marcadores de determinaciÓn directa introducción enzimas de restricción

MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTAMARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA

IntroducciónIntroducciónEnzimas de restricciónEnzimas de restricciónLa reacción en cadena de la polimerasaLa reacción en cadena de la polimerasaSecuenciaciónSecuenciaciónPCR cuantitativaPCR cuantitativaMicromatrices (Microarrays)Micromatrices (Microarrays)Técnicas complementariasTécnicas complementarias

Polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricciónPolimorfismos de longitud de los fragmentos de restricciónRepeticiones en tándem de número variableRepeticiones en tándem de número variableFrecuencias alélicas de genesFrecuencias alélicas de genesPolimorfismos de un solo nucleótido (SNPs)Polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs)ADN mitocondrialADN mitocondrialInserciones AluInserciones Alu

EnzimaEnzima SecuenciaSecuencia EnzimaEnzima SecuenciaSecuenciaEcoEco RI RI GAATTCGAATTC NarNar I I GGCGCCGGCGCCBclBcl I I TGATCATGATCA NaeNae I I GCCGGCGCCGGCNcoNco I I CCATGGCCATGG SmaSma I I CCCGGGCCCGGGBamBam HI HI GGATCCGGATCC AccAcc III III TCCGGATCCGGAAluAlu I I AGCTAGCT TaqTaq I I TCGATCGAHaeHae III III GGCCGGCC MaeMae II II ACGTACGTApaApa I I GGGCCCGGGCCC MaeMae I I CTAGCTAGNotNot I I GCGGCCGCGCGGCCGC NdeNde I I CATATGCATATGBalBal I I TGGCCATGGCCA SspSsp I I AATATTAATATTHindHind III III AAGCTTAAGCTT SpeSpe I I ACTAGTACTAGTCfoCfo I I GCGCGCGC SwaSwa I I ATTTAAATATTTAAAT

Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Secuencias de corte de algunas enzimas de restricciónSecuencias de corte de algunas enzimas de restricción

Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Esquema de un análisis básico con enzimas de restricciónEsquema de un análisis básico con enzimas de restricción

Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Mar

cado

rM

arca

dor

Mar

cado

rM

arca

dor

Mar

cado

rM

arca

dor

Mar

cado

rM

arca

dor

Mad

reM

adre

Mad

reM

adre

Hij

oH

ijo

Hij

oH

ijo

Pad

re a

lega

doP

adre

ale

gado

Pad

re a

lega

doP

adre

ale

gado

Mix

Mix

Mix

Mix

Tests sencillosTests sencillosde paternidadde paternidad

Reacción en cadena de la polimerasaReacción en cadena de la polimerasa

Número de cadenas obtenido. Ciclo 2: 2 - Ciclo 3: 2 - … - Ciclo 30: 2Número de cadenas obtenido. Ciclo 2: 2 - Ciclo 3: 2 - … - Ciclo 30: 211 22 2929

Reacción en cadena de la polimerasaReacción en cadena de la polimerasa

Reacción en cadena de la polimerasaReacción en cadena de la polimerasa

La PCR se realiza mediante termocicladoresLa PCR se realiza mediante termocicladores

SecuenciaciónSecuenciación

Lectura manual de una secuenciaLectura manual de una secuencia

SecuenciaciónSecuenciación

SecuenciaciónSecuenciación

Electroferograma de una secuenciaElectroferograma de una secuencia

SecuenciaciónSecuenciación

Analizador de ADNAnalizador de ADN

SecuenciaciónSecuenciación

Analizador de ADNAnalizador de ADN

PCR cuantitativaPCR cuantitativa

PCR cuantitativaPCR cuantitativa

MicromatricesMicromatrices

MicromatricesMicromatrices

Extracción de ADNExtracción de ADN

Extracción de ADNExtracción de ADN

Cuantificación de ADNCuantificación de ADN

Cuantificación de ADNCuantificación de ADN

FluorímetroFluorímetro