 US
COSTO TOTAL /PREÑEZ 420 US
CHAVEZ 1998
FINCA LA TIGRA ESTADO MONAGAS
Fuente la tigra 2007
HIPOTESIS
� LAS VACAS CARORA,ASI COMO LAS BOS INDICUS SON SENSIBLES A LA FSH-P
� TRABAJOS CON RAZAS CRIOLLAS EN COLOMBIA MOSTRARON ALTA SENSIBILIDAD A LA FSH-P. RAZAS BON Y CHINO ALTA SENSIBILIDAD A LA FSH-P. RAZAS BON Y CHINO SANTANDEREANO
� LOS ESTROGENOS NO SINCRONIZAN BIEN LAS ONDAS FOLICULARES EN RAZAS CRIOLLAS.
� REALIZAR TRABAJOS CON DOSIS BAJAS DE FSH-P� UTILIZAR PROTOCOLOS NUEVOS P24-P36. (BARROS-NOGUEIRA-
BARUSELLI 2001-2005)� USAR INDUCTORES DE OVULACION GNRH, LH, HCG. I.A. A TIEMPO
FIJO.
Superovulaciòn FOLLTROPIN 50%p24con i.a. tiempo fijo.
0 2 ml de preloban vía i.m.8 aplicar un implante de crestar y una dosis inyectable (p4 norg-valerato de e.)13 6 am 2 ml de folltropin im
6 pm 2 ml de folltropin im14 6 am 1,5 ml de folltropin im
6 pm 1 ,5ml de folltropin im15 6 am 1 ml folltropin + 7 ml lutalyse15 6 am 1 ml folltropin + 7 ml lutalyse
6 pm 1 ml folltropin + 3 ml lutalyse16 6 am 0,5 ml de folltropin im retirar implantes
6 pm 0,5 ml de folltropin im17 6 am i.a. + 5 cc de conceptal (3000 u.i. hcg)
6 pm i.a. 18 6 am i.a. 25 am colecta y t.e.
RESULTADOS T.E. FINCA LA TIGRA 2006-2008
VACAS TRATADAS 66 Pro/vaca� Vacas sin respuesta 14� Estructuras colectadas 682 10,33� Estructuras colectadas 682 10,33� Infértiles (óvulos ) 302 4,57� Embriones degenerados 82 1,24� Embriones viables 275 4,16� Receptoras preñadas 152 2,30� % DE EFECTIVIDAD t.e. 55,27%
COSTOS RESULTADOS LA TIGRA
CONCEPTO COSTO ESTIMADOMATERIAL 66 DONADORAS Y 495 RECEPTORAS( MATERIAL DESECHABLE APROBADO POR LA IETS)
19.800 US
Costos estimados 66 donadoras ( COSTO DONADORA / 7 RECEPTORAS 300US)
APROBADO POR LA IETS)
COSTO TECNICO COLECTA(100 US/DONADORA )
6.600 US
COSTO PREÑEZ CONFIRMADA(100 US/RECEPTORA) X 152
15.200 US
COSTO TOTAL /PREÑEZ 273,68 US
CHAVEZ 2008
COSTOS RESULTADOS LA TIGRA
CONCEPTO COSTO ESTIMADOMATERIAL 66 DONADORAS Y 495 RECEPTORAS (REUTILIZANDO MATERIAL
13.200US
Costos estimados 66 donadoras ( COSTO DONADORA / 7 RECEPTORAS 200US)
RECEPTORAS (REUTILIZANDO MATERIALNO APROBADO POR LA IETS)
COSTO TECNICO COLECTA(100 US/DONADORA )
6.600 US
COSTO PREÑEZ CONFIRMADA(100 US/RECEPTORA) X 152
15.200 US
COSTO TOTAL /PREÑEZCosto material desechable 273,68
230 USDiferencia 43,65/preñez CHAVEZ 2008
RESULTADOS FINCA LA TIGRA 2006-2008
VACA emb transferidos recep/preñadas� Vaca corona 31 18 (58,06%)� Vaca luz maría 25 15 (60%)� Vaca énfasis 19 13 (68,42%)� Vaca énfasis 19 13 (68,42%)� Vaca Chepina 16 10 (62,5%)� Vaca joya 33 15 (45,45%)
RESULTADOS FINCA LA TIGRA 2006-2008
emb transferidos recep/preñadasTORO (LAVADOS)
� SANTA CRUZ (6) 27 17 (62,96%)� REY FEDERICO (7) 27 18 (66,67%)� REY FEDERICO (7) 27 18 (66,67%)� MORICHAL (9) 26 18 (69,23%)� EL BERGON (8) 20 13 (65%)� COMACATE (7) 24 12 (50%)� CHAMBOTE (2) 14 10 (71,43%)
Sincronización receptoras
PGF2∞- Una dosis un día antes PGF2 donadora-dos dosis una cada 14 días.
