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UNIVERSIDAD DE ZARAGOZA. FACULTAD DE VETERINARIA.
ZARAGOZA (ESPAÑA)
POLIMORFISMO GENÉTICO DEL GEN DE LA LEPTINA A TRAVÉS DEL MÉTODO PCR-RFLP
EN DOS POBLACIONES DIFERENTES
INTRODUCCIÓNBúfalo de agua Raza Siboney
- Mezcla de genotipos de río y depantano
- Producción 1000kg de leche porlactancia, con un ordeño diario y conuna duración de la lactancia en unrango de 250-270 días.
- Fuerte adaptación- Elevada fertilidad y longevidad en la
producción- Importancia primordial en la vida de
los productores y en su economía:Carne, cuernos, piel y leche(mantequilla, queso, yogurt, crema)
- Cruzamiento 5/8H-3/8Z- Producción de 2585kg de leche por
lactancia, con un ordeño diario y conuna duración de la lactancia en unrango de 245-270 días.
- Adaptación al ambiente tropicalhúmedo
- Adecuada fertilidad y longevidad enla producción.
- Principal genotipo de producción deleche en manos de la mayoría de losganaderos cubanos
INTRODUCCIÓNFunción de la leptina: Gen Candidato
146 Aa producida a partir de un precursor de 167 Aa
La proteína plasmática
tiene un peso molecular
de 16kD y se transcribe
a partir del gen ob
Las variaciones en este gen se asocian con caracteres cuantitativos de importancia económica en ganado lechero:- balance energético- producción de leche- el peso vivo- fertilidad - InmunidadLiefers et al. (2002) Sau3AI-AB B allele improving milk productionBuchanan et al. (2003) B allelemore milk, Cerón et al. (2009) ganancia de peso, % grasa en la canal y mayor peso al año Souza et al. (2009) determinaron que Lep 1620 (A / G) se asoció con el peso al destete
LEP (alelo B) Candidato importante a ser utilizado en la mejora de características productivas y
reproductivas en estas razas de importancia vital en Cuba
Conocer la variabilidad del gen LEPTINA en dospoblaciones genéticamente distintas y de granimportancia en Cuba
- Siboney de Cuba, cruzamiento 5/8 Holstein x3/8 Cebú
- Búfalos de agua de Cuba (Bubalus bubalis)]
OBJETIVO
MATERIALES Y MÉTODOS- 118 búfalos de agua (cruzamientos no
controlados entre animales Carabao yBuffalypso)
- 50 bovinos de la raza Siboney deCuba, clínicamente sanos y criados demanera extensiva en el territorio de laprovincia Mayabeque (EPG “El Cangre” eInstituto de Ciencia Animal (ICA))
Extracción de AND genómico: Kit comercial de Promega Wizard ® Genomic DNA purification de acuerdo al protocolo MSRP protocol (Promega Corp., Madison, WI). Calidad y cantidad de ADN (ng/uL) para cada muestra: Nanodrop ND1000 (ThermoScientific).
Cebador Secuencia 5´-3´ Talla Referencia
LEP-BsaF GTC TGG AGG AGG CAA GCA GAG T 522pb Lien et al., 1997
LEP-BsaR CCA CCA CCT CTG TGG AGT AG
LEP-SauF TTG AGT GGC TTG TTA TTT TCT TCT 422pb Somayeh et al., 2012
LEP-SauR GTC CCC GCT TCT GGC TAC CTA ACT
BsaAI
Sau3A
Variabilidad genética: GENEPOP Versión 4.0.10 (Rousset 2008): test exacto para la desviación
del HWE, las frecuencias alélicas así como la He y Ho
522pb422pb
522pb
441pb 390pb303pb
LEP-BsaAILEP-Sau3AAA: 390+32
BB: 303+88+31
AB: 390+303+88+31
RESULTADOS
RFLPs
SNP
POBLACIÓN
Búfalos de Cuba (n=118) Siboney de Cuba (n=50)
Frecuencias génicas
LEP-BsaAI A 0.691 0.160
B 0.309 0.840
LEP-Sau3A A 0.377 0.380
B 0.623 0.620
Frecuencias genotípicas
LEP-BsaAI
AA 0.50 0.02
AB 0.38 0.28
BB 0.12 0.70
LEP-Sau3A
AA 0.14 0.18
AB 0.47 0.40
BB 0.39 0.42
RESULTADOS F
recu
enci
as g
énic
as y
gen
otí
pic
as p
or
po
bla
ció
n
RESULTADOS Indicadores poblacionales
CONCLUSIONES- Se consiguió la amplificación de ambas regiones del gen con cebadores
comunes en búfalos y en bovinos
- Identificación de polimorfismo en ambas poblaciones
- Las f.a (LEP-Bsa AI) es muy distinta en las dos poblaciones
- Existe equilibrio Hardy-Weinberg, en ambas la Ho es mayor que la He
- Este estudio permitió detectar 2 SNPs en el gen LEP en ambasespecies ganaderas, observándose alta frecuencia de alelo B.
- Esto puede ser base para futuros estudios de asociación concaracteres de interés económico y decisiones en la selección dereproductores
MUCHAS GRACIAS
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