GnRhGnRhDía 0 100µg dia7 PGF2 dia8 día 9 100µg
2 ml conceptal 2ml preloban 2 ml conceptal2ml conceptal 2 ml preloban 1mg EB celo
2ml conceptal+ CIDR-B 2ml preloban 1 mg EB celo
retiro CIDR-B
Sincronización receptoras
� Progestágenos � CRESTAR- CIDR-B-PRID-DIB-TRIUB-CUE-MATE-MGA ETC.� LOS IMPLANTES SE PUEDEN USAR A 7-8-9-10-11- DIAS-� INICIO 2mg EB+ 50 mg P4
AL RETIRAR PGF2 + ECG (PMSG)� AL RETIRAR PGF2 + ECG (PMSG)� DETECTAR CELO.� 0-CRESTAR + 2 ML INYECTABLES� 9-RETIRO +PGF2 (2 ml PRELOBAN)+ 300 U.I. ECG (1,5mlFOLLIGON)� 10-11 DETECTAR CELO� 18 T.E.
SINCRONIZACIÓN RECEPTORAS� TRANSFERENCIA DE EMBRIONES A TIEMPO FIJO� DIA O CRESTAR+ 2 ml INYECTABLES� DIA 8 RETIRAR IMPLANTE PM+300 UI eCG
+2cc preloban+0,5cc de ecp� DIA 10 CELO� DIA 17 T.E.� DIA 17 T.E.� NO REQUIERE DETECTAR CELO.
Tasa de utilizacion de receptoras > al 70 % n : 1000 animales tratados.
Material de colecta de embriones
Fuente :Chávez 2004
Medios de colecta y mantenimiento
Fuente Chávez 2004
Cajas de petri
Fuente Chávez 2004
Filtros de colecta
Fuente Chávez 2004
Sitio de trabajo de laboratorio
Finca el jobal 2000
Sitio ideal de trabajo de laboratorio
Central genética madrigal 2008
SITIO DE TRABAJO
Finca la tigra 2007
Laboratorio móvil
Fuente Chávez , midates Francia 2003
Sitio de colecta ideal
Fuente Chávez , midates Francia 2003
Sitio de colecta Finca La Tigra
Fuente la tigra 2008
Ovarios superovulados día 7
Fuente Chávez 2000
Búsqueda de embriones
Fuente ganadería manzanares 2004
Grupo de embriones viables
Fuente Chávez 2007
Grupo de estructuras no viables
Fuente Chávez 2007
Selección de embriones
Fuente Chávez 2006
Clasificación de embriones IETS
� Estado calidad� 1-UFO óvulos no fecundados 1- excelente� 2-2-12 células 2-regular� 3-mórula temprana 3-malo
4-mórula 4-muerto o degenerado� 4-mórula 4-muerto o degenerado� 5-blastocisto temprano� 6-blastocisto� 7-blastocisto expandido� 8-blastocisto eclosionado� 9-blastocisto elongado (eclosionado expandido)
Desarrollo embrionario� Ovocito 150-190µm� Día 1 ovulación fimbrias infundíbulo� Día 2 2 células oviducto� Día 3 4 células oviducto� Día 4 8 células oviducto� Día 4 8 células oviducto� Día 5 16 células cuerno uterino� Día 6 32-64 células mórula compacta� Día 7 100-200 células blastocisto temprano� Día 8 100-200 células blastocisto� Día 8 100-200 células blastocisto expandido mayor diámetro� Día 9 200-800 células blastocisto protruido
Grados de calidad embrionaria� Calidad tipo 1 excelente� Desarrollo acorde a la colecta. blastómeros visibles, color y estructura uniformes
esferoide buena compactación y zona pelucida intacta
� calidad tipo 2 bueno� Pocos blastomeros desprendidos de la masa celular, detritus celulares� Pocos blastomeros desprendidos de la masa celular, detritus celulares� Forma irregular, poca compactación
� Calidad tipo 3 regular� Color oscuro o muy claro, forma irregular, detritus celulares desarrollo retardado.
Zona pelucida agrietada.
� Calidad tipo 4 malo� Degenerado, vacuolización de blastomeros, aspecto granuloso estados de 8 celulas
Clasificación de embriones
Fuente manual iets 2003
Empaque de embriones en pajuelas
Fuente Chávez 2007
Montaje en pistolas de t.e.
Fuente Chávez 2006
Resultados de colecta de embriones finca la tigrade acuerdo al desarrollo y calidad del embrión
Clasificación embri ón
Nro embriones transferidos
Receptoraspreñadas
Receptorasvacías
% efectividad
4-1 138 76 62 55,07
4-2 42 25 17 59,524-2 42 25 17 59,52
4-3 9 5 4 55,56
5-1 60 31 29 51,67
5-2 25 15 10 60
totales 274 152 122 55,47
Chávez 2008
Cuerpo lúteo receptoras
Fuente Chávez 2000
Cuerpo lúteo ultrasonido
Fuente Chávez 2008
RECEPTORAS APTAS T.E.
Fuente finca la tigra 2008
REQUISITOS DE RECEPTORAS APTAS PARA T.E.
� 1- haber presentado celo 6-8 días antes� 2- palpación de un c.l. claro y definido� 3- ultrasonido c.l. mayor a 15 mm� 4- aplicar 5 cc lidocaina al 2% epidural� 4- aplicar 5 cc lidocaina al 2% epidural� 4- limpieza y desinfección de vulva� 5- transferir embrión de acuerdo a su desarrollo� 6- opcional aplicar 500 mg de flunixin meglumine� 7- progesterona 150 mg- o GnRh 2,5 ml(conceptal)� 8- llenar formato de lavado y transferencia de embrión
EMBRIONES FINCA LA TIGRA
Fuente finca la tigra 2007
EMBRIONES FINCA LA TIGRA
Fuente la tigra 2008
EMBRIONES FINCA LA TIGRA
Fuente la tigra 2008
Conclusiones y Recomendaciones
� 1- SELECCIONAR LAS DONADORAS DE ACUERDO AL TAMAÑO OVÁRICO� 2- PALPACION DE UN C.L. CLARO Y DEFINIDO PREVIO A TRATAMIENTOS
HORMONALES. UTILIZAR ULTRASONIDO.� 3- EVALUCION PREVIA DEL SEMEN A UTILIZAR� 4- PROGRAMA SANITARIO PREVIO A TRATAMIENTOS HORMONALES� 5-UTILIZAR ANIMAES CON EDADES NO SUPERIOR A 12 AÑOS.� 6-LLEVAR REGISTRO DE RESPUESTAS A LA SUPEROVULACION CON FSH-P
DE CADA DONADORA PARA AJUSTAR DOSIS .� 7-PROBAR PROTOCOLOS MIXTOS FOLLTROIPN –PLUSET, FOLLTROPIN -
ECG . PLUSET –ECG.� 8-UTILIZAR LH y la hcg COMO INDUCTOR DE OVULACION, PARA MEJORAR
OVULACION. Y EVALUARLA.� DEJAR EN DESCANSO LA DONADORA MÍNIMO 100 DÍAS DESPUÉS DEL
PARTO ANTES DE INICIAR LA SUPEROVULACIÓN� EVALUAR LOS PROGRAMAS DE TE EN NUMERO DE PREñECES SOBRE
VACAS TRATADAS Y NO SOBRE PORCENTAJES DE PREñEZ
CENTRAL GENETICA MADRIGALcentralgeneticamadrigal@hotmail.com
cultivo celular , fertilización in vitro, transferencia de embriones ,congelación de semen 2008
CENTRAL GENETICA MADRIGALcentralgeneticamadrigal@hotmail.com
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